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    不同預(yù)處理及光照條件對黃芪種子萌發(fā)的影響

    2018-03-03 07:30:09許陶瑜郭淑紅田洪嶺吳昌娟郝耀鵬裴帥帥
    山西農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年2期
    關(guān)鍵詞:赤霉素培養(yǎng)皿發(fā)芽勢

    許陶瑜 ,郭淑紅 ,田洪嶺 ,吳昌娟 ,郝耀鵬 ,裴帥帥

    (1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所,山西 汾陽 032200;2.山西大學(xué)生物工程學(xué)院,山西 太原 030006)

    黃芪是黃芪屬植物,別名綿芪,為多年生植物,植株高1 m左右。其干燥根藥用,主要分布在山西、內(nèi)蒙古、甘肅、黑龍江等地[1]。黃芪是珍貴的中藥材,廣泛應(yīng)用于中成藥。黃芪含有酮類、皂苷及多種微量元素,因性溫和,是補氣養(yǎng)血的圣藥[2-3]。由于過度采集,野生資源幾近枯竭,無法滿足市場需求。大面積栽培黃芪成為解決黃芪藥材不足的有效途徑[4]。

    在栽培黃芪過程中,黃芪種子硬實及內(nèi)源抑制物質(zhì)的存在導(dǎo)致黃芪發(fā)芽率極低,大約只有20%,嚴重制約了黃芪的大規(guī)模種植和生產(chǎn)。如何打破黃芪種子的休眠、提高發(fā)芽率,是實現(xiàn)黃芪規(guī)?;a(chǎn)的重要途徑[5-9]。近年來,有關(guān)黃芪的研究主要集中在化學(xué)有效成分、藥理作用[10-11]等方面,對黃芪種子處理主要是采用浸種、沙培等方法,這些方法大大提高了黃芪的發(fā)芽率,然而關(guān)于黃芪種子萌發(fā)的光照條件卻鮮有報道。

    本研究設(shè)置了7個黃芪種子預(yù)處理[9-12],分別在全光照和全黑暗條件下進行萌發(fā)試驗,進而篩選黃芪萌發(fā)的適宜條件和光照,為黃芪生產(chǎn)實踐中的繁育和育苗栽培提供參考。

    1 材料和方法

    1.1 試驗材料

    供試材料為采自山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所藥材基地的當(dāng)年生蒙古黃芪種子,其千粒質(zhì)量為6.52 g,種子經(jīng)山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所田洪嶺研究員鑒定。

    1.2 試驗方法

    將黃芪種子浸泡在高壓滅菌鍋中滅菌10min[13],然后用清水沖洗后取出,對黃芪種子進行不同方法的預(yù)處理。試驗共設(shè)7個預(yù)處理:處理A1.環(huán)割法,去除黃芪中的雜質(zhì),將黃芪種子浸泡15 min后,用解剖刀輕輕環(huán)割種子,以不傷害胚為宜;處理A2.沙培法,將黃芪種子與沙按照1∶3~4混合均勻,放在研缽中充分研磨,直到黃芪種子的釉質(zhì)變暗為止;處理A3.清水浸種法,即將黃芪種子置于蒸餾水中常溫浸泡24 h;處理A4.硫酸浸種法,將黃芪種子置于65%硫酸溶液中浸泡1 h,再在流水中清洗種子3~4次;處理A5.赤霉素浸種法,將黃芪種子置于200 mg/kg赤霉素溶液浸種18 h,在流水中清洗種子3~4次;處理A6.雙因素組合浸種法,將黃芪種子先置于65%硫酸溶液浸泡1 h[12,14],在流水中清洗種子3~4次后,再置于200 mg/kg赤霉素溶液浸種18 h,然后再在流水中清洗種子3~4次;處理A7.對照,未作任何處理(CK)。

    將經(jīng)過不同預(yù)處理的種子晾干待用。將備好的種子放在鋪好2張濾紙的培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)皿直徑20 cm,每個培養(yǎng)皿放置種子100粒,然后將培養(yǎng)皿放到人工智能氣候恒溫箱中培養(yǎng),光照條件為全光照(光強 5 000 lx)(B1)和全黑暗(B2),每天 17:00更換蒸餾水和濾紙,同時觀察統(tǒng)計各培養(yǎng)皿發(fā)芽數(shù),將發(fā)霉變質(zhì)的種子去掉,20 d后結(jié)束[15-17],不同方法的預(yù)處理和光照條件分別重復(fù)3次。

    1.3 測定項目及方法

    每天觀察并記錄培養(yǎng)皿中的種子當(dāng)日發(fā)芽數(shù),第10天作為統(tǒng)計發(fā)芽勢的截止日,第20天為統(tǒng)計種子發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)的截止日。計算黃芪種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)。

    發(fā)芽率=發(fā)芽率統(tǒng)計截止日培養(yǎng)皿中種子發(fā)芽總數(shù)/培養(yǎng)皿中供試種子數(shù)×100%;發(fā)芽勢=發(fā)芽勢統(tǒng)計截止日培養(yǎng)皿中種子發(fā)芽總數(shù)/培養(yǎng)皿中供試種子數(shù)×100%;發(fā)芽指數(shù)=∑Gt/Dt。其中,Gt表示不同天數(shù)內(nèi)種子發(fā)芽數(shù),Dt表示發(fā)芽日數(shù)。

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    試驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0,Excel2010和SigmaPlot進行統(tǒng)計分析。不同處理間的顯著性按照LSD法在95%置信水平下進行檢驗。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 全光照和全黑暗條件下不同預(yù)處理對黃芪種子發(fā)芽的影響

    由表1可知,在全光照條件下和全黑暗條件下,不做預(yù)處理的黃芪種子各項指標(biāo)都最低。在各項預(yù)處理中,雙因素組合浸種法(A6)各項指標(biāo)最高。發(fā)芽率方面,不同預(yù)處理間差異顯著,不同處理發(fā)芽率高低順序為A6>A5>A3>A4>A1>A2>A7(CK),與對照相比,不同處理均可以顯著提高發(fā)芽率,其中,雙因素組合浸種法(A6)對黃芪發(fā)芽率的提高最大,其次為赤霉素浸種法(A5);雙因素組合浸種法(A6)發(fā)芽勢最高,即雙因素組合浸種法不僅可以提高黃芪總的發(fā)芽率,而且可以提早打破黃芪休眠,促進黃芪提早發(fā)芽;不同預(yù)處理間發(fā)芽指數(shù)也存在顯著差異,預(yù)處理A6,A5的發(fā)芽指數(shù)顯著高于其他處理,說明赤霉素的存在可以提早打破休眠,促進黃芪種子提早發(fā)芽。

    表1 不同光照條件下預(yù)處理黃芪種子的發(fā)芽結(jié)果

    2.2 不同預(yù)處理和光照條件對黃芪種子發(fā)芽率影 響的方差分析

    表2 黃芪發(fā)芽率的方差分析

    表3 黃芪發(fā)芽勢的方差分析

    表4 黃芪發(fā)芽指數(shù)的方差分析

    由表2~4可知,通過對黃芪發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)的方差分析,變異來源為光照因素時,均有F<F0.01,表明全光照和全黑暗條件對黃芪種子萌發(fā)的影響不顯著[18-19]。黃芪種子發(fā)芽對光照不敏感,屬于光不敏感型。

    3 討論與結(jié)論

    導(dǎo)致黃芪種子發(fā)芽率低的2個因素是黃芪種皮硬實和種內(nèi)內(nèi)源抑制物質(zhì)的存在。可以通過機械破種、浸種、化學(xué)處理等方法對黃芪種子進行預(yù)處理來提高黃芪種子發(fā)芽率[20-21]。本研究結(jié)果表明,環(huán)割法、沙培法、清水浸種法、硫酸浸種法、赤霉素浸種法和雙因素組合浸種法均可大幅提高黃芪種子發(fā)芽率,其中,環(huán)割法、沙培法可以打破黃芪種皮的物理限制,浸種法可能是由于浸泡溶解了黃芪種子內(nèi)的水溶性抑制物質(zhì),解除了內(nèi)源物質(zhì)對種子萌發(fā)的抑制,從而提高了黃芪種子發(fā)芽指數(shù),提高了出苗率;雙因素組合浸種法發(fā)芽率高的原因可能是由于硫酸浸泡軟化了黃芪種皮,赤霉素浸泡溶解了部分黃芪內(nèi)源抑制物質(zhì),同時促進了胚的萌發(fā)。

    本研究表明,不同的物理和化學(xué)處理方法均可以打破黃芪種子的休眠,雙因素組合浸種法與清水浸種法間黃芪種子萌發(fā)率達到顯著水平。在生產(chǎn)實踐中,可以采用在200 mg/kg赤霉素溶液浸種18 h的方法來提高黃芪種子的發(fā)芽率,清水浸泡24 h也可以作為黃芪規(guī)?;耘喾N子處理的常規(guī)方法之一。

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    [4]秦雪梅,李震宇,孫海峰,等.中國黃芪藥材生產(chǎn)現(xiàn)狀與分析[C]//中國植物學(xué)會第十五屆會員代表大會暨八十周年學(xué)術(shù)年會論文集.北京:中國植物學(xué)會,2013.

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