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    非小細(xì)胞肺癌患者ALK、EGFR、KRAS基因的檢測及臨床病理特征

    2018-04-27 09:30:01楊耀湘
    關(guān)鍵詞:鱗癌基因突變腺癌

    楊耀湘

    在常見的惡性腫瘤中, 肺癌就是其中的一類, 同時還具有高死亡率。目前, 診斷和醫(yī)治的技術(shù)雖然呈上升的趨勢, 但是, 就整體水平而言, 肺癌患者的預(yù)后效果還是不能使人滿意[1-6]。其中間變性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase, ALK)、表皮生長因子受體(epidermalgrowth factor receptor,EGFR)、Kirsten鼠肉瘤(Kirsten rat sarcoma, KRAS)基因是肺癌的熱點(diǎn)靶向基因, ALK、EGFR已經(jīng)有與之相對應(yīng)的靶向藥物, 在臨床治療中, 取得很好的療效。本文研究了漢族非小細(xì)胞肺癌患者中ALK、EGFR、KRAS基因突變狀態(tài)及相關(guān)的臨床病理特征, 旨在促進(jìn)分子靶向治療的發(fā)展, 改善非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后?,F(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2015年3月~2017年3月本院收治并確診的100例非小細(xì)胞肺癌患者作為研究對象, 以上患者病理組織均用蠟塊保存。所有患者中, 男73例, 女27例;年齡≥60有62例, <60歲有38例;腺癌患者69例, 鱗癌患者20例, 其他癌癥患者11例。

    1.2 方法

    1.2.1 ALK融合基因的檢測 本組患者均利用VENTANA檢測試劑盒和VENTANA BenchMark XT及BenchMark GX自動切片染色儀實(shí)施ALK交融基因檢測, 一抗克隆號為VENTANA anti-ALK(DSF3), 操作的步驟需要遵循說明書上的要求。

    1.2.2 EGFR和KRAS基因突變檢測 部分患者采用PCR法檢測EGFR與KRAS基因突變情況, 試劑盒的生產(chǎn)商是廈門艾德公司, 是檢測EGFR 29種基因突變的試劑盒(amplification refractory mutation system, ARMS)以及 KRAS基因7種突變檢測試劑盒。EGFR基因的檢測點(diǎn)位為18外顯子G719A、G719S等;KRAS基因的檢測位點(diǎn)為位于2號外顯子12密碼子的6個突變位點(diǎn)(G1y12Ser、G1y12Asp、G1y12Cys、G1y12A1a、G1y12Va1、G1y12Arg)以及位于 13密碼子的1個突變位點(diǎn)(G1y13Asp)。操作步驟依據(jù)說明書。

    1.3 觀察指標(biāo) 觀察及分析ALK融合基因異常、EGFR基因突變、KRAS基因情況, 并比較不同癌癥類型上述基因突變陽性率。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法進(jìn)行檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 ALK融合基因檢測情況 100例患者全部進(jìn)行了ALK融合基因檢測, 其中腺癌患者基因突變陽性率為23.19%, 明顯高于鱗癌患者的5.00%, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=21.534,P<0.05)。見表 1。

    表1 100例患者ALK融合基因檢測情況[n(%)]

    2.2 EGFR基因突變檢測情況 有76例患者進(jìn)行EGFR基因突變檢測, 其中腺癌患者基因突變陽性率為46.55%, 明顯高于鱗癌患者的27.27%, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.580,P<0.05)。見表 2。

    表2 76例患者EGFR基因突變檢測情況[n(%)]

    2.3 KRAS基因突變檢測情況 有24例患者進(jìn)行KRAS基因突變檢測, 其中腺癌患者基因突變陽性率為50.00%, 明顯高于鱗癌患者的0, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=3.958, P<0.05)。見表3。

    表3 24例患者KRAS基因突變檢測情況[n(%)]

    3 討論

    表皮生長因子受體激酶抑制劑(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor, EGFR-TKI)是最先成功的研發(fā)出的抗擊腫瘤的藥物之一, 其是特定的靶向藥物, 其中典型的藥物代表為吉非替尼、厄洛替尼, 目前在臨床治療上已經(jīng)被廣泛的推廣使用, 取得良好的效果。但是, 對于藥物的耐受這一難點(diǎn), 目前還沒有得到良好的解決。有學(xué)者[7]對115815例非小細(xì)胞的肺癌患者, 對EGFR的基因測驗(yàn)結(jié)果通過Meta分析顯示得出:30466例患者檢測結(jié)果屬于陽性, 女性、腺癌患者是其主要的發(fā)生群體。在此次研究中, 46.05%屬于EGFR的突變結(jié)果, 也是多發(fā)生在腺癌的患者之中。在此次研究中, EGFR的突變率和相關(guān)學(xué)者的研究結(jié)果進(jìn)行對比發(fā)現(xiàn), 前者高于后者, 但是, 與之相關(guān)的臨床癥狀和相關(guān)學(xué)者所得出的結(jié)果基本相似, 女性群體屬于多發(fā)群體, 以腺癌為主, 偶爾會有其他類型的腫瘤, 如:鱗癌、腺鱗癌等[8]。但是還有其他的觀點(diǎn)認(rèn)為年齡大的患者是EGFR突變的高危群體[9]。

    EGFR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的下游調(diào)控基因就是KRAS基因,發(fā)現(xiàn)的時間是在20世紀(jì)60年代, 但是, 到目前為止還沒有發(fā)現(xiàn)有效的治療藥物, 有學(xué)者經(jīng)過對全世界的41個研究的結(jié)果, 發(fā)現(xiàn)當(dāng)KRAS基因突變的時候, 非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后水平將變得很差, 同時KRAS基因突變和EGFR-TKI的耐藥性具有密切的關(guān)系。有學(xué)者[6]檢測332例非小細(xì)胞肺癌的KRAS基因發(fā)現(xiàn), 7.2%的屬于陽性突變, 但是, 對于年齡和性別都沒有發(fā)現(xiàn)對產(chǎn)生陽性突變之間的關(guān)系。在研究中發(fā)現(xiàn), 年長具有吸煙史的男性, 組織學(xué)類型呈現(xiàn)腺癌特征的患者KRAS基因突變陽性的較多[10]。在此次研究中, KRAS基因突變陽性率為33.33%, 組織學(xué)類型多呈現(xiàn)在腺癌患者中, 本結(jié)果和其他的研究數(shù)據(jù)相一致[11]。本次研究中, 使用PCR法檢測EGFR及KRAS, 雖快捷, 但是有一定的風(fēng)險, 例如假陰性。

    總之, 非小細(xì)胞肺癌患者中ALK、EGFR、KRAS基因突變的發(fā)生幾率較高, 同時ALK、EGFR、KRAS基因突變和患者的臨床癥狀有關(guān)聯(lián), ALK與EGFR或KRAS突變并不是絕對的彼此之間互相排斥, 個別患者有可能會有雙基因突變的產(chǎn)生。

    [1] 楊長紹, 楊延龍, 丁曉潔, 等.非小細(xì)胞肺癌患者腫瘤組織多驅(qū)動基因聯(lián)合檢測及其臨床意義.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2017(11):1183-1187.

    [2] 林小梅, 莫娟梅, 鄒敏, 等.EGFR突變的非小細(xì)胞肺癌患者EML4-ALK融合基因的檢測及其臨床特征分析.中國病理生理雜志, 2012, 28(6):1135-1139.

    [3] 張海燕, 王捷, 陳曉東, 等.非小細(xì)胞肺癌患者EML4-ALK融合基因的檢測及其臨床病理特征分析.生物技術(shù)通訊, 2015,26(3):377-380.

    [4] 馬玲, 單莉, 張黎, 等.新疆維吾爾族非小細(xì)胞肺癌患者EGFR、KRAS基因突變與臨床病理特征的關(guān)系.實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2014, 18(5):30-33.

    [5] 邱田, 凌云, 山靈, 等.非小細(xì)胞肺癌患者表皮生長因子受體Kras基因突變檢測及與臨床病理特征的相關(guān)性.中國腫瘤臨床與康復(fù), 2015(6):678-680.

    [6] 王敬慧.肺腺癌患者EGFR、EML4-ALK、KRAS基因狀態(tài)的臨床研究.北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所, 2014.

    [7] 李筱妹, 李志強(qiáng).易瑞沙治療晚期肺腺癌的臨床療效觀察.北方藥學(xué), 2016, 13(1):8-9.

    [8] 高峨嵋, 趙軍, 卓明磊, 等.克唑替尼治療晚期患者單中心回顧性分析.中國肺癌雜志, 2016, 19(3):161-168.

    [9] 張揚(yáng).肺腺癌致癌基因突變研究.復(fù)旦大學(xué), 2013.

    [10] 董丹丹, 徐鋼, 李芳華, 等.肺腺癌EGFR、KRAS基因突變、ALK融合蛋白狀態(tài)分析.實(shí)用癌癥雜志, 2017, 32(9):1393-1397.

    [11] 劉靜, 姜桔紅, 顧瑩瑩, 等.非小細(xì)胞肺癌患者ALK, EGFR及KRAS基因的檢測及臨床病理特征.臨床與病理雜志, 2017,37(6):1146-1152.

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