大刺鰍幼魚配合飼料中適宜蛋白質(zhì)、蛋氨酸和脂肪水平研究

張 坤 ， 樊海平 ， 張蕉南 ， 胡 兵 ， 邱曼麗 ， 薛凌展 ， 陳 斌 ， 鐘全福

（1.福建天馬科技股份集團(tuán)股份有限公司，福建福州 350308；2.福建省特種水產(chǎn)配合飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建福州 350308；3.福建省淡水水產(chǎn)研究所，福建福州 350002）

大刺鰍（Mastacembelus aculeatus）主要分布于我國(guó)廣東、廣西、云南、海南以及福建等地的河流、湖泊中（林偉強(qiáng)等，2016），其肌肉中鮮味氨基酸總量超過青魚、草魚，肉味鮮美，無肌間刺，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值（Anu等，2013）。大刺鰍為底棲淡水魚類，主要捕食水生昆蟲、小魚、小蝦等小型無脊椎動(dòng)物和水生植物（黃永春，1999），胃壁厚，腸道粗而短。目前，大刺鰍營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求量及飼料配方研究應(yīng)用等鮮見報(bào)道，馴養(yǎng)主要使用水蚯蚓、冰鮮及鰻鱺配合飼料。

本文采用正交設(shè)計(jì)法，考察飼料中蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪不同含量水平對(duì)大刺鰍幼魚生長(zhǎng)性能和形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響，篩選出大刺鰍幼魚適宜飼料配方，以期為大刺鰍配合飼料的研制和應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及試驗(yàn)魚 試驗(yàn)用飼料、蛋氨酸及魚油均由福建省天馬科技集團(tuán)股份有限公司提供。飼料原料以全過100目篩，逐級(jí)混合均勻的魚粉及豆粕為主要蛋白源，以魚油為主要脂肪源，以預(yù)糊化淀粉作為黏合劑，另外添加少量維生素及礦物質(zhì)預(yù)混料。

試驗(yàn)魚為順昌縣兆興魚種養(yǎng)殖有限公司利用野生大刺鰍自繁育的同批次子一代苗種，經(jīng)浮游動(dòng)物、水蚯蚓、鰻鱺配合飼料系列餌料培育至幼魚，平均體重和全長(zhǎng)分別為 （8.63±0.23）g和（14.87±0.32）cm。挑選外表正常，健康的個(gè)體于直徑1.5 m的玻璃纖維桶中暫養(yǎng)2周，暫養(yǎng)期間24 h不間斷充氣，保證水體溶解氧穩(wěn)定，水源為經(jīng)充分曝氣24h以上的地下水，溫度維持26～28℃，每日分別于7∶00和16∶00投喂鰻鱺配合飼料2次，投餌量為魚體總重的2%，分別于投餌后1.5 h清污換水，日換水量40%左右，待魚體穩(wěn)定攝食后移至150 L玻璃缸中進(jìn)行正式試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用正交表L9（34）設(shè)計(jì)，以蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪含量為因素，設(shè)置3個(gè)水平，其中蛋白質(zhì)水平為44%、47%、50%，蛋氨酸水平為1.4%、1.7%、2.0%，脂肪水平為 4%、6%、8%，分別配制G1～G9共9組不同營(yíng)養(yǎng)水平配合飼料 （表1）。9個(gè)處理組，每組放養(yǎng)36尾經(jīng)停食24 h的大刺鰍幼魚，每組設(shè)置2個(gè)重復(fù)。每天分別于7∶00、16∶00投餌，日投餌率為魚體總重的2.5%～3%。攝食結(jié)束1.5 h后虹吸排污，日換水量為70%，試驗(yàn)持續(xù)60 d，試驗(yàn)期間利用電加熱棒維持水溫為27～28℃，溶解氧≥6.0 mg/L，氨氮 ＜0.2 mg/L，亞硝酸鹽 ＜0.02 mg/L，pH 7.3±0.3。每日記錄飼料攝食量和死亡魚尾數(shù)，每隔10 d每組隨機(jī)抽樣6尾大刺鰍稱重后調(diào)整飼料投喂量。

表1 配方飼料的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表L9（34）

1.3 樣品采集與處理 試驗(yàn)結(jié)束前24 h停止投餌，稱量每組魚體總重后，每組隨機(jī)取6尾魚稱重并測(cè)定體長(zhǎng)，然后在冰盤上進(jìn)行解剖，分離并稱量?jī)?nèi)臟重、肝臟重和腸系膜脂肪重，生理鹽水分別沖洗肝臟和腸道，濾紙吸干后分別加入9倍體積（V/m）的預(yù)冷生理鹽水，冰水浴中勻漿制成10%組織液，3000 r/min離心10 min，取上清液保存待測(cè)。

1.4 指標(biāo)測(cè)定 生長(zhǎng)性能采用增重率、特定生長(zhǎng)率、蛋白質(zhì)效率和餌料系數(shù)表示；形態(tài)學(xué)指標(biāo)采用肥滿度、臟體比、肝體比、腸系膜脂肪體比表示。具體計(jì)算公式如下：

存活率/%=Nt/N0×100；

增重率/%=（Wt-W0）/W0×100；

特定生長(zhǎng)率/%=（ln Wt-ln W0）/t×100；

蛋白質(zhì)效率=（Wt-W0）/WP；

餌料系數(shù)=F/（Wt-W0）；

肥滿度/%=100×m/L3×100；

臟體比/%=100×mv/m×100；

肝體比/%=ml/m×100；

腸系膜脂肪體比/%=mi/m×100；

式中：Wt為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體質(zhì)量，g；W0為試驗(yàn)開始時(shí)魚體質(zhì)量，g；WP為蛋白質(zhì)攝入量，g；t為飼喂天數(shù)，d；F為飼料攝食量，g；N0試驗(yàn)初始尾數(shù)；Nt為試驗(yàn)?zāi)┪矓?shù)；ml為肝臟重量，g/尾，mv為內(nèi)臟重量，g/尾，mi為腸系膜脂肪重量，g/尾；m 為魚體重量，g/尾；L 為魚體體長(zhǎng)，cm/尾。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，并進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示各組間差異顯著。直觀分析法及方差分析考察3種試驗(yàn)因素對(duì)大刺鰍幼魚增重率和餌料系數(shù)的影響，層次分析法（郭穗勛等，2004）考察試驗(yàn)因素各水平對(duì)增重率和餌料系數(shù)的影響權(quán)重。

2 結(jié)果

2.1 飼料營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)大刺鰍幼魚生長(zhǎng)性能的影響 結(jié)果見表2。試驗(yàn)期間大刺鰍幼魚攝食正常，存活率均超過97%，組間差異不顯著 （P＞0.05）。 G7處理組試驗(yàn)魚的增重率（WGR）、特定生長(zhǎng)率（SGR）和蛋白質(zhì)效率（PER）最大，分別為177.38%、1.65%和2.65%，其中WGR、SGR除與G9組差異不顯著外（P＞0.05），與其余各處理組差異顯著（P＜0.05），分別較其余處理組提高了8.09%～26.81%和5.45%～18.79%；PER較G4處理組顯著提高了26.79%（P＜0.05），與其余各組差異不顯著（P＞0.05）。G9處理組的餌料系數(shù)（FCR）最小，較G3處理組顯著降低了32.35%（P＜0.05），與其余各組差異不顯著（P＞0.05）。

表2 試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)大刺鰍幼魚生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼料營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)大刺鰍幼魚形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響 結(jié)果見表3。大刺鰍幼魚肥滿度（CF）及腸系膜脂肪比（IPF）受飼料中蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪添加水平影響不顯著（P＞0.05）。G5處理組肝體 比 （HSI） 較 G4、G6、G8處 理 組 顯 著 增 大 了13.55%、11.68%、13.55%（P ＜ 0.05），與其余各組差異不顯著（P＞0.05）。 G9處理組臟體比（VSI）較G8處理組顯著升高了27.08%，除與G3處理組差異不顯著外（P＞0.05），與其余各組差異顯著（P ＜ 0.05）。

表3 試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)大刺鰍幼魚形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響%

2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果分析

2.3.1 直觀分析法 結(jié)果見表4。以增重率和餌料系數(shù)為考察指標(biāo)，三種試驗(yàn)因素對(duì)大刺鰍幼魚增重率和餌料系數(shù)的極差 （R）值分別為24.21、10.87、5.81 和 0.17、0.08、0.02，R 值的主次順次為A（蛋白質(zhì)）因素 ＞C（蛋氨酸）因素＞B（脂肪）因素，因此試驗(yàn)因素中蛋白質(zhì)的含量是影響大刺鰍幼魚增重率的主要因素，其次為蛋氨酸含量，再者為脂肪含量。通過比較各因素水平間k值的大小得出，大刺鰍幼魚的飼料配方以A3B3C2為佳。

表4 試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)大刺鰍幼魚生長(zhǎng)的效應(yīng)分析（2個(gè)重復(fù)）

2.3.2 方差分析法 結(jié)果見表5。以增重率為考察指標(biāo)，蛋白質(zhì)對(duì)大刺鰍幼魚增重率影響極其顯著（P=0.000），其次是蛋氨酸含量（P=0.025），脂肪含量對(duì)大刺鰍幼魚增重率影響不顯著（P=0.233）。以餌料系數(shù)為考察指標(biāo)，3種飼料主要成分均對(duì)大刺鰍幼魚餌料系數(shù)影響顯著 （P＜0.05）。因模型誤差同試驗(yàn)誤差顯著差異（P＜0.05），說明試驗(yàn)因素間存在交互作用，進(jìn)行各因素水平間的多重比較無實(shí)際意義，為尋求最優(yōu)水平組合，需進(jìn)行試驗(yàn)各處理組間的多重比較。

2.3.3 層次分析法 結(jié)果見表6。以增重率和餌料系數(shù)為考察指標(biāo)，試驗(yàn)因素不同水平對(duì)大刺鰍幼魚增重率和餌料系數(shù)的影響權(quán)重最大的分別是A3、B3和C2，各因素的主次順序由各水平影響權(quán)重之和的大小決定，增重率各因素水平權(quán)重之和分別為 A：0.592，B：0.183，C：0.265；餌料系數(shù)各因素 水 平 權(quán) 重 之 和 分 別 為 A：0.613，B：0.077，C：0.311。因此主次順序?yàn)锳＞C＞B，試驗(yàn)最優(yōu)處理組合為A3B3C2，與直觀分析法一致。

表5 試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)大刺鰍幼魚生長(zhǎng)的方差分析（2個(gè)重復(fù)）

表6 試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)大刺鰍幼魚生長(zhǎng)的層次分析

3 討論

配合飼料具有營(yíng)養(yǎng)全面均衡、利用效率高、安全方便、便于儲(chǔ)存等優(yōu)點(diǎn)，是大刺鰍養(yǎng)殖業(yè)規(guī)?；⒓s化、標(biāo)準(zhǔn)化和產(chǎn)業(yè)化的物質(zhì)基礎(chǔ)，其質(zhì)量決定了大刺鰍養(yǎng)殖效益和產(chǎn)品質(zhì)量與安全（宋青春，2009）。然而有關(guān)大刺鰍的營(yíng)養(yǎng)生理、代謝規(guī)律、營(yíng)養(yǎng)需求及有害物質(zhì)的危害量等研究及其系列配合飼料研發(fā)仍處于起步階段，因此優(yōu)化大刺鰍幼魚飼料配方，對(duì)大刺鰍養(yǎng)殖業(yè)具有重要意義。

以增重率、餌料系數(shù)為考察指標(biāo)，蛋白質(zhì)的的含量對(duì)養(yǎng)殖效果影響最大，其次是蛋氨酸含量，而脂肪含量的養(yǎng)殖效果影響差異不顯著；以形態(tài)學(xué)指標(biāo)為考察指標(biāo)，3種飼料中主要營(yíng)養(yǎng)成分均對(duì)大刺鰍幼魚肥滿度、腸系膜脂肪比重影響不顯著，這與奧尼羅非魚（林仕梅等，2008）、大菱鲆（魏玉婷，2010）等研究結(jié)果一致。在9種飼料配方中，養(yǎng)殖生長(zhǎng)性能各項(xiàng)指標(biāo)最好的是G7處理組，即50%蛋白質(zhì)、4%脂肪和3%蛋氨酸，而餌料系數(shù)最低的為G9處理組，即50%蛋白質(zhì)、8%脂肪和1.7%蛋氨酸，這表明在一定范圍內(nèi)，提高脂肪含量有利于節(jié)約蛋白質(zhì)。但此含量是否已達(dá)“上限”，繼續(xù)提高蛋白質(zhì)和脂肪含量，大刺鰍幼魚生長(zhǎng)性能是否會(huì)更好，還有待于進(jìn)一步研究。本研究馴食轉(zhuǎn)料的幼鰻配合飼料3種主要營(yíng)養(yǎng)成分分別為粗蛋白質(zhì)45%，蛋氨酸1.4%，粗脂肪4%，與正交試驗(yàn)粗蛋白質(zhì)50%，蛋氨酸1.7%，粗脂肪8%的優(yōu)化組合相比，粗蛋白質(zhì)、蛋氨酸和粗脂肪水平均有所降低。飼喂結(jié)果顯示投喂幼鰻飼料大刺鰍幼魚生長(zhǎng)速度、餌料系數(shù)等指標(biāo)較優(yōu)化組合飼料差，表明大刺鰍幼魚對(duì)蛋白、蛋氨酸和脂肪需求量大于幼鰻。

研發(fā)優(yōu)質(zhì)配合飼料的基礎(chǔ)之一是營(yíng)養(yǎng)需求的研究，魚類的營(yíng)養(yǎng)需求包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物、維生素和礦物質(zhì)等多種因子，且各營(yíng)養(yǎng)成分的種類和含量及各因子間的相互作用均對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物產(chǎn)生影響，只有將多種飼料成分相配合才能滿足水產(chǎn)動(dòng)物的生理需求 （王曉娟等，2010）。良好的大刺鰍配合飼料配方，一方面要以大刺鰍營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)為理論依據(jù)，運(yùn)用大刺鰍營(yíng)養(yǎng)調(diào)控理論與技術(shù)，提高飼料的誘食性及其消化吸收率，增進(jìn)大刺鰍免疫力，充分滿足大刺鰍生長(zhǎng)與繁殖的需要，另一方面又要考慮大刺鰍養(yǎng)殖模式及季節(jié)和地區(qū)的差異，并根據(jù)大刺鰍種類、規(guī)格及養(yǎng)殖過程出現(xiàn)的各種具體情況作出適當(dāng)?shù)卣{(diào)整，以開發(fā)出安全高效環(huán)境友好型大刺鰍配合飼料（何志剛等，2010）。本研究?jī)H設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)、蛋氨酸和脂肪3因素3水平正交試驗(yàn)，且經(jīng)方差分析表明3種因素間存在交互作用，因此開展維生素、礦物鹽及不同種類、質(zhì)量蛋白源等對(duì)魚體的影響研究，對(duì)大刺鰍飼料配方的進(jìn)一步優(yōu)化具有積極意義。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)應(yīng)用平均體質(zhì)量為（8.63±0.23）g的大刺鰍幼魚，采用正交表L9（34）設(shè)計(jì)9組不同蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪含量水平的配合飼料，以增重率和餌料系數(shù)作為生長(zhǎng)評(píng)定指標(biāo)，結(jié)果表明，飼料中蛋白質(zhì)水平、蛋氨酸及脂肪含量水平對(duì)大刺鰍幼魚的WGR和FCR影響顯著；對(duì)肥滿度、臟體比、肝體比和腸系膜脂肪比影響不顯著。大刺鰍幼魚配合飼料中適宜蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪含量分別為50%、1.7%和8%。

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