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    快速檢測(cè)片在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用

    2018-06-11 15:31張瑛
    食品安全導(dǎo)刊 2018年5期
    關(guān)鍵詞:食品安全應(yīng)用

    張瑛

    摘 要:中國(guó)人民的生活質(zhì)量在不斷提高,對(duì)食品安全問(wèn)題也日趨重視,為了保證食物的食用安全,在食品安全檢查中,應(yīng)嚴(yán)格遵守食品微生物檢測(cè)方法,其中使用快速檢測(cè)法可以達(dá)到有效檢測(cè)的目的,提高食品安全檢測(cè)的效率,進(jìn)而為人們的身體健康提供保障。本文對(duì)快速檢測(cè)片在食品微生物檢測(cè)方面的應(yīng)用進(jìn)行了探討,并且與實(shí)際的食品安全檢測(cè)工作相結(jié)合,提出了一些改善建議。

    關(guān)鍵詞:快速檢測(cè)片 食品安全 微生物檢測(cè) 應(yīng)用

    現(xiàn)如今,大多食品都會(huì)經(jīng)過(guò)生產(chǎn)、加工、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)處理,然而無(wú)論是哪個(gè)環(huán)節(jié),都有被微生物污染的可能,如果食品被微生物所污染,那么微生物很可能在食品中大量繁殖,從而導(dǎo)致食品快速腐敗,而人食用這種食物后可能會(huì)出現(xiàn)食物中毒。近年來(lái)環(huán)境污染問(wèn)題日益嚴(yán)重,對(duì)食品安全也造成了一定的影響,增大了食品微生物對(duì)人體健康的威脅。因此需要選用合適的食品檢測(cè)方法來(lái)對(duì)食物進(jìn)行微生物檢測(cè),使用快速檢測(cè)片來(lái)檢測(cè)食物中的微生物具備操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)快速以及結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),本文對(duì)快速檢測(cè)片進(jìn)行了探討。

    1 快速檢測(cè)片在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)

    在食品微生物的檢測(cè)工作中,快速檢測(cè)片主要有如下三大優(yōu)勢(shì):

    第一,快速檢測(cè)片在少量食品小樣檢測(cè)中的檢測(cè)速度較快。因?yàn)椴恍枰渌噭┑妮o助,所以操作十分簡(jiǎn)便??焖贆z測(cè)片需要的檢驗(yàn)器皿數(shù)量及種類較少,其消毒以及保存的方式也十分簡(jiǎn)單,在運(yùn)輸方面同樣有一定優(yōu)勢(shì),并且符合經(jīng)濟(jì)性的原則??焖贆z測(cè)片對(duì)環(huán)境的污染程度較低,沒(méi)有檢測(cè)后的廢液或廢渣,其對(duì)食物小樣中的微生物檢測(cè)工作完成后的清洗工作較少,降低了食品微生物檢測(cè)工作量。與其他檢測(cè)方法相比,快速檢測(cè)片完善了熱瓊脂法在受損細(xì)菌中的不足,因此適用于室外檢測(cè)工作。

    第二,在食品微生物檢測(cè)中使用快速檢測(cè)片可以同時(shí)進(jìn)行接種工作和取樣工作,這樣得到的檢測(cè)結(jié)果更加真實(shí),還可以有效避免因?yàn)榻臃N時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而出現(xiàn)細(xì)菌繁殖的情況,避免得到誤差較大的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。

    第三,其他的食品微生物檢測(cè)方法所需時(shí)間較長(zhǎng),并對(duì)檢測(cè)溫度有一定的要求,一些基層食品單位無(wú)法滿足這些條件,導(dǎo)致不能得到理想的檢測(cè)效果。經(jīng)過(guò)實(shí)際的檢測(cè)得到了以下對(duì)比數(shù)據(jù),例如使用常規(guī)法檢測(cè)的細(xì)菌總數(shù)為48,應(yīng)用檢驗(yàn)紙片得到的數(shù)據(jù)在16~18的范圍內(nèi),3M測(cè)試片檢測(cè)得到的總數(shù)與常規(guī)法相同。在使用常規(guī)方法檢測(cè)大腸菌群數(shù)量時(shí),得到的結(jié)果是72~96,檢測(cè)紙片的測(cè)試結(jié)果為16~18,3M測(cè)試片的檢驗(yàn)結(jié)果為24。使用常規(guī)法對(duì)大腸桿菌進(jìn)行檢驗(yàn)得到的數(shù)量為240,檢測(cè)紙片的數(shù)據(jù)為24,3M測(cè)試片的數(shù)據(jù)為48。由以上3個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知,快速檢測(cè)片確實(shí)具備防止食品小樣因?yàn)闄z測(cè)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而出現(xiàn)細(xì)菌大量繁殖的技術(shù)優(yōu)勢(shì),經(jīng)實(shí)際實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)驗(yàn)證可知,快速檢測(cè)法的優(yōu)點(diǎn)屬實(shí)。

    2 在食品微生物檢測(cè)中較為常見(jiàn)的測(cè)試片

    食品微生物檢測(cè)中較為常見(jiàn)的是以濾紙為載體的測(cè)試片,濾紙要選用白色、分布密度均勻、無(wú)毒并且吸附能力合理的作為食品微生物檢測(cè)的載體,將其裁剪為常規(guī)的尺寸(4.0cm×5.0cm),在無(wú)菌的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基中加入2,3,5-三苯基氯化四唑(TTC),再將裁剪好的濾紙浸入其中,在這個(gè)過(guò)程中要注意掌握好濾紙?jiān)谂囵B(yǎng)基中的吸附量,然后將其干燥處理,處理完成后再將其裝入滅菌過(guò)的塑料口袋中,密封好,為食品微生物的檢測(cè)做準(zhǔn)備。TTC屬于化學(xué)范疇中的氧化還原指示劑,在與氫結(jié)合后成為不溶于水的紅色物質(zhì),在濾紙上的狀態(tài)為紅點(diǎn),紅點(diǎn)的總數(shù)即為細(xì)菌的數(shù)量,但是需要注意的是TTC過(guò)量會(huì)抑制細(xì)菌生長(zhǎng),因此在用量上要控制好,以反應(yīng)靈敏為原則,同時(shí)不能對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)速度造成影響。一次性的快速檢測(cè)紙片在檢測(cè)完之后需要進(jìn)行焚燒,因此其檢驗(yàn)的后續(xù)清理工作較為簡(jiǎn)單。將國(guó)標(biāo)檢驗(yàn)方法與快速檢測(cè)片方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比,兩者結(jié)果并無(wú)較大差異,但是要注意濾紙的密度較大,而菌類如果在其纖維上則無(wú)法用肉眼進(jìn)行判斷,因此微生物的檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)比實(shí)際細(xì)菌數(shù)量少。

    3 在食品微生物檢測(cè)中所應(yīng)用的快速檢測(cè)方法

    為改善快速檢測(cè)片的不足,還需要將其他方法與快速檢測(cè)法相結(jié)合,由此得到功能完善的快速檢測(cè)片。在不同的食品微生物檢測(cè)工作中應(yīng)根據(jù)其特征來(lái)選擇相應(yīng)的快速檢測(cè)法,如果檢測(cè)目的是要對(duì)食品中特征性很強(qiáng)的DNA進(jìn)行復(fù)制,則要用到PCR快速檢測(cè)法,這種方法可以對(duì)DNA進(jìn)行高效復(fù)制,還可以得到DNA大小的信息。如果所檢測(cè)的食品DNA擁有目的基因,需要在對(duì)其特征DNA進(jìn)行復(fù)制的同時(shí),利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)來(lái)檢驗(yàn)食品中微生物的物種,這樣可以在短時(shí)間內(nèi)得到微生物的檢驗(yàn)結(jié)果。如今,快速檢測(cè)法中的PCR檢測(cè)法得到了廣泛應(yīng)用,并且在不斷的完善。當(dāng)相關(guān)的檢測(cè)單位應(yīng)用PCR檢測(cè)法進(jìn)行檢測(cè)時(shí),一般都會(huì)使用BAX系統(tǒng),這種檢測(cè)系統(tǒng)得到多個(gè)國(guó)際性權(quán)威機(jī)構(gòu)的肯定,因此可靠性較高。根據(jù)堿基兩兩相配對(duì)的生物原理,核酸探針快速檢測(cè)方法是要標(biāo)記需要檢測(cè)的DNA,然后使其在一定的環(huán)境條件下與特定的菌種進(jìn)行核酸序列雜交,由此產(chǎn)生雙鏈,然后再利用得到的雙鏈來(lái)對(duì)食品的小樣進(jìn)行檢測(cè)。核酸探針式快速檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)在于直接、方便,并且其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度較高,因此受到了食品微生物檢測(cè)機(jī)構(gòu)的重視。

    熒光抗體快速檢測(cè)法屬于免疫學(xué)檢測(cè)法的范疇,其原理是應(yīng)用熒光物來(lái)對(duì)抗血清抗體進(jìn)行物理標(biāo)注,由此可以得到抗抗體。然后使用熒光顯微鏡來(lái)對(duì)樣品進(jìn)行觀察,再與食品樣品中的目的微生物進(jìn)行對(duì)比,由其菌種以及抗體的形態(tài)來(lái)判斷食品中微生物的類別。免疫學(xué)快速檢測(cè)法還包括免疫酶快速檢測(cè)法,這種檢測(cè)法利用酶來(lái)對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記,然后再使經(jīng)過(guò)標(biāo)記的酶與抗原發(fā)生相關(guān)的一系列反應(yīng),由此得到較為特殊的抗原化合物組合。這種快速檢測(cè)法主要是觀察有色酶反應(yīng)的具體情況以及其濃度變化,這樣可以檢測(cè)出食品中的抗原和抗體的數(shù)量以及分布情況,此類快速檢測(cè)法使用的技術(shù)為固相免疫酶測(cè)定技術(shù)、免疫酶定位技術(shù)和免疫酶沉淀技術(shù),而在檢測(cè)過(guò)程中所使用的檢測(cè)工具一般為Reveal沙門(mén)氏菌檢測(cè)技術(shù)以及Reveal大腸桿菌檢測(cè)系統(tǒng)等。除上述兩種免疫學(xué)快速檢測(cè)技術(shù)外,還有免疫磁珠快速檢測(cè)法,這種快速檢測(cè)法主要是由與抗體所連接的磁珠來(lái)對(duì)食品小樣培養(yǎng)液中的目的微生物進(jìn)行跟蹤并且捕捉,隨后再將得到的目的菌種放到專業(yè)的選擇性平板上,由技術(shù)人員來(lái)對(duì)目的菌種進(jìn)行觀察,在這種檢測(cè)法中,可以應(yīng)用熒光標(biāo)記或者酶標(biāo)記來(lái)對(duì)小樣進(jìn)行檢測(cè),再使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)來(lái)對(duì)其進(jìn)行更深層次的檢測(cè)處理,免疫磁珠快速檢測(cè)法在檢測(cè)加工食品以及各類動(dòng)物飼料中應(yīng)用較為廣泛,并且對(duì)于大腸桿菌O157和沙門(mén)氏菌的微生物檢測(cè)十分有成效。

    4 總結(jié)

    現(xiàn)階段,食品微生物快速檢測(cè)法在不斷完善,其中PCR快速檢測(cè)法與免疫學(xué)快速檢測(cè)法的應(yīng)用較為廣泛。快速檢測(cè)片具備操作簡(jiǎn)單、成本低、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn),因此受到了檢測(cè)單位的青睞。但是以濾紙為載體的快速檢測(cè)片存在濾孔較大、保水性不高、檢測(cè)范圍有限、不能給予菌體合適的生長(zhǎng)環(huán)境等諸多不足之處,因此需要與其他食品微生物檢測(cè)方法相結(jié)合,由此來(lái)在保證快速檢測(cè)法優(yōu)點(diǎn)的前提下對(duì)其進(jìn)行改善,拓展其對(duì)食品微生物的檢測(cè)范圍,從而為食品安全提供保障。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 王永梅.快速測(cè)試片在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用[J].科學(xué)與財(cái)富.2015(17):45.

    [2] 王佳男,肖茜文,王艷蕊.食品微生物測(cè)試片的研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào).2016,7(2):701x705.

    [3] 楊獻(xiàn)珍,歐祖運(yùn).測(cè)試片在食品衛(wèi)生微生物檢測(cè)中的運(yùn)用[J].飲食保健.2017,4(8).

    [4] 李里.測(cè)試片用于食品衛(wèi)生微生物檢測(cè)中的效果分析[J].食品安全導(dǎo)刊.2017(33).

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