動(dòng)物性食品中氟喹諾酮類獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)

□ 曾 麗 譜尼測(cè)試集團(tuán)深圳有限公司

近年來(lái)，氟喹諾酮類獸藥的普及應(yīng)用使得動(dòng)物性食品中這類藥物的殘留問(wèn)題愈發(fā)突出。例如：未能精準(zhǔn)檢測(cè)動(dòng)物性食品中的氟喹諾酮類獸藥殘留量，動(dòng)物性食品的食用安全、人們的飲食安全及身體健康狀況均會(huì)面臨一定的威脅。因此，分析動(dòng)物性食品中氟喹諾酮類獸藥殘留的檢測(cè)技術(shù)具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

1 氟喹諾酮類獸藥殘留的危害

作為一種常見(jiàn)的細(xì)菌DNA合成抑制劑，氟喹諾酮類獸藥（FGs）已被廣泛應(yīng)用于牛、羊等的養(yǎng)殖管理中。隨著這類藥物應(yīng)用范圍的擴(kuò)大，其在動(dòng)物性食品中的殘留問(wèn)題逐漸引起了人們的重視。動(dòng)物性食品中氟喹諾酮類獸藥殘留的危害主要體現(xiàn)在以下幾方面。第一，直接危害方面。當(dāng)人們使用殘留一定量FQs的動(dòng)物性食品后，其中的殘留劑量可進(jìn)入人體消化系統(tǒng)，并對(duì)相關(guān)器官造成損傷。第二，間接危害方面。FQs殘留的間接危害在于：當(dāng)人們長(zhǎng)期攝入含有FQs的動(dòng)物性食品后，其中的殘留藥物成分可誘導(dǎo)人體各類致病菌產(chǎn)生耐藥性，進(jìn)而為FQs在人類抗菌治療中的應(yīng)用產(chǎn)生阻礙作用[1]。

2 動(dòng)物性食品中氟喹諾酮類獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)

可用于動(dòng)物性食品中氟喹諾酮類獸藥殘留檢測(cè)的技術(shù)類型主要包含以下幾種。

2.1 免疫分析法

免疫分析法檢測(cè)動(dòng)物性食品中是否殘留FQs的原理為：利用抗原與抗體之間的特異性結(jié)合反應(yīng)，識(shí)別動(dòng)物性食品中是否含有FQs這一有害成分。自免疫分析法出現(xiàn)以來(lái)，這種方法已在動(dòng)物性食品成分檢測(cè)中得到了較為廣泛的應(yīng)用。從具體的方法類型來(lái)看，免疫熒光法、酶聯(lián)免疫法的應(yīng)用頻率更高。例如：某研究中采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)動(dòng)物性食品——牛肉樣本中是否含有FQs殘留，其將牛血清白蛋白及達(dá)氟沙星作為免疫原，設(shè)計(jì)主要參數(shù)為：酶標(biāo)二抗工作濃度：1∶4000；抗原濃度1.25μg/L；多抗工作濃度1∶10000。按照上述參數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果證實(shí)：酶聯(lián)免疫法對(duì)達(dá)氟沙星這種氟喹諾酮類獸藥的檢出限及檢測(cè)范圍結(jié)果分別為：0.02ng/L、0.1～10.0ng/L。

將免疫分析法與其他檢測(cè)技術(shù)相比，分析其優(yōu)勢(shì)為：這種檢測(cè)技術(shù)的檢測(cè)成本較低，操作便捷，且靈敏度水平與親和性水平均較好，可滿足人們同時(shí)檢測(cè)大量動(dòng)物性食品的要求。但除上述優(yōu)勢(shì)外，這類檢測(cè)技術(shù)也存在一定的不足：其檢測(cè)結(jié)果中可能存在交叉反應(yīng)，無(wú)法準(zhǔn)確確定動(dòng)物性食品中FGs的定量。

2.2 高效液相色譜法

近年來(lái)，隨著液相色譜法的不斷更新及發(fā)展，這種檢測(cè)技術(shù)逐漸在各類檢測(cè)工作中得到了良好的普及。

動(dòng)物性食品中FQs殘留的液相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)主要需要借助二極管陣列、紫外檢測(cè)器等設(shè)備完成。這種檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用效果已經(jīng)得到了充分證實(shí)。例如，可將氧氟沙星作為內(nèi)標(biāo)物，按照乙腈沉淀處理、離心處理、甲醇-硫酸鹽溶液處理等流程，確定動(dòng)物性食品中是否含有司帕沙星這種氟喹諾酮類藥物。

與其他檢測(cè)技術(shù)相比，該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)為：分離殘留FQs成分速度快、檢測(cè)靈敏度高等。但結(jié)合既往檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)可知，高效液相色譜法檢測(cè)雖然能夠保障動(dòng)物性食品中殘留FQs的檢測(cè)準(zhǔn)確性，但也存在檢測(cè)流程繁瑣、耗時(shí)較長(zhǎng)、成本較高等問(wèn)題[2]。上述特征決定著：在動(dòng)物性食品FQs殘留測(cè)定中，應(yīng)參照待檢樣品量、預(yù)期檢測(cè)成本及耗時(shí)等因素，綜合考慮，最終選擇適宜的檢測(cè)方法。

2.3 微生物檢測(cè)法

在動(dòng)物性食品中FQs殘留的檢測(cè)方法發(fā)展過(guò)程中，微生物檢測(cè)法的引入時(shí)間較早。這種檢測(cè)方法的原理為：以指示菌株為核心，通過(guò)指示菌株的反應(yīng)，判斷動(dòng)物性食品樣本中是否殘留FQs成分及所殘留FQs的含量。例如，可將恩諾沙星作為檢測(cè)重點(diǎn)，以微生物檢測(cè)法為基礎(chǔ)，利用金黃色葡萄球菌判斷動(dòng)物性食品中是否含有這種氟喹諾酮類獸藥。

到目前為止，這種檢測(cè)技術(shù)的低成本、檢測(cè)效率高等優(yōu)勢(shì)已經(jīng)得到了良好的證實(shí)。但該技術(shù)在靈敏度方面的缺陷限制了其在藥物殘留檢測(cè)中的全面普及。

2.4 毛細(xì)管電泳法

作為一種新型FQs殘留檢測(cè)技術(shù)，毛細(xì)管電泳法的檢測(cè)原理為：利用電泳反應(yīng)為人們提供動(dòng)物性食品樣本中是否殘留FQs的判斷依據(jù)。這種檢測(cè)技術(shù)適用于沙拉殺星、諾氟沙星及恩諾沙星等多種氟喹諾酮類藥物的殘留檢測(cè)工作。毛細(xì)管電泳法檢測(cè)動(dòng)物性食品中FQs殘留的效果良好。例如，利用毛細(xì)管電泳法檢測(cè)來(lái)源于某大型肉食銷售商場(chǎng)的2份羊肉樣品及豬肉樣品，結(jié)果顯示：羊肉樣品中諾氟沙星的回收率處于91.9%～97.2%水平，而牛肉樣本中諾氟沙星的回收率則處于93.2%～97.8%水平。提示這種檢測(cè)方法保障提供良好的檢測(cè)效果，進(jìn)而保障動(dòng)物性食品的食用安全。

隨著毛細(xì)管電泳法應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)的不斷豐富，其在動(dòng)物性食品殘留FQs檢測(cè)中的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)變得越來(lái)越明確。相對(duì)于其他檢測(cè)技術(shù)而言，這種檢測(cè)方法的色譜柱基本不會(huì)受樣品污染，且檢測(cè)環(huán)節(jié)的需氧量較少，檢測(cè)效率較高，可滿足大量動(dòng)物性食品的快速檢驗(yàn)要求。但這種檢測(cè)技術(shù)在檢測(cè)偏限方面存在一定的不足。

2.5 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

顧名思義，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法建立在液相色譜法與質(zhì)譜法的基礎(chǔ)上。這種檢測(cè)方法保留了這兩種檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)，并通過(guò)二者的聯(lián)合，提高了診斷靈敏度及組分確定效果。

例如：某雞養(yǎng)殖場(chǎng)主要提供雞肉、雞肝等相關(guān)動(dòng)物性食品，為保障養(yǎng)殖安全，定期使用各類氟喹諾酮類獸藥對(duì)不同月齡雞雛進(jìn)行用藥干預(yù)，如圖1所示。在檢測(cè)這類動(dòng)物性食品中是否含有FQs時(shí)，可利用乙腈提取樣品后，經(jīng)吹干、溶解（磷酸三乙胺緩沖液-乙腈）、UPLC-MS法檢測(cè)流程，確定其中是否殘留FQs。在實(shí)際的動(dòng)物性食品安全檢測(cè)中，可結(jié)合實(shí)際狀況，確定是否引入液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)。

圖1 某雞養(yǎng)殖場(chǎng)的動(dòng)物性食品

3 結(jié)論

加強(qiáng)動(dòng)物性食品中氟喹諾酮類獸藥的檢測(cè)具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。為了提高動(dòng)物性食品的食用安全水平，可結(jié)合氟喹諾酮類獸藥殘留檢測(cè)要求，選擇適宜的檢測(cè)方法，進(jìn)而確保動(dòng)物性食品中的氟喹諾酮類獸藥殘留量符合相關(guān)要求。此外，在后續(xù)管理中，還應(yīng)進(jìn)一步完善氟喹諾酮類獸藥的使用規(guī)定，確保藥物的規(guī)范化應(yīng)用。