過敏性哮喘的研究進(jìn)展*

余 芳

(貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，臨床醫(yī)學(xué)研究中心，貴州醫(yī)科大學(xué)免疫轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴陽 550004)

近數(shù)十年來，過敏病例在世界很多地區(qū)呈快速上升趨勢。常見過敏性疾病包括過敏性鼻炎、哮喘、結(jié)膜炎、濕疹、食物過敏、藥物過敏和全身性嚴(yán)重過敏反應(yīng)等。世界衛(wèi)生組織已把過敏性疾病列為21世紀(jì)需重點(diǎn)研究和防治的三大疾病之一。流行病學(xué)調(diào)查顯示世界人口的5%～16%都罹患有過敏性哮喘，特別是兒童患有過敏性哮喘的比例持續(xù)增加[1,2]。我們臨床工作發(fā)現(xiàn)，有大于15%的以久咳或難治性支氣管炎、肺炎等就診的患兒，經(jīng)血清總IgE及特異性過敏原檢測發(fā)現(xiàn)，實(shí)為過敏原誘發(fā)的呼吸道病癥。過敏性哮喘不僅影響發(fā)病兒童生活質(zhì)量，而且影響其正常的生長發(fā)育。作為一個(gè)復(fù)雜疾病，哮喘的發(fā)病機(jī)制與多達(dá)100種以上的遺傳位點(diǎn)和復(fù)雜環(huán)境因素的相互作用相關(guān)聯(lián)[3]， 而對于過敏性疾病迄今為止還沒有令人滿意的治療方法。進(jìn)一步認(rèn)識發(fā)病機(jī)制，尋找對過敏疾病有重要調(diào)控作用的關(guān)鍵分子或相關(guān)基因，采用多靶點(diǎn)聯(lián)合治療，具有極大的實(shí)用價(jià)值，這也一直是該領(lǐng)域研究者的關(guān)注點(diǎn)。目前研究集中在幾大方向：過敏免疫微環(huán)境變化(其中天然免疫系統(tǒng)與特異性免疫系統(tǒng)相互作用尤為突出)，表觀基因組學(xué)與過敏性哮喘，微生態(tài)與疾病，以及過敏原特異性免疫治療等?，F(xiàn)就過敏性哮喘的相關(guān)研究現(xiàn)狀綜述如下。

1 過敏性哮喘免疫微環(huán)境

氣道上皮細(xì)胞(Epithelial cells,ECs)是呼吸道的第一道防線[4]，表達(dá)多種模式識別受體，如TLR4，識別病原相關(guān)分子模式(Pathogen-associated molecular patterns，PAMPs)或損傷相關(guān)分子模式(Damage-associated molecular patterns，DAMPs)，活化產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，包括胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(Thymic stromal lymphopoietin,TSLP)、GM-CSF、IL-1 α、IL-1β、IL-25以及IL-33等，進(jìn)一步激活天然免疫細(xì)胞如誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞(Dendritic cell,DC)向促進(jìn)Ⅱ型免疫反應(yīng)方向分化[5]，或作用于適應(yīng)性免疫細(xì)胞如Th2細(xì)胞分泌Ⅱ型細(xì)胞因子，如IL-4、IL-5、IL-13等，進(jìn)而誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等聚集，以及反過來影響ECs細(xì)胞連接及皮下黏液層修復(fù)等[4，6]。ECs還產(chǎn)生生長因子如VEGF-A、VEGF-C等，誘導(dǎo)微環(huán)境中生成新的血管和淋巴管，有利于免疫細(xì)胞趨化及募集，如DC向淋巴結(jié)趨化[7]。

由于機(jī)體局部及系統(tǒng)大多可檢測到Ⅱ型炎性因子，如IL-4、IL-5、IL-13等，以及血清中大量升高的IgE，認(rèn)為其是Th2細(xì)胞為中心的病理過程，故而被納入Ⅱ型炎性反應(yīng)疾病類型。由此，圍繞Th2細(xì)胞來開展的機(jī)制研究，包括其在由天然免疫系統(tǒng)遞呈的過敏原刺激下產(chǎn)生的炎性介質(zhì)，介質(zhì)對下游其他效應(yīng)細(xì)胞，如嗜酸性粒細(xì)胞、B細(xì)胞、肥大細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等的作用。動(dòng)物哮喘疾病模型對這個(gè)機(jī)制上有很細(xì)節(jié)的解釋，而目前也有很多針對Ⅱ型炎性反應(yīng)通路中重要介質(zhì)的阻斷治療，盡管一些早期臨床實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明也具有一定的療效，但遺憾的是除了IL-5拮抗劑外，其他都沒有得到批準(zhǔn)用于哮喘的臨床治療。過敏性炎癥因子(如5-HT、U46619、組胺、LTD4等)與神經(jīng)遞質(zhì)存在有顯著的協(xié)同效應(yīng)，其中TMEM16A氯通道是該協(xié)同效應(yīng)的關(guān)鍵分子，抑制該氯通道可以極大地抑制呼吸道高反應(yīng)性、降低呼吸道阻力、明顯改善哮喘癥狀[8]。

2 天然淋巴樣細(xì)胞參與過敏性疾病

盡管Ⅱ型免疫反應(yīng)中Th2細(xì)胞的中心作用已有很好的證據(jù)，但對Th2反應(yīng)的始動(dòng)源于何處，仍不很明確。近來研究發(fā)現(xiàn)，Ⅱ型天然淋巴樣細(xì)胞(Innate lymphoid cells,ILCs)、ILC2[或Nuocyte,Nature helper cells(NHC)、Innate helper cells 2(Ih2)]，可能是Ⅱ型細(xì)胞因子如IL-5、IL-13的主要來源[9,10]，在肺部炎癥中架設(shè)天然免疫和獲得性免疫的橋梁[11,12]。ILC2可被由ECs受到外源信號刺激產(chǎn)生的如IL-33、IL-25、TSLP及IL-7等所活化，并產(chǎn)生多種效應(yīng)介質(zhì)，與其他效應(yīng)細(xì)胞相互作用，影響疾病過程。ILC2活化可能是由細(xì)胞內(nèi)蛋白激酶C-θ(PKC-θ)介導(dǎo)[13]，蛋白激酶C-θ(PKC-θ)缺失小鼠的ILC2細(xì)胞數(shù)量減少，肺組織IRF4和NFAT1表達(dá)水平降低，進(jìn)而影響下游Th2細(xì)胞的活化。IL-33單獨(dú)即可活化ILC2[14]，而IL-25則可能是通過刺激基質(zhì)產(chǎn)生IL-33和TSLP而對ILC2起作用[15]。

ILC2可能是應(yīng)對過敏原最早產(chǎn)生IL-13的細(xì)胞[16,17]，誘導(dǎo)替代性活化的巨噬細(xì)胞(Alternatively activated macrophages，AAMs)活化、樹突狀細(xì)胞遷移，IL-5可募集活化嗜酸性粒細(xì)胞，而與B細(xì)胞，則可能是通過活化Th2細(xì)胞產(chǎn)生的IL-4以及ICOS-L，活化B細(xì)胞分泌更多IgE。ILC2可能經(jīng)誘導(dǎo)可表達(dá)MHCII，充當(dāng)抗原遞呈細(xì)胞，與T細(xì)胞相互作用，還能分泌 IL-4及OX40L,誘導(dǎo)Th2細(xì)胞產(chǎn)生更多IL-4、IL-5、IL-13、IL-9等，而Th2細(xì)胞產(chǎn)生的IL-9和IL-2等也可以促進(jìn)ILC2細(xì)胞活性。ILC2也是氣道炎性反應(yīng)中IL-9的主要來源[18]，雖然其作用還不明確，但I(xiàn)L-9是肥大細(xì)胞的生長因子，提示ILC2與肥大細(xì)胞間的聯(lián)系。ILC2表達(dá)半胱氨酰白細(xì)胞三烯1受體(Cysteinyl leukotrienes 1 receptor,CysLT1R)，介導(dǎo)白細(xì)胞三烯C4(LTC4)的效應(yīng)，與 IL-33聯(lián)合作用可誘導(dǎo)更嚴(yán)重的Ⅱ型免疫反應(yīng)[19]。而肥大細(xì)胞是LTC的重要來源之一，提示肥大細(xì)胞與ILC2在過敏性哮喘中的交互作用。

有研究顯示，過敏原誘導(dǎo)的氣道反應(yīng)，如果暴露于環(huán)境污染物，如汽車尾氣物質(zhì)(Diesel exhaust particles,DEPs)等，炎性反應(yīng)程度將進(jìn)一步增加。而ILC2及Th2細(xì)胞的功能障礙可能是其原因之一。但動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)，Rag2缺失時(shí)相關(guān)疾病完全被阻斷，而在ILC2缺失時(shí)，疾病僅可見輕微緩解。可見T細(xì)胞仍是疾病發(fā)生發(fā)展不可或缺的中心環(huán)節(jié)[20]。最近研究揭示，ILC2與神經(jīng)元存在相互調(diào)控作用[21-23]。ILC2選擇性表達(dá)神經(jīng)介質(zhì)U(Neuromedin U,NMU)受體NMUR1，肺組織中可看到神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)，ILC2的位置相毗鄰，提示二者可能有相互作用的組織結(jié)構(gòu)支撐。NMUR1信號阻斷可下調(diào)ILC2活化所致的炎性改變，揭示了肺部局部效應(yīng)組織與神經(jīng)系統(tǒng)的相互關(guān)系在過敏性哮喘中的作用[21]，在消化道小腸黏膜也有類似發(fā)現(xiàn)[22]。這些研究提示，黏膜神經(jīng)系統(tǒng)與區(qū)域免疫系統(tǒng)共同完成對局部組織功能及穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)。

3 表觀基因組學(xué)與過敏性哮喘

表觀遺傳學(xué)修飾，如DNA甲基化、基因組印記和RNA編輯等，通過對DNA組裝入核的方式進(jìn)行修飾，改變基因被轉(zhuǎn)錄元件接近的容易程度，進(jìn)而影響基因組穩(wěn)定性。而這些如甲基化(Methylation)和乙酰化(Acetylation)等化學(xué)修飾的過程，較易受到環(huán)境等外界因素的影響，活化原本沉默的基因，或與之相反，沉默原本應(yīng)活化的基因，而這最終影響了個(gè)體對疾病的易感性。并且改變了的遺傳物質(zhì)有可能傳給下一代，從而影響其對疾病的易感性，即由非DNA變異而改變表型的“可遺傳的”現(xiàn)象[24,25]。遺傳因素和環(huán)境因素，常用來解釋過敏性疾病如何從一代傳到下一代的風(fēng)險(xiǎn)程度。有相當(dāng)多的證據(jù)支持疾病早期，甚至早到胚胎發(fā)育時(shí)期，即有疾病發(fā)生因素的影響。不僅母體暴露，如吸煙等，母親上一代，甚至父系的環(huán)境暴露，均與過敏性哮喘等癥狀有一定的相關(guān)性。而這些現(xiàn)象或者可以從表觀遺傳學(xué)的機(jī)制中得到一些解釋[26]。但如何從環(huán)境作用中將遺傳因素剝離出來單獨(dú)分析，對于很多慢性參與因素來說則仍然是一個(gè)難題。

衛(wèi)生假說(Hygiene hypothesis)提示，諸如家庭生活環(huán)境、生育和喂養(yǎng)方式、微生物荷載、抗生素使用等，都對出生后是否發(fā)生過敏有作用[27]。這些誘發(fā)因素的作用機(jī)制之一，可能是通過對表觀基因組學(xué)的修飾，進(jìn)而影響了疾病發(fā)生發(fā)展甚至轉(zhuǎn)歸。而其中，相當(dāng)部分研究顯示，關(guān)鍵分子的DNA甲基化增加或減少，占據(jù)極大的作用[28,29]。研究發(fā)現(xiàn)，兒童哮喘軌跡可能在出生時(shí)就已經(jīng)啟動(dòng)，包括在免疫調(diào)節(jié)和致炎通路中的表觀遺傳學(xué)修飾變化，而這些修飾均受到母體哮喘的影響[30]。一項(xiàng)追蹤哮喘母親的孩子歷時(shí)9年的研究發(fā)現(xiàn)[30]，9歲時(shí)發(fā)生或未發(fā)生哮喘，在其新生兒期的免疫細(xì)胞的589個(gè)不同的甲基化區(qū)域的表現(xiàn)上有著較明顯的差異。其中SMAD3的甲基化水平，在哮喘孩子增高尤為明顯，且與兒童哮喘風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。并且發(fā)現(xiàn)，在其母親患哮喘的新生兒中，SMAD3甲基化水平與其天然炎性介質(zhì)IL-1，呈現(xiàn)非常強(qiáng)的正相關(guān)[30]。6～12歲持發(fā)性過敏性哮喘兒童的外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)的DNA甲基化水平，包括幾個(gè)和T細(xì)胞成熟、Th2免疫相關(guān)以及過氧化應(yīng)激等相關(guān)的基因，均處于低甲基化水平[31]。表觀遺傳對疾病的作用，極有可能是通過對遺傳信息的修飾達(dá)成的。如果這個(gè)假說是正確的，那么在下一代阻斷過敏性哮喘的關(guān)鍵就可能是如何在孕期進(jìn)行干預(yù)。有研究者對過敏家庭進(jìn)行了表觀遺傳學(xué)相關(guān)的三代隊(duì)列研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，認(rèn)為子代可能并不只是僅僅繼承了親代的表觀基因組信息，進(jìn)而傳遞到下一代，而更多則是遺傳中發(fā)生的表觀遺傳放大效應(yīng)，這可能更能解釋表觀遺傳學(xué)參與過敏性疾病家族性發(fā)生的機(jī)制。提示在今后的研究中，可能更需要研究這些在親子代間傳遞的表觀遺傳特征可能帶來的功能性表現(xiàn)，以及建立這些現(xiàn)象的臨床相關(guān)性對誘導(dǎo)性表觀遺傳性狀轉(zhuǎn)移模型的驗(yàn)證。

4 黏膜系統(tǒng)微生態(tài)與過敏性哮喘

許多證據(jù)表明，腸道微生態(tài)參與免疫耐受的形成及維持，并可能在其中有著重要作用[32]。該微生態(tài)可以被多種因素影響，如各種環(huán)境因素，包括飲食、抗生素使用、早期微生物暴露情況等。機(jī)體黏膜微生態(tài)的生物多樣性的減少，以及腸道或皮膚菌群組成改變，與多種炎性疾病相關(guān)，包括過敏性疾病如哮喘、炎性腸病(Inflammatory bowel diseases,IBD)、Ⅰ型糖尿病等[33]。在一些免疫異?；蛎庖吣褪墚惓Ｈ巳?，常發(fā)現(xiàn)其固有的微生態(tài)菌群的改變，或發(fā)生常見的菌群失調(diào)。而這種風(fēng)險(xiǎn)可能由于隨后對腸道微生態(tài)有影響的生活方式而增大[34]。

研究顯示，包括病原微生物在內(nèi)的微生態(tài)群與哮喘發(fā)生和發(fā)展有很強(qiáng)的相關(guān)性[35]。從健康成人支氣管沖刷物的分析發(fā)現(xiàn)，下氣道也正常存在微生態(tài)，而并不是無菌的環(huán)境，并且發(fā)現(xiàn)哮喘病人或慢性阻塞性肺疾病的病人，其下氣道的微生態(tài)組成較健康成人有所改變[36]。發(fā)生哮喘的兒童，在1周及1個(gè)月時(shí)，其腸道菌群多樣性都遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于那些后來沒有發(fā)生哮喘的兒童，提示出生初期腸道菌群的多樣性降低與之后發(fā)生哮喘有較高的相關(guān)性[37]。哮喘病人，特別是非肥胖哮喘病人，其腸道分泌組胺的細(xì)菌增多[38]。

腸道和肺部的微生態(tài)對哮喘的發(fā)生和進(jìn)展均有影響。用新生小鼠的研究表明，某些腸道微生物與過敏性哮喘的發(fā)生有著很強(qiáng)的相關(guān)性。這些研究都提示，如何調(diào)整腸道及氣道的微生態(tài)，特別是在生活早期，可能是預(yù)防或治療哮喘的方法[39]。然而，用益生菌聯(lián)合益生元在這個(gè)疾病上治療的研究，總體結(jié)果模棱兩可[40]。體外實(shí)驗(yàn)顯示，益生菌可促進(jìn)細(xì)胞分泌IL-10等下調(diào)免疫反應(yīng)的介質(zhì)，但人體實(shí)驗(yàn)的結(jié)果卻沒有像體外實(shí)驗(yàn)一樣，提示體內(nèi)的復(fù)雜性，遠(yuǎn)非體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)所能代表。例如，有研究顯示在過敏性皮炎似乎有一定效果[41]，但更多則并不理想，很難得到重復(fù)性的研究結(jié)果[40,42-44]。當(dāng)然，這可能與選取的益生菌種類、組合、劑量等有關(guān)，并且研究對象的異質(zhì)性，也對研究結(jié)果有一定影響。鑒于沒有很好的臨床前有效證據(jù)，在微生態(tài)與過敏性哮喘的相關(guān)研究及臨床應(yīng)用上，可能還需要更多系統(tǒng)性的研究數(shù)據(jù)的支撐[45]。

5 哮喘的表型與內(nèi)表型

內(nèi)表型(Endotype)是對重新認(rèn)識哮喘分子異質(zhì)性時(shí)提出的一個(gè)相對于疾病表型(Phenotype)的另一個(gè)概念，即由疾病確定的功能或病理機(jī)制來定義疾病的亞型[46]。而表型則是由疾病觀察到的特征來定義，較少或并不涉及疾病的機(jī)制[46]。由于表型的復(fù)雜性，內(nèi)表型的分類界定也尚不清晰。如果說某個(gè)內(nèi)表型與某種特定疾病機(jī)制一一相關(guān)，則哮喘可能更多是某單一機(jī)制卻可有多個(gè)內(nèi)表型。盡管如此，這樣進(jìn)行分類無疑仍有助于優(yōu)化治療方案，并且強(qiáng)調(diào)從根據(jù)病人疾病表現(xiàn)為之選擇正確的治療方案(從表型出發(fā))，轉(zhuǎn)變?yōu)楦鶕?jù)特定治療方案的作用機(jī)制來選擇更適合的病人(從內(nèi)表型或治療型出發(fā))[47]。

哮喘無論從臨床或分子表型，都呈現(xiàn)出明顯的異質(zhì)性，而了解這些異質(zhì)性，對于如何選擇針對關(guān)鍵通路的阻斷治療方法，尤為重要。臨床發(fā)現(xiàn)，如果考慮了哮喘表型特征，再選用相應(yīng)的生物制劑，如細(xì)胞因子等的拮抗劑進(jìn)行干預(yù)治療，通常能取得明顯效果。對于表現(xiàn)為高Th2免疫反應(yīng)表型的一類哮喘，如一些修飾Th2免疫反應(yīng)的方案，用于阻斷IL-5、IL-13、IgE,或前列腺素D2，或一些其他信號通路干預(yù)等，可降低Th2型反應(yīng)[48]。然而，如何鑒別到那些適合這些昂貴的生物干預(yù)治療的病人，則需要實(shí)驗(yàn)室有快速、重復(fù)性好、特異性強(qiáng)的生物學(xué)指標(biāo)。例如，對于糖皮質(zhì)激素有效的難治性嗜酸性粒細(xì)胞增多性哮喘這樣的表型，由于通常其中心環(huán)節(jié)是Th2型反應(yīng)，故而選用針對Th2細(xì)胞因子的阻斷劑有著很好的應(yīng)用前景。而采用外周血嗜酸性粒細(xì)胞作為一個(gè)操作簡單而重復(fù)性好的生物學(xué)指標(biāo)，可能用來明確那些有特定表型的哮喘病人，指導(dǎo)選擇生物治療方案。

對于低Th2哮喘病人，目前還沒有很明確的生物學(xué)指標(biāo)，而僅僅依賴于檢測不到高Th2反應(yīng)指標(biāo)來診斷。但發(fā)現(xiàn)低Th2哮喘可能與Th1細(xì)胞或Th17細(xì)胞相關(guān)[49]。而這些病人往往對激素治療反應(yīng)較差，其治療手段的研究遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于高Th2哮喘。近來，研究發(fā)現(xiàn)在低Th2哮喘中，存在較高水平的中性粒細(xì)胞，或中性粒細(xì)胞相關(guān)介質(zhì)[48]。而如何找到針對更多亞表型哮喘的特異性指標(biāo)，則可能也是研究工作的熱點(diǎn)之一[50]。如MeDALL(Mechan-isms of the Development of Allergy)的一項(xiàng)研究顯示，在多發(fā)性過敏中，僅有不足40%是由于IgE致敏所致，由此提出非IgE致敏的一類多發(fā)過敏疾病。認(rèn)為單因素致敏和多因素致敏可能也代表著兩種不同的表型[51]。

6 過敏原特異性免疫治療

世界衛(wèi)生組織指出“免疫脫敏治療是唯一可以徹底治療過敏性疾病的根本性治療方法”，即過敏原特異性免疫療法(Allergen-specific immunoth-erapy，ASIT)。這是用少量過敏原提取物反復(fù)多次注射或經(jīng)黏膜途徑給藥，讓病人脫敏。該療法的使用雖然已有近百年歷史,機(jī)理仍不完全清楚,且療效有很大的個(gè)體性差異。對于ASIT的研究和臨床應(yīng)用，2017年我國學(xué)者(主要針對過敏性鼻炎)和歐洲學(xué)者均發(fā)布了相應(yīng)的指南[52，53]。明確ASIT作用機(jī)制，尋找更有效的耐受誘導(dǎo)原，如何進(jìn)行個(gè)性化治療，如何尋找有效生物標(biāo)記識別對某種干預(yù)，治療性抗原或復(fù)合物的應(yīng)答性，均是研究熱點(diǎn)。

在ASIT 的機(jī)制研究中，有發(fā)現(xiàn)經(jīng)過ASIT治療后，過敏部位的肥大細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的數(shù)量有所下降，同時(shí)能增多調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(T regulatory cell,Treg)及調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(B regulatory cell,Breg)的數(shù)量，增加IL-10的分泌，抑制炎性樹突細(xì)胞分泌細(xì)胞因子，炎性效應(yīng)細(xì)胞如Th1、Th2及Th17細(xì)胞減少[54]，還可能通過抑制CCL20及肺組織IL-33、CCL17、eotaxin水平等，拮抗過敏反應(yīng)[55]。同時(shí)也有實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，在ASIT過程中，反復(fù)多次的過敏原刺激機(jī)體能產(chǎn)生多種類型親合力各異的免疫球蛋白IgG[56]，高親合力IgG可能通過截獲過敏原，而減少其被特異性的IgE抗體捕獲。低親合力IgG還可以和其抑制性受體FcγRIIB(免疫球蛋白IgG受體IIB)結(jié)合，通過特異性的IgG作為橋梁，F(xiàn)cεRI和抑制性的FcγRIIB得到交聯(lián)，減弱肥大細(xì)胞的活化，降低機(jī)體對過敏的易感性[56]。這些研究從不同的角度逐步揭示ASIT作用機(jī)制的冰山一角，但ASIT的機(jī)理仍然屬于探索階段。例如ASIT治療后肥大細(xì)胞數(shù)量減少的機(jī)理仍然不明，在ASIT中產(chǎn)生的大量IgG是否和治療中發(fā)現(xiàn)的效應(yīng)細(xì)胞肥大細(xì)胞數(shù)量減少有聯(lián)系，細(xì)胞凋亡在ASIT的作用等等，都等待從不同角度不同環(huán)節(jié)的研究來回答和完善。對ASIT的機(jī)制更深入更細(xì)節(jié)的了解，不僅有助于設(shè)計(jì)更好的方法預(yù)防治療過敏性疾病，其機(jī)制還可能對研究其他疾病的有效治療方法，如自身免疫性疾病、器官移植、慢性感染、腫瘤等疾病、有一定的借鑒作用[57]。

選擇預(yù)測監(jiān)測或評估治療有效性的生物指標(biāo)，也是ASIT重要的內(nèi)容。有推薦以特異性IgG4作為治療敏感性，而特異性IgE/總IgE比率和IgE-FAB作為臨床療效指標(biāo)[58]，并且檢測鼻腔液中的特異性IgE、IgG4及一些功能性抗體，與癥狀有更好的相關(guān)性，可能較外周血結(jié)果更能顯示對治療的反應(yīng)性。此外，如嗜堿性粒細(xì)胞活化，一些可溶性細(xì)胞因子或趨化因子，及其他一些如DC、Treg、Breg等細(xì)胞學(xué)指標(biāo)，這些研究結(jié)果還需要更多臨床驗(yàn)證，并且還需要研究處于ASIT病人的靶器官的其他抗體，如IgA等[47]。

7 對更適合的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的需求

過敏性疾病的研究在相當(dāng)程度上依賴于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，特別是對疾病發(fā)生發(fā)展機(jī)制的深入研究，以便開發(fā)有針對性的治療手段。這些實(shí)驗(yàn)性研究無論從技術(shù)還是倫理角度，都很難直接在人體上來開展。目前已成功建立的疾病動(dòng)物模型基本都是依賴于近交系實(shí)驗(yàn)小鼠。而其中絕大多數(shù)研究是基于常用的兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室近交系小鼠品系，即C57BL/6和BALB/c。由于這些近交系小鼠具有相同的遺傳背景，大大方便了實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷目芍貜?fù)性和穩(wěn)定性。目前生物醫(yī)學(xué)界對免疫學(xué)的認(rèn)識極大部分是基于對這些實(shí)驗(yàn)室小鼠的研究。然而，隨著研究的深入，關(guān)于實(shí)驗(yàn)室小鼠是否能可靠地反映人體的免疫反應(yīng)狀態(tài)，日益受到醫(yī)學(xué)科學(xué)界關(guān)注。對于將基于實(shí)驗(yàn)室小鼠的研究結(jié)果直接應(yīng)用于推測人體免疫學(xué)反應(yīng)機(jī)理，以及開發(fā)治療手段的研究，都面臨許多解釋方面的困難。

實(shí)驗(yàn)室小鼠生活在相對潔凈的屏障內(nèi)，而環(huán)境對動(dòng)物的免疫系統(tǒng)形成有著重要的影響。野生小鼠的免疫反應(yīng)，對其進(jìn)化適應(yīng)性非常重要，因?yàn)樗麄冃枰粩噙m應(yīng)其生活的環(huán)境得以更好生存。目前這個(gè)領(lǐng)域的研究較少。但已有的研究顯示，野生動(dòng)物的體內(nèi)細(xì)胞免疫反應(yīng)性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于實(shí)驗(yàn)室源動(dòng)物。而對于體外培養(yǎng)的再刺激的反應(yīng)，相對于實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物而言，則似乎處于免疫抑制狀態(tài)[59]。比如，血清中免疫球蛋白水平，在不同環(huán)境生活的小鼠有著明顯區(qū)別[60]。實(shí)驗(yàn)室小鼠的水平明顯低于野生小鼠或者與野生小鼠共生活的小鼠，其中以IgE水平差異為甚,而后兩者間則未見明顯區(qū)別[60]。實(shí)驗(yàn)室小鼠和野生小鼠在NK細(xì)胞的生物學(xué)功能上的表現(xiàn)也有顯著區(qū)別，如NK細(xì)胞數(shù)量、NK細(xì)胞經(jīng)IL-2/IL-12刺激后表達(dá)IFN-γ的水平以及NK細(xì)胞活化狀態(tài)，野生小鼠都明顯高于實(shí)驗(yàn)室小鼠[61]。

8 結(jié)語

過敏性疾病患病率的增加，以及對生活質(zhì)量更高要求，使該領(lǐng)域研究日益受到關(guān)注。研究技術(shù)及臨床檢測手段的更新帶來更多研究思路的可行性，均給該領(lǐng)域研究帶來更多機(jī)遇，同時(shí)也帶來更多挑戰(zhàn)。一些臨床治療方法的有效性及異質(zhì)性，機(jī)制不十分明確，而一些很好的基礎(chǔ)研究，研究成果如何進(jìn)一步轉(zhuǎn)化，在臨床得到應(yīng)用，需更多細(xì)節(jié)化探索。本領(lǐng)域的研究需要建立新型動(dòng)物模型，結(jié)合生物信息學(xué)研究個(gè)性化發(fā)病機(jī)制及治療機(jī)制、遺傳及環(huán)境影響及交互作用，以及如何對臨床檢測及治療指標(biāo)進(jìn)行有效評估。見圖1。

圖1 過敏性哮喘研究熱點(diǎn)Fig.1 Current research highlights in allergic asthma

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