飼料中不同著色劑搭配對紅草金魚生長及抗氧化能力的影響

曲木　張寶龍　孫榕　翟勝利

摘 要：本試驗用規(guī)格一致、健康活潑的紅草金魚作為試驗對象，著色劑選用的是萬壽菊粉、蝦青素、加麗素紅及辣椒紅素，采用四因素三水平L9（34）的正交設(shè)計方案設(shè)計9種飼料配方，以不添加任何著色劑的飼料作為對照組，紅草金魚初始體重為（54.60±1.58）g，每個處理三個重復(fù)，每個重復(fù)30尾魚，養(yǎng)殖56 d后測定其生長及抗氧化能力等相關(guān)指標。結(jié)果表明：Diet 7處理組增重率及特定生長率最高且餌料系數(shù)最低，蝦青素對紅草金魚生長的影響要高于其他三種著色劑；測定并比較了紅草金魚血清及組織中GSH、GST、GOT、GPT活性及GOT/GPT比值的變化情況，結(jié)果表明Dirt 3及Diet 7處理組可顯著促進紅草金魚抗氧化能力。

關(guān)鍵詞：紅草金魚；著色劑；生長；抗氧化能力

金魚作為常見觀賞魚的一種，近幾年養(yǎng)殖規(guī)模日趨擴大，逐漸走入千家萬戶，深受廣大觀賞魚愛好者的喜愛。近年來，金魚著色方面的研究很多，然而對其機體健康的關(guān)注較少，金魚體色好壞與魚體健康程度息息相關(guān)，金魚由于“嬌生慣養(yǎng)”，機體抵抗力較錦鯉來說相對較弱。因此，在關(guān)注金魚增色的同時，也應(yīng)注重其機體健康。本研究的開展，可為金魚增色飼料的優(yōu)化提供參考。

一、試驗材料與方法

1.試驗魚與養(yǎng)殖管理

本試驗所用紅草金魚購自天津市金水族水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，隨后運往天津現(xiàn)代晨輝科技集團有限公司循環(huán)水養(yǎng)殖實驗室。金魚運輸?shù)綄嶒炇液?，用消毒劑對魚體進行消毒，在周轉(zhuǎn)箱中暫養(yǎng)7 d后，從中挑選900尾紅草金魚，隨機分為9個處理組和1個對照組，每個處理三個重復(fù)，每個重復(fù)30尾魚。養(yǎng)殖周期為56 d，每天投喂兩次，日投喂量為體重的3-4%，投喂時間為每天的09：00，15：00。養(yǎng)殖過程中水體溶氧>5 mg/L，PH為7-8，氨氮<0.02 mg/L，亞硝酸鹽<0.005 mg/L。每天記錄養(yǎng)殖水溫、試驗魚死亡條數(shù)及投餌量。

2.試驗飼料

本試驗以萬壽菊粉（葉黃素有效含量2%）、蝦青素（有效含量10%）、加麗素紅（有效含量10%）、辣椒紅素（色價150）為著色劑，每種著色劑設(shè)置3個梯度，采用四因素三水平L9（34）的正交設(shè)計方案，設(shè)計試驗飼料配方，正交設(shè)計結(jié)果見表1。以魚粉6%、豆粕34%、花生粕14%、菜粕6%為主要蛋白源，配置成飼料蛋白含量為32%的配合飼料。

3.指標測定

（1）生長指標測定

在養(yǎng)殖開始及養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，測定紅草金魚體重、體長、全長及體高。生長指標按下列公式計算：

增重率（WGR，%）=100×（終末體重-初始體重）/初始體重；

特定生長率（SGR，%/d）=100×（ln終末體重-ln初始體重）/養(yǎng)殖天數(shù)；

餌料系數(shù)（FCR）=飼料攝入量干重/（終末體重-初始體重）；

蛋白質(zhì)效率（PER）=（終末體重-初始體重）/（飼料攝入量干重×飼料粗蛋白質(zhì)含量）；

肥滿度（CF，%）=100×終末體重/終末體長3；

肝體指數(shù)（HSI，%）=100×肝胰臟重/終末體重；

存活率（SR，%）=100×終末存活尾數(shù)/初始放養(yǎng)尾數(shù)。

（2）抗氧化指標測定

養(yǎng)殖56 d后，每個重復(fù)取9條魚，用1 mL注射器從尾靜脈抽血，每3條魚的血液混為一個樣本，4℃靜置4 h后用離心機以4000轉(zhuǎn)/min離心15 min，取上層澄清液制成血清，保存于-20℃，等待進行血液指標的測定。抽血之后在冰袋上進行解剖，取紅草金魚的肝胰臟和腎臟組織，按組織：0.85%的生理鹽水=1：9的比例制成10%勻漿液，用于抗氧化指標的測定。

試驗共測定了谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶（GST）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）4個抗氧化指標，指標測定均按照南京建成生物科技研究所的試劑盒說明書進行測定。

4.數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)用EXCEL 2003軟件計算平均值和標準差（Mean±SD）。采用SPSS 18.0進行相關(guān)性檢驗，單因素極差與方差分析來進行試驗組間顯著性檢驗，若組間差異顯著（P<0.05），則作Duncan氏多重比較分析。

二、試驗結(jié)果

1.飼料中不同著色劑搭配對紅草金魚生長的影響

結(jié)果如表2所示，不同的著色劑對紅草金魚生長性能有顯著影響（P<0.05）。在Diet 7飼料組，紅草金魚的增重率、特定生長率及蛋白質(zhì)效率最高，且顯著高于其他飼料組（P<0.05）；餌料系數(shù)方面，Diet 7飼料組最低，與Diet 1、Diet 3、Diet 9飼料組差異不顯著（P>0.05），但顯著高于其他飼料組（P<0.05）。

結(jié)果如表3所示，四種著色劑中對紅草金魚增重率及特定生長率影響最大的為蝦青素，P值主次順序為蝦青素>加麗素紅>辣椒紅素>萬壽菊粉，其最大值分別為K3、K2、K3及K3，萬壽菊粉三個水平之間差異不顯著（P>0.05），其他三種著色劑各水平間差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚餌料系數(shù)影響最大的為蝦青素，P值主次順序為蝦青素>加麗素紅>萬壽菊粉>辣椒紅素，其最大值分別為K3、K1、K3及K3，且各水平間差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚蛋白質(zhì)效率影響最大的為蝦青素，P值主次順序為蝦青素>加麗素紅>辣椒紅素>萬壽菊粉，其最大值分別為K2、K1、K3及K3，且各水平間差異顯著（P<0.05）。

（2）同一行肩標不同表示差異顯著（P<0.05）。同表3、表5、表9。

2.飼料中不同著色劑搭配對紅草金魚抗氧化能力的影響

（1）飼料中不同著色劑搭配對紅草金魚組織中GSH含量的影響

結(jié)果如表4所示，不同的著色劑對紅草金魚GSH含量有顯著影響（P<0.05）。血清中，Diet 7、Diet 8處理組與Diet 3差異不顯著（P<0.05），而這三組均顯著高于其他各組（P>0.05）。肝胰臟中，Diet 3處理組與Diet 2、Diet 7處理組差異不顯著（P>0.05），但顯著高于其他各組（P<0.05）。腎臟中以Diet 3處理組最高，與Diet 7處理組差異不顯著（P>0.05），但顯著高于其他各組（P<0.05）。

結(jié)果如表5所示，四種著色劑中對紅草金魚血清中GSH含量影響最大的為蝦青素，P值主次順序為辣椒紅素>萬壽菊粉>加麗素紅>蝦青素，其最大值分別為K3、K1、K3及K1，四種著色劑各水平間均差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚肝胰臟中GSH含量影響最大的為蝦青素，P值主次順序為萬壽菊粉>加麗素紅>辣椒紅素>蝦青素，其最大值均為K3，且各水平間差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚腎臟中GSH含量影響最大的為萬壽菊粉，P值主次順序為蝦青素>辣椒紅素>加麗素紅>萬壽菊粉，其最大值分別為K1、K3、K3及K1，且各水平間差異顯著（P<0.05）。

（2）飼料中不同著色劑搭配對紅草金魚組織中GST含量的影響

結(jié)果如表6所示，不同的著色劑對紅草金魚GST活性有顯著影響（P<0.05）。血清和肝胰臟中，均以Diet 3處理組最高，且顯著高于其他各組（P<0.05）；腎臟中以Diet 3處理組最高，Diet 7和Diet 8處理組與之差異不顯著（P>0.05），但均顯著高于其他各組（P<0.05）。

結(jié)果如表7所示，四種著色劑中對紅草金魚血清中GST活性影響最大的為萬壽菊粉，P值主次順序為加麗素紅>辣椒紅素>蝦青素>萬壽菊粉，其最大值分別為K3、K3、K1及K1，萬壽菊粉各水平之間差異不顯著（P>0.05），其他三種著色劑各水平間均差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚肝胰臟中GST活性影響最大的為辣椒紅素，P值主次順序為辣椒紅素>蝦青素>萬壽菊粉>加麗素紅，其最大值分別為K3、K1、K3及K3，且各水平間差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚腎臟中GST活性影響最大的為蝦青素，P值主次順序為萬壽菊粉=蝦青素=加麗素紅>辣椒紅素，其最大值分別為K1、K1、K3及K3，加麗素紅各水平之間差異不顯著（P>0.05），其他三種著色劑各水平之間差異顯著（P<0.05）。

（3）飼料中不同著色劑搭配對紅草金魚組織中GOT、GPT活性及其比值的影響

結(jié)果如表8所示，不同的著色劑對紅草金魚GOT、GPT及其比值活性有顯著影響（P<0.05）。血清中，GOT活性在Diet 3處理組最高，與Diet 2處理組差異不顯著（P>0.05），但顯著高于其他各組（P<0.05）；肝胰臟中GOT活性在Diet 3處理組達到最大，且顯著高于其他各組（P<0.05）。血清和肝胰臟中GPT活性均在Diet 3處理組最高，且顯著高于其他各組（P<0.05）。就GOT和GPT的比值來說，血清中其比值在Diet 3處理組最低，顯著低于Diet 8及對照組（P<0.05），肝胰臟中Diet 7處理組顯著降低（P<0.05），其他各組差異不顯著（P>0.05）。

結(jié)果如表9所示，四種著色劑中對紅草金魚血清中GOT活性影響最大的為萬壽菊粉，P值主次順序為萬壽菊粉>蝦青素=辣椒紅素>加麗素紅，其最大值分別為K3、K2、K3及K2，四種著色劑各水平間均差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚肝胰臟中GOT活性影響最大的為加麗素紅，P值主次順序為蝦青素=加麗素紅=辣椒紅素>萬壽菊粉，其最大值分別為K1、K3、K3及K3，且各水平間差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚血清中GPT活性影響最大的為加麗素紅，P值主次順序為加麗素紅>萬壽菊粉=辣椒紅素>蝦青素，其最大值分別為K3、K3、K3及K1，且各水平間差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚肝胰臟中GPT活性影響最大的為加麗素紅，P值主次順序為加麗素紅>辣椒紅素>萬壽菊粉>蝦青素，其最大值分別為K3、K3、K3及K1，且各水平間差異顯著（P<0.05）；對紅草金魚血清中GOT/GPT活性影響最大的為蝦青素，P值主次順序為蝦青素>加麗素紅>辣椒紅素>萬壽菊粉，其最大值分別為K2、K1、K1及K2，蝦青素各水平間差異顯著（P<0.05），其他三種著色劑各水平之間差異不顯著（P>0.05）；對紅草金魚肝胰臟中GOT/GPT活性影響最大的為蝦青素，P值主次順序為蝦青素>加麗素紅>辣椒紅素>萬壽菊粉，其最大值分別為K1、K3、K1及K2，蝦青素、加麗素紅各水平間差異顯著（P<0.05），其他兩種著色劑各水平之間差異不顯著（P>0.05）；

三、討論

1.飼料中不同著色劑搭配對紅草金魚生長的影響

著色劑所含類胡蘿卜素等營養(yǎng)成分豐富，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用廣泛，著色劑的使用不僅能提高水產(chǎn)動物的體色也可顯著提高養(yǎng)殖動物的生長率。劉春東等研究發(fā)現(xiàn)，在鯉魚飼料中添加部分菊花粉麩皮，可以顯著促進鯉魚的生長。王魯波等研究發(fā)現(xiàn)，黃顙魚飼料的最適葉黃素添加量為700 mg/kg。鄴城遠、黃辨非等認為紅辣椒粉有提高養(yǎng)殖對象食欲、助消化、促生長等作用[3-4]。孫劉娟等用不同蝦青素含量的飼料飼喂血鸚鵡，得到了飼料中蝦青素含量為2%-3%時，血鸚鵡增重有所提高，但是持續(xù)效果不強的結(jié)論，同樣的研究結(jié)果也出現(xiàn)在牟文燕等的試驗中。本試驗用添加不同水平的萬壽菊粉、蝦青素、加麗素紅及辣椒紅素飼喂紅草金魚，對生長指標進行分析后發(fā)現(xiàn)，當萬壽菊粉：蝦青素：加麗素紅：辣椒紅素為0.25%：0.06%：0.05%：0.03%時，紅草金魚生長性能顯著提高。其中，蝦青素為紅草金魚生長性能的主要影響因素。

2.飼料中不同著色劑搭配對紅草金魚抗氧化能力的影響

GSH在生物體內(nèi)發(fā)揮著重要的生理功能，諸如：是胞內(nèi)最豐富的抗氧化劑，保護DNA、蛋白質(zhì)和其他生物分子抵抗氧化損傷，通過GST完成解毒功能等。GOT是醫(yī)學臨床上檢查肝功能的重要指標，GPT能夠產(chǎn)生重要的代謝中間產(chǎn)物，在禁食和劇烈運動時，可作用于丙氨酸，促進葡萄糖的生成[10]。本試驗測定了GSH、GST、GOT、GPT活力，并且計算了GOT和GPT的比值，比較發(fā)現(xiàn)Diet 3處理組（萬壽菊粉1.00%、蝦青素0.01%、加麗素紅0.12%、辣椒紅素0.03%）對提高GSH含量、提升GST活力作用顯著，且顯著降低了GOT/GPT比值，對紅草金魚的肝臟來說起到了一定的保護作用，Diet 7處理組（萬壽菊粉0.25%、蝦青素0.06%、加麗素紅0.05%、辣椒紅素0.03%）效果次之。孫學亮等研究了飼料中添加葉黃素對血鸚鵡魚GOT、GPT活性的影響，發(fā)現(xiàn)，0.3%葉黃素與0.1%維生素E搭配可起到保護鸚鵡魚肝胰臟不受損的目的[11]。Nakano[12]用添加紅法夫酵母的飼料飼喂虹鱒，結(jié)果表明，當飼料中法夫酵母添加水平為10.87 g/kg時，虹鱒血清中GOT、GPT含量得到顯著降低。本試驗結(jié)果與以上實驗結(jié)果相似，但是蝦青素添加水平不同，這跟養(yǎng)殖對象不同、著色劑搭配添加物不同有很大的關(guān)系。著色劑對GSH、GST的影響現(xiàn)未見報道，但毋庸置疑，著色劑對紅草金魚的抗氧化能力是有一定的提升作用的。不同組織中影響最大的著色劑種類有所差別，不同著色劑在魚體中的吸收部位不同，作用效果也產(chǎn)有所差距。

四、結(jié)語

本試驗對紅草金魚生長及抗氧化相關(guān)指標進行了測定，綜合結(jié)果看，在本試驗條件下，紅草金魚最適的著色劑搭配比例有兩種，分別是萬壽菊粉：蝦青素：加麗素紅：辣椒紅素為1.00%：0.01%：0.12%：0.03%或萬壽菊粉：蝦青素：加麗素紅：辣椒紅素為0.25%：0.06%：0.05%：0.03%。

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作者簡介：曲木（1990—），女，山東海陽人，初級工程師，碩士研究生，天津現(xiàn)代晨輝科技集團有限公司研發(fā)中心研發(fā)員，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料的研究。

通訊作者：張寶龍，男，天津人，碩士研究生，初級工程師，天津現(xiàn)代晨輝科技集團有限公司研發(fā)中心副主任，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料方面的研究。

基金項目：2016年寶坻區(qū)農(nóng)業(yè)科技重大項目“金魚新型增色環(huán)保飼料的研發(fā)與應(yīng)用”；2017年寶坻區(qū)農(nóng)業(yè)科技重大項目“中國彩鯉、精品金魚養(yǎng)殖技術(shù)的研究與應(yīng)用”；第二批天津市人才發(fā)展特殊支持計劃——高層次創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)團隊項目資助。