早產(chǎn)兒血液中Notch3的變化對(duì)支氣管肺發(fā)育不良早期診斷價(jià)值的研究

陳穎　張金鳳　麥麗珊

[摘要]目的 探討早產(chǎn)兒血液中Notch 3的變化對(duì)支氣管肺發(fā)育不良（BPD）的早期診斷價(jià)值。方法 回顧性分析佛山市婦幼保健院2016年1月～2017年2月接收的胎齡27～32周，存活28 d以上的患兒78例，其中患有BPD 23例，非BPD患兒55例，將BPD患兒組設(shè)定為觀察組，將同期在新生兒科診治的、與BPD組患者胎齡性別相匹配、未診斷BPD的患兒設(shè)為對(duì)照組。測(cè)定兩組患兒體內(nèi)Notch 3表達(dá)情況。結(jié)果 觀察組患兒在第7、14、21天體內(nèi)Notch 3值逐漸增加，且顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 BPD的發(fā)病過(guò)程中存在Notch 3高表達(dá)，Notch 3值對(duì)BPD有較高的早期診斷價(jià)值。

[關(guān)鍵詞]支氣管肺發(fā)育不良；早產(chǎn)兒；Notch 3；早期診斷

[中圖分類(lèi)號(hào)] R722.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）1（a）-0082-03

[Abstract]Objective To investigate the value of Notch 3 in the blood of preterm infants in the early diagnosis of bronchopulmonary dysplasia （BPD）.Methods A total of 78 patients with gestational age of 27 to 32 weeks received in Maternal and Child Health Hospital of Foshan City from January 2016 to February 2017 were recorded.There were 23 patients with BPD and 55% of non-BPD children.The BPD group was set as the observation group，and the children who had not been diagnosed with BPD were matched with the gestational age of BPD group in the neonatal department.The expression of Notch 3 in the two groups was measured.Results The values of Notch 3 in the observation group were significantly higher than those in the control group，and the difference between the observation group and the control group was statistically significant （P<0.05）.Conclusion Notch 3 is highly expressed in the pathogenesis of BPD，and Notch 3 has a high early diagnostic value for BPD.

[Key words]Bronchopulmonary dysplasia；Premature children；Notch 3；Early diagnosis

隨著新生兒重癥監(jiān)護(hù)技術(shù)的迅速發(fā)展，越來(lái)越多的早產(chǎn)兒和極低出生體質(zhì)量?jī)海╲ery low birth weight infant ）得以存活，支氣管肺發(fā)育不良（BPD）成為引起早產(chǎn)兒疾病和死亡的重要原因，是早產(chǎn)兒最常見(jiàn)的遠(yuǎn)期并發(fā)癥之一[1]。在存活者中BPD延長(zhǎng)了住院時(shí)間，增加了再入院和神經(jīng)發(fā)育障礙的風(fēng)險(xiǎn)。在BPD放置肺表面活性物質(zhì)（pulmonary surfactant）替代治療、新的機(jī)械通氣策略、限制液體輸入和利尿劑的使用、最優(yōu)化的營(yíng)養(yǎng)支持及對(duì)動(dòng)脈導(dǎo)管未閉（patent ductus arteriosus）的積極處理均已取得共識(shí)，糖皮質(zhì)激素的使用仍是目前最具爭(zhēng)議的領(lǐng)域[2]。探尋BPD的早期預(yù)測(cè)因子，適時(shí)阻斷BPD的發(fā)病進(jìn)程，減少BPD的發(fā)生發(fā)展尤為重要。早產(chǎn)兒出生后正常的肺泡發(fā)育程序被打亂，最終可導(dǎo)致肺泡組織學(xué)上的單一化及同質(zhì)異構(gòu)性，肺組織從囊泡期向肺泡期的發(fā)育受到阻滯，從而出現(xiàn)BPD的新特征肺發(fā)育停滯[3]。Notch家族由一組高度保守蛋白質(zhì)組成。Notch信號(hào)參與胚胎發(fā)育、血管損傷修復(fù)、血管重構(gòu)，在肺發(fā)育過(guò)程中動(dòng)態(tài)表達(dá)。有研究提示Notch3與肺微血管形態(tài)異常相關(guān)。本研究對(duì)早產(chǎn)兒不同時(shí)段血液中Notch 3含量進(jìn)行測(cè)定，分析其對(duì)BPD早期診斷的價(jià)值，為BPD早期干預(yù)提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

回顧性分析我院2016年1月～2017年2月接收的胎齡27～32周，存活28 d以上的患兒共78例，其中患有BPD 23例，非BPD患兒55例，將BPD患兒設(shè)定為觀察組，將同期在新生兒科診治的、與BPD組患者胎齡性別相匹配、未診斷BPD的患兒設(shè)為對(duì)照組。BPD診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《實(shí)用新生兒學(xué)》3版：1 min阿氏評(píng)分8～10分，不伴有先天性心臟病、氣漏、肺動(dòng)脈高壓、ARDS、缺氧缺血性腦病、BPD等其他病變[4]，任何氧依賴(lài)（>21%）超過(guò)28 d的新生兒。排除情況：①先天明顯畸形，合并先天性心臟病等，神經(jīng)系統(tǒng)與呼吸系統(tǒng)發(fā)育明顯畸形；②遺傳有先天性代謝疾病；③重要資料缺失；④染色體明顯異常；⑤其他器官功能障礙。入組所有患兒均不在排除條件之內(nèi)，所有受試者監(jiān)護(hù)人對(duì)本研究知情，本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法

標(biāo)本采集及測(cè)量：所有患兒在出生后的第7、14、21天留取血液樣本，使用ELISA方法檢測(cè)Notch 3含量。endprint

治療方案：使用經(jīng)鼻持續(xù)氣道正壓通氣（NCPAP）或呼吸機(jī)進(jìn)行輔助通氣，并應(yīng)用PS，逐漸變?yōu)榈土髁课酰詈笸Ｖ刮?，適當(dāng)限制液體入量，感染者根據(jù)藥敏試驗(yàn)及用藥經(jīng)驗(yàn)選擇合適的抗生素，對(duì)出現(xiàn)呼吸暫停的患兒使用氨茶堿（石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H13021033）或咖啡因，輸紅細(xì)胞懸液糾正貧血等綜合治療手段[5]。

1.3觀察指標(biāo)及標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)患兒出生后第7、14、21 d體內(nèi)的Notch 3值進(jìn)行測(cè)量。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS l6.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

觀察組患兒在7、14、21 d體內(nèi)Notch 3值逐漸增加，且顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

3討論

早產(chǎn)兒的肺部發(fā)育往往正處于管道形成期結(jié)束和囊泡期的開(kāi)始，且體內(nèi)抗氧化酶活性低下，對(duì)于活性氧代謝產(chǎn)物清除不足，出生后也更容易暴露于高氧濃度、炎癥反應(yīng)、感染、氣壓傷等不利的生長(zhǎng)環(huán)境中，各種因素導(dǎo)致急性肺損傷后果，且損傷后修復(fù)過(guò)程同樣出現(xiàn)異常[6]。肺組織從囊泡期向肺泡期的發(fā)育受到阻滯，從而出現(xiàn)BPD的新特征肺發(fā)育停滯[7]。新型BPD病理改變以肺泡和肺微血管發(fā)育不良為主要特征，表現(xiàn)為肺泡數(shù)目減少、體積增大、肺泡結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單化，肺微血管形態(tài)異常，并可見(jiàn)持續(xù)炎癥反應(yīng)，而肺泡和氣道損傷以及纖維化較輕[8]。

Notch家族是由一組高度保守的蛋白質(zhì)組成，其信號(hào)途徑通過(guò)局部細(xì)胞間相互作用，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞間通訊、胞漿內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及核內(nèi)轉(zhuǎn)錄，從而控制細(xì)胞的增殖、分化、凋亡、遷移及黏附等，在機(jī)體的整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程的調(diào)控中發(fā)揮著重要的作用[9]。Notch信號(hào)參與胚胎發(fā)育、血管損傷修復(fù)、腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程中的血管重構(gòu)，在肺發(fā)育過(guò)程中呈動(dòng)態(tài)表達(dá)，并可能在調(diào)控肺泡上皮、血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化、發(fā)育中起關(guān)鍵作用[10]。有研究報(bào)道應(yīng)用γ分泌酶抑制劑DPAT抑制Notch信號(hào)通路后，能抑制血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的肺血管重構(gòu)，降低肺動(dòng)脈壓力，為肺動(dòng)脈高壓的治療提供了新思路[11]。有學(xué)者的研究表明：肺動(dòng)脈高壓小鼠的肺動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)Notch 3蛋白過(guò)度表達(dá)，且肺動(dòng)脈高壓病情的嚴(yán)重程度與肺內(nèi)Notch 3蛋白表達(dá)量具有正相關(guān)性；通過(guò)對(duì)基因敲除Notch 3的小鼠模型研究后發(fā)現(xiàn)缺失Notch 3的小鼠不會(huì)罹患肺動(dòng)脈高壓；使用γ分泌酶抑制劑阻斷Notch 3活化，可逆轉(zhuǎn)小鼠肺動(dòng)脈高壓[12]。這些研究都說(shuō)明Notch 3信號(hào)與肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生關(guān)系密切，也提示Notch 3與肺微血管形態(tài)異常相關(guān)。

肺動(dòng)脈高壓是發(fā)生肺血管疾病的重要環(huán)節(jié)，主要特征為動(dòng)脈平滑肌的細(xì)胞增殖，血管阻力升高等。在肺部發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期，肺部循環(huán)的各類(lèi)損傷容易導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓[13-14]。通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Notch 3通過(guò)Hes 5等方式參與肺部動(dòng)脈平滑肌的增殖和肺部血管重構(gòu)，肺部血管中Notch 3活化程度與蛋白質(zhì)的表達(dá)量和肺部動(dòng)脈高壓嚴(yán)重程度成正相關(guān)關(guān)系[15-16]。

本研究觀察組患兒Notch 3的表達(dá)情況在整個(gè)病程中動(dòng)態(tài)變化，從第7天開(kāi)始持續(xù)升高，第21天仍處于高值。Notch 3的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程與BPD疾病的發(fā)病過(guò)程相符，推測(cè)隨著Notch 3表達(dá)的升高，肺動(dòng)脈壓力相對(duì)高，肺部動(dòng)脈平滑肌增殖和肺部血管重構(gòu)，肺泡發(fā)育受阻。BPD組第7天Notch 3即已高表達(dá)，提示該組患兒出生后不久即有BPD發(fā)病傾向。因此，在胎齡較小的早產(chǎn)兒早期通過(guò)檢測(cè)Notch 3預(yù)判BPD發(fā)生，采取有效的綜合防治措施，降低疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

本研究?jī)H檢測(cè)血液中Notch 蛋白高表達(dá)，組織病理學(xué)等方面的研究尚存在較大的局限性，有待于多中心、大樣本的研究論證。

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（收稿日期：2017-09-25 本文編輯：崔建中）endprint