糧油中真菌毒素檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用

◎ 石曉敏，丁 亮

（1.南京糧食集團(tuán)有限公司，江蘇 南京 210000；2.南京市高淳區(qū)綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心，江蘇 南京 210000）

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和科學(xué)技術(shù)水平的提高，糧油的檢測(cè)技術(shù)也在發(fā)生變化，而真菌毒素檢測(cè)作為糧油檢測(cè)中的重要技術(shù)，如何提高技術(shù)水平成為其中的關(guān)鍵，目前糧油真菌毒素的檢測(cè)技術(shù)大致有薄層色譜法（TLC）、酶聯(lián)免疫法（ELISA）、液相色譜法（LC）、儀器分析法、免疫分析法、氣相色譜法（GC）及色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等[1-2]，因此，通過對(duì)真菌毒素檢測(cè)技術(shù)的研究，為糧油檢測(cè)技術(shù)提供策略，對(duì)保障國(guó)家糧食質(zhì)量安全，保護(hù)人類身體健康具有極其重大意義。

1 真菌毒素檢測(cè)技術(shù)

真菌毒素是糧油中存在的真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝，對(duì)糧油的質(zhì)量有不利影響，真菌毒素有黃曲霉毒素（APT）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、赭曲霉毒素A（OTA）、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）等，具有強(qiáng)致癌、致畸、致突變性，導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)生流產(chǎn)、死胎。糧食被這些真菌毒素污染后，通過食物鏈作用進(jìn)入人和動(dòng)物體內(nèi)，嚴(yán)重威脅著人和動(dòng)物的健康，故此，糧油需要進(jìn)行真菌毒素的檢測(cè)，進(jìn)而保障糧油的技術(shù)，避免出現(xiàn)問題。

2 糧油中真菌毒素檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用

2.1 免疫分析法

在糧油的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)中，免疫分析法是一種主要檢測(cè)技術(shù)。主要通過采用抗原和抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)以及抗體或抗原上標(biāo)記物的信號(hào)放大作用，實(shí)現(xiàn)對(duì)微量殘留物的定性定量檢測(cè)，這種檢測(cè)技術(shù)較為便捷、檢測(cè)的靈敏度高，因此成為常用的檢測(cè)技術(shù)[3]。

2.1.1 酶聯(lián)免疫吸附法

酶聯(lián)免疫吸附法主要借助抗原與抗體的特異性反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接，之后加入底物，酶與底物發(fā)生顯色反應(yīng)，在特定波長(zhǎng)下測(cè)定反應(yīng)體系的吸光度，從而實(shí)現(xiàn)待測(cè)物的定量檢測(cè)。該檢測(cè)技術(shù)在檢測(cè)的過程中對(duì)檢測(cè)人員的要求較低，操作便捷，儀器設(shè)備也簡(jiǎn)單，因而在糧油的真菌毒素檢測(cè)中經(jīng)常使用。

2.1.2 膠體金免疫分析法

膠體金免疫分析法主要借助多余金標(biāo)記抗體的分析，進(jìn)行對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，這種分析方法主要是通過質(zhì)控線顯色與否判斷試紙條的有效性，通過檢測(cè)線顯色深淺判斷樣品提取液中真菌毒素含量，進(jìn)而對(duì)糧油的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)。

2.1.3 放射免疫分析技術(shù)

放射免疫分析技術(shù)主要是借助放射性的同位素為標(biāo)記物標(biāo)記標(biāo)準(zhǔn)物品，之后與糧油樣品進(jìn)行混合，加入定量特異性抗體，使其形成競(jìng)爭(zhēng)性抑制，這種檢測(cè)方法在檢測(cè)的過程中易造成污染，影響其他糧油的質(zhì)量，同時(shí)檢測(cè)成本高，使得該檢測(cè)技術(shù)在糧油真菌毒素的檢測(cè)中受到限制。

2.2 儀器分析法

儀器分析法也是糧油真菌毒素檢測(cè)技術(shù)中常見的一種。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，在糧油的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)中，儀器分析法逐漸得到應(yīng)用，常見的儀器分析法有經(jīng)典儀器分析法和新型的儀器分析法[4]。

2.2.1 經(jīng)典儀器分析法

經(jīng)典儀器分析法就是一種高效液相色譜法，這種檢測(cè)技術(shù)主要利用真菌毒素的本身特性，通過有機(jī)溶劑對(duì)糧油樣品中的真菌毒素進(jìn)行提取，之后利用液液萃取、免疫親和、固相萃取、凝膠色譜等技術(shù)進(jìn)行凈化，通過色譜柱進(jìn)行組分分離，之后對(duì)熒光特性進(jìn)行檢測(cè)，這種檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度高，且靈敏度高，是常見的一種檢測(cè)技術(shù)。

2.2.2 新型的儀器分析法

新型的儀器分析法包括近紅外光譜技術(shù)、高光譜成像技術(shù)以及電子鼻技術(shù)。①近紅外光譜技術(shù)主要是借助真菌毒素在近紅外波段的特征進(jìn)行檢測(cè)，這種檢測(cè)技術(shù)準(zhǔn)確性高，檢測(cè)效率高。②高光譜成像技術(shù)主要借助光譜分辨率在納米級(jí)范圍內(nèi)的光譜圖像，從而對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)。③電子鼻技術(shù)是通過氣體傳感器陣列的響應(yīng)圖案來識(shí)別氣味的電子系統(tǒng)，采用這種技術(shù)可以對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行分析，進(jìn)而提高檢測(cè)技術(shù)和檢測(cè)效率。

2.3 薄層色譜法

在糧油的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)中，薄層色譜法可以提高檢測(cè)技術(shù)的水平，進(jìn)而保障糧油的質(zhì)量。所謂真菌毒素檢測(cè)技術(shù)就是在糧油的檢測(cè)技術(shù)中，先對(duì)糧油進(jìn)行取樣，然后樣品經(jīng)提取、濃縮、薄層分離后，使其在紫外光的照射下觀察，在觀察的過程中主要關(guān)注樣品的熒光特性，之后等待測(cè)試組分在薄層板上的比移植進(jìn)行定性，在定性的過程中依據(jù)熒光斑點(diǎn)的大小進(jìn)行定量，即可反映出糧油的質(zhì)量[5]。薄層色譜法在糧油的真菌毒素檢測(cè)中是一種的傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)，主要是借助抽取樣品進(jìn)行檢測(cè)，而樣品不能代表全部，使得糧油的真菌毒素檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性降低，此外，在糧油的真菌毒素的檢測(cè)中，這種檢測(cè)技術(shù)的檢測(cè)程序復(fù)雜，同時(shí)檢測(cè)中要隨時(shí)關(guān)注樣品的變化，步驟繁瑣，靈敏度低，存在較高真菌毒素暴露風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)檢測(cè)人才的操作技術(shù)要求高，使得大多數(shù)操作人員對(duì)真菌毒素分析具有較強(qiáng)的戒備心理，從而影響薄層色譜法的檢測(cè)結(jié)果。因此，薄層色譜法在現(xiàn)今的糧油真菌毒素的檢測(cè)中逐漸被淘汰。

3 結(jié)語(yǔ)

在糧油的真菌毒素的檢測(cè)中，應(yīng)提高檢測(cè)技術(shù)水平，并不斷提升準(zhǔn)確性，因此，在糧油真菌毒素檢測(cè)技術(shù)中，借助免疫分析法、儀器分析法以及薄層色譜法等技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)衡量目標(biāo)物的準(zhǔn)確定量，也需要結(jié)合實(shí)踐，發(fā)展方便、快速、低毒、準(zhǔn)確及低成本的快速檢測(cè)技術(shù)，以滿足基層糧油收購(gòu)和食品及畜禽等飼料加工企業(yè)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的需求，提高糧油的檢測(cè)技術(shù)和檢測(cè)水平，促進(jìn)我國(guó)的糧油產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步和發(fā)展。