梁 盈, 襲曉娟, 劉巧麗, 王 榮, 劉 穎, 林親錄
(中南林業(yè)科技大學(xué) 稻谷及副產(chǎn)物深加工國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室,湖南 長(zhǎng)沙410004)
血管內(nèi)皮細(xì)胞位于血液與血管壁之間,是保護(hù)血管的屏障。內(nèi)皮細(xì)胞具有選擇性屏障、細(xì)胞通透性、止血、纖溶、抗凝、血液傳輸和分泌血管活性物質(zhì)的作用;還能調(diào)節(jié)血管運(yùn)動(dòng)張力、產(chǎn)生生長(zhǎng)因子、纖維基質(zhì)增生,并參與炎癥反應(yīng),影響體液平衡、血管發(fā)生以及血管通透性[1]。氧化應(yīng)激、氧化型膽固醇、氧化型低密度脂蛋白、內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子、細(xì)胞因子等多種因素可使內(nèi)皮細(xì)胞損傷[2]。內(nèi)皮細(xì)胞損傷會(huì)導(dǎo)致功能障礙,癥狀主要為促凝和抗凝物質(zhì)、舒張和收縮因子或生長(zhǎng)抑制和生長(zhǎng)促進(jìn)物質(zhì)的生成釋放不平衡,引起生理系統(tǒng)各種變化,如血小板和白細(xì)胞的黏附,進(jìn)一步導(dǎo)致血管性疾病的發(fā)生。血管平滑肌細(xì)胞損傷極易導(dǎo)致多種血管性疾病,但內(nèi)皮細(xì)胞可能是影響血液病理生理變化的最關(guān)鍵細(xì)胞,多種因素的綜合作用會(huì)導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙,因此,內(nèi)皮功能損傷是導(dǎo)致多種血管性疾病的關(guān)鍵因素[2]。本文作者主要總結(jié)概括了植物源活性物質(zhì)在內(nèi)皮細(xì)胞的損傷保護(hù)方面的研究進(jìn)展。
植物源活性物質(zhì)是指存在于植物性食物中的生物活性物質(zhì)(bioactivecompounds),對(duì)生命現(xiàn)象有影響的微量或少量物質(zhì),又稱(chēng)植物性保護(hù)物質(zhì)(phytoprotectants), 或植物化學(xué)物(photochemical),目前研究的比較清楚的有下列幾類(lèi):
氨基酸、肽與蛋白質(zhì)為含有氨基和羧基的一類(lèi)化合物的總稱(chēng),包括大米活性肽、谷胱甘肽及免疫球蛋白等。
研究發(fā)現(xiàn),大米活性肽具有抗氧化、降血壓、免疫和抗癌等作用[3]。梁盈等[4]通過(guò)觀察和分析大米活性肽處理前后氧化損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)能力及細(xì)胞形態(tài)的變化,發(fā)現(xiàn)大米活性肽對(duì)過(guò)氧化氫損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。Yoshiyukis等[5]從酒糟中經(jīng)蛋白酶處理,分離得到了血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE),作用于患有原發(fā)性高血壓的老鼠,30 h后仍有降壓效果。
谷胱甘肽(GSH)廣泛存在于植物胚芽中。目前研究已證實(shí),GSH在DNA和蛋白質(zhì)的合成、物質(zhì)的運(yùn)輸、酶的活性、新陳代謝及保護(hù)細(xì)胞等中起了直接或間接的作用。GSH作為許多酶反應(yīng)的輔基,可清除體內(nèi)過(guò)多的自由基,具有良好的抗氧化功能;它也參與體內(nèi)三羧酸循環(huán)及糖代謝,并具有解毒,預(yù)防糖尿病和癌癥以及消除疲勞等作用。
功能性油脂類(lèi)包括多不飽和脂肪酸、磷脂及其他復(fù)合脂質(zhì)類(lèi)。
目前已有研究表明,多不飽和脂肪酸中的ω-6多不飽和脂肪酸(omega-6 polyunsaturated fatty acids,ω-6 PUFAs)與人體心血管疾病的控制、免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞生長(zhǎng)以及抗癌作用等息息相關(guān)。花生四烯酸(AA)具有調(diào)節(jié)血脂和血糖,預(yù)防心血管疾病的生理作用。動(dòng)物試驗(yàn)表明,AA能有效地降低高血糖、高血脂和高膽固醇,同時(shí)還可以降低血中丙二醛的含量,升高肝組織中超氧化歧化物酶活性,并促進(jìn)生物體內(nèi)脂肪代謝。從降低血膽固醇的效果,AA比亞油酸和亞麻酸強(qiáng)4倍,其降血脂和降血壓的作用比亞油酸和亞麻酸強(qiáng)[6]。
磷脂(Phospholipid)在植物界中主要存在于種子、堅(jiān)果及谷物中。研究發(fā)現(xiàn),大豆卵磷脂具有提高大腦活力、增強(qiáng)記憶力、預(yù)防脂肪肝以及抗疲勞的生理功效。秦曉健等[7]用不同劑量大豆卵磷脂作用于小鼠,對(duì)其強(qiáng)迫游泳時(shí)間、耐缺氧能力、血清尿素氮、血乳酸、肝糖原含量進(jìn)行了試驗(yàn)。結(jié)果表明,大豆卵磷脂能延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間,降低血乳酸含量,提高肝糖原含量。說(shuō)明大豆卵磷脂具有抗疲勞作用。
活性多糖包括膳食纖維、香菇多糖、靈芝多糖、枸杞多糖、黑木耳多糖、海帶多糖、松花粉多糖等功能性成分。
膳食纖維具有非常廣泛的藥理作用,能降血糖并保護(hù)胃腸道。Panahi等[8]發(fā)現(xiàn)口服燕麥膳食纖維可顯著降低餐后血糖濃度。馬正偉等[9]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),大豆膳食纖維有降低體內(nèi)血液中膽固醇含量,預(yù)防動(dòng)脈硬化、冠心病和降血糖的作用。同時(shí)還能改善大腸功能,促進(jìn)胃腸正常蠕動(dòng),從而預(yù)防便秘與結(jié)腸癌,有減肥瘦身作用。
香菇多糖(LEP)具有抗病毒、抗輻射、抗腫瘤、增強(qiáng)人體免疫力等多種功能[10]。柳迎華等[11]研究表明LEP具有一定的抗慢性輻射作用,能有效地保護(hù)小鼠臟器受輻射損傷。王玉紅[12]研究表明,香菇多糖在體內(nèi)、外均能間接發(fā)揮抗白血病作用。香菇多糖還可提高惡性腫瘤患者的免疫功能,改善調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的水平。
菊糖廣泛存在于桔梗植物中,具有良好的抗氧化、降血糖、降血脂作用。劉德萍等[13]通過(guò)測(cè)定菊糖抗氧化能力以及還原能力,建立人克隆結(jié)腸腺癌細(xì)胞(Caco-2)細(xì)胞模型探討其抗氧化機(jī)理,結(jié)果表明菊糖具有良好的抗氧化能力,對(duì)H2O2誘導(dǎo)的Caco-2細(xì)胞損傷有顯著的保護(hù)作用。
研究發(fā)現(xiàn),藻類(lèi)中的褪黑素(MT)有抗氧化、調(diào)節(jié)生物鐘功能、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)的生理功效[14]。Pieri C等[15]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)MT主要通過(guò)提供電子來(lái)清除ROS,失去電子后MT本身變成了毒性很低的吲哚陽(yáng)離子,進(jìn)一步增強(qiáng)了MT對(duì)ROS的清除能力。Negrette B等[16]給供試小鼠皮下注射 MT后,用滅活的病毒免疫小鼠,發(fā)現(xiàn)MT注射組的IgM抗體滴度和IL-14水平顯著升高,證明MT有提高小鼠免疫力的作用。同時(shí),MT可以促進(jìn)IL-2的合成及提高T淋巴細(xì)胞的活性。
人參皂苷Rb1是一種固醇類(lèi)化合物。研究表明,人參皂苷在促進(jìn)智力發(fā)育、改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能、保護(hù)細(xì)胞損傷和抑制細(xì)胞凋亡中起了很重要的作用。Lee等[17]以腦多胺水平為指標(biāo),研究了人參皂苷Rb1對(duì)沙鼠的抗應(yīng)激作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,Rb1在束縛應(yīng)激 3 min后腐胺水平明顯降低,說(shuō)明Rb1在腦束縛應(yīng)激過(guò)程中具有神經(jīng)保護(hù)作用。
姜科、天南星科中的植物的根莖中提取的姜黃素是種天然色素,具有抗氧化、降血脂、抗癌抗腫瘤的功效。吳亞麗等[18]探討了姜黃素對(duì)大腸癌(LoVo)細(xì)胞凋亡以及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,用不同濃度的姜黃素溶液體外培養(yǎng)大腸癌細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)姜黃素能顯著抑制LoVo細(xì)胞生長(zhǎng)增殖并能加速其凋亡,具有良好的抗腫瘤抗癌作用。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,葉綠素具有抗誘變、抗腫瘤和抗氧化的生理功效[19]。葉綠素及其衍生物卟啉環(huán)結(jié)構(gòu)易與具有多環(huán)結(jié)構(gòu)的復(fù)合物以非共價(jià)鍵結(jié)合,形成一種無(wú)活性復(fù)合物失去它的攻擊性,從而減輕致癌效應(yīng)[20]。Blum CA等[21]發(fā)現(xiàn)葉綠素還可以和DNA、mRNA及蛋白質(zhì)結(jié)合,調(diào)節(jié)細(xì)胞中與分化、增殖和凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá);降低細(xì)胞膜對(duì)一些致癌物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)能力[22],從而具有抗誘變、抗腫瘤作用。
植物源活性物質(zhì)對(duì)高糖造成的血管內(nèi)皮細(xì)胞(vascular endothelial cell,VEC) 損傷有一定的保護(hù)作用。研究證明,高糖是導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙的主要因素之一。何勝虎通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)丹參多酚酸鹽對(duì)體外高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能通過(guò)保護(hù)細(xì)胞線粒體、清除活性氧、提高內(nèi)皮細(xì)胞抗氧化酶體系的活力和抑制內(nèi)皮素1的分泌而實(shí)現(xiàn)[23]。彭軍通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)高濃度葡萄糖能使血管內(nèi)皮細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、mRNA和蛋白表達(dá)下調(diào),可損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞,當(dāng)歸和葡萄糖同時(shí)作用能抑制其下調(diào),他推測(cè)當(dāng)歸對(duì)高濃度葡萄糖下的血管內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用可能是當(dāng)歸治療糖尿病并發(fā)組織缺血性疾病的機(jī)制之一[24]。李桂林通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)得出高糖可明顯影響血管內(nèi)皮細(xì)胞和頸上交感神經(jīng)節(jié)mRNA和蛋白表達(dá)。甲墓蓮心堿可以下調(diào)糖尿病內(nèi)皮細(xì)胞、II型糖尿病模型大鼠頸上神經(jīng)和心肌中CCL5和CCR5的表達(dá),上調(diào)糖尿病大鼠頸上神經(jīng)和心肌組織DDAH1和UCHL1表達(dá),從而增加NO的生成,減少ROS的產(chǎn)生,對(duì)糖尿病及其血管內(nèi)皮細(xì)胞和交感神經(jīng)損傷產(chǎn)生防治作用[25]。此外,紅芪總黃酮、黃芪注射液等植物源活性物質(zhì)對(duì)高糖環(huán)境造成的VEC損傷也有獨(dú)特的保護(hù)作用。
植物源活性物質(zhì)對(duì)過(guò)氧化氫對(duì)VEC造成的損傷有保護(hù)作用。氧化應(yīng)激被認(rèn)為是導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷的主要病理因素[26]?;钚匝踝杂苫莾?nèi)皮細(xì)胞損傷的主要原因之一,H2O2是機(jī)體產(chǎn)生的活性氧,在過(guò)氧化氫條件下能分解成氧自由基,通過(guò)對(duì)生物膜中多不飽和脂肪酸的過(guò)氧化引起細(xì)胞損傷,最終形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊。
方婧杰[27]測(cè)定了大米活性肽對(duì)自由基的體外清除能力,通過(guò)采用作為外源性自由基生成系統(tǒng),建立體外培養(yǎng)的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)氧化損傷模型,觀察比較和分析大米活性肽處理前后血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷程度,結(jié)果表明,大米活性肽對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞受過(guò)氧化氫氧化損傷有一定的保護(hù)作用,同時(shí),大米活性肽可抑制HUVEC凋亡。高蒙蒙[28]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)紅車(chē)軸草總黃酮對(duì)H2O2誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷有明顯的保護(hù)作用,H2O2可誘發(fā)ECV-304細(xì)胞產(chǎn)生凋亡,而紅車(chē)軸草總黃酮預(yù)處理可抑制細(xì)胞凋亡,這能與抗自由基,減輕脂質(zhì)過(guò)氧化、降低Caspase-3活性及穩(wěn)定性線粒體膜電位有關(guān)。潘少霞[29]發(fā)現(xiàn)三七總皂苷能明顯改善內(nèi)皮細(xì)胞活力,改善內(nèi)皮細(xì)胞分泌功能,改善細(xì)胞氧自由基清除功能,減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞缺氧再給氧損傷。此外,黑米花色苷、麥冬不同提取部位、山葡萄多酚、總丹酚酸等對(duì)過(guò)氧化氫對(duì)VEC造成的損傷均有一定的保護(hù)作用。
植物源活性物質(zhì)對(duì)低密度脂蛋白 (low-density lipoprotein,LDL),氧 化 型 低 密 度 脂 蛋 白(Oxidizedlow-density lipoprotein,Ox-LDL) 對(duì) VEC造成的損傷起保護(hù)作用。LDL是血液中膽固醇重要的載體,而氧化修飾的Ox-LDL能引起內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)環(huán)境發(fā)生紊亂,致使VEC損傷,使其脂質(zhì)過(guò)氧化,誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生凋亡。田蔚[30]通過(guò)建立Ox-LDL誘導(dǎo)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷模型,釆用MTT比色法研究5種霉菌的米渣發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)存活率的影響,并探討了抗氧化活性與發(fā)酵產(chǎn)物的水解度、酚類(lèi)物質(zhì)含量、總酸含量的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大米活性肽對(duì)氧化型低密度脂蛋白引起的血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷有保護(hù)作用,能夠抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。車(chē)文文[31]實(shí)驗(yàn)得出車(chē)前子多糖(PSP)可通過(guò)穩(wěn)定細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu),使細(xì)胞免受自由基的損害,減少脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)的生成,提高細(xì)胞內(nèi)SOD的活力;PSP能增強(qiáng)細(xì)胞的增殖活性,對(duì)Ox-LDL損傷內(nèi)皮具有一定的保護(hù)作用。翟小菊[32]經(jīng)試驗(yàn)研究證實(shí)芍藥苷可以減少內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)氧化產(chǎn)物的生成,拮抗內(nèi)皮細(xì)胞MDA的產(chǎn)生,并抑制黏附分子的生成,減輕內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,增加內(nèi)皮細(xì)胞NO的合成,從而減緩動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程。另外,陳皮-半夏、大豆異黃酮、紅花水提物、西紅花苷等對(duì)LDL,Ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞損傷均有具體保護(hù)作用。
大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明,甲醛可致VEC及多組織器官氧化損傷[33]。李梓民等經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)茶多酚可提高VEC抗氧化酶活性,抑制NF-κB表達(dá),減少NO產(chǎn)生,減輕脂質(zhì)過(guò)氧化作用進(jìn)而拮抗甲醛對(duì)VEC氧化損傷,從而保護(hù)VEC[34]。高半胱氨酸(Hcy)是一種含硫基氨基酸,為體內(nèi)管內(nèi)VEC損傷的危險(xiǎn)因素。有研究證實(shí),大蒜素可明顯降低大鼠血清Hcy水平。郝媛媛在此基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)大蒜素可增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力,對(duì)VEC的保護(hù)作用在一定濃度內(nèi)有效,小(大蒜素 10 μg/mL+Hcy 5 mmol/L 培養(yǎng)液)、中(大蒜素20 μg/mL+Hcy5 mmol/L培養(yǎng)液)劑量可明顯降低Hcy對(duì)VEC的損傷,有效防止高半胱氨酸血癥[35]。大劑量腎上腺素(Adr)可導(dǎo)致血管強(qiáng)烈收縮,引起血壓升高和血液剪切應(yīng)力的改變,對(duì)血管壁產(chǎn)生機(jī)械損傷。魯波等通過(guò)血管內(nèi)膜形態(tài)學(xué)觀察和血漿培養(yǎng)液血管性血友病因子 (von Willebrand factor,vWF)水平檢測(cè),發(fā)現(xiàn)海帶多糖具有保護(hù)VEC的作用,進(jìn)而維護(hù)了VEC止血與抗血栓功能平衡,從而能夠抑制血栓形成[36]。
植物源活性物質(zhì)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞損傷有明顯的保護(hù)的作用,其作用機(jī)理在大量的實(shí)驗(yàn)研究中可以體現(xiàn)。Ding Y等[37]通過(guò)抗氧化機(jī)制研究鞣花酸(EA)對(duì)血管內(nèi)皮功能障礙和動(dòng)脈粥樣硬化的影響,發(fā)現(xiàn)鞣花酸能顯著改善內(nèi)皮依賴(lài)性血管舒張和衰減HOCl誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮功能障礙。Zhou P[38]通過(guò)建立乳鼠的鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞收集和VIII因子損傷模型,丹紅注射液(50、100 mL/L)能顯著對(duì)抗缺氧誘導(dǎo)的損傷,提高細(xì)胞內(nèi)SOD活性,降低MDA水平。結(jié)果表明,丹紅注射液在保護(hù)缺氧損傷的鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞起著重要的作用,其機(jī)制可能與細(xì)胞抗氧化能力的增強(qiáng)、炎癥反應(yīng)的抑制及細(xì)胞凋亡有關(guān)。Li M[39]研究了茶多酚對(duì)血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的影響,探討茶多酚對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn),茶多酚對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的內(nèi)皮素分泌有抑制作用,改善了血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度和線粒體膜電位的變化。這項(xiàng)研究表明,茶多酚可有效調(diào)節(jié)內(nèi)皮素、細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度與血管內(nèi)皮細(xì)胞線粒體膜電位,來(lái)保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞免受損傷。植物源活性物質(zhì)對(duì)各種內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)機(jī)制見(jiàn)表1,綜上所述,植物源活性物質(zhì)保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的機(jī)理,在于它們能影響血管緊張素、細(xì)胞內(nèi)離子濃度和血管內(nèi)皮表面的酶的含量水平,同時(shí)抑制細(xì)胞凋亡,從而改善血管內(nèi)皮的功能,減少血管內(nèi)皮功能障礙。
表1 植物源活性物質(zhì)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞不同損傷的保護(hù)機(jī)制Table 1 Protective mechanism of botanical activesubstances on different injury of endothelial cells
血管內(nèi)皮細(xì)胞是位于血管內(nèi)壁表面的單層細(xì)胞,與血液直接接觸。VEC可產(chǎn)生和分泌許多血管活性物質(zhì),對(duì)各種刺激做出反應(yīng),調(diào)節(jié)血管舒張和收縮,參與維持機(jī)體組織穩(wěn)態(tài),在血細(xì)胞激活和遷移等生理病理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[40]。VEC能夠參與血管的形成,調(diào)節(jié)血管內(nèi)外大分子和炎癥細(xì)胞的交換,VEC可以分泌許多與造血有關(guān)的細(xì)胞因子,極大地促進(jìn)了造血干細(xì)胞、祖細(xì)胞和造血調(diào)控機(jī)制的研究[41],當(dāng)VEC受到損傷后,其功能失衡可導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓等心腦血管病發(fā)生,
然而當(dāng)前已知的植物源活性物質(zhì)并不多,而且現(xiàn)在有關(guān)植物源活性物質(zhì)保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的研究的作用機(jī)理大部分都只停留在表觀現(xiàn)象,比如細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞生存活力等,而較少研究其中深層現(xiàn)象,例如DNA、RNA以及信號(hào)通路等。因此,廣泛從植物中提取生物活性物質(zhì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究具有良好的應(yīng)用前景,也將對(duì)血管炎疾病的防治提供參考價(jià)值。
目前,通過(guò)植物源活性物質(zhì)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞損傷進(jìn)行保護(hù)有良好的的發(fā)展趨勢(shì),對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞具有損傷保護(hù)作用的植物源活性物質(zhì)并不多,其中有些植物生物活性物質(zhì)的作用機(jī)理尚不清楚,對(duì)損傷的內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作用的未知植物生物活性物質(zhì)有很大的研究潛力,因此,關(guān)于內(nèi)皮細(xì)胞損傷保護(hù)方面,從植物中提取生物活性物質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)研究具有良好前景。相信在不久的將來(lái)與植物源活性物質(zhì)相關(guān)的研究會(huì)越來(lái)越全面,使其運(yùn)用于醫(yī)學(xué)生物學(xué)成為必然趨勢(shì),在醫(yī)療救助方面發(fā)揮關(guān)鍵的生理作用。
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