• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    AFB1與吸附劑對牦牛瘤胃發(fā)酵性能的影響

    2018-05-03 06:04:56李子謙文勇立齊沛森安雅靜趙佳琦安德科
    關(guān)鍵詞:胃液牦牛微量元素

    李子謙,文勇立*,齊沛森,安雅靜,李 鑄,艾 鷖,趙佳琦,李 強,安德科

    (1.西南民族大學(xué)青藏高原研究院,成都 610041;2.四川省畜牧總站,成都 610041;3.金川縣畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心,四川 金川 624100)

    牦牛分布于我國青藏高原,我國占世界總量90%以上,是當(dāng)?shù)刂匾a(chǎn)生活資料及地方經(jīng)濟發(fā)展支柱。傳統(tǒng)牦牛飼養(yǎng)依靠純天然放牧,生產(chǎn)方式落后,經(jīng)濟效益較低。隨生產(chǎn)方式改進,逐漸開展牦牛舍飼、半舍飼養(yǎng)殖。但牦牛飼料易受霉菌毒素污染,影響健康和產(chǎn)品安全。因此,研究霉菌毒素對牦牛瘤胃發(fā)酵影響利于牦牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展。我國部分地區(qū)飼料及原料黃曲霉毒素B1(Aflatoxins B1,AFB1)含量達11.2 μg·kg-1,粕類達47.6 μg·kg-1[1]。一般選擇酵母細胞壁提取物(Yeast cell wall extract,YCW)和蒙脫石(Montmorillonite,MMT)作霉菌毒素脫毒劑。YCW結(jié)構(gòu)中β-葡聚糖(β-glucan)是吸附活性成分,可與霉菌毒素分子相互作用結(jié)合排出體外[2-3]。YCW中甘露寡糖(Mannan-oligosaccha?rides,MOS)可促進瘤胃有益菌增殖[4-6]。MMT在干燥條件下與AFB1間主要以離子偶極相互作用或交換陽離子/羰基氧配位結(jié)合,濕潤條件下主要以交換陽離子水化膜和羰基間形成氫鍵結(jié)合[7]。Seeling等對體外瘤胃微生物靜態(tài)培養(yǎng)表明,隨AFB1濃度增加,氨氮(NH3-H)、揮發(fā)性脂肪酸(VFA)濃度及甲烷產(chǎn)量下降,且抑制羧甲基纖維素酶和微晶纖維素酶活性[8-10]。除pH、NH3-H、VFA等外,微量元素通過影響瘤胃微生物代謝與發(fā)酵性能關(guān)系密切[11]。有關(guān)吸附劑及AFB1對微量元素影響,朱金林等研究表明,不同吸附劑對微量元素具有不同程度吸附作用,僅見硒(Se)對其AFB1毒性具有緩解作用[12-14]。目前研究多基于體外試驗,涉及瘤胃氨氮(NH3-H)、揮發(fā)性脂肪酸(VFA)及纖維素酶活性等報道較少[15]。另外,Kutz等吸附劑研究表明,水合鋁硅酸鈣鈉(HSCAS)可降低乳中黃曲霉毒素M1(Aflatoxins M1,AFM1)轉(zhuǎn)化率,YCW物可降低機體對AFB1吸收[16-17]。本研究以牦牛為試驗對象,在飼料中添加不同水平AFB1及3種吸附劑處理:MMT、YCW、MMT+YCW,分析AFB1和吸附劑對牦牛瘤胃發(fā)酵性能影響。旨為AFB1影響瘤胃性能相關(guān)研究積累資料,為反芻動物飼料安全和吸附劑應(yīng)用提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 試劑與儀器

    主要儀器:pH計8362sc(購自美國哈希公司);漩渦振蕩器XH-B(購自上海汗諾儀器有限公司);紫外可見分光光度計UV-9000S(購自上海元析儀器有限公司);氣相色譜儀LC-20A(購自日本島津儀器公司);超聲波細胞破碎儀JY92-IIN(購自寧波新芝生物科技股份有限公司);恒溫水浴搖床WHY-2A(購自常州市華怡儀器制造有限公司);iCAP6000全譜直讀型臺式ICP光譜儀(購自美國Thermo Fisher Scientific Inc.公司)。

    主要試劑:AFB1標(biāo)準(zhǔn)品(99.5%),購自以色列FERMENTEK公司;蒙脫石(>95%),購自赤峰和明生化有限公司;酵母細胞壁提取物(甘露寡糖≥20%),購自安琪酵母股份有限公司;L-乳酸(≥98%)、偏磷酸(≥98%)、對羥基聯(lián)苯(≥99%)、微晶纖維素(≥99%)、羧甲基纖維素鈉(≥99%)、水楊苷(≥98%)、木聚糖(≥95%)、濃硝酸(≥68%)等,購自上海瀚思化工有限公司。

    1.2 動物分組與處理

    2017年9月在四川省阿壩藏族羌族自治州茂縣茂興牦牛養(yǎng)殖場選擇16頭健康、發(fā)育正常,36月齡公牦牛,平均體重為195.8 kg。試驗牦牛飼養(yǎng)管理條件一致,自由采食和飲水。日糧精粗比1∶4,精料為豆粕(40%)和玉米粉(60%)。試驗采用2因素4水平完全正交試驗設(shè)計法(見表1),對AFB1與吸附劑處理作主效應(yīng)方差分析,AFB1水平:A(20 μg·kg-1)、B(40 μg·kg-1),C(60 μg·kg-1)、對照組,吸附劑處理:Ⅰ(MMT 50 g·頭-1·d-1)、Ⅱ(YCW 50 g·頭-1·d-1)、Ⅲ(MMT 25 g·頭-1·d-1+YCW 25 g·頭-1·d-1)、對照組。投喂7 d。每天6:00,18:00兩次飼喂。每日6:00先將AFB1和吸附劑摻入一小撮精料中,混勻,待牦牛全部采食后,投喂剩余飼料。

    表1 2因素4水平完全正交試驗設(shè)計Table 1 Two factors and four levels complete orthogonal design

    1.3 樣品采集與制備

    于第8天采集瘤胃液,飼喂后2 h,用負壓采集器,經(jīng)導(dǎo)管通過口腔食道,深入到瘤胃內(nèi)中部,為防止唾液污染,棄去前一部分,采集瘤胃液約100 mL。一部分樣品經(jīng)過4層紗布過濾,立即測定pH,分裝-72°C保存,用于NH3-N、VFA濃度測定;另一部分樣品不過濾,直接分裝-72°C保存,用于微生物蛋白(MCP)、纖維素酶活性(微晶纖維素酶、羧甲基纖維素酶、纖維二糖酶和木聚糖酶)測定。

    1.4 測定指標(biāo)及方法

    1.4.1 瘤胃發(fā)酵性能指標(biāo)測定

    優(yōu)化對羥基聯(lián)苯法定量測定乳酸濃度,參照文獻[18];比色法測定NH3-N濃度,參照文獻[19];氣相色譜法外標(biāo)法測定VFA濃度,嘌呤法測定MCP濃度,參照文獻[20];纖維降解酶活性測定參照文獻[21]。

    1.4.2 瘤胃液微量元素的測定

    取過濾瘤胃液5 mL于潔凈三角瓶中,加入約100 mL濃硝酸。先將電熱板溫度調(diào)至200℃低溫消解,待達到硝酸分解溫度后,將電熱板升溫至400℃。加熱期間瓶中液體低于20 mL時,可加入適量濃硝酸。待瓶內(nèi)液體澄清,所剩液體約5 mL時,取下冷卻,用10%硝酸于10 mL定容管中定容,收集濾液測定ICP-OES。

    1.5 數(shù)據(jù)處理

    用SPSS作2因素4水平方差分析,估計因子效應(yīng),用LSD作行多重比較。結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 AFB1對瘤胃發(fā)酵性能影響

    由表2可知,AFB1顯著降低瘤胃pH、NH3-H、總VFA、乙酸、丙酸戊酸濃度、微晶纖維素酶、纖維二糖酶、木聚糖酶活性(P<0.01或P<0.05)。丁酸、MCP、乳酸濃度濃度、羧甲基纖維素酶活性隨AFB1濃度升高而降低(P>0.05)。AFB1在60 μg·kg-1水平下,纖維二糖酶活性顯著低于對照組(P<0.05),表明當(dāng) AFB1濃度達 60 μg·kg-1時,對該指標(biāo)影響具有統(tǒng)計學(xué)意義,為最低危害濃度;在40、60 μg·kg-1水平下,木聚糖酶活性顯著低于對照組(P<0.05),表明當(dāng)AFB1濃度達到40 μg·kg-1時,對該指標(biāo)影響具有統(tǒng)計學(xué)意義,為最低危害濃度。

    2.2 AFB1對瘤胃液微量元素含量影響

    由表3可知,隨AFB1水平升高,瘤胃液Fe、Cu、Zn、Mn、Se含量極顯著或顯著降低(P<0.01或P<0.05)。

    表2 AFB1對瘤胃發(fā)酵性能影響Table 2 Effect of AFB1 on the rumen fermentation performance

    表3 AFB1對微量元素影響Table 3 Effect of AFB1 on trace elements (mg·L-1)

    2.3 吸附劑對瘤胃發(fā)酵性能影響

    由表4可知,3種吸附劑處理均不同程度降低乙丙比和提高總VFA、乙酸、丙酸、丁酸MCP濃度、羧甲基纖維素酶活性,效應(yīng)順序為Ⅱ>Ⅲ>Ⅰ,但僅見YCW具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)。

    混合處理組(MMT+YCW)效果大于對照組和MMT組,但小于YCW組。

    2.4 吸附劑對瘤胃液微量元素影響

    由表5可知,3種吸附劑處理均不同程度降低Fe、Cu、Zn、Mn、Se含量(P>0.05),其降低程度由高到低為Ⅰ>Ⅲ>Ⅱ。

    表4 吸附劑對瘤胃發(fā)酵性能影響Table 4 Effects of adsorbents on the rumen fermentation performance

    表5 吸附劑對微量元素影響Table 5 Effects of adsorbents on trace elements(mg·L-1)

    3 討 論

    3.1 AFB1對瘤胃發(fā)酵性能影響

    對照組pH為6.25,處于正常范圍[22]。處理組為5.51~5.83。Mould等研究指出,當(dāng)pH≤6.0時,纖維降解菌活性完全受抑制[23]。顯示牦牛瘤胃纖維降解受AFB1影響。齊琪基于瘤胃微生物體外培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)AFB1對羧甲基纖維素酶、微晶纖維素酶和纖維分解菌酶活性有抑制作用[10]。本研究結(jié)果與體外試驗報道結(jié)果一致,表明AFB1降低牦牛瘤胃pH同時影響瘤胃纖維降解作用。對照組NH3-H濃度為8.96 mg·dL-1,處于正常范圍,處理組為6.77~7.22 mg·dL-1,低于正常范圍[24]。由于NH3-H濃度與蛋白利用率有關(guān),表明AFB1影響牦牛蛋白利用率。Dengler等VFA轉(zhuǎn)運的分子機制研究認為,VFA與組織新陳代謝有關(guān)[25],Jiang等通過瘤胃微生物體外靜態(tài)培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)AFB1濃度升高,總VFA、乙酸、丙酸、丁酸和戊酸濃度下降[26],本試驗結(jié)果與其相符,因此驗證體內(nèi)試驗與體外試驗結(jié)果一致,顯示牦牛新陳代謝受到AFB1抑制。Mojtahedi等通過體外發(fā)酵試驗,發(fā)現(xiàn)在含有AFB1培養(yǎng)基中,干物質(zhì)消化率顯著降低[27-28]。Burmeister等采用主要成分為AFB1的霉菌毒素(AFs)粗提物,研究微生物對該粗提物敏感性,發(fā)現(xiàn)與MCP合成相關(guān)芽孢桿菌、梭菌和鏈霉菌受抑制[29],與本研究AFB1影響MCP結(jié)果一致。目前未見AFB1對瘤胃乳酸濃度影響報道,但瘤胃乳酸濃度過高可引起動物急性酸中毒,還可導(dǎo)致動物出現(xiàn)瘤胃炎和肝水腫等疾病[30-32]。本研究發(fā)現(xiàn)AFB1影響乳酸代謝,可能引起牦牛酸中毒或發(fā)生瘤胃及肝臟疾病風(fēng)險。目前未見AFB1對微量元素影響相關(guān)研究,Se可以降低AFB1對動物毒性,但作用機制尚不明確[13-14]。本研究AFB1降低瘤胃液Se、Fe、Cu、Zn、Mn含量(P>0.05),推測Se等微量元素與AFB1存在與吸附劑類似結(jié)合作用,可能在動物體內(nèi)與AFB1結(jié)合排出體外,降低瘤胃液中微量元素含量。

    3.2 吸附劑對發(fā)酵性能影響

    本研究通過測定瘤胃發(fā)酵性能等相關(guān)指標(biāo)分析MMT和YCW對AFB1吸附效果,表明兩種吸附劑具有較好作用。MMT屬硅鋁酸鹽類吸附劑,可以吸水膨脹形成觸變凝膠體,具有離子交換能力,且可以調(diào)節(jié)瘤胃微生物發(fā)酵。在飼料中添加硅鋁酸鹽類鈉基膨潤土,可使總VFA濃度升高[33-35]。本研究MMT提高總VFA濃度與其吸附作用和對瘤胃微生物調(diào)節(jié)作用有關(guān)。針對YCW吸附作用研究,Ehrlich等認為特殊鍵結(jié)方式和分子氫鍵使YCW中β-葡聚糖呈螺旋結(jié)構(gòu)可與多種霉菌毒素形成互補構(gòu)造,通過腸道排出動物體外[35-37]。同時,YCW中甘露寡糖(MOS)具有改善瘤胃菌群結(jié)構(gòu)和內(nèi)環(huán)境功能作用。陳志龍等研究表明,日糧中添加MOS顯著提高瘤胃中原蟲、真菌數(shù)量,提高VFA、MCP濃度[5-6]。本研究顯示YCW效果優(yōu)于MMT,可能因YCW在吸附AFB1同時,疊加其結(jié)構(gòu)中MOS對瘤胃菌群結(jié)構(gòu)有益生理效應(yīng)。朱金林等研究表明,吸附劑可以吸附Cu、Fe、Mn、Zn等微量元素,其中無機類吸附劑吸附效果顯著高于有機類[12]。本研究3種吸附劑處理均降低微量元素含量,且MMT效應(yīng)大于YCW,吸附劑雖可抑制AFB1毒性,同時也吸附動物所需微量元素,影響機體對微量元素利用。因此,生產(chǎn)上應(yīng)用吸附劑的同時,還應(yīng)考慮補充微量元素。由于YCW對AFB1吸附作用大于MMT,但對微量元素吸附作用小于MMT,說明YCW綜合效果較優(yōu)。

    本研究中,當(dāng) AFB1 濃度為 20 μg·kg-1時,NH3-H、戊酸濃度及微晶纖維素酶活性差異顯著(P<0.05),因此有必要在20 μg·kg-1以下范圍設(shè)置濃度梯度試驗,確定最低危害濃度。此外,目前尚未見吸附劑最優(yōu)劑量報道。本研究僅采用產(chǎn)品推薦劑量,應(yīng)通過兩種吸附劑濃度梯度試驗確定MMT與YCW最優(yōu)劑量;MMT+YCW處理組結(jié)果尚不能說明是否存在協(xié)同效應(yīng),可能與未設(shè)置吸附劑濃度梯度有關(guān)。

    4 結(jié)論

    AFB1對牦牛瘤胃發(fā)酵具有負面影響,且濃度越高,影響越大;AFB1可降低瘤胃液微量元素含量;3種吸附劑處理均可抑制AFB1對牦牛瘤胃微生物毒性,其中YCW效果較優(yōu)。

    [參考文獻]

    [1] 劉鳳芝,李鋒,王永麗.2017年上半年我國部分地區(qū)飼料及飼料原料中霉菌毒素的污染狀況分析[J].糧食與飼料工業(yè),2017(11):46-50.

    [2] Yiannikouris A,Poughon L,Cameleyre X,et al.A novel tech?nique to evaluate interactions between Saccharomyces cerevisiae cell wall and mycotoxins:Application to zearalenone[J].Biotech?nology Letters,2003,25(10):783-789.

    [3] Yiannikouris A,André G,Buléon A,et al.Comprehensive confor?mational study of key interactions involved in zearalenone com?plexation with beta-D-glucans[J].Biomacromolecules,2004,5(6):2176-2185.

    [4] Jawhara S,Habib K,Maggiotto F,et al.Modulation of intestinal inflammation by yeasts and cell wall extracts:Strain dependence and unexpected anti-inflammatory role of glucan fractions[J].Plos One,2012,7(7):e40648.

    [5] 陳志龍,曾燕霞,王林,等.不同精粗比飼糧中添加甘露寡糖對綿羊體外瘤胃發(fā)酵的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2016,28(10):3292-3300.

    [6] 郭婷婷,胡丹丹,金亞東,等.甘露寡糖對泌乳早期奶牛瘤胃發(fā)酵及生產(chǎn)性能影響的研究[J].飼料工業(yè),2017,38(17):56-60.

    [7] Deng Y,Velázquez A L B,Billes F,et al.Bonding mechanisms between aflatoxin B and smectite[J].Applied Clay Science,2010,50(1):92-98.

    [8] Seeling K,Lebzien P,Dnicke S,et al.Effects of level of feed intake and Fusarium toxin-contamina-ted wheat on rumen fermen?tation as well as on blood and milk parameters in cows[J].Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition,2006,90(3-4):103-115.

    [9] Mojtahedi M,Mesgaran M D,Vakili S A,et al.Effect of aflatoxin b1on in vitro rumen microbial fermentation responses using batch culture[J].Annual Review and Research in Biology,2013,3(4):686-693.

    [10] 齊琪.黃曲霉毒素B1對荷斯坦奶牛乳中黃曲霉毒素M1含量、生產(chǎn)性能及血液生化指標(biāo)的影響[D].泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2012.

    [11] Martinez A,Church D C.Effect of various mineral elements on in vitro rumen cellulose digestion[J].Journal of Animal Science,1970,31(5):982-990.

    [12] 朱金林,齊德生.不同霉菌毒素吸附劑對維生素B2及Cu、Fe、Mn和Zn的吸附影響[J].飼料研究,2013(12):31-32.

    [13] Iii J F G,Edds G T.Effect of dietary selenium on the metabolism of aflatoxin B 1,in turkeys[J].Food and Chemical Toxicology An International Journal Published for the British Industrial Biological Research Association,1984,22(8):637.

    [14] Griffin A C.Role of selenium in the chemoprevention of cancer[J].Advances in Cancer Research,1979,29:419-442.

    [15] Edrington T S,Harvey R B,Kubena L F.Effect of aflatoxin in growing lambs fed ruminally degradable or escape protein sources[J].Journal of Animal Science,1994,72(5):1274-1281.

    [16] Kutz R E,Sampson J D,Pompeu L B,et al.Efficacy of solis,NovasilPlus,and MTB-100 to reduce aflatoxin M1,levels in milk of early to mid lactation dairy cows fed aflatoxin B1[J].Journal of Dairy Science,2009,92(8):3959-3963.

    [17] Firmin S,Morgavi D P,Yiannikouris A,et al.Effectiveness of modified yeast cell wall extracts to reduce aflatoxin B1 absorption in dairy ewes[J].Journal of Dairy Science,2011,94(11):5611-5619.

    [18] 楊平平,甄玉國,鄭艷秋,等.優(yōu)化對羥基聯(lián)苯法定量測定瘤胃液中乳酸含量[J].畜牧與飼料科學(xué),2013,34(2):1-2,5.

    [19] 馮宗慈,高民.通過比色測定瘤胃液氨氮含量方法的改進[J].畜牧與飼料科學(xué),2010(6):40-41.

    [20] Hu W,Liu J,Ye J,et al.Effects of tea saponin on rumen fermenta?tion in vitro[J].Animal Feed Science and Technology,2005,120(4):333-339.

    [21] 汪水平,王文娟.瘤胃纖維降解相關(guān)酶活性的測定[J].中國飼料,2006(11):31-32.

    [22] 馮仰廉.反芻動物營養(yǎng)學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,2004.

    [23] Mould F L,?rskov E R.Manipulation of rumen fluid pH and its influence on cellulolysis in sacco,dry matter degradation and the rumen microflora of sheep offered either hay or concentrate[J].Animal Feed Science and Technology,1983,10(1):1-14.

    [24] Mcallister T A,Cheng K J,Rode L M,et al.Digestion of barley,maize,and wheat by selected species of ruminal bacteria[J].Applied and Environmental Microbiology,1990,56(10):3146.

    [25] Dengler F,Rackwitz R,Benesch F,et al.Bicarbonate-dependent transport of acetate and butyrate across the basolateral membrane of sheep rumen epithelium[J].Acta Physiologica,2014,210(2):403-414.

    [26] Jiang Y H,Yang H J,Lund P.Effect of aflatoxin B1 on in vitro ruminal fermentation of rations high in alfalfa hay or ryegrass hay[J].Animal Feed Science and Technology,2012,175(1-2):85-89.

    [27] Mojtahedi M,Mesgaran M D,Vakili S A,et al.Effect of aflatoxin B1 on in vitro rumen microbial fermentation responses using batch culture[J].Annual Review and Research in Biology,2013,3(4):686-693.

    [28] Mathur C F,Smith R C,Hawkins G E.Growth and morphology of Streptococcus bovis and of mixed rumen bacteria in the presence of aflatoxin B1,in vitro[J].Journal of Dairy Science,1976,59(3):455-458.

    [29] Burmeister H R,Hesseltine C W.Survey of the sensitivity of microorganisms to aflatoxin[J].Appl Microbiol,1966,14(3):403-404.

    [30] Nagaraja T G,Titgemeyer E C.Ruminal acidosis in beef cattle:The current microbiological and nutritional outlook[J].Journal of Dairy Science,2007,90(Sl):17-38.

    [31] Moya D,Calsamiglia S,Ferret A,et al.Effects of dietary changes and yeast culture(Saccharomyces cerevisiae)on rumen microbial fermentation of Holstein heifers[J].Journal of Animal Science,2009,87(9):2874-2881.

    [32] Krause K M,Oetzel G R.Understanding and pre-venting suhacute ruminal acidosis in dairy herds:A review[J].Animal Feed Science and Technology,2006(126):215-236.

    [33] Stephenson R G A,Huff J L,Krebs G,et al.Effect of molasses,sodium bentonite and zealot,on urea toxicity[J].Australian Journal of Agricultural Research,1992,43(2):301-314

    [34] Salem F A,Soliman A S,Abdelmawla W S,et al.Effect of some feed additives to rations of growing sheep on growing perfor?mance,rumen fermentation,blood constituents and carcass char?acteristics[J].Annals of Agricultural Science Moshtohor,2000,38(4):1885-1904.

    [35] Ehrlich W K,Davison T M.Adding bentonite to sorghum grainbased supplements has no effect on cow milk production[J].Australian Journal of Experimental Agriculture,1997,37(5):505-508.

    [36] Diaz D E,Jr H W,Blackwelder J T,et al.Aflatoxin bindersⅡ:Reduction of aflatoxin M1 in milk by sequestering agents of cows consuming aflatoxin in feed[J].Mycopathologia,2004,157(2):233-241.

    [37] Alexandros Y,Gwéna?lle A,Alain B,et al.Comprehensive confor?mational study of key interactions involved in zearalenone complexation with β-d-Glucans[J].Biomacromolecules,2004,5(6):2176-2185.

    猜你喜歡
    胃液牦牛微量元素
    美仁大草原的牦牛(外一章)
    散文詩(2021年22期)2022-01-12 06:13:54
    跟著牦牛去巡山
    ICP-OES法測定鋼和鐵中微量元素
    昆鋼科技(2020年6期)2020-03-29 06:39:40
    解析中微量元素
    藏藥佐太在模擬胃液、腸液中的汞溶出差異
    中成藥(2018年10期)2018-10-26 03:41:28
    早產(chǎn)兒胃液培養(yǎng)在早發(fā)性感染診斷中的價值
    瘤胃液在牛羊疾病中的臨床應(yīng)用
    目前牦牛口蹄疫的診斷與防治
    三種檢測方法在胃液隱血試驗中的臨床應(yīng)用評價
    微量元素與人體健康
    河南科技(2014年15期)2014-02-27 14:12:31
    久久国产精品男人的天堂亚洲 | 新久久久久国产一级毛片| 久久久久久久国产电影| 99热这里只有精品一区| 在线播放无遮挡| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 中国国产av一级| 国内精品宾馆在线| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲av二区三区四区| 日日啪夜夜撸| 精品一区在线观看国产| a级毛色黄片| 日韩一区二区视频免费看| av有码第一页| 亚洲国产av新网站| 91久久精品国产一区二区成人| 欧美丝袜亚洲另类| 日韩在线高清观看一区二区三区| 日韩一本色道免费dvd| xxx大片免费视频| 日韩欧美精品免费久久| 丝袜喷水一区| 国产成人精品无人区| 桃花免费在线播放| av国产久精品久网站免费入址| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 女性生殖器流出的白浆| 一区二区av电影网| 一级毛片我不卡| 国产爽快片一区二区三区| 色5月婷婷丁香| av网站免费在线观看视频| 女人精品久久久久毛片| 亚洲国产最新在线播放| 97在线人人人人妻| 国国产精品蜜臀av免费| 人妻系列 视频| 赤兔流量卡办理| 欧美精品一区二区大全| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说| 成人美女网站在线观看视频| 国产成人精品无人区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产在视频线精品| 青春草视频在线免费观看| 永久网站在线| 国国产精品蜜臀av免费| 免费看av在线观看网站| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 一区在线观看完整版| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产成人精品福利久久| 桃花免费在线播放| 乱系列少妇在线播放| 精品视频人人做人人爽| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲精品国产色婷婷电影| 秋霞在线观看毛片| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲成人av在线免费| 男女啪啪激烈高潮av片| 又大又黄又爽视频免费| 免费av中文字幕在线| 美女内射精品一级片tv| 少妇精品久久久久久久| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 尾随美女入室| 五月伊人婷婷丁香| 国产在视频线精品| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 久久毛片免费看一区二区三区| 日日啪夜夜撸| 毛片一级片免费看久久久久| 久久久久久久亚洲中文字幕| 男女边摸边吃奶| 日韩强制内射视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 久久久久国产网址| 十分钟在线观看高清视频www | 三级经典国产精品| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 97超碰精品成人国产| 国产黄频视频在线观看| 国产亚洲最大av| 午夜福利视频精品| 曰老女人黄片| 99久久人妻综合| 看免费成人av毛片| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲国产色片| 十八禁网站网址无遮挡 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 在线观看三级黄色| 简卡轻食公司| 大香蕉久久网| 亚洲国产av新网站| 国产精品久久久久久精品电影小说| av视频免费观看在线观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 久久6这里有精品| 中文字幕免费在线视频6| 久久久国产精品麻豆| 精品久久久久久电影网| 黄色视频在线播放观看不卡| 99国产精品免费福利视频| 国产一区二区在线观看日韩| 一区二区三区免费毛片| 嘟嘟电影网在线观看| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲国产精品999| 国产免费一级a男人的天堂| 免费av中文字幕在线| 日本黄色片子视频| 国产成人精品福利久久| 一边亲一边摸免费视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产欧美亚洲国产| 精品午夜福利在线看| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲内射少妇av| 三级国产精品片| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 亚洲怡红院男人天堂| 插阴视频在线观看视频| 亚洲国产精品999| 欧美bdsm另类| 成年人午夜在线观看视频| 免费看不卡的av| 亚洲美女黄色视频免费看| 一二三四中文在线观看免费高清| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 日韩欧美 国产精品| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 91精品国产九色| 国产av精品麻豆| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲伊人久久精品综合| 午夜激情福利司机影院| 久久久久久久久久人人人人人人| 国产视频首页在线观看| 又爽又黄a免费视频| 亚洲av日韩在线播放| 久久ye,这里只有精品| 久热久热在线精品观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产高清国产精品国产三级| 丝瓜视频免费看黄片| 国产免费福利视频在线观看| 我要看日韩黄色一级片| 在线观看人妻少妇| 中文欧美无线码| 六月丁香七月| 久久亚洲国产成人精品v| 国产一区二区在线观看日韩| 日韩 亚洲 欧美在线| 99re6热这里在线精品视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产精品嫩草影院av在线观看| 尾随美女入室| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 人妻系列 视频| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久久久久久国产电影| 成人影院久久| 国产爽快片一区二区三区| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲精品国产成人久久av| 午夜精品国产一区二区电影| 永久免费av网站大全| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲av成人精品一区久久| 日日啪夜夜撸| 色婷婷久久久亚洲欧美| av有码第一页| 青春草亚洲视频在线观看| 国产在线一区二区三区精| 久久久久久久久久久久大奶| 黄色毛片三级朝国网站 | 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 精品久久久久久电影网| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产在线免费精品| 丰满乱子伦码专区| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 22中文网久久字幕| 久久 成人 亚洲| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久久亚洲精品成人影院| av在线播放精品| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 亚洲av日韩在线播放| 视频中文字幕在线观看| 午夜视频国产福利| 精品一区二区免费观看| 免费黄色在线免费观看| 国产成人精品久久久久久| 激情五月婷婷亚洲| 久久久a久久爽久久v久久| 国产精品国产三级专区第一集| 能在线免费看毛片的网站| av视频免费观看在线观看| 少妇人妻 视频| 下体分泌物呈黄色| 九草在线视频观看| 久久ye,这里只有精品| 热re99久久精品国产66热6| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 97超视频在线观看视频| 18禁动态无遮挡网站| 男女免费视频国产| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| av专区在线播放| 欧美日韩视频精品一区| 精品人妻熟女av久视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 我要看日韩黄色一级片| 青春草视频在线免费观看| 少妇丰满av| 丝袜脚勾引网站| 大香蕉久久网| 色视频在线一区二区三区| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲国产精品专区欧美| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | 亚洲精品中文字幕在线视频 | 能在线免费看毛片的网站| 尾随美女入室| 黑人猛操日本美女一级片| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲精品自拍成人| 在线 av 中文字幕| 大香蕉久久网| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 极品少妇高潮喷水抽搐| 欧美日韩在线观看h| 国产亚洲精品久久久com| 99国产精品免费福利视频| 777米奇影视久久| 亚洲人成网站在线播| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲国产色片| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 高清不卡的av网站| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久久久人妻精品一区果冻| 久久狼人影院| 国产伦精品一区二区三区视频9| 免费黄色在线免费观看| 欧美精品一区二区大全| 插阴视频在线观看视频| 久久久久国产网址| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 欧美高清成人免费视频www| 丰满人妻一区二区三区视频av| 另类精品久久| 这个男人来自地球电影免费观看 | 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲美女视频黄频| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | 中文字幕亚洲精品专区| 免费高清在线观看视频在线观看| 水蜜桃什么品种好| 边亲边吃奶的免费视频| 在现免费观看毛片| 国产熟女欧美一区二区| 热re99久久国产66热| 在线播放无遮挡| 大片电影免费在线观看免费| 一个人免费看片子| 99久久精品热视频| 亚洲不卡免费看| 久久99蜜桃精品久久| 下体分泌物呈黄色| 国产免费一级a男人的天堂| videossex国产| 亚洲国产日韩一区二区| 观看美女的网站| 九九爱精品视频在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 黄色毛片三级朝国网站 | 七月丁香在线播放| 丝袜在线中文字幕| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 一本大道久久a久久精品| 久久久久国产网址| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲人成网站在线观看播放| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 又爽又黄a免费视频| 日本午夜av视频| 亚洲精品第二区| 全区人妻精品视频| 成人无遮挡网站| 看免费成人av毛片| 国产高清有码在线观看视频| a级片在线免费高清观看视频| 午夜激情久久久久久久| 男人添女人高潮全过程视频| 大码成人一级视频| 少妇精品久久久久久久| 亚洲精品色激情综合| 国产在线一区二区三区精| 日本午夜av视频| 国产亚洲一区二区精品| 在线观看免费日韩欧美大片 | 欧美bdsm另类| 欧美丝袜亚洲另类| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 欧美日韩av久久| 男女免费视频国产| 女性被躁到高潮视频| 国产精品.久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 丝袜脚勾引网站| 免费黄频网站在线观看国产| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 下体分泌物呈黄色| 伦精品一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲国产精品国产精品| av网站免费在线观看视频| 黄色怎么调成土黄色| 99热这里只有是精品50| 国产精品偷伦视频观看了| 国产成人a∨麻豆精品| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久国内精品自在自线图片| 国产精品国产av在线观看| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 在线 av 中文字幕| 亚洲久久久国产精品| 看非洲黑人一级黄片| 老司机亚洲免费影院| 看免费成人av毛片| 精品久久久久久久久av| 18禁动态无遮挡网站| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 日本av手机在线免费观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 青春草亚洲视频在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 黑人猛操日本美女一级片| h视频一区二区三区| 国产亚洲91精品色在线| 日本欧美视频一区| 大码成人一级视频| av专区在线播放| 有码 亚洲区| 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲精品色激情综合| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲国产精品国产精品| 97超视频在线观看视频| 美女中出高潮动态图| 精品午夜福利在线看| 日本欧美视频一区| 国产精品三级大全| 在线播放无遮挡| 丰满迷人的少妇在线观看| 97超碰精品成人国产| 国产高清国产精品国产三级| 在线精品无人区一区二区三| 久久精品久久精品一区二区三区| 免费大片黄手机在线观看| 国精品久久久久久国模美| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 综合色丁香网| 日本黄色日本黄色录像| 久久97久久精品| 性高湖久久久久久久久免费观看| 性色avwww在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| 一级毛片我不卡| 日本免费在线观看一区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲精品自拍成人| 国产黄色视频一区二区在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 欧美精品亚洲一区二区| 日本与韩国留学比较| 免费看日本二区| 深夜a级毛片| 国产精品伦人一区二区| 欧美精品一区二区免费开放| 国产精品久久久久久久久免| 一区在线观看完整版| 晚上一个人看的免费电影| 精品久久久久久久久亚洲| 99热这里只有精品一区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 丝袜喷水一区| 欧美国产精品一级二级三级 | 亚洲国产精品一区三区| 伊人久久精品亚洲午夜| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 国模一区二区三区四区视频| 黄色怎么调成土黄色| av专区在线播放| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲国产精品999| 免费观看性生交大片5| 成人免费观看视频高清| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 日韩中字成人| 91成人精品电影| 久久人人爽人人爽人人片va| 另类亚洲欧美激情| 午夜免费鲁丝| 黑丝袜美女国产一区| 99久国产av精品国产电影| 两个人的视频大全免费| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 日本av免费视频播放| 18禁动态无遮挡网站| 精品一区二区免费观看| 日韩电影二区| 一级毛片久久久久久久久女| 五月开心婷婷网| 丰满少妇做爰视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 韩国高清视频一区二区三区| 草草在线视频免费看| 免费黄网站久久成人精品| 99久久中文字幕三级久久日本| 男女无遮挡免费网站观看| 搡老乐熟女国产| 国产精品99久久久久久久久| 99九九在线精品视频 | 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲熟女精品中文字幕| 新久久久久国产一级毛片| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲性久久影院| 国产免费视频播放在线视频| 日本黄大片高清| 亚洲欧美一区二区三区国产| 婷婷色综合大香蕉| 丝袜喷水一区| 丰满乱子伦码专区| 岛国毛片在线播放| 亚洲精品国产av成人精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 51国产日韩欧美| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| av播播在线观看一区| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| av专区在线播放| 观看美女的网站| av天堂中文字幕网| 婷婷色综合www| 精品人妻偷拍中文字幕| 极品教师在线视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 日本黄色片子视频| 99热网站在线观看| 99久久精品一区二区三区| 丰满迷人的少妇在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产精品偷伦视频观看了| 国产91av在线免费观看| 大片电影免费在线观看免费| 内射极品少妇av片p| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久99一区二区三区| 三级国产精品片| 搡女人真爽免费视频火全软件| 久久久久久久亚洲中文字幕| 9色porny在线观看| av福利片在线观看| 久久精品夜色国产| 亚洲av成人精品一二三区| 日韩视频在线欧美| 日本av手机在线免费观看| 国产有黄有色有爽视频| 国产视频内射| 七月丁香在线播放| 亚洲精品一二三| 国产精品久久久久久av不卡| 国产永久视频网站| 亚洲av不卡在线观看| 97超视频在线观看视频| 午夜福利,免费看| 亚洲国产最新在线播放| 这个男人来自地球电影免费观看 | 少妇高潮的动态图| 一本久久精品| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 色吧在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 久热久热在线精品观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 欧美高清成人免费视频www| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久99一区二区三区| 在线免费观看不下载黄p国产| 69精品国产乱码久久久| 国产成人精品一,二区| 久久影院123| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲欧美一区二区三区国产| 最新中文字幕久久久久| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 十八禁高潮呻吟视频 | 成人免费观看视频高清| 欧美精品亚洲一区二区| 精品国产一区二区久久| 国产又色又爽无遮挡免| av国产久精品久网站免费入址| 午夜日本视频在线| 国产乱人偷精品视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 久久精品夜色国产| 色婷婷av一区二区三区视频| 中文资源天堂在线| 高清欧美精品videossex| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 亚洲欧美清纯卡通| 国产黄色免费在线视频| 久久精品国产a三级三级三级| 精品一区在线观看国产| 欧美日韩综合久久久久久| 国产乱来视频区| 成人国产av品久久久| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产亚洲欧美精品永久| 岛国毛片在线播放| 国产黄色视频一区二区在线观看| 极品人妻少妇av视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 午夜91福利影院| 国产黄频视频在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 91在线精品国自产拍蜜月| av.在线天堂| 国产精品久久久久久久久免| 色哟哟·www| .国产精品久久| a级毛色黄片| av又黄又爽大尺度在线免费看| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产淫片久久久久久久久| 又大又黄又爽视频免费| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲欧美清纯卡通| 国产熟女午夜一区二区三区 | a级毛片在线看网站| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 日韩强制内射视频| 亚洲电影在线观看av| 晚上一个人看的免费电影| 多毛熟女@视频| av天堂中文字幕网| 欧美3d第一页| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 男人爽女人下面视频在线观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产成人午夜福利电影在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 国产亚洲5aaaaa淫片| 国产一区有黄有色的免费视频| 综合色丁香网| 久久久久久久久久久久大奶| 新久久久久国产一级毛片| 日韩成人av中文字幕在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产在线一区二区三区精| 人人澡人人妻人| 成人毛片a级毛片在线播放| 高清在线视频一区二区三区| 色视频在线一区二区三区| 美女大奶头黄色视频| 涩涩av久久男人的天堂| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 少妇精品久久久久久久| 91精品国产国语对白视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久久国产欧美日韩av| 免费观看无遮挡的男女| 久久久午夜欧美精品| 欧美精品高潮呻吟av久久| 久久韩国三级中文字幕| 国产精品福利在线免费观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 91在线精品国自产拍蜜月| 男人舔奶头视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲av在线观看美女高潮|