PCR檢驗法及細菌培養(yǎng)法在陰道細菌檢驗中的應用比較

劉朝志 向廷健

（1四川省德陽市旌陽區(qū)疾病預防控制中心檢驗科 四川 德陽 618000）(2四川省德陽市旌陽區(qū)人民醫(yī)院檢驗科 四川 德陽 618000）

女性的陰道的細菌檢驗對于女性健康非常重要，陰道細菌感染將直接導致女性的陰道炎，所以女性若遇到陰部不適應及時就醫(yī)，并進行檢查，及時緩解不適，以防造成陰道感染[1]。嚴重時將直接造成女性不孕，還會給女性的妊娠等造成困難。女性的陰道感染主要是由于患者的陰道內(nèi)寄生大量細菌，從而導致陰道內(nèi)環(huán)境不平衡造成各種并發(fā)癥發(fā)生[2]。因此對患者陰道內(nèi)細菌情況進行有效檢測，并根據(jù)具體情況采用相應的治療方法能夠有效改善患者癥狀，臨床常規(guī)采用細菌培養(yǎng)法對其進行檢測，但由于檢測時間較長，操作較為復雜，已逐漸無法應對現(xiàn)今情況。隨著檢驗科學的發(fā)展，采用PCR對患者情況進行檢測逐步被接受，本研究通過對本院的112名女性陰道細菌的檢驗，比較PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法的優(yōu)缺點及這兩種方法的應用價值。檢驗PCR檢驗法的有效性。

1.資料和方法

1.1 臨床資料

將我院在2016年8月至2017年8月診治的112例進行陰道細菌檢測的患者作為研究對象，112例患者年齡范圍25～41歲，平均年齡（30.7±2.6）歲，病程（6～22）個月，平均病程（14.9±4.2）個月。納入標準：（1）患者均為育齡期婦女。（2）獲得患者本人及家屬同意。（3）患者有陰道細菌感染的病灶。排除標準：（1）由于主觀因素排斥治療的患者。（2）哺育期的患者。（3）肝腎肺功能異常的患者。兩組患者的在年齡、病程等其他方面具有可比性(P＞0.05)。

1.2 方法

先使用無菌棉棒涂抹陰道后穹窿部位，收集陰道分泌物，并將陰道分泌物置于無菌生理鹽水中儲存，隨后分別將其進行細菌培養(yǎng)檢驗和PCR檢驗。具體操作方法如下：

PCR檢驗法：收集1ml陰道分泌物于離心管中，離心，離心條件為1200r、15min，隨后棄掉上清液，留下沉淀，并加入組織裂解液，置于水浴鍋，60℃水浴15min，然后再次離心，離心條件為1200r、10min，離心完成后取上清液將其作為PCR的擴增DNA模板，使用PCR儀進行擴增循環(huán)。

細胞培養(yǎng)法：將細菌接種到之前配置好的5%的羊血培養(yǎng)基中，使用涂布的方法，涂布棒要使用熟練，盡量將培養(yǎng)基表面的液體均勻涂抹開。隨后置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時，待長出明顯菌落后，挑選目標菌落。目標菌落程灰白色，水滴狀。使用ATB半自動微生物鑒定藥敏儀以確定B族鏈球菌。

1.3 觀察指標

觀察兩組女性患者的陰道細菌檢驗情況。主要比較兩組患者的陽性檢出率，本研究中主要包括棒球狀菌、加特納菌、腸球菌三種細菌的檢出。

1.4 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)采用SPSS17.0 軟件進行統(tǒng)計學分析。計量資料應用平均值±標準差(±s)，組間比較采用獨立樣本t檢驗，各項指標以百分率表示，采用χ2檢驗。差異具有可比性，（P＜0.05）。

2.結果

2.1 觀察兩組患者陰道細菌的檢驗情況

觀察組患者使用PCR檢驗法，對照組患者使用細菌培養(yǎng)法，觀察組患者的陽性檢出率為72.32%，對照組患者的陽性檢出率為40.18%。觀察組患者的陽性檢出率高出對照組44.44%?？傊?，觀察組患者的陽性檢出率遠高于對照組患者的陽性檢出率，各項差異具有可比性，（P＜0.05）。詳見表。

表 兩組患者使用PCR檢驗法與細菌培養(yǎng)法對女性陰道細菌檢驗結果比較（n，%）

3.討論

近年來，細菌性陰道炎的發(fā)病率有顯著上升趨勢，給患者日常生活帶來較大影響，該病癥主要導致患者出現(xiàn)白帶異味及外陰瘙癢等癥狀，發(fā)病的主要機制為引導內(nèi)菌群平衡被破壞，導致陰道桿菌數(shù)量急劇減少，從而使致病菌所占比例提高，引起癥狀。因此，有效對患者陰道細菌進行檢測，對該癥狀的早期診斷及治療具有重要意義。

對于女性陰道細菌的檢查有兩種方法，包括PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法。細菌培養(yǎng)法長期以來為陰道細菌檢測的“金標準”，能夠較為準確的對患者陰道內(nèi)細菌情況進行檢測，但隨著患者數(shù)量的增加，存在以下不足：（1）操作復雜，采用細菌培養(yǎng)法對培養(yǎng)環(huán)境要求較高，在對致病菌進行培養(yǎng)時，需保證其不被外界病菌所污染；（2）檢測時間長，細菌培養(yǎng)時間一般為48h以上，可能造成對患者治療的延誤；（3）檢測結果需反復印證才能確定。PCR檢驗法又稱聚合酶鏈式檢驗法，該方法是將PCR、DNA分子雜交和光譜精確定量三種技術的融合[3]。PCR檢驗法分為DNA變性成單鏈、降溫結合引物模板成雙鏈DNA、延伸擴增[4]。PCR檢驗法還有多種優(yōu)點，例如：檢驗耗時短、方便有效、操作便捷，是檢驗女性陰道細菌情況的有效方法。

現(xiàn)在醫(yī)學表明，PCR檢驗法是檢驗女性陰道細菌的首選方法，能準確地檢出患者的隱患，及時得到治療，使患者擺脫疾病的痛苦。受到了廣大女性患者的深切擁護。

兩組檢驗均順利完成，觀察組患者使用PCR檢驗法，陽性檢出率為72.32%，遠高于對照組患者使用的細菌培養(yǎng)法的陽性檢出率40.18%，各項差異具有可比性，（P＜0.05）。說明采用PCR對患者陰道細菌進行檢查，能夠有效保證檢測質(zhì)量，同時檢測時間及操作較常規(guī)細菌培養(yǎng)法而言，根據(jù)有優(yōu)勢。

綜上所述，使用PCR檢驗法檢測女性患者陰道細菌感染情況的檢驗效果要比細菌培養(yǎng)法的檢驗效果要好的多。

【參考文獻】

[1]李偉萍,鐘旭軍.PCR檢驗法與細菌培養(yǎng)法應用于陰道細菌檢驗中的價值分析[J/OL].中國生化藥物雜志,2017,(11)：356-357.

[2]郭秋霞,楊俊歌.分析PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果[J].中國療養(yǎng)醫(yī)學,2017,26(10)：1087-1088.

[3]李穎嫦,羅小娟,黃少珍.PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法在陰道細菌檢驗中的應用研究[J].現(xiàn)代診斷與治療,2017,28(07)：1300-1301.

[4]郭燕.PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法在陰道細菌檢驗中的效果對比[J].保健醫(yī)學研究與實踐,2016,13(06)：52-53.