脊髓背角瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸響應(yīng)的研究

蔡輝 王明 金傳陽 余芝 王欣君 張建斌

摘要：目的 觀察脊髓背角瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1（TRPV1）敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸“足三里”的響應(yīng)。方法 健康成年雄性大鼠40只，以41、45、49 ℃分別艾灸干預(yù)“足三里”，用玻璃微電極探查L4脊髓背角神經(jīng)元放電并進(jìn)行細(xì)胞外記錄；以辣椒素溶劑、辣椒素溶液穴位注射“足三里”，篩選出瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1（TRPV1）敏感性神經(jīng)元，觀察并比較脊髓背角TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)3個(gè)溫度艾灸的響應(yīng)及其差異。結(jié)果 TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)3組溫度均有響應(yīng)。從響應(yīng)的神經(jīng)元性質(zhì)看，45、49 ℃艾灸主要表現(xiàn)為興奮，41 ℃艾灸興奮和抑制的神經(jīng)元數(shù)目相當(dāng)；從響應(yīng)的神經(jīng)元特征看，不同溫度對(duì)應(yīng)特定放電頻率的神經(jīng)元：41 ℃為（8.26±2.14）spikes/s、45 ℃為（4.69±2.61）spikes/s、49 ℃為（10.66±5.97）spikes/s；從影響神經(jīng)元放電頻率變化看，41 ℃艾灸干預(yù)前后無明顯變化，45、49 ℃艾灸干預(yù)后放電頻率明顯加快（P<0.01）。結(jié)論 脊髓背角TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)41、45、49 ℃ 3組溫度均有響應(yīng)，響應(yīng)的特征、性質(zhì)和強(qiáng)弱與溫度有關(guān)。

關(guān)鍵詞：脊髓背角細(xì)胞；神經(jīng)元；艾灸；足三里；溫度；大鼠

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.03.011

中圖分類號(hào)：R245 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2018）03-0048-05

Abstract： Objective To observe the response of TRPV1 sensitive neurons in spinal cord under moxibustion of different temperatures in “Zusanli”. Methods Totally 40 healthy male SD rats were chosen and stimulated with moxibustion at “Zusanli” in 41 ℃， 45 ℃ and 49 ℃. Extracellular recording techniques of glass microelectrode was used in the rats L4 spinal cord neurons. Capsaicin vehicle and solution was injected into the rats through “Zusanli” to filter the sensitive neuron to TRPV1. The response of sensitive neurons to TRPV1 in spinal cord under moxibustion of three different temperatures was recorded and compared. Results The TRPV1 sensitive neurons responded to all the three temperatures. Viewing from the nature of the responding neurons， the neuron in 45 ℃ and 49 ℃ mainly performed in agitation， while the number of agitated and inhibitory neurons appeared same in 41 ℃. Viewing from the character of the responding neurons， different temperatures correspond to differential discharge frequency： 41 ℃was （8.26±2.14） spikes/s， 45 ℃ was （4.69±2.61） spikes/s， 49 ℃ was （10.66±5.97） spikes/s. Viewing from the change of discharge frequency， the neurons in 41 ℃ was found without obvious change， while the neurons in 45 ℃ and 49 ℃ discharge frequency apparently increased （P<0.01）. Conclusion Sensitive neurons in TRPV1 in spinal cord can response to 41 ℃， 45 ℃ and 49 ℃， whose character， nature and degree are related to the temperature gradient.

Keywords： spinal dorsal cell； neuron； moxibustion； Zusanli； temperature； rats

艾灸的核心作用是以溫促通[1]。在神經(jīng)系統(tǒng)中，外周感受溫?zé)岬某跫?jí)傳入纖維大多數(shù)為C纖維[2]，經(jīng)背根神經(jīng)節(jié)主要投射到脊髓背角的邊緣層和膠質(zhì)層（傳遞頭面部溫度信息的纖維終止于三叉神經(jīng)脊束核），膠質(zhì)層中的興奮性和抑制性中間神經(jīng)元對(duì)溫度信息進(jìn)行調(diào)制[3]。瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1（transient receptor potential cation channel subfamily V member 1，TRPV1）又稱辣椒素受體或香草酸受體，是非選擇性的陽離子通道蛋白家族成員之一，廣泛分布于哺乳動(dòng)物的感覺神經(jīng)纖維，尤其是小直徑的Aδ和C纖維[4]。此外，中樞神經(jīng)系統(tǒng)如背根神經(jīng)節(jié)、脊髓背角、三叉神經(jīng)節(jié)及大腦部分區(qū)域的突觸上亦有TRPV1的分布[5]。該受體除了對(duì)辣椒素敏感，也被傷害性熱刺激信號(hào)（>43 ℃）、低pH值（<6.0）激活[6]。當(dāng)TRPV1被激活后，大量鈣離子內(nèi)流，同時(shí)伴有極少量的鎂離子、鈉離子、鉀離子、銫離子，胞內(nèi)陽離子濃度升高，細(xì)胞去極化，產(chǎn)生動(dòng)作電位，神經(jīng)沖動(dòng)經(jīng)過一系列整合，上傳到中樞[7]，產(chǎn)生熱覺并通過分泌神經(jīng)肽等方式發(fā)揮艾灸溫通作用[8-9]。因此，脊髓背角TRPV1敏感性神經(jīng)元活動(dòng)可能是艾灸溫?zé)嵝?yīng)脊髓中樞調(diào)制的主要環(huán)節(jié)；同時(shí)，有研究表明，TRPV1介導(dǎo)的艾灸降脂效應(yīng)具有溫度差異，脊髓背角TRPV1敏感性神經(jīng)元的差異性響應(yīng)可能是不同溫度艾灸效應(yīng)的原因之一[10]。本研究觀察TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸的響應(yīng)，探討艾灸TRPV1機(jī)制的脊髓環(huán)節(jié)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

健康成年雄性SD大鼠40只，體質(zhì)量300～350 g。南京中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（滬）2013-0016。飼養(yǎng)于溫度（22±2）℃、相對(duì)濕度（60±10）%環(huán)境，光照12 h/12 h明暗交替，大鼠自由攝食飲水。

1.2 主要試劑與儀器

10%烏拉坦（上海青析化工科技有限公司），滂胺天藍(lán)（美國Sigma，批號(hào)24410），辣椒素（美國Sigma），石蠟油（南京化學(xué)試劑有限公司），無水乙酸鈉（南京化學(xué)試劑有限公司），吐溫80（南京化學(xué)試劑有限公司），艾條（南陽市臥龍漢醫(yī)艾絨廠）。辣椒素溶液配制：將吐溫80、無水乙醇、生理鹽水以1∶1∶8比例配制成溶劑（vehicle），然后將辣椒素溶解于vehicle溶劑中配成0.01 mol/L辣椒素溶液。腦立體定位儀（美國David Kopf Instruments），玻璃微電極拉制儀（WD-1，成都儀器廠），微電極操作器控制（日本NARISHIGE，型號(hào)PC-5N07017），玻璃微電極（南京市泉水教學(xué)實(shí)驗(yàn)器材廠），細(xì)胞外電生理記錄放大器（美國A-M systems，型號(hào)L-FDQ-1），Micro3-1401生理信號(hào)采集分析系統(tǒng)（英國CED，型號(hào)M4097），溫控儀H-KWDY-Ⅲ（南京市泉水教學(xué)實(shí)驗(yàn)器材廠），紅外測(cè)溫儀（Fluke 566），動(dòng)物手術(shù)器械1套。

1.3 動(dòng)物處理

大鼠稱重，腹腔注射10%烏拉坦（1.5 g/kg），充分麻醉并俯臥固定于37 ℃電熱板上。剃凈大鼠背部手術(shù)區(qū)域及小腿干預(yù)區(qū)域的毛，分離皮下組織，切除脊柱兩側(cè)的豎脊肌，暴露椎骨，撬開棘突和椎骨，暴露脊髓L4節(jié)段，用蘸有生理鹽水的棉球擦凈周圍血液。在解剖顯微鏡放大下觀察脊髓，剝離硬脊膜后迅速滴38 ℃左右的石蠟油保持脊髓濕潤。將大鼠固定在脊髓固定架上，沿兩側(cè)外耳道插入耳棒，齒棒固定下門齒，頭部制動(dòng)，防止在記錄過程中呼吸運(yùn)動(dòng)對(duì)記錄產(chǎn)生干擾。

1.4 神經(jīng)元放電

拉制玻璃微電極，尖徑1～2 μm，內(nèi)充溶有2%滂胺天藍(lán)0.5 mol/L醋酸鈉電解液（阻抗5～10 mΩ），并在顯微鏡下觀察以確保無氣泡殘留，隨后將玻璃微電極固定在微電極操作器上。連接微電極和生理信號(hào)采集系統(tǒng)，并開啟計(jì)算機(jī)運(yùn)行生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)。用推進(jìn)器將微電極插入大鼠脊髓L4節(jié)段后正中裂旁開0.5～1.0 mm，旁開側(cè)與隨后的干預(yù)側(cè)保持一致。以5 μm/s速度推進(jìn)到脊髓表面下250 μm后開始記錄，通過微電極推進(jìn)器控制使電極尖端以1 μm/s速度步進(jìn)在目標(biāo)脊髓的深度范圍（脊髓表面下250～1000 μm），以細(xì)胞外記錄的方式，探查神經(jīng)元。記錄到穩(wěn)定放電且信噪比>3∶1，記錄放電1 min作為基線和研究對(duì)照。

1.5 艾灸

參考《實(shí)驗(yàn)針灸（第二版）》[11]定位“足三里”：膝關(guān)節(jié)后外側(cè)，腓骨小頭下約5 mm處。將紅外測(cè)溫儀固定在小型支架上并對(duì)準(zhǔn)“足三里”監(jiān)測(cè)溫度。點(diǎn)燃艾條，采用懸灸方式刺激穴位，固定施灸距離使紅外測(cè)溫儀顯示的數(shù)值始終保持在所需溫度。依次觀察41、45、49 ℃施灸“足三里”對(duì)脊髓背角神經(jīng)元放電的影響。每組溫度艾灸干預(yù)并記錄神經(jīng)元放電30 s。隨后“足三里”注射150 μL vehicle作為對(duì)照，記錄神經(jīng)元放電30 s，再注射0.01 mol/L辣椒素150 μL，記錄神經(jīng)元放電30 s。以干預(yù)開始時(shí)刻為時(shí)間點(diǎn)，以1 s內(nèi)放電1次（1 spike/s）作為平均放電頻率單位，比較干預(yù)前后神經(jīng)元在干預(yù)時(shí)間內(nèi)平均放電頻率變化率，平均放電頻率=（干預(yù)后平均放電頻率-干預(yù)前平均放電頻率）÷干預(yù)前平均放電頻率，以平均放電頻率變化率的絕對(duì)值超過15%為有響應(yīng)，變化率為正值是興奮，變化率為負(fù)值則是抑制。若平均放電頻率對(duì)vehicle無響應(yīng)而對(duì)辣椒素有響應(yīng)，則判斷該神經(jīng)元為TRPV1敏感性神經(jīng)元。

在以上記錄過程中，每組干預(yù)開始前，必須先等待上一組干預(yù)影響的神經(jīng)元放電恢復(fù)至基線水平50 s以上。在注射vehicle及辣椒素溶液時(shí)，先插入針頭，等待一段時(shí)間，待干擾恢復(fù)至基線水平50 s以上后，再將vehicle或辣椒素溶液注射入肌肉進(jìn)行記錄。實(shí)驗(yàn)過程中隨時(shí)補(bǔ)充38 ℃石蠟油保持脊髓濕潤，保持安靜，減少周圍環(huán)境的干擾。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以—x±s表示，干預(yù)前后對(duì)比采用配對(duì)t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1敏感性性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸的響應(yīng)

40只大鼠共記錄到60個(gè)自發(fā)放電的神經(jīng)元，其中46個(gè)神經(jīng)元對(duì)vehicle無反應(yīng)而對(duì)辣椒素干預(yù)敏感，即為TRPV1敏感性神經(jīng)元。進(jìn)一步分析46個(gè)TRPV1敏感性神經(jīng)元中，對(duì)41 ℃艾灸干預(yù)敏感的神經(jīng)元24個(gè)，平均放電頻率為（8.26±2.14）spikes/s；對(duì)45 ℃艾灸干預(yù)敏感的神經(jīng)元21個(gè)，平均放電頻率為（4.69±2.61）spikes/s；對(duì)49 ℃艾灸干預(yù)敏感的神經(jīng)元20個(gè)，平均放電頻率為（10.66±5.97）spikes/s。見表1。

2.2 瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸響應(yīng)的性質(zhì)

在脊髓背角記錄到的46個(gè)TRPV1敏感性神經(jīng)元中，其中興奮性神經(jīng)元38個(gè)，抑制性神經(jīng)元8個(gè)。TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸干預(yù)的響應(yīng)存在興奮性和抑制性差異：響應(yīng)41 ℃艾灸的24個(gè)（興奮作用12個(gè)、抑制作用12個(gè)），響應(yīng)45 ℃艾灸的21個(gè)（興奮作用21個(gè)、抑制作用0個(gè)），響應(yīng)49 ℃艾灸的20個(gè)（興奮作用16個(gè)，抑制作用4個(gè)）。脊髓背角TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)于45、49 ℃艾灸“足三里”的響應(yīng)主要表現(xiàn)為興奮，而對(duì)41 ℃艾灸“足三里”的響應(yīng)則興奮和抑制各半。

2.3 瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度響應(yīng)的放電頻率變化程度

TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸“足三里”響應(yīng)放電頻率變化存在差異。其中，41 ℃艾灸“足三里”后，響應(yīng)的TRPV1敏感性神經(jīng)元放電頻率平均升高（0.54±3.51）spikes/s，艾灸前后放電頻率無明顯差異。45 ℃艾灸“足三里”后，響應(yīng)的TRPV1敏感性神經(jīng)元放電頻率平均升高（5.41±6.68）spikes/s，艾灸前后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；49 ℃艾灸“足三里”后，響應(yīng)的TRPV1敏感性神經(jīng)元放電頻率平均升高（4.54±6.60）spikes/s，艾灸前后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見圖1、表2。

3 討論

艾灸施術(shù)于體表特定部位，通過溫?zé)岣兄图せ钕嚓P(guān)通路發(fā)揮以溫促通的作用，其中脊髓背角是重要環(huán)節(jié)之一。足三里是臨床施灸常用穴，可以治療高血壓病[12]、高血脂癥[13]、冠心病心絞痛[14]等疾病。一般認(rèn)為，足三里穴區(qū)的初級(jí)傳入神經(jīng)纖維來源于腓深神經(jīng)，其在脊髓的節(jié)段為L4-5及骶S1-2節(jié)段，故本研究選擇足三里為體表干預(yù)點(diǎn)，以L4節(jié)段的背角區(qū)域?yàn)榧顾桦娚硇盘?hào)觀察點(diǎn)。有研究表明，高濃度辣椒素阻斷C纖維，使感覺神經(jīng)元失敏，故我們選擇低濃度的辣椒素（0.01 mol/L）作為TRPV1敏感性神經(jīng)元的激活劑[15]。先將針頭插進(jìn)穴區(qū)，等放電恢復(fù)至基線水平再注射藥物，排除了注射器刺入肌肉過程中的機(jī)械性傷害造成的干擾因素。我們測(cè)試了vehicle注射“足三里”對(duì)脊髓背角神經(jīng)元的影響，發(fā)現(xiàn)其對(duì)背角神經(jīng)元放電無明顯影響，故可以排除vehicle注射的化學(xué)干擾因素。為避免留在肌肉內(nèi)的vehicle和辣椒素溶液對(duì)艾灸干預(yù)效應(yīng)產(chǎn)生干擾的可能，我們先給予不同溫度艾灸干預(yù)，后注射vehicle和辣椒素。通過探究篩選出的TRPV1敏感性神經(jīng)元及其對(duì)3組溫度（41、45、49 ℃）的響應(yīng)情況，探索艾灸效應(yīng)的溫度差異及其可能機(jī)制，確保了實(shí)驗(yàn)的可靠性。

結(jié)果表明，TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸“足三里”都可以響應(yīng)，但是響應(yīng)的方式和特征存在明顯差異。

首先，對(duì)不同溫度艾灸干預(yù)響應(yīng)TRPV1敏感性神經(jīng)元放電頻率不同。如響應(yīng)41 ℃艾灸干預(yù)的TRPV1敏感性神經(jīng)元平均放電頻率為（8.26±2.14）spikes/s，響應(yīng)45 ℃艾灸干預(yù)的TRPV1敏感性神經(jīng)元，平均放電頻率為（4.69±2.61）spikes/s，響應(yīng)49 ℃艾灸干預(yù)的TRPV1敏感性神經(jīng)元，平均放電頻率為（10.66±5.97）spikes/s。，對(duì)不同溫度艾灸干預(yù)響應(yīng)的TRPV1敏感性神經(jīng)元數(shù)總和大于TRPV1敏感性神經(jīng)元的總數(shù)。如在46個(gè)TRPV1敏感性神經(jīng)元中，響應(yīng)41 ℃艾灸刺激的有24個(gè)，響應(yīng)45 ℃的21個(gè)，響應(yīng)49 ℃的20個(gè)，提示某個(gè)放電頻率特征的TRPV1敏感性神經(jīng)元可能響應(yīng)2個(gè)或2個(gè)以上溫度的艾灸刺激。

其次，TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度艾灸的響應(yīng)方式不同。41 ℃艾灸干預(yù)對(duì)TRPV1敏感性神經(jīng)元既有抑制作用也有興奮作用且兩者神經(jīng)元數(shù)目接近，并且對(duì)放電頻率影響不大。而45 ℃和49 ℃艾灸則主要表現(xiàn)為興奮作用，對(duì)放電頻率影響也較大，艾灸前后放電頻率顯著升高（P<0.01）。值得關(guān)注的是，本研究中脊髓背角TRPV1敏感性神經(jīng)元也響應(yīng)41 ℃艾灸干預(yù)，這與一般認(rèn)為的高于43 ℃溫度激活TRPV1不符，并且45 ℃艾灸干預(yù)全面表現(xiàn)為興奮，且干預(yù)后放電頻率上升最大。而49 ℃艾灸干預(yù)在興奮占優(yōu)勢(shì)的同時(shí)，少數(shù)神經(jīng)元還出現(xiàn)了抑制，進(jìn)一步提示脊髓背角TRPV1敏感性神經(jīng)元艾灸響應(yīng)具有溫度差異性。

瞬時(shí)感受器電位（transient receptor potential，TRP）家族是機(jī)體重要的溫度感受器，包括TRPV、TRPC、TRPA等多個(gè)家族成員，感受不同的溫度區(qū)間。有研究表明TRPV1可以和其他的家族成員共表達(dá)于同一個(gè)神經(jīng)元：如TRPV1和TRPA1共表達(dá)于同一個(gè)神經(jīng)元且其活性受TRPV1和TRPA1通道共同調(diào)制[16]，Weng H J等[17]也在DRG神經(jīng)元中發(fā)現(xiàn)TRPV1和TRPA1復(fù)合體。TRPV1敏感性神經(jīng)元對(duì)不同溫度的響應(yīng)特征是否與這一機(jī)制相關(guān)，還需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

脊髓背角TRPV1敏感性神經(jīng)元是感知外周溫?zé)岽碳ず驼{(diào)控中樞熱反應(yīng)的主要環(huán)節(jié)之一，對(duì)不同溫度艾灸干預(yù)作出相應(yīng)的初級(jí)中樞響應(yīng)，是其產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)的基礎(chǔ)。我們分別選擇了代表溫和熱溫度的41 ℃、代表較低溫傷害性熱溫度的45 ℃、代表較高溫傷害性熱溫度的49 ℃進(jìn)行艾灸干預(yù)，發(fā)現(xiàn)了艾灸溫度參數(shù)與TRPV1機(jī)制的部分規(guī)律。該研究還需進(jìn)一步擴(kuò)大干預(yù)溫度的范圍并在溫度參數(shù)上進(jìn)一步精細(xì)化，從而進(jìn)一步研究艾灸脊髓效應(yīng)的溫度梯度。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張建斌，王玲玲，胡玲，等.艾灸溫通作用的理論探討[J].中國針灸， 2011，31（1）：51-54.

[2] 韓濟(jì)生.神經(jīng)科學(xué)[M].北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2009：677.

[3] 吳楠，張丹龍，衡立軍，等.TRPV1與pJNK在樹脂毒素致痛模型大鼠脊髓背角的表達(dá)變化[J].神經(jīng)解剖學(xué)雜志，2015，31（2）：155-160.

[4] KOBAYASHI K， FUKUOKA T， OBATA K， et al. Distinct expression of TRPM8， TRPA1， and TRPV1 mRNAs in rat primary afferent neurons with aδ/c-fibers and colocalization with trk receptors[J]. Journal of Comparative Neurology，2005，493（4）：596-606.

[5] STANDER S， MOORMANN C， SCHUMACHER M， et al. Expression of vanilloid receptor subtype 1 in cutaneous sensory nerve fibers， mast cells， and epithelial cells of appendage structures[J]. Experimental Dermatology，2004，13（3）：129-139.

[6] JULIUS D. TRP channels and pain[J]. Annual Review of Cell and Developmental Biology，2013，29（1）：355-384.

[7] ZEILHOFER H U， KRESS M， SWANDULLA D. Fractional Ca2+ currents through capsaicin- and proton-activated ion channels in rat dorsal root ganglion neurones[J]. Journal of Physiology，2010， 503（1）：67-78.

[8] WANG L， WANG D H. TRPV1 gene knockout impairs postischemic recovery in isolated perfused heart in mice[J]. Circulation， 2005，112（23）：3617-3623.

[9] BREYNE J， VANHEEL B. Methanandamide hyperpolarizes gastric arteries by stimulation of TRPV1 receptors on perivascular CGRP containing nerves[J]. Journal of Cardiovascular Pharmacology， 2006，47（2）：303-309.

[10] 高建蕓，王桂英，王玲玲.TRPV1介導(dǎo)不同溫度艾灸調(diào)脂通脈效應(yīng)的臨床研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2015，26（9）：2182-2184.

[11] 李忠仁.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)（第二版）[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2007：255-256.

[12] 李美羅，李垠和，吳煥淦，等.灸法治療高血壓的研究概述[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2012，5（2）：142-147.

[13] 尹仁，吳煥淦，李璟，等.艾灸法治療高脂血癥并動(dòng)脈粥樣硬化研究進(jìn)展[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2011，18（11）：104-107.

[14] 張澤，陳民，吳文勝，等.基于Meta分析的艾灸治療冠心病心絞痛臨床療效評(píng)價(jià)[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，31（2）：183-186.

[15] 劉鄉(xiāng)，黃平波.辣椒素阻斷腓總神經(jīng)C纖維的效應(yīng)及其對(duì)電針“足三里”鎮(zhèn)痛作用的影響[J].針刺研究，1997，22（4）：295.

[16] MASUOKA T， KUDO M， YAMASHITA Y， et al. TRPA1 channels modify TRPV1-mediated current responses in dorsal root ganglion neurons[J]. Frontiers in Physiology，2017，8：272.

[17] WENG H J， PATEL K N， JESKE N A， et al. Tmem100 is a regulator of TRPA1-TRPV1 complex and contributes to persistent pain[J]. Neuron，2015，85（4）：833.

（收稿日期：2017-08-15）

（修回日期：2017-08-31；編輯：華強(qiáng)）