1例溫自身抗體引起的疑難配血的分析與探討

高凌峰

（臨汾市中心血站 山西 臨汾 041000）

自身抗體是指機(jī)體自身耐受的完整性遭到破壞，無(wú)法識(shí)別自身組織器官、細(xì)胞及細(xì)胞成分，導(dǎo)致免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對(duì)自身相應(yīng)組織器官、細(xì)胞及細(xì)胞成分的抗體。自身抗體一般分為冷自身抗體和溫自身抗體2類。冷自身抗體多產(chǎn)生于某些疾病的活動(dòng)期，這些抗體由于不引起溶血反應(yīng)，因此沒(méi)有臨床意義。溫自身抗體多產(chǎn)生于惡性腫瘤、淋巴組織增生性疾病、自身免疫紊亂等，能引起溶血反應(yīng)，具有臨床意義[1]。自身抗體一般無(wú)特異性，可凝集自身紅細(xì)胞以及所有人的紅細(xì)胞，因此對(duì)血型鑒定、抗體篩查及交叉配血造成影響。因本次發(fā)現(xiàn)一例病例，特作進(jìn)一定的探討，進(jìn)行臨床意義分析。

1.資料與方法

1.1 標(biāo)本情況

市第二人民醫(yī)院送至本單位的一例疑難配血標(biāo)本，醫(yī)院正反正型不符，送本單位進(jìn)行鑒定并交叉配血。

1.2 試劑

ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞(本室自制)；抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清（長(zhǎng)春博德）；抗-D、抗-C、抗-c、抗E、抗-e等血型定型試劑、譜細(xì)胞、篩選細(xì)胞（上海血液中心）。聚凝胺試劑盒(珠海貝索生物技術(shù)有限公司)；抗人球蛋白試劑(長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司)。試劑均為合格試劑并在有效期內(nèi)。

1.3 方法及操作

1.3.1 方法 ABO血型、Rh（D）血型鑒定；吸收、放散試驗(yàn)；直接抗人球蛋白試驗(yàn)；間接抗人球蛋白試驗(yàn)；抗體篩選及特異性鑒定均按照標(biāo)準(zhǔn)方法操作。對(duì)送檢患者的血樣進(jìn)行直接抗球蛋白試驗(yàn)，吸收放散試驗(yàn)，ABO、Rh血型鑒定，抗體篩查及抗體鑒定試驗(yàn)。

1.3.2 操作 患者紅細(xì)胞的處理：取患者標(biāo)本紅細(xì)胞適量，用37℃溫鹽水洗滌3次，去除冷自身抗體對(duì)試驗(yàn)的影響。取試管2支，分別標(biāo)記，在1管中加入1體積洗滌的患者紅細(xì)胞和3體積的鹽水，在2管中，加入同等體積的鹽水和洗滌后的已知血型的壓積紅細(xì)胞，45℃孵育10min，振蕩。1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，吸去上清液。在1管中加入少量鹽水，離心，觀察，與未經(jīng)放散時(shí)紅細(xì)胞進(jìn)行自身凝集強(qiáng)度作對(duì)比，如果標(biāo)本紅細(xì)胞仍有自身凝集但自身凝集強(qiáng)度減弱，重復(fù)上述試驗(yàn)，直至沒(méi)有自身凝集。將放散后的標(biāo)本紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次，配成2%～5%的紅細(xì)胞懸液，準(zhǔn)備用于血型鑒定。如果處理后的己知血型的紅細(xì)胞不與對(duì)應(yīng)的抗血清發(fā)生凝集，則本次試驗(yàn)無(wú)效。

1.3.3 患者血清的處理 將放散之后的標(biāo)本紅細(xì)胞鹽水洗滌3次，最后吸盡上清液，取壓積紅細(xì)胞1份，與等量的患者標(biāo)本血清混合，在4℃孵育60分鐘，不時(shí)搖勻，然后1000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，吸取上清液，檢查凝集情況，以確定冷自身抗體對(duì)患者標(biāo)本的影響；另取壓積紅細(xì)胞1份，與等量的患者血清混合，在37℃孵育60分鐘，不時(shí)搖勻，1000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，吸取上清液，檢查凝集情況，如果仍存在自身凝集，重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，排除溫自身抗體對(duì)患者標(biāo)本血清的影響

1.3.4 血型鑒定 取4支潔凈試管，分別加入抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H血清各2滴，并標(biāo)記，再分別加入放散處理后的患者2～5%的紅細(xì)胞懸液各1滴，混勻；取潔凈試管3支，分別加入A、B、O型2～5%試劑紅細(xì)胞懸液1滴，并標(biāo)記，然后加入吸收處理后的患者血清2滴，混勻；另取試管1支，做自身對(duì)照，加入吸收后的患者血清2滴和放散后的患者2～5%紅細(xì)胞懸液1滴，混勻。3000轉(zhuǎn)/分離心10s，記錄結(jié)果。

1.3.5 抗體篩查試驗(yàn) 血清兩滴加入標(biāo)有ⅠⅡⅢ的試管中，對(duì)應(yīng)加入ⅠⅡⅢ套2%～5%篩選紅細(xì)胞懸液1滴，37℃孵育30分鐘。3000轉(zhuǎn)/分離心10秒，觀察凝集和溶血情況，并記錄。鹽水法如為陰性繼續(xù)做抗人球蛋白法。如為陽(yáng)性，則做譜細(xì)胞格局。

1.3.6 直接抗人球蛋白 實(shí)驗(yàn)取潔凈試管2支，各加入患者洗滌3次后配制的3%紅細(xì)胞懸液1滴，加入抗人球蛋白試劑1滴，混勻；不完全抗-D血清致敏的3%D陽(yáng)性紅細(xì)胞懸液1滴加抗人球蛋白試劑1滴，混勻，做陽(yáng)性對(duì)照；正常人3%D陽(yáng)性紅細(xì)胞懸液1滴加抗人球蛋白1滴，混勻，做陰性對(duì)照。1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，記錄結(jié)果[2]。

2.結(jié)果

未經(jīng)處理的患者標(biāo)本血樣ABO血型鑒定結(jié)果見(jiàn)表1。吸收放散處理后的患者標(biāo)本血樣ABO血型鑒定結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 未經(jīng)處理的患者標(biāo)本血型鑒定結(jié)果

表2 處理后的患者標(biāo)本血型鑒定結(jié)果

由上述結(jié)果可以看出，吸收放散處理后的標(biāo)本紅細(xì)胞和血清正反定結(jié)果在4℃、室溫、37℃下均顯示相同的反應(yīng)，確定該患者血型為A型。處理后的血清抗篩試驗(yàn)為陰性，處理后的紅細(xì)胞直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)為陰性。

3.討論

由以上結(jié)果可知，該患者血樣中存在IgG和IgM性質(zhì)的溫自身抗體。溫自身抗體多為IgG性質(zhì)，IgM性質(zhì)抗體較少，引起患者自身細(xì)胞凝集而影響血型鑒定的更為少見(jiàn)。當(dāng)冷凝集自身抗體影響血型鑒定時(shí)，可以采用37℃溫鹽水洗滌紅細(xì)胞的方法去除自身抗體的影響；當(dāng)溫自身抗體影響血型鑒定時(shí)，采用熱放散的方法可以去除自身抗體的影響，但在熱放散過(guò)程中需注意加入對(duì)照試驗(yàn)，以檢查放散過(guò)程中是否破壞了抗原的反應(yīng)性。對(duì)于此類病人的輸血治療，應(yīng)注意嚴(yán)格掌握其輸血指征，既要考慮輸血的必要性，也要考慮輸血后的危險(xiǎn)性。在達(dá)到臨床相應(yīng)的輸血指征并必須要輸血的時(shí)候，既使交叉配血不相合，仍然可以輸注配血不相合的血液。可選擇ABO、Rh等重要血型相同的同型血多份，逐一與病人血液進(jìn)行配血，從而選擇“最小不相容性”，即配血中反應(yīng)最弱的血液輸注，洗滌紅細(xì)胞為此類患者輸血的首選。此時(shí)對(duì)于成人每次輸血以不超過(guò)2U為宜，以盡量慢的速度輸血，時(shí)刻觀察[3]。

[1]張志峰，劉佳.溫反應(yīng)自身抗體導(dǎo)致兩種交叉配血結(jié)果不一致分析[J].國(guó)際輸血及血液學(xué)雜志，2012.35.2.

[2]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程（血站部分).

[3]向東，劉曦，王健蓮，沈偉，陸瓊.金沙紅細(xì)胞溫自身抗體的血清學(xué)特點(diǎn)分析及配血對(duì)策[J].中國(guó)輸血雜志，2008.21.12.