江西省269例臍血染色體核型臨床分析

王欣榮，劉艷秋

(江西省婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心，南昌 330006)

染色體疾病是導(dǎo)致胎兒出生后智力低下、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩的常見(jiàn)原因之一，是嚴(yán)重的先天性疾病，且目前缺乏有效的治療方法[1]。因此通過(guò)產(chǎn)前診斷及時(shí)發(fā)現(xiàn)并阻止有染色體疾病胎兒兒的出生是優(yōu)生工作的重點(diǎn)。由于絨毛穿刺和羊水穿刺的手術(shù)時(shí)間均有孕周的限制，而臍血穿刺的手術(shù)時(shí)間受孕周限制較小，因此對(duì)于較大孕周（孕22周以上）的有產(chǎn)前診斷指征的孕婦行臍血染色體檢查已成為一種不可或缺的產(chǎn)前診斷方式。我中心自2014年在江西省率先開(kāi)展臍血穿刺手術(shù)以來(lái)，已陸續(xù)為多例孕婦行臍血穿刺及染色體核型分析，本文對(duì)269例臍血染色體核型結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，探討臍血染色體異常核型與產(chǎn)前診斷各指征的關(guān)系，從而為今后的產(chǎn)前診斷工作提供客觀的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年1月-2017年8月在我院就診具有臍血穿刺指征、自愿行臍血穿刺產(chǎn)前診斷的孕婦277例，年齡為18-45歲，孕周為24-30周。我們將臍血穿刺產(chǎn)前診斷的指征分為8組，分別是：高齡（≥35歲）、唐氏征篩查高風(fēng)險(xiǎn)、NIPT陽(yáng)性、不良生育史、羊水染色體核型分析提示嵌合體、夫婦一方為染色體異常攜帶者、孕期不良接觸史、孕中期或孕晚期B超胎兒異常，例如：心臟結(jié)構(gòu)畸形，心室強(qiáng)光斑，脈絡(luò)叢囊腫，腦室增寬，頸部皮膚層增厚，四肢畸形，唇腭裂，宮內(nèi)發(fā)育遲緩，羊水過(guò)多或過(guò)少，鼻骨短小或缺失，腸管回聲增強(qiáng)，胎兒水腫等情況。

1.2 方法 在無(wú)菌條件下，在B超引導(dǎo)下，經(jīng)腹壁進(jìn)行臍血穿刺，抽取臍血2ml，注入無(wú)菌肝素鈉管中送實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行常規(guī)染色體培養(yǎng)、制片、G顯帶，計(jì)數(shù)30個(gè)分散好、中等長(zhǎng)度的中期分裂相染色體，用德國(guó)萊卡公司染色體自動(dòng)分析儀分析3-5個(gè)核型，發(fā)現(xiàn)嵌合體時(shí)，計(jì)數(shù)100個(gè)核型后計(jì)算比例。根據(jù)國(guó)際人類細(xì)胞遺傳學(xué)命名體系(ISCN2009)描述染色體核型。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 將數(shù)據(jù)錄入excel，數(shù)據(jù)分析采用率和構(gòu)成比表示。采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間計(jì)數(shù)和計(jì)量資料比較分別行χ2和t檢驗(yàn)，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 臍血穿刺不同指征異常染色體核型檢出情況臍血細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)277例，8例培養(yǎng)不成功，培養(yǎng)成功率為97.11%。符合衛(wèi)生部產(chǎn)前診斷實(shí)驗(yàn)室關(guān)于臍血細(xì)胞培養(yǎng)的要求。共發(fā)現(xiàn)異常核型59例，異常核型檢出率為21.93%。其中NIPT陽(yáng)性異常染色體核型檢出率最高，為78.57%，而B(niǎo)超胎兒異常染色體異常核型檢出例數(shù)最多，為45例。臍血穿刺各指征染色體異常檢出情況具體情況見(jiàn)表1。

2.2 異常染色體核型類型分析 59例異常核型中，染色體數(shù)目異常最多，為26例，占44.07%，而其中21三體19例，占32.20%。其次是染色體多態(tài)性，為17例，占28.81%。結(jié)構(gòu)異常中以倒位最多，是5例，占8.47%。具體見(jiàn)表2。

3 討論

3.1 臍血穿刺術(shù)在產(chǎn)前診斷中的價(jià)值 產(chǎn)前診斷就是對(duì)胎兒進(jìn)行先天缺陷和遺傳性疾病的診斷。其目的不僅為符合產(chǎn)前診斷指征的孕婦提供可靠的信息，使她們能夠在妊娠期間對(duì)胎兒的去留作出適當(dāng)?shù)倪x擇，而且對(duì)于B超已確定畸形的胎兒進(jìn)行染色體分析，還可以協(xié)助醫(yī)生對(duì)孕婦的下次妊娠進(jìn)行有效指導(dǎo)。由于臍血穿刺術(shù)相比絨毛穿刺和羊水穿刺術(shù)，具有⑴較大的孕周適用范圍，孕22-32周；⑵較快的出具染色體核型結(jié)果：臍血從手術(shù)取樣到出具染色體核型分析報(bào)告一般一周即可，較絨毛和羊水的時(shí)間要縮短很多；⑶培養(yǎng)成功率和特異性高：可對(duì)絨毛或羊水中培養(yǎng)失敗進(jìn)行補(bǔ)救，也可對(duì)絨毛或羊水中培養(yǎng)中出現(xiàn)的嵌合現(xiàn)象進(jìn)行確診等優(yōu)點(diǎn)，因此對(duì)于孕中期錯(cuò)過(guò)唐氏篩查或羊水穿刺的高危孕婦，和孕中晚期B超提示胎兒異常的孕婦，以及絨毛及羊水培養(yǎng)失敗或培養(yǎng)出現(xiàn)嵌合體時(shí)，行臍血穿刺進(jìn)行染色體核型分析就顯得尤為重要[2]。

表1 臍血穿刺各指征染色體檢出情況

表2 染色體異常核型分類

3.2 胎兒異常核型分布分析 本中心臍血染色體異常核型檢出率為21.93%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國(guó)內(nèi)郭小寶等[3]報(bào)道5.5%的異常率，可能因?yàn)槲覀冄芯康臉颖纠锎蟛糠侄际荁超胎兒異常的高危孕婦，而且我們將染色體多態(tài)性也歸類為異常核型，所以異常檢出率較高。在檢出的59例異常核型中，三體檢出率最高，占異常核型的44.07%(26/59)，其中21-三體19例、18-三體5例，13三體1例，說(shuō)明三體核型仍然是胎兒最常見(jiàn)的異常核型，三體中又以21-三體為主，這與國(guó)內(nèi)外的報(bào)道一致[4]。NIPT是運(yùn)用高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)母血內(nèi)胎兒游離DNA的一種新技術(shù)，目前主要用于胎兒21-三體、18-三體、13-三體的產(chǎn)前檢測(cè)，也用于性染色體的非整倍體的檢測(cè)。本中心對(duì)14例NIPT檢測(cè)高風(fēng)險(xiǎn)的的孕婦行臍血穿刺染色體核型分析，發(fā)現(xiàn)11例異常核型 （檢出率78.57%）：其中8例21三體高風(fēng)險(xiǎn)，臍血確診6例（檢出率75%）；1例NIPT18三體高風(fēng)險(xiǎn)，確診1例（檢出率100%）；2例性染色體高風(fēng)險(xiǎn)，確診2例 （檢出率100%）；3例其他異常（NIPT提示染色體微缺失或微重復(fù)或提示其他染色體數(shù)目異常等），確診1例（檢出率33.33%）。本中心的NIPT 21三體高風(fēng)險(xiǎn)經(jīng)過(guò)臍血染色體檢查，符合率僅75%，較國(guó)內(nèi)其他中心明顯偏低[5]，主要原因可能跟樣本數(shù)較少有關(guān)。胎兒超聲檢查在產(chǎn)前診斷中有著重要的作用，特別是超聲檢查異常往往提示胎兒染色體異常的可能性較大，如本中心對(duì)246例妊娠中晚期超聲提示異常的孕婦行臍帶穿刺，發(fā)現(xiàn)45例異常核型，檢出率18.29%，在8組臍血穿刺指征中異常染色體檢出率排第二位。其中28例是染色體數(shù)目異常和結(jié)構(gòu)異常，另外17例是染色體多態(tài)性，檢出率為6.91%。染色體多態(tài)是一種常見(jiàn)的染色體結(jié)構(gòu)變異，在人群中的攜帶率為2.6%[6]，主要是指染色體結(jié)構(gòu)或帶型強(qiáng)度的微小變異，常涉及遺傳上相對(duì)不活躍、含高度重復(fù)DNA結(jié)構(gòu)的異染色質(zhì)區(qū)。以往的觀點(diǎn)認(rèn)為，染色體多態(tài)屬于正常形態(tài)變異，不引起表型和功能的異常，因而不具有臨床意義。但最近幾年越來(lái)越多的研究表明，染色體多態(tài)性與反復(fù)稽留流產(chǎn)、胎死宮內(nèi)、生育畸形兒、男性少精、弱精或無(wú)精、女性不孕等生殖異常有一定相關(guān)性[6，7]。本文B超胎兒異常中染色體多態(tài)檢出率為6.91%，較普通人群攜帶率（2.6%）明顯要高很多，提示我們要對(duì)B超胎兒異常合并染色體多態(tài)的情況引起重視，要密切觀察和隨訪。我們相信，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和發(fā)展，染色體多態(tài)性作用機(jī)理及遺傳效應(yīng)將得到進(jìn)一步了解，為產(chǎn)前診斷提供更好的理論依據(jù)。

綜上，近幾年隨著新技術(shù)如NIPT和四維彩超在醫(yī)院越來(lái)越普及，尤其是四維彩超在臨床的大規(guī)模使用，越來(lái)越多的胎兒結(jié)構(gòu)異常在妊娠中晚期即被發(fā)現(xiàn)，如本研究收集269例中就有多達(dá)246例因此原因來(lái)我院就診，而臍血穿刺術(shù)相對(duì)絨毛取樣及羊水穿刺而言，具有適用孕周廣泛、過(guò)程簡(jiǎn)便快速等優(yōu)點(diǎn)，將在今后的產(chǎn)前診斷工作中發(fā)揮更大的作用。