血清唾液酸水平對卵巢癌的診斷效能

曹修娥，欒芳，趙躍然

(1濟南大學山東省醫(yī)學科學院醫(yī)學與生命科學學院，濟南250022； 2山東大學附屬省立醫(yī)院)

卵巢癌在我國發(fā)病率逐年上升，已成為危害女性健康的三大婦科腫瘤之一[1]。卵巢癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療尤為重要。傳統(tǒng)腫瘤標志物如CA125在卵巢癌的篩查、診斷和治療中發(fā)揮了重要作用，但存在很多局限性，如其檢測多采用化學發(fā)光法，試劑費用高，且在早期診斷的敏感度、特異度也較低等[2]。唾液酸(SA)是一系列含9個碳原子羥基化單糖酰化衍生物的統(tǒng)稱，是糖復合物結構和功能多樣化的重要物質基礎,通常位于糖蛋白和糖脂的糖基化非還原末端[3]。當正常細胞受損或發(fā)生惡變時，細胞膜上糖脂合成會增加且轉化異常，從而使其更多地脫落分泌入血，導致腫瘤患者血清SA水平升高[4]。已有文獻[4～9]報道血清SA水平與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉移等密切相關，血清SA水平在肺癌、肝癌、結直腸癌、乳腺癌的診斷中均有一定的價值。但關于SA在卵巢癌中的研究鮮有報道。本研究觀察了卵巢癌患者血清SA水平變化，觀察其診斷卵巢癌的效能?，F(xiàn)將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年1月～2016年10月在山東大學附屬省立醫(yī)院就診的卵巢癌患者254例(卵巢癌組)，年齡8～81歲，平均51.66歲，均經(jīng)卵巢癌切除術后組織病理病理確診，所有患者在標本采集前均未經(jīng)放療及化療治療；卵巢良性疾病患者216例(卵巢良性腫瘤組)，年齡15～76歲，平均 48.23歲，其中卵巢囊腫177例，成熟性囊性畸胎瘤39例；健康對照組為本院體檢中心健康查體女性216例，年齡20～90歲，平均45.68歲。三組年齡分布差異無統(tǒng)計學意義。本研究經(jīng)過山東大學附屬山東省立醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 血清SA檢測方法 三組均于清晨空腹采取靜脈血3 mL，室溫自然凝固后3 200轉/min離心12 min分離血清, 采用Olympic AU5800全自動生化分析儀檢測三組血清SA。SA試劑采用浙江溫州東甌科技有限公司試劑盒，質控品為上海昆淶生物科技有限公司，采用高、低兩個濃度水平；校準品為浙江溫州東甌科技有限公司廠家提供。本研究的實驗室檢測均采用常規(guī)推薦方法。

2 結果

卵巢癌組、卵巢良性腫瘤組及健康對照組血清SA水平分別為(736.59±191.98)、(556.25±66.30)、(550.15±54.68)mg/L，卵巢癌組血清SA水平明顯高于其余兩組，P均<0.05,根據(jù)卵巢癌組與健康對照組的血清SA繪制ROC曲線，曲線下面積0.839，截斷值為622 mg/L(95%CI為0.803～0.875，P<0.001)，其診斷卵巢癌的敏感度為68.11 %(173/254)，特異度為90.74 %(196/216)，陽性預測值89.64%(173/193)，陰性預測值70.76%(196/277)。根據(jù)卵巢癌組與卵巢良性疾病組的血清SA含量繪制ROC曲線，曲線下面積為0.823，截斷值為625mg/L(95%CI為0.785～0.860)，SA區(qū)分卵巢良惡性腫瘤的敏感度66.93%(170/254)、特異度88.43%(191/216)、陽性預測值87.18%(170/195)、陰性預測值69.45 %(191/275)。

以SA=622 mg/L為診斷卵巢癌的臨界值，對卵巢癌組及健康對照組血清標本進行臨床驗證。結果顯示，血清SA診斷卵巢癌的敏感度為70.34%，特異度為91.07%。

3 討論

SA存在于人體各種組織，主要是細胞膜內(nèi)，是真核細胞膜上糖蛋白、糖脂的重要組成部分。其在體內(nèi)的主要存在形式為位于細胞膜糖蛋白以及糖脂寡糖鏈末端殘基端的SA和血中游離型SA 3種，作為細胞膜的一種重要組成成分，正常代謝時血清中SA含量非常穩(wěn)定。結合型SA結合的脂蛋白主要是糖脂，含有SA的糖脂叫做神經(jīng)節(jié)苷脂，在脂蛋白和脂質代謝中發(fā)揮重要的作用[10，11]。在細胞受損以及惡變時，細胞膜上糖脂合成增加及轉化異常會使其更多的脫落或分泌入血，從而導致腫瘤患者血清中SA水平升高[12],因此檢測血清中SA水平可以對腫瘤患者進行篩查、輔助診斷。近年來，研究[12]發(fā)現(xiàn)SA在腫瘤病人血清中明顯升高，其中一項關于口腔鱗癌的研究發(fā)現(xiàn)，SA在癌癥患者血清中明顯升高且與疾病病理級別呈正相關[6]。還有學者報道了SA在肝癌輔助診斷中的臨床價值[9]。另外，也有不少學者報道了SA在胰腺癌、乳腺癌等其他惡性腫瘤中的輔助診斷價值[5,12～15]。

本文通過檢測254例卵巢癌、216例卵巢良性腫瘤和216例健康對照者血清中SA濃度發(fā)現(xiàn)，卵巢癌患者血清中SA水平顯著高于卵巢良性疾病患者和健康對照者，說明SA對卵巢癌的輔助診斷及卵巢良惡性腫瘤的鑒別診斷有一定的應用價值。其中卵巢癌患者血清中SA濃度顯著高于卵巢良性腫瘤患者，可能是由于正常細胞在轉化為惡性腫瘤細胞的過程中，細胞膜上糖脂合成增加以及細胞膜上的糖脂轉化異常并更多的脫落分泌入血，從而導致卵巢癌患者血清中SA濃度顯著增加。

為評價血清SA對卵巢癌的診斷效能，本研究對254例卵巢癌患者和216例健康體檢者血清SA的檢測數(shù)據(jù)繪制了卵巢癌患者SA的ROC曲線，ROC曲線下方的面積為0.839，以Youden指數(shù)(即靈敏度+特異度-1)最大時所對應的點為最佳診斷界值[16]，得出卵巢癌患者SA的最佳診斷臨界值為622 mg/L，進一步計算敏感度68.11%、特異度為90.74%、陽性預測值89.64%、陰性預測值70.76%，可以發(fā)現(xiàn)血清SA診斷卵巢癌有較高的特異度和陽性預測值，分別為90.74 %、89.64%，而敏感度稍低，為68.11%。我們從門診中取的驗證組標本也證明了這一結論。對良性腫瘤組的數(shù)據(jù)繪制ROC曲線, ROC曲線下面積為0.521，與其診斷卵巢癌相比，診斷效能相對較低。由此可以看出，血清SA在診斷卵巢惡性腫瘤方面更具有價值。另外，在惡性腫瘤發(fā)生的早期往往伴隨有炎癥反應，SA是一種急性時相反應蛋白，其與多種炎癥因子相關[17]，也有研究者[18]認為在腫瘤的早期血清SA便可能預測其發(fā)生，因此血清SA可作為一項較好的篩查指標在卵巢癌的早期診斷中發(fā)揮重要的作用。

為探討血清SA在卵巢良惡性腫瘤中的鑒別診斷價值，我們根據(jù)254例卵巢癌患者和216例卵巢良性腫瘤患者血清SA的檢測數(shù)據(jù)繪制ROC曲線，ROC曲線下面積為0.823，以約登指數(shù)(即靈敏度+特異度-1)最大時所對應的點為最佳診斷界值[16]，得出SA鑒別卵巢良惡性腫瘤的最佳臨界值為625 mg/L，進一步計算敏感度66.93%、特異度為88.43%、陽性預測值87.18%、陰性預測值69.45%。由此可以看出，血清SA在鑒別卵巢良惡性腫瘤時具有較高的特異度和陽性預測值，因此，在鑒別卵巢腫瘤良惡性時可發(fā)揮重要的作用。

綜上所述，卵巢癌患者血清SA水平升高。檢測卵巢癌患者血清SA水平有助于卵巢癌的診斷。血清SA檢測方法自動化程度高、簡便快速、試劑費用相對低廉、非侵入等優(yōu)點，其可以作為高危人群卵巢癌篩查的一項較好的指標。如與目前卵巢癌常用的腫瘤標志物CA125和人附睪蛋白4聯(lián)合檢測，可大大提高敏感度與特異度，對診斷卵巢癌有較高的臨床價值。

[1] Jemal A, Tiwari RC, Murray T , et al. Cancer statistics, 2004[J]. CA Cancer J Clin, 2004,54(1):8-29.

[2] Whitehouse C, Solomon E. Current status of the molecular characterization of the ovarian cancer antigen CA125 and implications for its use in clinical screening [J]. Gyne Oncol ,2003,88(1 pt2):152-157.

[3] Wickramasinghe S , Medrano JF. Primer on genes eneoding enz-ymes in sialic acid metabolism in mammals[J]. Biochimie, 2011,93(10):1641-1646.

[4] Cylwik B, Chrostek L, Panasiuk A, et al. Serum total and free sialic acid in patients with chronic liver disease[J]. Clin Chem Lab Med, 2010,48(1):137-139.

[5] Gruszewska E, Chrostek L, Cylwik B, et al . Serum sialic acid as a marker of pancreatic cancers[J].Clin Lab, 2013,59(7-8):781-788.

[6] Dhakar N, Astekar M, Jain M, et al. Total sialic acid, total protein and total sugar levels in serum and saliva of oral squamous cell carcinoma patients : a case control study[J]. Dent Res J(Isfahan), 2013,10:343-347.

[7] Sandhu R, Lal H, Kundu ZS, et al. Serum Fluoride and Sialic Acid Levels in Osteosarcoma[J]. Biol Trace Elem Res, 2011，144(1-3):1-5.

[8] Rajpura KB, Patel PS, Chawda JG, et al. Clinical significance of total and lipid bound sialic acid levels in oral pre-cancerous conditions and oral cancer[J]. J Oral Pathol Med, 2005 ,34(5):263-267.

[9] 王慜杰，嚴翠娥，胡書生，等.血清唾液酸在肝癌患者診療中的臨床應用[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2013,36(7):643-647.

[10] Miyangi T, Yamaguchi K.Human sialidase as a cancer marker[J]. Proteomics，2008，8(16):3303-3011.

[11] Narayanan S. Sialic acid as a tumor marker[J]. Ann Clin Lab Sci, 1994,24(4):376-384.

[12] Chrostek L,Cylwik B, Panasiuk A, et al. Lipid-bound sialic acid(LSA) in liver diseases of different etiologies[J]. Ann Hepatol, 2011,10(2):150-154.

[13] Li PL,Zhang X, Li TF, et al. Combined detection of sialic acid and hydroxyproline in diagnosis of ovarian cancer and its comparison with human epididymis protein 4 and carbohydrate antigen125[J]. Clin Chim Acta, 2015,439(15):148-153.

[14] Ferreira SA, Vasconcelos JL, Cavalcanti CI, et al . Sialic acid differential expression in non-melanoma skin cancer biopsies[J]. Med Mol Morphol, 2013,46(4):198-202.

[15] 田亞軍，齊軍，高春芳，等. 血清唾液酸臨床應用價值和臨床研究中應重視的問題[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2013,36(10)：880-882.

[16] Hanley JA, McNeil BJ. The meaning and use of the area under a receiver operating characteristic (ROC) curve [J]. Radiology, 1982, 143(1):29-36.

[17] Dogan H, Pasaoglu H , Ekinciler OF, et al. A comparative study of total protein , total lipid associated serum sialic acid levels in patients with Beheet′s disease and control groups [J] . Acta Ophthalmol(Copenh), 1992,70(6):790-794 .

[18] Kannagi R . Carbohydrate antigen sialyl Lewis a--its pathophysiological significance and inductionmechanism in cancer progression[J]. Chang Gung Med J，2007，30(3):189-209.