飼糧豆粕水平與β-甘露聚糖酶對(duì)斷奶仔豬血清半乳甘露聚糖含量、生化指標(biāo)及腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體基因表達(dá)的影響

朱曉彤 張方亮 尹 杰 黎育穎 韓 慧 賓石玉* 李鐵軍 印遇龍

(1.廣西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，桂林 541006；2.中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南省畜禽健康養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心，農(nóng)業(yè)部中南動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，長(zhǎng)沙 410125；3.中國(guó)科學(xué)院大學(xué)，北京 100039；4.湖南畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，長(zhǎng)沙 410128)

半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)多為豆科植物多糖，是植物中常見主要碳水化合物儲(chǔ)備方式[1-2]。GM屬于甘露聚糖最復(fù)雜的亞科，α-半乳甘露聚糖(α-galactomannan,α-GM)和β-半乳甘露聚糖(β-galactomannan,β-GM)是GM的重要組成部分[3]，其均由β-1,4糖苷鍵連接[4]。飼糧中植物細(xì)胞壁存儲(chǔ)的大量GM不能被單胃動(dòng)物消化，因?yàn)閱挝竸?dòng)物腸道中缺乏靶向β-1,4糖苷鍵的必需酶[5]。對(duì)于動(dòng)物而言，飼糧中大量的存在GM可阻礙其對(duì)細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)利用率降低[6]，甚至大大增加肺曲霉病發(fā)生的可能[7]。β-甘露聚糖酶(β-mannanase,β-MN)可以將GM的β-1,4糖苷鍵從植物細(xì)胞壁中分解，使其成為甘露寡糖等小分子[8]，有效減少飼糧中的α-GM、β-GM和GM含量，從而提高飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用效率，改善動(dòng)物健康，有利于養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展。

鑒定生物系統(tǒng)中血清生化指標(biāo)可以反映豬的炎癥程度[9-10]。飼糧添加β-MN可顯著降低仔豬血清乳酸脫氫酶、肌酸激酶活性，一定程度上緩和了仔豬的斷乳應(yīng)激[11]。飼糧添加β-MN可以改善仔豬生長(zhǎng)性能，提高飼糧利用效率[12]，還可增加機(jī)體氨基酸消化系數(shù)，促進(jìn)氨基酸的吸收[13]，當(dāng)體內(nèi)氨基酸吸收變化時(shí)，哺乳動(dòng)物細(xì)胞氨基酸基因的表達(dá)也變化[14]。盡管飼糧中添加β-MN可調(diào)控生豬生長(zhǎng)性能和生理機(jī)能，但β-MN對(duì)斷奶仔豬血清α-GM、β-GM和GM含量和生化指標(biāo)以及腸道中氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體的表達(dá)的影響還沒有系統(tǒng)的研究。

植物飼料原料中GM對(duì)動(dòng)物生理機(jī)能具有不利影響，但飼料原料中GM的含量卻鮮有報(bào)道，本試驗(yàn)檢測(cè)了飼料原料中的α-GM、β-GM和GM的含量，并通過過量添加豆粕(soybean meal,SBM)提高了α-GM、β-GM和GM含量后，在飼糧中添加β-MN，研究β-MN在飼糧增加α-GM、β-GM和GM含量后，斷奶仔豬腸系膜靜脈、肝門靜脈、頸動(dòng)脈血中血清α-GM、β-GM和GM含量，血清生化指標(biāo)以及腸道溶質(zhì)載體家族7成員1(SLC7A1)、溶質(zhì)載體家族7成員11(SLC7A11)、溶質(zhì)載體家族38成員2(SLC38A2)基因相對(duì)表達(dá)量的影響，探討了β-MN對(duì)α-GM、β-GM和GM的作用效應(yīng)，為β-MN對(duì)GM的作用機(jī)理研究提供了理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

β-MN購(gòu)自美國(guó)Elanco公司，活性為360 MU/kg。選取24頭21日齡健康二元雜交斷奶閹公仔豬，預(yù)飼6 d，初始體重為(9.00±1.17) kg時(shí)，按照2×2因子設(shè)計(jì)，采用完全隨機(jī)的方法將仔豬分為4組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組)，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬，單欄飼養(yǎng)。各組分別飼喂4種試驗(yàn)飼糧。Ⅰ組飼喂22% SBM水平飼糧，Ⅱ組飼喂22% SBM水平并添加0.02% β-MN的飼糧，Ⅲ組飼喂37% SBM水平飼糧，Ⅳ組飼喂37% SBM水平并添加0.02% β-MN的飼糧。飼糧參照NRC(2012)仔豬營(yíng)養(yǎng)需要配制，并根據(jù)SBM水平調(diào)節(jié)試驗(yàn)飼糧的α-GM、β-GM和GM含量。飼糧制成顆粒料，所有飼糧消化能一致，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.2 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)在湖南新五豐股份有限公司永安分公司的中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基地進(jìn)行。試驗(yàn)豬在相同環(huán)境下飼養(yǎng)，單欄飼喂，自由飲水和采食，每天飼喂4次(07:00、11:00、14:00、18:00)，并記錄采食量，自然光照和通風(fēng)，執(zhí)行常規(guī)免疫程序。預(yù)試期6 d，正試期30 d。

本試驗(yàn)程序需要說明的是：鑒于本試驗(yàn)?zāi)康氖菫榱搜芯繑嗄套胸i高SBM飼糧與β-MN對(duì)血清聚糖含量、生化指標(biāo)及腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體基因表達(dá)的影響，為了保障研究的持續(xù)性和完整性，在正試期內(nèi)(30 d)，斷奶2周后的試驗(yàn)仔豬持續(xù)使用添加了高鋅(氧化鋅)的4種試驗(yàn)飼糧，這僅針對(duì)本研究的需要。而有關(guān)鋅的使用，應(yīng)按國(guó)家相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)24頭斷奶仔豬麻醉采集頸動(dòng)脈、腸系膜靜脈以及肝門靜脈血樣各10 mL，檢測(cè)血清中α-GM、β-GM和GM含量；采集前腔靜脈血樣10 mL，檢測(cè)血清生化指標(biāo)；并取空腸前端和回腸后端，檢測(cè)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體SLC7A1、SLC7A11和SLC38A2基因相對(duì)表達(dá)量。在采樣結(jié)束后，所有試驗(yàn)仔豬已根據(jù)國(guó)家相關(guān)規(guī)定進(jìn)行無(wú)公害化處理。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)礦物質(zhì)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The mineral premix provided the following per kg of diets：Cu 150 mg，F(xiàn)e 170 mg，Co 1.9 mg，Mn 80 mg，Zn 77 mg，I 0.3 mg，Se 0.12 mg。

2)多維可為每千克飼糧提供 The multi-vitamin provided the following per kg of diets：VA 4 875 IU，VD31 500 IU，VE 12 mg，VK31.5 mg，VB61.8 mg，VB1215 mg，煙酸 nicotinic 15 mg，D-泛酸D-pantothenic acid 7.5 mg。

3)營(yíng)養(yǎng)水平均為計(jì)算值。α-GM、β-GM和GM含量是根據(jù)表3結(jié)果，通過玉米和豆粕在試驗(yàn)飼糧中的比例計(jì)算得出。Nutrient levels were calculated values. According to the results of Table 3, the contents of α-GM, β-GM and GM were calculated by the ratio of corn and soybean meal in experimental diets.

1.3 樣本采集

于正試期第30天對(duì)24頭斷奶仔豬進(jìn)行禁食12 h，注射麻藥Zoletil 50(Virbac S.A.公司，法國(guó))后屠宰，先采集頸動(dòng)脈、前腔靜脈血樣各10 mL，剖開腹腔，采集肝門靜脈以及腸系膜靜脈血樣各10 mL，血樣靜置3 h，3 000 r/min、離心10 min制備血清，上清液移入離心管中，置于-80 ℃冰箱中保存。迅速采集空腸前端(2 cm)和回腸后端(2 cm)樣品，生理鹽水洗凈后，錫箔紙包樣，并放入液氮中速凍，置于-80 ℃冰箱中保存。

1.4 飼料原料與血清中α-GM、β-GM和GM含量測(cè)定

飼料原料與血清中α-GM、β-GM和GM含量的測(cè)定采用試劑盒，試劑盒均采購(gòu)于上海酶聯(lián)生物科技有限公司，并由上海酶聯(lián)生物科技有限公司檢測(cè)。

1.5 平均日采食量(ADFI)及平均日采食α-GM、β-GM和GM含量測(cè)定

試驗(yàn)期間記錄試驗(yàn)豬的日采食量，計(jì)算1～30 d的ADFI，根據(jù)采食量及飼糧中α-GM、β-GM和GM含量，計(jì)算1～30 d平均日采食α-GM、β-GM和GM含量。

1.6 血清生化指標(biāo)測(cè)定

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)活性及尿素氮(urea nitrogen,UN)、肌酐(creatinine,CREA)、葡萄糖(glucose,GLU)、鈣(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、補(bǔ)體4(complement 4,C4)含量均使用羅氏生化檢測(cè)試劑盒和COBAS C311型羅氏生化自動(dòng)分析儀(Roche公司，德國(guó))進(jìn)行檢測(cè)。

1.7 氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體基因表達(dá)測(cè)定

研磨從液氮冷凍的腸道組織，使用Trizol試劑(Invitrogen公司，美國(guó))分離總RNA，所有樣品總RNA均稀釋至1 μg/μL。然后根據(jù)制造商的說明書用DNase Ⅰ(Invitrogen公司，美國(guó))對(duì)總RNA消化，以去除基因組DNA污染。采用上海生物工程有限公司反轉(zhuǎn)錄試劑盒對(duì)上述DNA消化產(chǎn)物進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，獲得樣品總RNA的cDNA產(chǎn)物，體系為20 μL，置于-20 ℃保存?zhèn)溆?。根?jù)豬的基因序列(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/)使用Prime 5.0設(shè)計(jì)引物以產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物，引物由上海生工生物技術(shù)有限公司合成，引物序列及參數(shù)見表2。將1 μL cDNA模板加入的含有5 μL SYBR Green Premix (2×，預(yù)混MgCl2、dNTP、SYBR Green Ⅰ染料、EX-Taq聚合酶、Buffer)，0.4 μmol/L正向和反向引物各0.5 μL，去離子水補(bǔ)齊總體積為10 μL。PCR循環(huán)設(shè)置為：1)預(yù)熱程序，95 ℃、10 s；2)擴(kuò)增和定量程序，重復(fù)40個(gè)循環(huán)(95 ℃、5 s，60 ℃、20 s)；3)熔化曲線程序，60～99 ℃，溫度升高速率為0.1 ℃/s。反應(yīng)結(jié)束后，分別得到各樣品的β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)基因以及各目的基因引物PCR擴(kuò)增的Ct值，根據(jù)公式2-△Ct=2-(Ct目的基因-Ctβ-actin)計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)量。

表2 實(shí)時(shí)定量PCR引物序列

1.8 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2007進(jìn)行初步整理，用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件的GLM程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)模型包括SBM和β-MN以及兩者的交互作用對(duì)數(shù)據(jù)結(jié)果產(chǎn)生的影響，并采用Duncan氏多重比較法以評(píng)估各組之間的差異，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P<0.05時(shí)為差異顯著，P<0.01時(shí)為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 常用植物飼料原料中α-GM、β-GM和GM含量

由表3中相關(guān)常用植物蛋白質(zhì)飼料原料和能量飼料原料中α-GM、β-GM和GM含量的實(shí)際檢測(cè)值可知，在22種植物飼料原料中，除了發(fā)酵豆粕、蠶豆和黑豆外，飼料原料中β-GM含量均明顯高于α-GM的含量，而GM含量則高于α-GM和β-GM含量的總和。因此，在飼糧配制過程中需要考慮α-GM、β-GM和GM含量。

表3 22種飼糧中常用蛋白質(zhì)原料和能量原料的α-GM、β-GM和GM含量

2.2 β-MN和SBM對(duì)斷奶仔豬ADFI及平均日采食α-GM、β-GM和GM含量的影響

由表4可知，與Ⅰ組相比，Ⅱ組斷奶仔豬的ADFI以及平均日采食α-GM、β-GM和GM含量沒有顯著變化(P>0.05)；與Ⅲ組相比，Ⅳ組斷奶仔豬的ADFI顯著提高(P<0.05)；與Ⅱ組相比，Ⅳ組斷奶仔豬的平均日采食α-GM含量顯著增加(P<0.05)；與Ⅰ組相比，Ⅲ組斷奶仔豬ADFI顯著降低(P<0.05)，平均日采食α-GM含量顯著升高(P<0.05)，這表明，在不添加β-MN的情況下，高水平SBM飼糧可顯著提高仔豬平均日采食α-GM含量(P<0.01)。

2.3 β-MN和SBM對(duì)斷奶仔豬不同部位血清α-GM、β-GM和GM含量的影響

由表5可知，在頸動(dòng)脈血清中，與Ⅰ組相比，Ⅱ組血清α-GM含量降低了37.70%(P>0.05)；與Ⅲ組相比，Ⅳ組血清α-GM含量降低了16.90%(P>0.05)，這表明β-MN可降低頸動(dòng)脈血清中α-GM含量(P=0.02)。與Ⅰ組相比，Ⅲ組血清β-GM含量顯著升高(P<0.05)；與Ⅱ組相比，Ⅳ組血清β-GM含量顯著升高(P<0.05)，這表明過量添加SBM可顯著增加仔豬頸動(dòng)脈血清β-GM含量(P<0.01)。

表4 β-MN和SBM對(duì)斷奶仔豬ADFI及平均日采食α-GM、β-GM和GM含量的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

在腸系膜靜脈血清中，與Ⅰ組相比，Ⅱ組血清α-GM含量顯著降低(P<0.05)，表明β-MN可降低腸系膜靜脈血清中α-GM含量(P=0.01)。與Ⅰ組相比，Ⅲ組血清β-GM含量顯著升高(P<0.05)，血清GM含量顯著升高(P<0.05)；與Ⅱ組相比，Ⅳ組血清α-GM和β-GM含量均顯著增加(P<0.05)，這表明過量添加SBM可顯著增加仔豬腸系膜靜脈血清中α-GM(P=0.04)、β-GM(P<0.01)和GM含量(P<0.01)。

在肝門靜脈血清中，與Ⅰ組相比，Ⅱ組血清α-GM和GM含量均顯著降低(P<0.05)；與Ⅲ組相比，Ⅳ組血清GM含量顯著降低(P<0.05)，這表明β-MN可降低肝門靜脈血清中α-GM(P=0.02)和GM含量(P<0.01)。與Ⅰ組相比，Ⅲ組血清β-GM含量升高了40.24%(P>0.05)；與Ⅱ組相比，Ⅳ組血清α-GM含量顯著升高(P<0.05)，這表明過量添加SBM可顯著增加仔豬肝門靜脈血清中α-GM(P=0.03)和β-GM(P=0.02)含量。

表5 β-MN和SBM對(duì)斷奶仔豬血清α-GM、β-GM和GM含量的影響

續(xù)表5項(xiàng)目ItemsⅠ組GroupⅠⅡ組GroupⅡⅢ組GroupⅢⅣ組GroupⅣP值P-value組間Group豆粕SBMβ-甘露聚糖酶β-MN互作Interaction腸系膜靜脈Mesentericveinα-半乳甘露聚糖α-GM145.68±6.82a90.82±7.65b173.52±16.60a146.17±26.82a0.010.040.010.62β-半乳甘露聚糖β-GM199.60±12.79bc171.27±9.61c247.39±11.26a221.13±15.15ab<0.01<0.010.060.97半乳甘露聚糖GM393.74±35.14b349.10±44.94b557.49±54.82a472.50±51.92ab0.03<0.010.400.78肝門靜脈Hepaticportalveinα-半乳甘露聚糖α-GM122.23±13.95a70.49±5.87b131.54±13.97a119.76±13.77a0.010.030.020.12β-半乳甘露聚糖β-GM175.26±17.79171.12±13.80245.78±29.22204.97±21.610.080.020.300.41半乳甘露聚糖GM368.94±12.60ab264.82±12.86c405.27±41.69a313.94±30.29bc<0.010.19<0.010.64

2.4 β-MN對(duì)斷奶仔豬前腔靜脈血清生化指標(biāo)的影響

由表6可知，在前腔靜脈血清中，與Ⅰ組相比，Ⅱ組血清GLU、Ca和HDL含量均顯著升高(P<0.05)，且Ⅱ組比Ⅰ組血清P含量升高了32.47%(P>0.05)，這表明β-MN可顯著增加前腔靜脈血清GLU(P<0.01)、Ca(P<0.01)、P(P=0.02)和HDL(P<0.01)含量。

與Ⅰ組相比，Ⅲ組血清ALT、GOT活性和UN含量均顯著升高(P<0.05)；與Ⅱ組相比，Ⅳ組血清GOT活性顯著升高(P<0.05)，血清GLU含量顯著降低(P<0.05)，這表明過量添加SBM可顯著增加前腔靜脈血清ALT(P<0.01)、GOT(P=0.01)活性及UN(P<0.01)含量，顯著降低血清GLU含量(P<0.01)。

表6 β-MN和SBM對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

續(xù)表6項(xiàng)目ItemsⅠ組GroupⅠⅡ組GroupⅡⅢ組GroupⅢⅣ組GroupⅣP值P-value組間Group豆粕SBMβ-甘露聚糖酶β-MN互作Interaction鈣Ca/(mmol/L)1.89±0.22b2.67±0.05a1.98±0.17b2.36±0.26ab0.040.57<0.010.32磷P/(mmol/L)2.31±0.323.06±0.042.47±0.162.81±0.220.090.820.020.34高密度脂蛋白HDL/(mmol/L)0.60±0.08b1.07±0.06a0.86±0.08ab0.98±0.14a0.020.40<0.010.08補(bǔ)體4C4/(g/L)0.034±0.0020.036±0.0050.026±0.0020.038±0.0050.190.460.090.22

2.5 β-MN對(duì)斷奶仔豬空腸和回腸氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體基因表達(dá)的影響

由表7可知，與Ⅰ組相比，Ⅱ組空腸SLC7A11基因相對(duì)表達(dá)量顯著升高(P<0.05)；與Ⅲ組相比，Ⅳ組空腸SLC7A1、SLC7A11和SLC38A2基因相對(duì)表達(dá)量均顯著升高(P<0.05)。這表明β-MN可增加空腸氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體SLC7A1(P=0.03)、SLC7A11(P<0.01)和SLC38A2(P=0.01)基因相對(duì)表達(dá)量。

與Ⅰ組相比，Ⅲ組回腸SLC7A1基因相對(duì)表達(dá)量顯著降低(P<0.05)，這表明過量添加SBM可以顯著降低回腸氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體SLC7A1基因相對(duì)表達(dá)量(P=0.01)。

表7 β-MN和SBM對(duì)斷奶仔豬腸道中SLC7A11、SLC7A1和SLC38A2相對(duì)表達(dá)量的影響

3 討 論

植物性飼料原料中GM含量過多會(huì)造成胃腸道功能下降，增加腸道食糜黏度，降低飼料利用率[15]，對(duì)動(dòng)物生理機(jī)能有害。本研究檢測(cè)了常見飼料原料中α-GM、β-GM和GM含量，并發(fā)現(xiàn)大部分飼料原料中β-GM含量明顯高于α-GM，且GM含量高于α-GM與β-GM含量總和，說明GM亞科中還含有其他分支的多聚糖。

在仔豬飼糧中添加GM可以降低仔豬腸道絨毛高度和乳酸桿菌數(shù)量[16]，從而降低仔豬飼糧營(yíng)養(yǎng)利用率。在本試驗(yàn)中，飼糧SBM水平由22%增加至37%后，仔豬采食量下降，而α-GM的采食量卻顯著增加，這可能是α-GM導(dǎo)致采食量下降的因素。GM是菌絲組織生長(zhǎng)期間從細(xì)胞壁釋放的熱穩(wěn)定多糖成分，對(duì)曲霉菌的存活是必需的[17]。因此，仔豬采食過量GM，可導(dǎo)致曲霉肺炎等疾病的風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重危害仔豬健康。本研究通過檢測(cè)不同部位血清GM含量，從而明確了該部位對(duì)GM的吸收狀況。飼糧SBM水平由22%增加至37%后，仔豬頸動(dòng)脈和腸系膜靜脈血清中β-GM含量均顯著增加，什么影響仔豬生理變化的主要因素可能是β-GM。有研究報(bào)道，GM可使胃腸道功能下降，增加腸道食糜黏度[15]，本試驗(yàn)飼糧SBM水平增加使腸系膜靜脈中血清α-GM、β-GM和GM含量均顯著升高，改變了GM在腸道中的平衡，這可能是仔豬腸道生理功能改變的原因，但具體原因尚需進(jìn)一步分析。肝臟屬于先天免疫系統(tǒng)[18]，而在肝門靜脈中，飼糧22%的SBM水平并添加β-MN后，血清α-GM和GM含量均顯著降低，我們推測(cè)β-MN可通過降低肝門靜脈血清中GM的含量來(lái)提高機(jī)體免疫能力。

血清生化指標(biāo)對(duì)致病過程或治療干預(yù)的藥物反應(yīng)具有指示性作用[19]。在試驗(yàn)動(dòng)物模型中，肝損傷可以通過血清ALT和GOT活性來(lái)估計(jì)，血清ALT和GOT活性升高表明嚴(yán)重的肝細(xì)胞損傷或壞死[20-21]，而血清UN含量的升高通常是由于腎臟損傷造成的小球?yàn)V過率降低[22]。本研究表明，飼糧SBM水平由22%增加至37%后，血清ALT、GOT活性及UN含量均顯著增加，提示SBM可破壞仔豬生理生化平衡，增加疾病風(fēng)險(xiǎn)。血清GLU和Ca含量反映了豬的能量狀況[23]和骨對(duì)Ca的吸收狀況[24]；HDL可通過將肝外組織中過多的膽固醇進(jìn)行代謝，防止膽固醇在這些組織中過多地聚集，促進(jìn)機(jī)體健康[25]。本研究表明，飼糧22%的SBM水平并添加β-MN后，可顯著增加血清GLU、Ca、HDL含量，提示β-MN可以提高仔豬能量利用率，促進(jìn)仔豬骨對(duì)Ca的吸收和保持體內(nèi)膽固醇平衡。

β-MN可以將SBM中GM降解為半乳甘露寡糖小分子，半乳甘露寡糖具有消除抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)、提高飼糧消化率、促進(jìn)氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收等特點(diǎn)[4]。氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體可通過偶聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)過程調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)氨基酸濃度和細(xì)胞內(nèi)氨基酸受體的下游信號(hào)，將氨基酸等營(yíng)養(yǎng)信息以及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)本身轉(zhuǎn)移到細(xì)胞需要的位置[26]。SLC7A1用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞堿性氨基酸(精氨酸和賴氨酸)攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)，其中SLC7A1的相對(duì)表達(dá)量上調(diào)，細(xì)胞內(nèi)堿性氨基酸(精氨酸和賴氨酸)濃度也會(huì)隨之上調(diào)[27-28]。SLC7A11屬于溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因家族，編碼胱氨酸/谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體xCT[29]，上調(diào)SLC7A11可促進(jìn)谷氨酸的吸收[30]。SLC38A2維持細(xì)胞內(nèi)L-谷氨酰胺含量并作用中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞[31]。SLC38A2的相對(duì)表達(dá)量越高，其組織中中性氨基酸濃度越高[32]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在37% SBM水平飼糧中添加β-MN，空腸SLC7A1、SLC7A11和SLC38A2相對(duì)表達(dá)量均顯著升高。這可能是由于β-MN通過破壞腸系膜靜脈中過量GM的β-1,4糖苷鍵，從而促進(jìn)了空腸中SLC7A1、SLC7A11和SLC38A2相對(duì)表達(dá)量的增加。飼糧SBM水平由22%增加至37%時(shí)，回腸中SLC7A1的相對(duì)表達(dá)量降低，提示SBM可通過降低SLC7A1的相對(duì)表達(dá)量降低仔豬腸道對(duì)堿性氨基酸(精氨酸和賴氨酸)的吸收。

4 結(jié) 論

① 在大部分常用飼料原料中，β-GM含量比α-GM的含量高。

② 斷奶仔豬平均日采食α-GM含量增加時(shí)，ADFI會(huì)隨之降低。

③ 飼糧中α-GM、β-GM和GM含量增加時(shí)，斷奶仔豬肝門靜脈、頸動(dòng)脈和腸系膜靜脈血清α-GM、β-GM和GM含量也會(huì)增加。

④ 飼糧添加β-MN可以降低斷奶仔豬血清α-GM、β-GM和GM含量，同時(shí)增加了前腔靜脈血清GLU、Ca、P和UN含量，提高了空腸SLC7A1、SLC7A11、SLC38A2的相對(duì)表達(dá)量。

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