關(guān)于細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR檢測(cè)法在淋病奈瑟菌檢測(cè)中的效果

陸 波

（遼寧省鐵嶺市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 鐵嶺112000）

淋病是臨床治療中一種常見性傳播疾病，淋病奈瑟菌（NG）也可稱為淋球菌，其為淋病的一種病原體，可導(dǎo)致生殖道發(fā)生感染，引發(fā)淋菌性宮頸炎、淋菌性尿道炎等，逆行感染還可引發(fā)前列腺炎、膀胱炎等，可導(dǎo)致患者不孕不育[1]。目前，臨床上應(yīng)用于NG檢測(cè)的方法表現(xiàn)出多樣化，當(dāng)各種方法應(yīng)用效果存在差異性，探討NG有效檢測(cè)方式具有重要臨床意義。本次研究主要對(duì)比分析PCR檢測(cè)法、細(xì)菌培養(yǎng)法在NG檢測(cè)中的應(yīng)用效果，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：隨機(jī)選取88例于2015年2月至2016年5月期間在我院接受診治的疑似淋病患者作為對(duì)象?；颊咝詣e：男性為49例，女性為39例；年齡：最小為22歲，最大為60歲，平均（28.7±2.7）歲。

1.2 方法：①生殖道分泌物采集：患者為男性時(shí)，使用棉拭子放置于患者尿道1～3 cm位置，輕輕將棉拭子轉(zhuǎn)幾周，將生殖道分泌物或者前列腺液蘸取，然后取出棉拭子，放入無菌試管內(nèi)，立即將試管送至檢驗(yàn)科進(jìn)行NG檢測(cè)?；颊邽榕詴r(shí)，使用棉拭子收集患者宮頸黏液和陰道分泌物，將棉拭子放入無菌試管中后立即送至檢驗(yàn)科進(jìn)行NG檢測(cè)。②NG檢測(cè)：應(yīng)用細(xì)菌培養(yǎng)法實(shí)施NG檢測(cè)時(shí)，標(biāo)本以及標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照菌株接種至溫度為37 ℃孵箱中的T-M培養(yǎng)基上實(shí)施菌株培養(yǎng)、培養(yǎng)時(shí)間為24～48 h，然后對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)情況進(jìn)行觀察。培養(yǎng)完成之后使用半自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對(duì)標(biāo)本菌株實(shí)施鑒定。鑒定方法及操作均嚴(yán)格按照說明進(jìn)行，可疑的菌落需實(shí)施生化鑒定。應(yīng)用PCR檢測(cè)法實(shí)施NG檢測(cè)時(shí)，所選用的實(shí)驗(yàn)試劑為潮州凱普生物化學(xué)有限公司提供的pcr+膜雜交法，相關(guān)操作均嚴(yán)格按照試劑說明書實(shí)施。利用聚合酶鏈反應(yīng)對(duì)采集到的標(biāo)本中的少量DNA片段實(shí)施擴(kuò)增操作，完成擴(kuò)增，得到獲得較長(zhǎng)DNA片段之后，應(yīng)用凝膠電泳法實(shí)施檢測(cè)，對(duì)色帶的變化情況進(jìn)行仔細(xì)觀察，對(duì)檢測(cè)所得結(jié)果進(jìn)行判定。檢測(cè)過程中，工作人員嚴(yán)格按照PCR檢測(cè)法具體操作要求實(shí)施病菌檢測(cè)。

1.3 觀察內(nèi)容及效果評(píng)價(jià)：計(jì)算患者NG的陽性檢出率，并通過對(duì)比檢出率對(duì)不同檢測(cè)方式的應(yīng)用效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：研究數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均使用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行。計(jì)數(shù)資料以百分率表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（±s）表示，行t檢驗(yàn)。差異對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義均以P＜0.05表示。

2 結(jié) 果

88例患者接受細(xì)菌培養(yǎng)法對(duì)淋病奈瑟菌進(jìn)行檢測(cè)后，有39例患者的檢測(cè)結(jié)果表現(xiàn)為陽性。接受PCR檢測(cè)法對(duì)淋病奈瑟菌進(jìn)行檢測(cè)后，共有67例檢測(cè)結(jié)果呈陽性。在陽性檢出率比較上，PCR檢測(cè)法明顯高于細(xì)菌培養(yǎng)法，差異對(duì)比存在顯著性（P＜0.05），見表1。

表1 2種檢測(cè)方法陽性檢出情況

3 討 論

淋病為一種常見性傳播疾病，對(duì)患者身心健康均造成嚴(yán)重影響。淋病奈瑟菌為淋病的病原體。淋病奈瑟菌通常均是寄存在患者生殖及泌尿系統(tǒng)中[2]。在機(jī)體免疫力處于較差狀態(tài)時(shí)，病菌便會(huì)直接侵入患者血流，在經(jīng)過血液循環(huán)使得循環(huán)機(jī)體部位出現(xiàn)化膿性炎癥。在全球范圍內(nèi)，淋病均為一種流行極為廣泛的性病，表現(xiàn)出極強(qiáng)的傳染性，其臨床主要表現(xiàn)為發(fā)病急促。目前，在淋病的臨床診斷過程中主要選用實(shí)驗(yàn)室檢查方法進(jìn)行診斷鑒別。諸多醫(yī)療機(jī)構(gòu)在婚檢、淋病初診過程中均應(yīng)用分泌物直接涂片方式進(jìn)行診斷[3]。但是該種方法誤診、漏診率較高，陽性檢出率相對(duì)降低。因此，須加強(qiáng)對(duì)淋病奈瑟菌有效檢測(cè)方法進(jìn)行深入研究，為淋病早期診斷準(zhǔn)確率的提高提供更多可靠參考依據(jù)。

細(xì)菌培養(yǎng)法為臨床菌落檢測(cè)過程中應(yīng)用較為普遍的一種方法，其也是世界衛(wèi)生組織推薦使用的檢測(cè)淋病奈瑟菌的一種標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)法。但是諸多應(yīng)用結(jié)果均表明，該種方法在檢測(cè)淋病奈瑟菌的實(shí)際應(yīng)用過出中還存在一定局限性，應(yīng)用細(xì)菌培養(yǎng)法實(shí)施檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果極易受到多種因素影響，陽性檢出率相對(duì)較低。影響檢測(cè)結(jié)果的因素主要為菌株存活環(huán)境、檢測(cè)者的操作技術(shù)、檢測(cè)操作時(shí)間、所用試劑質(zhì)量、患者在接受檢測(cè)前使用過抗生素等。因此，細(xì)菌培養(yǎng)法應(yīng)用于淋病奈瑟菌檢測(cè)時(shí)，存在諸多限制。

PCR檢測(cè)法又可稱為聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)法，其為通過體外酶合成特異性DNA片段的方式來實(shí)現(xiàn)對(duì)目的DNA片段進(jìn)行檢測(cè)的一種方法。諸多實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示，在淋病奈瑟菌檢測(cè)中應(yīng)用PCR檢測(cè)法具有針對(duì)性強(qiáng)、靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)快捷等特點(diǎn)[4]。該種檢測(cè)方法與細(xì)菌培養(yǎng)法相互比較，其對(duì)檢測(cè)采集過程、保存環(huán)境的要求相對(duì)較低，同時(shí)，在細(xì)菌已死亡的情況下也能夠進(jìn)行有效檢測(cè)。此外，以為該種檢測(cè)方法在實(shí)際應(yīng)用過程中，其是在菌株基因級(jí)別上實(shí)施檢測(cè)的，因此，其能夠有效克服檢測(cè)標(biāo)本過少問題。在本次研究中，分別應(yīng)用PCR檢測(cè)法和細(xì)菌培養(yǎng)法對(duì)88份標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)后，檢測(cè)結(jié)果顯示，PCR檢測(cè)法的陽性檢出率明顯高于細(xì)菌培養(yǎng)法，差異對(duì)比存在顯著性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。謝國(guó)勇[5]等研究結(jié)果顯示，于其他檢測(cè)方法比較，將PCR檢測(cè)法應(yīng)用于淋病奈瑟菌檢測(cè)具有更強(qiáng)的特異性，靈敏度更高，可有效降低漏診率，對(duì)臨床診斷準(zhǔn)確率的提高具有重要意義。有研究者認(rèn)為，當(dāng)淋病患者處于急性期時(shí)，其膿性的分泌物會(huì)明顯增多，癥狀表現(xiàn)得更為明顯。在這種情況下，應(yīng)該先實(shí)施Gram染色，且在2 h之內(nèi)將結(jié)果匯報(bào)給臨床。若是能夠找到NG，而且其數(shù)量較多時(shí)，應(yīng)該同時(shí)實(shí)施細(xì)菌分離試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)，在24 h內(nèi)讀取藥敏結(jié)果，在使用系統(tǒng)實(shí)施細(xì)菌鑒定。通過這樣的方式能夠有效提高早期診斷準(zhǔn)確率，使患者能夠盡早接受針對(duì)性治療，減少患者治療費(fèi)用，降低患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。綜上所述，細(xì)菌培養(yǎng)法、PCR檢測(cè)法均為檢測(cè)的淋病奈瑟菌的有效方式，但PCR檢測(cè)法的陽性檢出率更高，特異性更強(qiáng)，應(yīng)用效果更為顯著。

[1] 趙燦.細(xì)菌培養(yǎng)法聯(lián)合檢測(cè)流行性腦膜炎奈瑟氏菌的臨床研究[J].系統(tǒng)醫(yī)學(xué),2016,1(1):397-398.

[2] 馬萍,聶慶東,殷敏.3種方法檢測(cè)淋病奈瑟菌的比較分析及意義[J].中國(guó)醫(yī)藥科學(xué),2012,2(9):508-509.

[3] 趙曉蘭,馮琳.四種方法檢測(cè)淋病奈瑟球菌的臨床應(yīng)用對(duì)比研究[J].中國(guó)性科學(xué),2015,24(7):301-302.

[4] 鄧鵬程,鄺滿元,王岐本,等.環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法與臨床常規(guī)方法檢測(cè)淋球菌效果比較[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2015,30(7):375-376.

[5] 謝國(guó)勇,余進(jìn)勝.淋病奈瑟氏菌3種檢測(cè)方法的結(jié)果對(duì)照思路[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2014,20(17):114-115.