局部組織工程室誘發(fā)組織新生的實(shí)驗(yàn)研究

雷忱　王彪

摘要：目的 探索組織工程室誘導(dǎo)脂肪組織新生的模式。方法 取成年雄性新西蘭大白兔12只，分離背部脂肪瓣將其一半植入背部同期構(gòu)建的組織工程室內(nèi)，1個(gè)月時(shí)，進(jìn)行取材。取腹股溝脂肪瓣作為對照組。結(jié)果 1個(gè)月時(shí)，組織工程室內(nèi)構(gòu)建物未充滿工程室，小室內(nèi)脂肪組織與小室外體積相當(dāng)。使用排水法測量體積為（11.17±1.97）ml，增大（744±132）%。組織學(xué)觀察為成熟的脂肪組織。結(jié)論 脂肪組織工程室不僅能誘導(dǎo)其內(nèi)的脂肪再生。亦可誘導(dǎo)脂肪組織工程室外的脂肪組織再生。

關(guān)鍵詞：組織工程脂肪；軸心血管；組織工程室；脂肪瓣

中圖分類號(hào)：R318 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-1959（2017）26-0034-03

Abstract：Objective To explore the differentiation of adipose tissue of newborn tissue engineering chamber model.Methods 12 adult male New Zealand white rabbits were implanted into the tissue engineering room with the back of the fat flap and the back half of the flap.Rats were killed at 1 month.The inguinal fat flap as the control group.Results At 1 month，the tissue engineering chamber was not filled with engineering chambers，and the fat cells in the chambers corresponded to the small outdoor volume.The drainage volume was（11.17±1.97）ml，an increase of （744±132）%.Histological observation of mature adipose tissue.Conclusion Adipose tissue engineering room can not only induce the fat regeneration inside.Adipose tissue engineering can also induce the regeneration of adipose tissue outside.

Key words：Tissue engineered fat；Axial vessels；Tissue engineering chamber；Fat flap

軟組織缺損的修復(fù)是整形科醫(yī)生面臨的挑戰(zhàn)之一。近年來隨著人工替代材料及自體脂肪移植技術(shù)的發(fā)展，能夠修復(fù)體積較小的軟組織缺損。但是對于諸如乳房、腫瘤切除術(shù)、先天發(fā)育不良或外傷等造成的大體積軟組織缺損，卻依然缺乏可行的解決方案。傳統(tǒng)的金標(biāo)準(zhǔn)皮瓣修復(fù)會(huì)不可避免地造成繼發(fā)供區(qū)缺損，且手術(shù)難度大。組織工程技術(shù)的提出，有望在軟組織缺損領(lǐng)域產(chǎn)生一種全新的修復(fù)方式：使用自身組織修復(fù)缺損的同時(shí)，不造成繼發(fā)的大體積缺損。基于傳統(tǒng)組織工程室三要素的研究雖然能構(gòu)建出由成熟脂肪細(xì)胞構(gòu)成的工程化脂肪。但其體積均為超出1ml，這是由于傳統(tǒng)的組織工程僅通過周圍的組織向支架材料內(nèi)生長的方式重構(gòu)工程化組織的血管。而這樣的新生血管方式在短時(shí)間內(nèi)難以使大體積的工程構(gòu)建物完 成血管化。因此，為了構(gòu)建大體積的工程化組織，其在短時(shí)間內(nèi)的血管化方式被逐漸重視。

2003年，Hofer[1-2]等人通過在剛性硅膠小室內(nèi)引入完整的軸心血管在體內(nèi)構(gòu)建出了體積超過1 ml的新生構(gòu)建物，并將這種技術(shù)命名為組織工程室（TEC）技術(shù)[3]。其后的研究進(jìn)一步指出，組織工程室內(nèi)滲出的纖維蛋白支架決定了最終構(gòu)建物的體積。本實(shí)驗(yàn)室的前期研究也發(fā)現(xiàn)，部分實(shí)驗(yàn)組中，組織工程室外的脂肪組織也出現(xiàn)了體積地?cái)U(kuò)增。并且，這種體積地增大速度高于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身體積速度。基于此，我們提出假說：將組織工程室中滲出液引流至帶軸心血管的脂肪組織能激發(fā)脂肪組織的自發(fā)再生。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

取成年雄性新西蘭大白兔12只，每只體重約2.0～2.2 kg（福建醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供）。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均為SPF級(jí)，層流室內(nèi)飼養(yǎng)。

1.2組織工程室準(zhǔn)備

取邊長2 cm×2 cm×1 cm長方體方體型硅膠模具，并于各側(cè)壁打孔，間隔0.5 cm，并于兩對稱側(cè)壁分別取0.5 cm×0.5 cm方形孔洞，用于工程室放置及引流液引流，完成后高壓消毒備用。

1.3組織工程室模型模型構(gòu)建方法

手術(shù)前1 d，兔背部備毛。手術(shù)當(dāng)天，使用10%水合醛0.3 ml/100 g腹腔注射麻醉，麻醉滿意后，在兔背部正中取5 cm手術(shù)切口，切開至皮下，分離一側(cè)肩胛骨上脂肪瓣，使其與周圍組織充分游離，使用排水法測得脂肪瓣體積后，實(shí)驗(yàn)組將脂肪瓣末端植入預(yù)先高壓消毒的工程室中，調(diào)整位置后絲線固定于兔背部。取兔腹股溝3 cm切口，分離修剪腹股溝脂肪瓣，使用排水法測得脂肪瓣體積后，調(diào)整位置后絲線固定于兔背部。

1.4形態(tài)學(xué)及免疫組化染色

分別于14 d、28 d時(shí)完整切取組織工程室內(nèi)工程化組織，保存于多聚甲醛固定24 h，然后石蠟包埋切片，行蘇木素-伊紅（HE）染色。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

計(jì)量資料以（x±s）表示，應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，組間比較采用隨機(jī)資料單因素方差分析，以P<0.05為差異學(xué)有統(tǒng)計(jì)意義。

2 結(jié)果endprint