3株甘薯干腐病菌的生物學(xué)特性研究

楊冬靜,謝逸萍,孫厚俊,徐 振,張成玲

(江蘇徐淮地區(qū)徐州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所/農(nóng)業(yè)部 甘薯生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 徐州 221131)

我國(guó)是世界上最大的甘薯生產(chǎn)國(guó),每年種植面積約500萬hm2,年產(chǎn)量約 1.1萬t,約占世界甘薯產(chǎn)量的82.2 %。甘薯干腐病(Dry rot of sweet potato)是甘薯貯藏期重要病害之一,在江蘇、山東、浙江等省發(fā)生非常普遍,該病發(fā)生嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致全窖發(fā)病,造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。引起甘薯干腐病的病原菌有兩類：一類是鐮刀菌屬的串珠鐮刀菌[Fusariummoniliforme(Sheldon.) Snyd. & Hans.]、尖鐮刀菌[Fusariumoxysporum(Schlecht.) Snyd. & Hans.]以及腐皮鐮刀菌[Fusariumsolani(Sacc.) Mart.]等;另一類是子囊菌亞門間座殼屬的甘薯間座殼菌。這兩類病原菌引起的甘薯干腐病的癥狀有所差異。系統(tǒng)地研究甘薯干腐病病原菌的生物學(xué)特性可為該病害的防治提供理論依據(jù)[1]。鐮刀菌屬的病菌可引起多種作物發(fā)生多種病害,已經(jīng)引起了世界各國(guó)植保專家的密切關(guān)注；而我國(guó)關(guān)于鐮刀菌屬病原菌生物學(xué)特性的報(bào)道也很多,如朱迎迎等(2016)[2]對(duì)引起火龍果果腐病的單層鐮刀菌進(jìn)行了分子鑒定并對(duì)其進(jìn)行了生物學(xué)特性研究;楊煥青等(2008)[3]研究發(fā)現(xiàn)PSA是引起草莓枯萎病的尖孢鐮刀菌草莓專化型菌株菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的最佳培養(yǎng)基,并測(cè)定了該菌株對(duì)幾種殺菌劑的敏感性;鄭肖蘭等(2006)[4]研究發(fā)現(xiàn)引起西瓜枯萎病的尖孢鐮刀菌西瓜?；途甑淖罴焉L(zhǎng)和產(chǎn)孢培養(yǎng)基為PDA,并發(fā)現(xiàn)烯唑醇對(duì)該菌株的毒力最強(qiáng);康迅等(2017)[5]報(bào)道了辣木枝枯病的病原菌木賊鐮刀菌的生物學(xué)特性;李健等(2016)[6]研究發(fā)現(xiàn)雜草馬唐的生防菌厚垣孢鐮刀菌ZC201301的最適產(chǎn)孢培養(yǎng)基為馬唐汁液培養(yǎng)基。迄今國(guó)內(nèi)外有關(guān)甘薯干腐病的研究報(bào)道較少,對(duì)甘薯干腐病病原菌進(jìn)行系統(tǒng)的生物學(xué)特性研究未見報(bào)道。本課題組前期分離到3株甘薯干腐病菌并經(jīng)科赫式法則驗(yàn)證。本文對(duì)這3株甘薯干腐病菌進(jìn)行了系統(tǒng)的生物學(xué)特性研究，以期為甘薯干腐病的綜合防控提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1　供試菌株

本課題組從江蘇徐州甘薯研究中心甘薯貯藏庫中采集甘薯干腐病薯塊,采用組織分離法和單孢分離法分離得到3株甘薯干腐病病原菌并經(jīng)科赫式法則驗(yàn)證,這3株干腐病菌分別被命名為GF1Y、GF2Y和GF3Y。將分離純化得到的這3株甘薯干腐病菌保存于4 ℃冰箱中。

1.2　菌絲及孢子形態(tài)特征

將活化好的GF1Y、GF2Y和GF3Y菌株接種到PDA培養(yǎng)基平板上,于25 ℃恒溫培養(yǎng)5 d,觀察菌絲生長(zhǎng),并采用倒置顯微鏡觀察各菌株產(chǎn)生孢子的形態(tài)。

1.3　甘薯干腐病菌生物學(xué)特性的研究

1.3.1pH值對(duì)菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢及產(chǎn)色素的影響用0.1 mol/L HCl和0.1 mol/L NaOH調(diào)節(jié)PDA培養(yǎng)基的pH值,制備成pH值分別為5、6、7、...、12等8個(gè)梯度的平板各9個(gè)；打取3個(gè)供試菌株的菌碟,每個(gè)菌株每個(gè)梯度pH值的平板接種3個(gè)；將接種好的平板倒置于25 ℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng),6 d后采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑,并用5 mL無菌水洗滌孢子,采用血球計(jì)數(shù)板測(cè)定產(chǎn)孢量。

1.3.2光照對(duì)菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢及產(chǎn)色素的影響接種各菌株菌碟到PDA平板中,分別置于完全光照、完全黑暗和12 h光照12 h黑暗光暗交替條件下,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù),其他培養(yǎng)和測(cè)量方法同1.3.1。

1.3.3碳源對(duì)菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢及產(chǎn)色素的影響以査氏培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基[7],以等量的山梨醇、麥芽糖、葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉和D-木糖等制備成6種不同碳源的培養(yǎng)基,分別命名為C1～C6,以不添加碳源的培養(yǎng)基C0作為對(duì)照,其他接種、檢測(cè)和培養(yǎng)方法同1.3.1。

1.3.4氮源對(duì)菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢及產(chǎn)色素的影響以査氏培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,分別加入等量的牛肉膏、蛋白胨、甘氨酸、L-苯丙氨酸、氯化銨和尿素等，制備成6種不同氮源的培養(yǎng)基,分別命名為N1～N6,以不添加氮源的培養(yǎng)基N0作為對(duì)照,其他接種、檢測(cè)和培養(yǎng)方法同1.3.1。

1.3.5菌絲和孢子致死溫度的測(cè)定設(shè)置42、45、48、50、52、55、58、60 ℃共8個(gè)溫度梯度,在無菌條件下將6 mm菌絲塊和孢子懸浮液分別置入裝有5 mL無菌水的試管中,塞好棉塞,水浴10 min,然后將熱處理后的菌絲塊移入PDA平板中,于25 ℃下恒溫培養(yǎng),每處理設(shè)3個(gè)重復(fù),根據(jù)菌落形成與否,確定致死溫度及相應(yīng)的時(shí)間。

2　結(jié)果與分析

2.1　3株甘薯干腐病菌的菌絲及孢子形態(tài)

將25 ℃下培養(yǎng)5 d的GF1Y、GF2Y和GF3Y這3個(gè)菌株的PDA平板取出觀察,發(fā)現(xiàn)3個(gè)菌株的菌絲濃密程度和產(chǎn)色素顏色均有差異,其中GF1Y和GF2Y的菌絲較為濃密,而GF3Y的菌絲非常濃密；從菌絲生長(zhǎng)速度來看,GF1Y生長(zhǎng)最快,GF2Y其次,GF3Y生長(zhǎng)速度最慢;從產(chǎn)色素來看,GF1Y產(chǎn)生淡紫色的色素,GF2Y產(chǎn)生紫色的色素,而GF3Y產(chǎn)生淡淡的黃色。在顯微鏡下觀察各菌株的孢子形態(tài),發(fā)現(xiàn)3個(gè)菌株均產(chǎn)生大型鐮刀狀分生孢子和小型分生孢子,大型分生孢子具有3～5個(gè)隔,小型分生孢子橢圓形或卵形,具有0～1個(gè)隔,初步判斷這3個(gè)菌株均為鐮刀屬病菌。

2.2　不同培養(yǎng)條件對(duì)甘薯干腐病菌菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響

2.2.1pH值對(duì)菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響不同pH值對(duì)3株干腐病菌菌絲生長(zhǎng)影響的結(jié)果如圖1所示。由圖1可以看出：GF1Y在pH值9～12下生長(zhǎng)速度較快,平均菌落直徑在7.30～8.00 cm；在pH值5～9條件下平均菌落直徑在6.63～7.30 cm；在pH值10～12下的菌落直徑與pH值5～8下的呈極顯著水平差異,說明在pH值10～12下GF1Y的菌絲生長(zhǎng)速度最快。GF2Y的菌絲生長(zhǎng)速度總體來看也是隨pH值的增加而增加,在pH值12條件下菌落平均直徑最大，為7.27 cm；在pH值5～9條件下平均菌落直徑較小。GF3Y在pH值5～12條件下的平均菌落直徑在5.53～5.90 cm,說明該菌株在pH值5～12條件下均能較好地生長(zhǎng)。因此,這3個(gè)菌株在不同酸堿度條件下均能較好地生長(zhǎng),但GF1Y和GF2Y在堿性較強(qiáng)的環(huán)境下菌絲生長(zhǎng)速度更快,而GF3Y對(duì)酸堿度不敏感。

不同小寫、大寫字母分別表示在5%和 1%水平下差異顯著。下同。圖1　不同pH值對(duì)干腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

3個(gè)菌株在不同酸堿度條件下菌絲致密程度如圖2上部所示。從該圖可見：GF1Y在pH值5～9條件下菌絲致密,但是在pH值10～12條件下盡管菌落

直徑變長(zhǎng),但是菌絲變得稀疏;GF2Y的菌絲致密程度變化規(guī)律與GF1Y基本相同;而GF3Y在pH值5～12條件下菌絲都非常致密,但是在pH值10～12條件下可見到菌落中呈現(xiàn)絮狀菌絲。3個(gè)菌株在不同酸堿度條件下產(chǎn)色素情況如圖2下部所示,從圖中可見GF1Y在pH值5～7之間可產(chǎn)生淡紫色色素,但隨著堿性增強(qiáng),該菌株產(chǎn)色素的能力降低,從平板背面幾乎看不到色素;GF2Y在pH值7～9之間可產(chǎn)生紫色色素,而在酸性和pH值10條件下該菌株產(chǎn)色素的能力增強(qiáng),從平板背面可觀察到深紫色色素；GF3Y在pH值5條件下可見淺紅色色素產(chǎn)生,而隨著pH值增加,未見明顯色素產(chǎn)生。盡管在pH值11和12的條件下,由于制作的平板自身顏色變深,肉眼已無法觀察出色素產(chǎn)生能力,但是從pH值5～10下的色素產(chǎn)生情況來看,在酸性條件下這3個(gè)菌株的產(chǎn)色素能力均變強(qiáng)。

圖2　不同pH值對(duì)干腐病菌菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響

2.2.2光照對(duì)菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響光暗條件對(duì)菌落直徑的影響如圖3所示,從該圖可以看出：3個(gè)菌株在完全光照條件下的菌落直徑均低于光暗交替和完全黑暗條件下的,但是GF1Y和GF2Y在光暗條件下的平均菌落直徑并無顯著性差異,說明這兩個(gè)菌株對(duì)光照不敏感;GF3Y在光暗交替條件下的菌落直徑為6.53 cm,與黑暗條件下的菌落直徑6.00 cm呈極顯著水平差異,而在完全光照條件下該菌株的菌落直徑為5.27 cm,又與黑暗條件下的菌落直徑呈極顯著水平差異，說明GF3Y對(duì)光照比較敏感。

從菌絲致密程度來看,在光照條件下GF1Y的菌絲比完全黑暗和光暗交替條件下顯得更為致密,而GF2Y和GF3Y的菌絲致密程度變化不明顯。從產(chǎn)色素方面分析,GF1Y在光暗交替條件下呈現(xiàn)淡淡的紫色,而在完全光照和完全黑暗的條件下未見明顯色素產(chǎn)生;GF2Y在光暗交替條件下呈現(xiàn)紫色,而在完全光照和完全黑暗的條件下顏色更深,平板背面已呈深紫色;GF3Y在光暗交替和完全黑暗條件下平板背面呈現(xiàn)淺黃色,而在完全光照的條件下產(chǎn)生的色素更少(圖4)。

2.2.3碳源對(duì)菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響以查式培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,分別添加山梨醇、麥芽糖、葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉和D-木糖等6種不同碳源,培養(yǎng)結(jié)果如圖5所示。GF1Y在以可溶性淀粉為碳源的培養(yǎng)基中菌落直徑最大，達(dá)8.13 cm；在以蔗糖為碳源的培養(yǎng)基中菌落直徑最小，只有6.83 cm,且與其他幾種碳源和不加碳源條件下的菌落直徑呈極顯著差異；而在其他的碳源和不加碳源條件下得到的菌落直徑均無顯著性差異,說明GF1Y菌株的菌絲生長(zhǎng)可不依賴碳源。在不添加碳源的條件下,GF2Y的菌落直徑為6.37 cm,與其他6種添加碳源條件下的菌落直徑呈極顯著水平差異,其中GF2Y對(duì)蔗糖的利用又是最佳的,其菌落直徑達(dá)到7.10 cm,與其他5種碳源下

的菌落直徑呈極顯著水平差異。菌株GF3Y的生長(zhǎng)也不依賴碳源，其在未添加碳源的條件下菌落直徑最大，為5.6 cm,且與山梨醇和可溶性淀粉為碳源條件下的菌落直徑無顯著性差異；而該菌株對(duì)麥芽糖、葡萄糖和D-木糖的利用較差。

圖3　不同光照條件對(duì)干腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

圖4　光暗處理對(duì)干腐病菌菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響

圖5　不同碳源對(duì)干腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

在不添加碳源條件下，盡管3個(gè)菌株的菌絲生長(zhǎng)都較快,但是從圖6可以明顯看出,這3個(gè)菌株的菌絲都非常稀薄；其次,在以山梨醇為碳源的培養(yǎng)基中3個(gè)菌株的菌絲也較為稀薄。

從產(chǎn)色素情況來看,PDA平板培養(yǎng)的GF1Y可產(chǎn)生淡紫色色素,而以查式培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、以6種不同碳源制備的培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到的菌落完全不產(chǎn)生淡紫色色素,僅麥芽糖和D-木糖條件下平板背面呈現(xiàn)淡黃色;GF2Y也完全不呈現(xiàn)原來在PDA平板中的紫色,僅在麥芽糖、葡萄糖和D-木糖條件下平板背面呈現(xiàn)淡黃色;GF3Y也是在麥芽糖和D-木糖條件下平板背面呈現(xiàn)淡黃色,在其他幾種碳源條件下幾乎不產(chǎn)生色素。

2.2.4氮源對(duì)菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響 以查式培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,分別添加牛肉膏、蛋白胨、甘氨酸、L-苯丙氨酸、氯化銨和尿素等6種不同氮源,菌絲生長(zhǎng)速度如圖7所示。在不添加任何氮源的條件下GF1Y的菌落直徑可達(dá)8.10 cm,與以牛肉膏為氮源條件下的菌落直徑8.20 cm無顯著差異；其次GF1Y對(duì)蛋白胨和L-苯丙氨酸的利用較好,菌落直徑分別為7.20 cm和7.37 cm；但是該菌株對(duì)甘氨酸和尿素的利用較差,對(duì)氯化銨的利用最差,其菌落直徑僅為4.07 cm,與其他各種氮源條件下的菌落直徑呈極顯著差異。GF2Y和GF3Y對(duì)氮源的利用規(guī)律與GF1Y相似?？傮w來看,3個(gè)菌株在無氮源條件下均能生長(zhǎng),說明它們的生長(zhǎng)不依賴氮源,但是對(duì)不同氮源的利用又有所差異,其中3個(gè)菌株對(duì)氯化銨的利用均最差。

圖6　不同碳源對(duì)干腐病菌菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響

圖7　不同氮源對(duì)干腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

從圖8可以看到：盡管3個(gè)菌株在不添加氮源的條件下菌絲生長(zhǎng)速度均很快,但是菌絲都非常稀薄;在以牛肉膏為氮源的條件下菌絲也比較稀薄;在以氯化銨為氮源的條件下菌絲非常致密。GF1Y在以牛肉膏為氮源的條件下平板背面呈現(xiàn)淡淡的紫色,而在其他氮源條件下均未見明顯色素產(chǎn)生;GF2Y在以蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)紫色,在以牛肉膏為氮源的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)深紫色,在以L-苯丙氨酸為氮源的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)淺紫色,在以氯化銨為氮源的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)紫紅色,在其他氮源條件下基本不產(chǎn)生色素;GF3Y在以L-苯丙氨酸為氮源的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)淺紅色,在以氯化銨為氮源的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)紅色,在其他氮源條件下基本不產(chǎn)生色素。該結(jié)果說明氮源不僅影響各菌株的菌絲生長(zhǎng),還影響其產(chǎn)色素能力。

2.3　不同培養(yǎng)條件對(duì)甘薯干腐病菌產(chǎn)孢的影響

2.3.1pH值對(duì)病菌產(chǎn)孢的影響從表1可知,pH值對(duì)3個(gè)菌株的產(chǎn)孢量有一定的影響。對(duì)于GF1Y而言,該菌株在各個(gè)pH條件下的產(chǎn)孢量均較小,其中pH值為6和7時(shí)產(chǎn)孢量相對(duì)較高,分別為22.68×106CFU/mL和14.68×106CFU/mL,與其他各個(gè)pH條件下的產(chǎn)孢量呈極顯著差異;GF2Y的產(chǎn)孢量相對(duì)較高,其中pH 9和10條件下該菌株的產(chǎn)孢量分別達(dá)到153.2×106CFU/mL和145.2×106CFU/mL,與其他pH條件下的產(chǎn)孢量呈極顯著差異;菌株GF3Y的自身產(chǎn)孢量很小,在各pH值條件間未見顯著性差異。

圖8　不同氮源對(duì)干腐病菌菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)色素的影響

表1　不同pH值條件下甘薯干腐病菌的產(chǎn)孢量 106CFU/mL

2.3.2光照對(duì)病菌產(chǎn)孢的影響經(jīng)不同光照條件處理后在顯微鏡下觀察產(chǎn)孢量,未見菌株GF1Y和GF3Y產(chǎn)孢;對(duì)于GF2Y來說,在光照條件下該菌株的產(chǎn)孢量可達(dá)61.20×106CFU/mL,與黑暗條件下的產(chǎn)孢量36.00×106CFU/mL呈顯著水平差異,而在光暗交替條件下該菌株的產(chǎn)孢量最小,為21.32×106CFU/mL,與完全光照和完全黑暗條件下的產(chǎn)孢量呈極顯著水平差異。

表2　不同光照條件下甘薯干腐病菌的產(chǎn)孢量 106CFU/mL

2.3.3碳源對(duì)病菌產(chǎn)孢的影響碳源對(duì)3個(gè)甘薯干腐病菌菌株的產(chǎn)孢量影響如表3所示。從表3可以看到：GF1Y在以D-木糖為碳源條件下產(chǎn)孢量最高,為24.00×106CFU/mL,其次在以蔗糖為碳源條件下產(chǎn)孢量為17.32×106CFU/mL,在以麥芽糖、葡萄糖和可溶性淀粉為碳源條件下產(chǎn)孢量較低,而在以山梨醇為碳源和不添加碳源的情況下,GF1Y未見產(chǎn)孢;GF2Y在以葡萄糖和麥芽糖為碳源條件下產(chǎn)孢量較高，分別為100.00×106CFU/mL和92.00×106CFU/mL,在以蔗糖、可溶性淀粉和D-木糖為碳源的條件下產(chǎn)孢量較低,在以山梨醇為碳源和不添加碳源的情況下幾乎不產(chǎn)孢;對(duì)于GF3Y菌株,該菌株本身產(chǎn)孢量很小,因此在各種不同碳源條件間其產(chǎn)孢量無顯著性差異。

2.3.4氮源對(duì)病菌產(chǎn)孢的影響從表4可以看出:在不同氮源條件下GF1Y和GF3Y幾乎不產(chǎn)孢；GF2Y在以尿素和L-苯丙氨酸為氮源條件下產(chǎn)孢量較高,分別為77.20×106CFU/mL和72.00×106CFU/mL,極顯著高于其他幾種氮源條件下的產(chǎn)孢量；GF2Y在以牛肉膏、蛋白胨、甘氨酸和氯化銨為氮源條件下的產(chǎn)孢量較低,而在未添加氮源條件下平均每個(gè)血球計(jì)數(shù)板內(nèi)僅有1個(gè)孢子,產(chǎn)孢量很少。

表3　不同碳源條件下甘薯干腐病菌的產(chǎn)孢量 106CFU/mL

表4　不同氮源條件下甘薯干腐病菌的產(chǎn)孢量 106CFU/mL

2.4　菌絲和孢子的致死溫度

GF1Y菌絲經(jīng)過不同溫度水浴處理后回接到PDA平板,經(jīng)過培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn),經(jīng)58 ℃處理10 min后該菌株無法再產(chǎn)生菌落,因此認(rèn)為GF1Y的菌絲致死溫度為58 ℃,10 min;同樣處理和調(diào)查發(fā)現(xiàn)GF2Y和GF3Y的菌絲致死溫度均為60 ℃,10 min。此外，GF1Y的孢子液經(jīng)過48 ℃處理10 min后該菌株無法再產(chǎn)生菌落,因此認(rèn)為GF1Y的孢子致死溫度為48 ℃,10 min；而GF2Y和GF3Y的孢子致死溫度均為50 ℃,10 min。

3　討論與結(jié)論

鐮刀菌廣泛分布于土壤、空氣以及動(dòng)植物有機(jī)體中,雖然有研究認(rèn)為鐮刀菌可作為生防菌株用于雜草防治[6],但大多數(shù)鐮刀菌與植物病害有關(guān),如Prospero等(2004)報(bào)道的香蕉萎蔫病[8]、Díaz Arias等(2013)報(bào)道的大豆根腐病[9]、Ivors等(2006)報(bào)道的玉米穗腐病[10]、Marasas等(2006)報(bào)道的杧果畸形病[11]、陳瑤等(2012)[12]報(bào)道的草莓根腐病、孔瓊等(2005)報(bào)道的香莢蘭根腐病[13],以及楊輝輝等(2014)報(bào)道的芝麻枯萎病[14]等都是由鐮刀菌屬病菌引起的,并由此造成了非常重大的經(jīng)濟(jì)損失。鐮刀菌屬病菌在甘薯上還能引起甘薯根腐病[15-16]、褐斑病[17]以及苗床爛苗[18]等病害。

目前關(guān)于鐮刀菌的生物學(xué)特性有較為廣泛的報(bào)道,但是引起甘薯干腐病的鐮刀菌屬病菌的生物學(xué)特性還未見相關(guān)報(bào)道。本文系統(tǒng)地研究了3個(gè)甘薯干腐病菌菌株的生物學(xué)特性,結(jié)果表明：GF3Y的菌絲生長(zhǎng)速度較慢，而GF1Y和GF2Y的菌絲生長(zhǎng)速度較快;GF1Y和GF2Y在堿性較強(qiáng)的環(huán)境下菌絲生長(zhǎng)速度更快,而菌株GF3Y對(duì)酸堿度不敏感；這3個(gè)菌株的產(chǎn)色素能力隨著酸堿度的變化而變化;光照條件對(duì)3個(gè)菌株的菌絲生長(zhǎng)速度影響不是太大;3個(gè)菌株的生長(zhǎng)完全不依賴碳源和氮源,但是在缺失碳源和氮源的條件下菌絲極為稀??；GF1Y和GF3Y的產(chǎn)孢能力較差；GF2Y的產(chǎn)孢能力較強(qiáng),其在pH 9～10、完全光照、以D-木糖為碳源和以尿素和L-苯丙氨酸為氮源條件下的產(chǎn)孢量最大，在碳源和氮源缺失的條件下該菌株幾乎不產(chǎn)孢。由此可見,本研究中3個(gè)干腐病菌菌株的菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢數(shù)量和產(chǎn)色素等特性存在較大的差異,且與其他報(bào)道的鐮刀菌的生物學(xué)特性[19-22]也存在一定的差異,由此也表明對(duì)甘薯干腐病的防控存在一定的復(fù)雜性。下一步我們將對(duì)這3個(gè)菌株進(jìn)行高效低毒藥劑篩選和防治效果試驗(yàn),以進(jìn)一步為該病害的綜合防控奠定理論基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn):

[1] 郭予元.中國(guó)農(nóng)作物病蟲害[M].3版.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2015:94-95.

[2] 朱迎迎,高兆銀,李敏,等.火龍果鐮刀菌果腐病病原菌鑒定及生物學(xué)特性研究[J].熱帶作物學(xué)報(bào),2016,37(1):164-171.

[3] 楊煥青,王開運(yùn),范昆,等.草莓枯萎病菌的生物學(xué)特性及7種殺菌劑對(duì)其抑制作用[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào),2008,2(35):169-174.

[4] 鄭肖蘭,崔昌華,馮慧麗,等.尖孢鐮刀菌西瓜專化型菌株的生物學(xué)特性[J].熱帶作物學(xué)報(bào),2006,1(27):97-100.

[5] 康迅,靳鵬飛,馮霞,等.辣木枝枯病病原菌鑒定及其生物學(xué)特性[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào),2017,44(3):481-487.

[6] 李健,李巖,高興祥,等.馬唐生防菌厚垣孢鐮刀菌ZC201301的生物學(xué)特性研究[J].草業(yè)學(xué)報(bào),2016,3(25):234-239.

[7] 沈萍,陳向東.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)[M].北京:高等教育出版社,2007.

[8] Prospero S, Blank J A, Wtnton L M. Isolation and chracterization of mocrosatellite markers inPhytophthoraramorum, the causal agent of sudden oak death [J]. Molecular Ecology Notes, 2004(4): 672-674.

[9] Díaz Arias M M, Leandro L F, Munkvold G P. Aggressiveness ofFusariumspecies and impact of root infection on growth and yield of soybeans [J]. Phytopathology, 2013, 103(8): 822-832.

[10] Ivors K, Garbelotto M, Vries I D E, et al. Microsatellite markers identify three lineages ofPhytophthoraramorumin US nurseries, yet single lineages in US forest and European nursery populations [J]. Molecular Ecology, 2006, 15: 1493-1505.

[11] Marasas W F O, Ploetz R C, Wingfield M J, et al. Mango malformation disease and the associatedFusariumspecies [J]. Phytopathology, 2006, 96(6): 667-672.

[12] 陳瑤,王樹雪,魏艷敏,等.草莓根腐病菌C16-4的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J].果樹學(xué)報(bào),2012,29(4):638-643.

[13] 孔瓊,王云月,朱有勇,等.香莢蘭尖孢鐮刀菌生物學(xué)特性[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2005,1(18):47-49.

[14] 楊輝輝,王坦,黃思良,等.一株芝麻枯萎病菌的鑒定及其生物學(xué)特性[J].中國(guó)油料作物學(xué)報(bào),2014,36(3):385-392.

[15] 柴一秋,陳利鋒,王金生.甘薯根腐病病原菌粗毒素對(duì)甘薯生長(zhǎng)的影響[J].植物病理學(xué)報(bào),2007,37(6):604-609.

[16] 趙永強(qiáng),孫厚俊,陳曉宇,等.6種生物源殺菌劑對(duì)甘薯根腐病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,23(2):115-116.

[17] 張成玲,趙永強(qiáng),徐振,等.3株不同鐮刀菌對(duì)甘薯致病性及7種殺菌劑敏感性測(cè)定[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào),2013,28(增刊2):376-379.

[18] 張成玲,趙永強(qiáng),謝逸萍,等.甘薯苗床鐮刀菌病害分子檢測(cè)及分析[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2017,29(4):58-62.

[19] 高婧,張園園,王凱,等.向日葵枯萎病菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性[J].中國(guó)油料作物學(xué)報(bào),2016,38(2):214-222.

[20] 秦涵淳,楊臘英,李松偉,等.培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)香蕉枯萎病尖孢鐮刀菌生長(zhǎng)的影響[J].熱帶作物學(xué)報(bào),2009,12(30):1852-1857.

[21] 王勇,楊秀榮,楊依軍,等.茄根腐病致病病原——茄病鐮刀菌及其藍(lán)色變種的生物學(xué)特性研究[J].天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,2(9):21-25.

[22] 潘龍其,張麗,楊成德,等.紫花苜蓿根腐病原菌——擬枝孢鐮刀菌的鑒定及其生物學(xué)特性研究[J].草業(yè)學(xué)報(bào),2015,10(24):88-98.