秦宇
(青海大學(xué)生態(tài)環(huán)境工程學(xué)院,西寧 810016)
過氧化氫酶(CAT)在各類生物的抗氧化防御系統(tǒng)中占據(jù)著重要的地位,可以催化H2O2和其他氧化物在體內(nèi)分解代謝,具有保護(hù)機(jī)體的作用[1]。丙二醛(MAD)是在機(jī)體的膜結(jié)構(gòu)中的物質(zhì)受到氧自由基攻擊時(shí)產(chǎn)生的一類物質(zhì),與機(jī)體受氧自由基攻擊的程度密切相關(guān)。
Cr6+是一種劇毒類物質(zhì),對(duì)機(jī)體有致癌作用。當(dāng)Cr6+進(jìn)入機(jī)體后,能夠被還原為Cr3+,伴有Cr5+中間體及大量自由基的產(chǎn)生[2]。
目前為止,尚未見有關(guān)重鉻酸鉀對(duì)小鼠不同組織內(nèi)過氧化氫酶和丙二醛的影響的報(bào)道,因此本實(shí)驗(yàn)以小鼠心、肝、肺及腎離體組織為實(shí)驗(yàn)材料,探究重鉻酸鉀對(duì)小鼠不同組織內(nèi)過氧化氫酶和丙二醛的影響[3]。
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
昆明白化小鼠購置于蘭州大學(xué)動(dòng)物研究中心。
1.1.2 試劑及儀器
CAT試劑盒(南京建成)、MDA試劑盒(南京建成)、勻漿器(T18BS25)、漩渦混勻器(MVS-1)、可見紫外分光光度計(jì)(722S)。
1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處理
將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死,立即取出心、肝、肺及腎4種組織,生理鹽水沖洗并剪碎,以質(zhì)量體積比1∶9 的比例加入生理鹽水,冰浴條件下勻漿,4℃、8000 r/min下離心13 min,取其上清液[4]。將不同動(dòng)物不同組織分為4個(gè)組,即高、中、低3個(gè)染毒組和一個(gè)對(duì)照組,高劑量組的組織內(nèi)鉻離子達(dá)到8 mg/g,中劑量組和低劑量組分別為4 mg/g和2 mg/g。
1.2.2 總蛋白質(zhì)濃度的測定(采用BCA法進(jìn)行測定)
參照蛋白定量測試盒進(jìn)行測定并計(jì)算總蛋白量。
1.2.3 CAT和MDA活性測定
參照試劑說明書進(jìn)行測定。
1.2.4 數(shù)據(jù)處理
在SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±S)表示,并用t-檢驗(yàn)進(jìn)行差異性分析。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1和表2。
表1 Cr6+對(duì)CAT活性的影響
表2 Cr6+對(duì)MDA活性的影響
在本實(shí)驗(yàn)中Cr6+使小鼠心、腎、肺和肝4種組織中CAT和MDA活性顯著提高,與對(duì)照組相比差異極顯著(P<0.01);且隨著Cr6+濃度的增加4種離體組織中CAT活性增強(qiáng),MDA含量也增加。文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)經(jīng)重金屬Cd處理后的小鼠其腎臟中CAT活性增強(qiáng)[5]。CAT對(duì)有害環(huán)境因子所表現(xiàn)出來的這樣的生態(tài)效應(yīng)被認(rèn)為是生物體在有害因子作用下的一種自身保護(hù)性反應(yīng)。生物體內(nèi)的脂質(zhì)過氧化程度與CAT活性和MAD含量密切相關(guān),一定程度上反映出Cr6+對(duì)生物機(jī)體的毒害作用。對(duì)小鼠體內(nèi)加入重鉻酸鉀使其體內(nèi)的CAT活性和MDA含量發(fā)生變化的具體原因有待進(jìn)一步研究。