王曉潤(rùn)
(青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海 西寧 810001)
包蟲(chóng)病(hydatid disease),又稱細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)病,犬為終末宿主、家畜是中間宿主;其傳播途徑主要是犬的小腸寄生的細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)發(fā)育成熟后排出的大量蟲(chóng)卵,而被蟲(chóng)卵污染的土壤、草地、水源、犬的皮毛,被人和家畜食入,在家畜和人體內(nèi)的臟器中發(fā)育成包蟲(chóng)囊,囊內(nèi)有無(wú)數(shù)的原頭蚴,當(dāng)感染動(dòng)物屠宰后,含原頭蚴的家畜肝、肺囊被犬生食,囊中的許多原頭蚴在犬的小腸寄生發(fā)育,45 d 發(fā)育成成蟲(chóng),成蟲(chóng)排出大量蟲(chóng)卵,周而復(fù)始,造成包蟲(chóng)病的傳播流行。要在傳播途徑上切斷傳播源,主要手段:一是對(duì)家畜進(jìn)行包蟲(chóng)病疫苗免疫,使之包蟲(chóng)卵不能在家畜肝、肺、脾等實(shí)質(zhì)器官上寄生,形成包囊,對(duì)含有包蟲(chóng)囊的家畜臟器要嚴(yán)禁生食喂犬,切斷包蟲(chóng)對(duì)犬的感染;二是對(duì)野犬撲殺,對(duì)家犬拴養(yǎng)并采取“犬犬投藥、月月驅(qū)蟲(chóng)”的管理辦法,對(duì)排出的犬糞進(jìn)行焚燒、深埋,控制犬對(duì)包蟲(chóng)病的感染和傳播。
2016年我們對(duì)省內(nèi)8個(gè)州(市)、24個(gè)縣(市)的960只羔羊,進(jìn)行了羔羊包蟲(chóng)免疫抗體檢測(cè)試驗(yàn)。
1.1 樣品采集 在省內(nèi)12個(gè)縣,采集3月齡注射了包蟲(chóng)免疫疫苗的羔羊血清960份,進(jìn)行羔羊免疫抗體檢測(cè)。
1.2 診斷試劑 重慶澳龍生物制品有限公司生產(chǎn)的羊棘球蚴(包蟲(chóng))ELISA抗體檢測(cè)試劑盒。
1.3 方法 羔羊包蟲(chóng)病免疫抗體檢測(cè),按常規(guī)方法制備血清。
濃縮的洗滌液恢復(fù)至室溫(25 ℃左右),并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作25倍稀釋。
試劑稀釋和樣品稀釋:在血清稀釋板中按1∶100的體積稀釋待檢血清樣品(198 μL樣品稀釋液中加2 μL待檢血清樣品)。對(duì)照稀釋:在血清稀釋板中按1∶100分別稀釋陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照血清。 二抗稀釋:用樣品稀釋液按1∶50~100稀釋酶標(biāo)二抗。取抗原包被板,分別將稀釋好的待檢血清和對(duì)照各取100 μL加入到抗原包被板孔中,待檢樣品做1孔,陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各設(shè)2孔,每孔100 μL。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),置37 ℃溫育60 min。甩掉板中的溶液,每孔加入稀釋好的洗滌液200 μL,靜置3分鐘倒掉,再在吸水紙上拍干,共洗5次。每孔加入稀釋好的兔抗山羊酶標(biāo)二抗100 μL,置37 ℃恒溫箱溫育60 min。洗滌5次,方法同前。每次在干凈吸水紙上拍干。每孔先加底物液A50 μL、再加底物液B 50 μL,室溫避光顯色10 min。每孔加終止液50 μL,10 min內(nèi)測(cè)定結(jié)果。
結(jié)果判定:在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD450nm值。試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD450nm值≥0.6,陰性對(duì)照孔平均OD450nm值<0.3。樣品OD450nm值>0.6,判為陽(yáng)性;樣品OD450nm值<0.3,判為陰性;0.3~0.6之間為疑似。
2016年本省級(jí)動(dòng)物疫控機(jī)構(gòu)共檢測(cè)24個(gè)縣(市、區(qū))免疫包蟲(chóng)羔羊血清960份,合格784份,合格率81.67%,見(jiàn)表1。
表1 2016年青海部分地區(qū)羔羊細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)疫苗免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 單位:份
根據(jù)本次羔羊血清檢測(cè),羔羊免疫血清抗體24縣總體達(dá)到81.67%,達(dá)到國(guó)家規(guī)定的70%免疫抗體標(biāo)準(zhǔn)要求,總體上西寧、海東市等農(nóng)區(qū)都達(dá)到了抗體合格標(biāo)準(zhǔn),但是牧區(qū)海西州都蘭縣、海北州門(mén)源縣、海北州剛察縣、玉樹(shù)州稱多縣、雜多縣、海南州興海等6縣未達(dá)到國(guó)家規(guī)定免疫抗體合格70%標(biāo)準(zhǔn),占被檢測(cè)24個(gè)縣的25%,我們分析原因:一是農(nóng)業(yè)區(qū)犬少于牧區(qū),羊感染包蟲(chóng)機(jī)率低;二是牧區(qū)犬的控制存在一定困難,特別是流浪犬,無(wú)法對(duì)其驅(qū)蟲(chóng),撲殺又有當(dāng)?shù)啬撩褡钄r,很不好處理;三是牧區(qū)不達(dá)標(biāo)的這6縣,鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站歸鄉(xiāng)鎮(zhèn)府管理,對(duì)羔羊的包蟲(chóng)免疫疫苗注射可能不到位,需要對(duì)這6個(gè)縣的包蟲(chóng)羔羊免疫加強(qiáng)補(bǔ)免工作,落實(shí)責(zé)任,不留死角。我們一定要將此項(xiàng)工作做細(xì),早日完成中央和省政府安排部署的包蟲(chóng)病防控工作,為下一步完全控制青海省內(nèi)動(dòng)物包蟲(chóng)病的流行而努力。
參考文獻(xiàn):
[1] 李祥瑞.動(dòng)物寄生蟲(chóng)病彩色圖譜[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2004:36-38.