大白菜中農(nóng)藥多殘留GC-MS方法的確認(rèn)過程

施雨彤

北京市西城區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局食品藥品安全監(jiān)控中心

1. 前言

食品農(nóng)藥殘留指農(nóng)藥施用后殘存于食品表面及滲透到內(nèi)部的微量農(nóng)藥。除農(nóng)藥本身外，也包括其有毒代謝物和雜質(zhì)。農(nóng)藥殘留是施藥后的必然現(xiàn)象，但如果超過最大殘留量標(biāo)準(zhǔn)，就會對人畜產(chǎn)生不良影響或通過食物鏈對生態(tài)系統(tǒng)中的生物造成毒害。當(dāng)前，一些非法分子非法使用禁用農(nóng)藥、超量使用農(nóng)藥或未到安全間隔期提前上市銷售，使得農(nóng)藥成為當(dāng)前影響蔬菜和水果類食品安全的主要污染物，它通過食物鏈傳遞富集后進入人體，構(gòu)成了對人體健康的傷害，是當(dāng)前食品安全迫切需要解決的問題。水果蔬菜農(nóng)殘例行監(jiān)測是食品安全風(fēng)險監(jiān)測的一部分，本文實驗采用大白菜作為樣本基質(zhì)，按照農(nóng)業(yè)部的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《蔬菜、水果中51種農(nóng)藥多殘留的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（NY/T 1380-2007）操作，驗證了方法的可行性。

2. 實驗條件

2.1 主要試劑及標(biāo)準(zhǔn)品

2.1.1 試劑

乙腈（色譜純）、冰乙酸、無水乙酸鈉、無水硫酸鎂、鍵合硅固相萃取吸附劑PSA、鍵合硅固相萃取吸附劑C18、

3-乙氧基 1，2-丙二醇溶液、D-山梨醇。除非另有說明，分析中僅使用分析純試劑和GB/T 6682中規(guī)定的一級水。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)品（100μg/mL）：速滅磷等8種農(nóng)藥.

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)品（1000μg/mL）：敵敵畏等33種農(nóng)藥。

2.1.4 內(nèi)標(biāo)(三苯基磷酸酯TPP）儲備液（1000μg/mL）。

2.2 試劑溶液及標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

2.2.1 試劑溶液

2.2.1.1 冰乙酸-乙腈溶液：1mL冰醋酸加乙腈定容至1000mL。

2.2.1.2 乙氧基-丙二醇溶液：3-乙氧基1,2-丙二醇2g用乙腈溶解稀釋至5mL。

2.2.1.3 山梨醇溶液：1g山梨醇加30mL水振蕩溶解，用乙腈稀釋至50mL。

2.2.1.4 分析保護劑混合溶液：乙氧基-丙二醇溶液5mL和山梨醇溶液5mL混合。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

2.2.2.1 內(nèi)標(biāo)物工作液：移取10μL內(nèi)標(biāo)儲備液于10mL容量瓶中，用乙腈定容。

2.2.2.2 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作液：根據(jù)需要系列稀釋至5μg/mL～20μg/mL、1μg/mL～4μg/mL等各種濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作液，避光4℃保存，可使用1個月。

2.2.2.3 農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：將100μL內(nèi)標(biāo)工作液、100μL分析保護劑混合溶液和100μL相應(yīng)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，分別加到1mL容量瓶中，用乙腈準(zhǔn)確定容至刻度。

2.3 主要儀器

氣相色譜-質(zhì)譜儀（Agilent 7890B/5977A），勻漿機、高速冷凍離心機、氮吹儀。

2.4 檢測條件

2.4.1 氣相色譜端儀器參數(shù)

色譜柱：Agilent HP-5MS 30m×0.250mm×0.25μm；柱溫箱升溫程序：初溫60℃，保持1min，以40℃/min的速率上升到170℃，再以10℃/min的速率升溫到310℃，保持3min；進樣口溫度：280 ℃；載氣：氦氣，流速 1.0 mL/min；進樣方式：不分流；進樣量：2μL。

2.4.2 質(zhì)譜端儀器參數(shù)

電離方式：電子轟擊電離源EI；離子源溫度：280℃；掃描方式：SIM。掃描分組見下圖：

2.5 樣品處理

2.5.1 提?。簻?zhǔn)確稱取試樣15g于50mL聚苯乙烯具塞離心管中，加入15mL冰乙酸-乙腈溶液，6g無水硫酸鎂，1.5g無水乙酸鈉，劇烈振蕩1min后，5000r/min離心1min。

2.5.2 凈化：稱取0.1gSPA、0.1gC18、0.3g無水硫酸鎂置于5mL具塞離心管中，吸取上述上清液2mL至此離心管中，渦旋混合1min，5000r/min離心1min，移取上清液1mL于1mL容量瓶中。

2.5.3 添中內(nèi)標(biāo)物和分析保護劑溶液：將上述容量瓶放在氮吹儀上，緩緩?fù)ㄈ氲獨猓覝叵聺饪s至低于0.8mL，分別準(zhǔn)確添加0.8μL內(nèi)標(biāo)工作液和0.8μL分析保護劑混合溶液，用乙腈定容至1.0mL，在渦旋振蕩混勻，待測。

2.6 結(jié)果計算和表述

試樣中農(nóng)藥的殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計，單位以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（1）計算。

ρs——標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度（mg/L）；Vx——待測液進樣體積（μL）；

Vs——標(biāo)準(zhǔn)溶液進樣體積（μL）；Aix——樣品溶液中內(nèi)標(biāo)物的峰面積；

Ax—— 樣品溶液中內(nèi)標(biāo)物的峰面積；As——標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的峰面積；

Ais——標(biāo)準(zhǔn)溶液中內(nèi)標(biāo)物的峰面積； m ——試樣質(zhì)量（g）。

V0——試樣溶液最終定容體積（mL）；F——分取體積/提取液體積。

3. 實驗數(shù)據(jù)

3.1 保留時間的確定

3.1.1 十種離子相同的農(nóng)藥保留時間的確定

3.1.2 四十一農(nóng)藥保留時間明細(xì)表（以定量離子計）

?

3.2 四十一種農(nóng)殘SIM分段掃描的總離子流積分色譜圖

?

3.3 加標(biāo)回收及精密度實驗

采用大白菜作為加標(biāo)基質(zhì)，在10、20、40、100ppb四個點進行四水平加標(biāo)，每個點做6個平行，每個點的6個平行數(shù)據(jù)計算RSD值，選用其中3個平行數(shù)據(jù)用于計算加標(biāo)回收率。

?

3.4 檢出限

采用空白樣品基質(zhì)，分別添加0.2ppb、1.0ppb、2.0ppb、5.0ppb、10.0ppb共五個濃度的41種農(nóng)殘混標(biāo)溶液，再分別按照本方法平行進樣10次，用儀器自帶信嗓比功能，計算信嗓比。要求信噪比≥3符合要求。最終結(jié)果，實際檢出限均低于或等于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢出限。

?

3.5 結(jié)論

實驗數(shù)據(jù)回收率范圍均在60～120%內(nèi)，RSD≤15%，符合《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》（GB/T-2008）的要求。在上述41種農(nóng)藥殘留量的檢測上，采用氣相-質(zhì)譜GC-MS聯(lián)用儀器，通過定性離子、定量離子及出峰時間進行綜合定性，通過定量離子內(nèi)標(biāo)法定量，避免了單獨采用氣相色譜儀出峰時間重疊的問題，準(zhǔn)確度、精密度均能達到滿意效果。

以上方法還存在一些不足，謹(jǐn)供同行專業(yè)人士們參考，作為拋磚引玉之用。隨著國家對食品安全的不斷重視以及果蔬例行監(jiān)測的普及，對于農(nóng)藥殘留檢測的準(zhǔn)確度和檢測效率方面的要求也在不斷提高。由于目前我國缺少完善的農(nóng)殘檢測和認(rèn)定體系，對于農(nóng)藥殘留的監(jiān)管存在職能不清的問題，特別是農(nóng)藥殘留監(jiān)管和檢測人員整體專業(yè)技能偏低，工作經(jīng)驗較少，學(xué)習(xí)交流機會有限。在這種形勢下，更加迫切地需要盡快健全農(nóng)殘檢測體系，加強專業(yè)隊伍的建設(shè)，通過把好從田間到餐桌的每一道安全關(guān)，保障蔬菜水果類食品的質(zhì)量安全。

[1]丁昌東,潘志遠(yuǎn).我國農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)淺析[J].農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).2008(5):23-25.

[2]GB/T 8855-2008/ISO874：1980,新鮮水果和蔬菜 取樣辦法[S].

[3]NY/T 1380-2007,蔬菜、水果中51種農(nóng)藥多殘留的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法[S].

[4]GB/T 27404-2008,實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測[S]