HPV分型檢測聯(lián)合TCT檢查在宮頸病變篩查中的應(yīng)用

劉洪波 祁曉莉 喬星 杜睿 王麗梅

摘 要：目的 探究人乳頭瘤病毒（HPV）以及液基細(xì)胞學(xué)（TCT）的聯(lián)合檢測在宮頸病變的篩查中的應(yīng)用。方法 選取2015 年12月～2016年11月因?qū)m頸異常來我院就診的2327例婦科疾病患者，對其實(shí)施TCT以及HPV DNA檢測，對陽性的患者進(jìn)行陰道鏡活檢，以患者組織的病理學(xué)結(jié)果作為最終確診標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果 共計(jì)355例患者進(jìn)行陰道鏡檢查，其中HPV檢測靈敏度為75.72%，準(zhǔn)確性為70.43%，特異性為30.22%；TCT檢測靈敏度為41.32%，準(zhǔn)確性43.40%，特異性為47.87%；二者聯(lián)合診斷靈敏度為88.21%，準(zhǔn)確率75.10%，特異性為43.36%。兩種檢測方法的陽性檢出敏感度相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 HPV分型檢測聯(lián)合TCT的檢測方式具有相當(dāng)高的陽性率及靈敏度，能夠提高患者宮頸病變的檢出率，延長患者的篩查間隔，有利于臨床上對于宮頸病變的篩查。

關(guān)鍵詞：HPV；TCT；聯(lián)合檢測；宮頸病變篩查

中圖分類號(hào)：R737.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.08.053

文章編號(hào)：1006-1959（2018）08-0152-03

Application of HPV Typing Test Combined with TCT Examination in Screening Cervical Lesions

LIU Hong-bo，QI Xiao-li，QIAO Xing，DU Rui，WANG Li-mei

（Department of Pathology，People's Hospital，Daxing District，Beijing 102600，China）

Abstract：Objective To investigate the application of combined detection of human papillomavirus（HPV）and liquid-based cytology （TCT）in the screening of cervical lesions.Methods From December 2015 to November 2016，2327 patients with gynecological diseases who were diagnosed by cervical abnormality were examined by TCT and HPV DNA，and the positive patients were examined by colposcopy.Pathological findings of the patient's tissues were used as the final diagnostic criteria.Results A total of 355 patients were examined with colposcopy，in which the sensitivity of HPV was 75.72%，the accuracy was 70.43%，the specificity was 30.22%，the sensitivity of TCT was 41.32%，the accuracy was 43.40%，and the specificity was 47.87%；the sensitivity of the combined diagnosis was 88.21%，the accuracy rate was 75.10%，and the specificity was 43.36%.The sensitivity of the two detection methods was statistically significant（P<0.05）.Conclusion The detection method of HPV typing combined with TCT has a high positive rate and sensitivity， which can improve the detection rate of the cervical lesions and prolong the screening interval of the patients，which is beneficial to the screening of cervical lesions.

Key words：HPV；TCT；Combined detection；Cervical lesion screening

宮頸癌（cervical carcinoma）是目前全球排名第二位的女性生殖系統(tǒng)常見癌，患病人數(shù)越來越多，嚴(yán)重威脅女性健康[1]。世界范圍內(nèi)統(tǒng)計(jì)每年50萬左右的宮頸癌新發(fā)病例，其中80%的病例發(fā)生在發(fā)展中國家，50%的病例發(fā)生在亞洲，我國每年新發(fā)病例約有10萬，占世界新發(fā)病例總數(shù)的1/5，且近年呈現(xiàn)地區(qū)增長及發(fā)病年齡提前的現(xiàn)象[2，3]。本研究以同時(shí)進(jìn)行宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）檢查及人乳頭狀瘤病毒（HPV）檢測355例患者為研究對象，以組織病理學(xué)診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，來探討TCT聯(lián)合HPV檢測在宮頸癌前病變及宮頸癌篩查中的應(yīng)用。

1資料與方法

1.1一般資料 選取2015年12月～2016年11月因?qū)m頸異常來北京市大興區(qū)人民醫(yī)院就診的2327例婦科疾病患者，年齡21～71歲，均有性生活史。患者在就診時(shí)多表現(xiàn)為不同程度的白帶異常、陰道不規(guī)則出血、宮頸糜爛等癥狀，僅有小部分患者無明顯的臨床癥狀。排除妊娠、非月經(jīng)期及子宮切除、盆腔放療等患者。

1.2方法

1.2.1 TCT篩查方法 首先采用宮頸刷于患者的宮頸黏膜表面處進(jìn)行反復(fù)刷，然后將宮頸刷取出，將刷頭放入細(xì)胞保存液，送病理科進(jìn)行液基薄層細(xì)胞學(xué)制片，經(jīng)巴氏染色后，由具有豐富閱片經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師于顯微鏡下對涂片進(jìn)行全面的觀察做出病理診斷。

1.2.2 HPV-DNA篩查方法 HPV-DNA篩查采用的是專用HPV采樣刷，將其在宮頸口處以逆時(shí)針方式旋轉(zhuǎn)3圈，停留10 s左右取出，置于專門的樣本儲(chǔ)存管內(nèi)，送病理科采用PCR-反向雜交法進(jìn)行HPV-DNA分型檢測。

1.2.3病理組織活檢 婦科醫(yī)師在陰道鏡下對宮頸移行上皮以及血管的微細(xì)變化進(jìn)行全面觀察，宮頸活檢組織的提取主要位于醋酸白試驗(yàn)、碘試驗(yàn)陽性部位，需要注意的是所收取的標(biāo)本要具有一定的深度，至宮頸上皮基底層，采用10%中性福爾馬林溶液進(jìn)行固定，送病理科按常規(guī)組織處理程序進(jìn)行處理，然后做出病理學(xué)診斷。

1.3儀器與試劑 黑馬Hemal1600基因擴(kuò)增儀、亞能FYY全自動(dòng)分子雜交儀、奧盛K30D加熱型干式金屬恒溫器、臺(tái)式離心機(jī)、HPV基因分型檢測23型試劑盒（亞能）、液基薄層細(xì)胞制片分析系統(tǒng)、博訊VS-840超凈工作臺(tái)、生物安全柜。

1.4觀察指標(biāo) TCT診斷陽性：根據(jù)2004年TBS系統(tǒng)進(jìn)行診斷。包括未見上皮內(nèi)瘤變及惡性細(xì)胞、非典型鱗狀上皮細(xì)胞--不能明確意義（ASC-US）、非典型鱗狀上皮細(xì)胞--不能除外高度病變（ASC-H）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）（包括 CINⅠ）、高度鱗狀上皮病變（HSIL）（包括 CINⅡ，CINⅢ）以及原位癌。TCT結(jié)果≥ASC-US為陽性。HPV-DNA診斷陽性：HPV分型中6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、81、82、83其中一個(gè)型別或一個(gè)以上型別陽性均判斷為陽性。病理組織活檢陽性：CINI、CINⅡ、CINⅢ以及宮頸鱗狀細(xì)胞癌（SCC）屬于陽性[4]。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件對數(shù)據(jù)分析處理，計(jì)數(shù)資料以（n，%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

共計(jì)355例患者進(jìn)行陰道鏡檢查，其中HPV檢測靈敏度為75.72%，準(zhǔn)確性為70.43%，特異性為30.22%；TCT檢測靈敏度為41.32%，準(zhǔn)確性43.40%，特異性為47.87%；二者聯(lián)合診斷靈敏度為88.21%，準(zhǔn)確率75.10%，特異性為43.36%。兩種檢測方法的陽性檢出敏感度相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1～表4。

3討論

宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)病率近年來仍在不斷上升，在發(fā)展中國家占婦女癌癥的24%，全世界每年新發(fā)病40萬例～50萬例，發(fā)病呈年輕化趨勢[5]。對患者的生育功能和生命安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。早期篩查和診斷是確保宮頸癌患者得到及時(shí)有效治療的關(guān)鍵。

臨床上宮頸癌的診斷最常用方法為宮頸脫落細(xì)胞學(xué)檢查，隨著細(xì)胞學(xué)診斷技術(shù)及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，目前宮頸脫落細(xì)胞學(xué)檢查已經(jīng)逐漸被液基薄層細(xì)胞制片術(shù)（thinprep cytologic test，TCT）和HPV分型檢測所取代。通常情況下，單獨(dú)進(jìn)行TCT或HPV分型檢測均可診斷宮頸癌前的有關(guān)病變。但是，TCT靈敏度低且容易受標(biāo)本取材質(zhì)量、制片質(zhì)量及閱片醫(yī)師主觀影響。HPV檢測靈敏度高但特異度差，且人體感染HPV后會(huì)因?yàn)樽陨砻庖叩淖饔脤ζ溥M(jìn)行清除。并且只有感染HPV高危型的一部分人群引發(fā)宮頸癌。所以兩者檢測均存在一定的假陽性率，TCT和HPV聯(lián)合篩查，可以互補(bǔ)不足，提高宮頸疾病的檢出率及篩查準(zhǔn)確程度，減少假陽性和漏診率[6]。本研究顯示，采用TCT聯(lián)合HPV分型檢測診斷宮頸癌前病變的準(zhǔn)確性顯著高于單獨(dú)檢測的方式，而且TCT聯(lián)合HPV分型檢測的方案其靈敏性顯著高于單獨(dú)的TCT與HPV分型檢測的方式。依據(jù)中國癌癥研究基金會(huì)（CCRF）宮頸癌篩查指南的建議，HPV和TCT檢查每年一次；30歲以后HPV和TCT檢查篩查結(jié)果連續(xù)3年正常，可以間隔3～5年進(jìn)行1次篩查。HPV分型檢測聯(lián)合TCT檢查方案可有效延長宮頸病變的篩查間隔時(shí)間，可有效降低患者的醫(yī)療費(fèi)用。

綜上所述，采用HPV分型檢測聯(lián)合TCT檢查的診斷方案，可明顯提高診斷的準(zhǔn)確度以及特異性和靈敏性，必要時(shí)行陰道鏡指導(dǎo)下的活組織檢查，可提高對宮頸病變的診斷率。兩種方法的聯(lián)合檢測對宮頸癌的早期診治有重要意義，值得推廣并加以利用。

參考文獻(xiàn)：

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收稿日期：2017-11-8；修回日期：2017-11-13

編輯/楊倩