采收期對寶興縣華重樓皂苷含量的影響

李碧琴+王春濤+劉帆+鄭順林

摘要 〔目的〕通過對華重樓不同生長發(fā)育期有效成分（重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ）含量的研究，為華重樓適宜采收期的確定提供試驗依據。〔方法〕采用高效液相色譜法。〔結果〕不同生長期華重樓中4種皂苷總含量發(fā)生明顯變化。從不同月份采集看，4—9月重樓皂苷含量呈升高趨勢，8—9月含量最高，10月后開始下降。不同生長年份看，前期華重樓皂苷積累較慢，第5～6年重樓皂苷達到最高，之后有下降趨勢。〔結論〕明確了華重樓重樓皂苷含量高的最佳采收期，即一年中8—9月是最佳采收期，以生長年限第5～6年采收最佳。

關鍵詞 華重樓；皂苷；采收期；四川寶興

中圖分類號 S567 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2018）01-0056-01

四川華重樓[Paris polyphylla Smith var. chinensis（Franch.）Hara]，為《中國藥典》收載的常用中藥材[1]，其主要活性成分為甾體皂苷，具有止血、抗菌、抗腫瘤、調節(jié)免疫、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛等生物活性，是一些著名中成藥宮血寧膠囊、樓蓮膠囊等的主要原料之一，市場需求量較大。

由于四川華重樓藥用價值較高，遭到長期掠奪式的采挖，野生資源日益減少，導致工業(yè)藥用原料嚴重緊缺。近年來，對人工栽培華重樓逐漸重視，人工栽培品種逐漸增多。寶興縣是四川華重樓傳統(tǒng)而集中的分布區(qū)域之一，在生產實踐中，如何采取有效措施控制與提高藥材質量，同時獲得最好的經濟效益是值得關注的重要問題。重樓皂苷是華重樓的活性成分和衡量藥材質量的重要指標，已有人對不同生長年限華重樓的皂苷含量進行了檢測[2]，但目前尚未查閱到對華重樓藥材不同采收期進行系統(tǒng)研究的相關資料，而利用物候期來指導中藥材采收是保證良好品質的重要措施[3]。因此，本試驗擬采用HPLC法對年度間（同一年不同時期采收）和年際間（不同生長年限采收）的華重樓4種重樓皂苷進行含量分析，以期為確定華重樓的最佳采收期提供依據，進一步服務于四川人工栽培華重樓的規(guī)范化種植與采收。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試儀器。1100 LC高效液相色譜儀、KQ-250B型超聲波清洗器、RE-2000型旋轉蒸發(fā)儀、SHZ-m循環(huán)水式真空泵、1/10 000電子天秤。

1.1.2 供試試劑。重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ對照品為標品；乙腈為色譜醇，水為去離子蒸餾水，其他試劑均為分析純。

1.1.3 供試樣品。7份華重樓樣品于2016年4—10月采自四川省雅安市寶興縣靈關重樓種植基地，為2011年栽培的試驗材料，測定年內不同月份采收期華重樓品質的變化；取用種苗栽培2～8年的華重樓，測定不同年份華重樓皂苷積累量。以上材料均為華重樓的干燥根莖。

1.2 試驗方法

采用高效液相色譜法[4]。精確稱量樣品粉末（過3號篩）0.400 0 g，置具塞錐形瓶中，精密加75%乙醇30 mL，超聲處理30 min，提取溫度為6 ℃，放冷過濾，重復1次，合并濾液?；厥找掖贾粮?，用甲醇溶解定容至10 mL，得供試品溶液。

2 結果與分析

2.1 華重樓品質月份間的變化

華重樓不同采挖月份重樓皂苷含量的變化如表1所示?？梢钥闯?，4—9月生長階段，重樓皂苷總含量呈不斷上升趨勢。4—5月，變化不大，增加很慢，6—7月重樓皂苷總含量開始加快增長，8月和9月為重樓皂苷總含量的最高峰，以后開始迅速下降。表明重樓皂苷總含量一年中有一個峰值，出現(xiàn)在8—9月，是一年中采挖華重樓的最佳時間。8月后，重樓開始衰老，地上部的營養(yǎng)開始逐漸向地下部轉移，為來年的出苗生長做準備，因此其藥用品質也達到最佳。

2.2 華重樓品質年際間的變化

不同年份華重樓皂苷含量的變化如表2所示?？梢钥闯觯煌L年限華重樓中重樓皂苷的含量差異較明顯，華重樓在2～3年間，重樓皂苷的含量積累很緩慢，總量均在0.3%以下，沒有達到藥典規(guī)定的要求。4年以后開始上升，在5年以后，皂苷總量積累迅速增加，達到0.96%，第6年達到最高，為1.0%。以后含量有下降趨勢，維持在0.5%以上水平。表明華重樓皂苷總量最高生長年限是5～6年，不足5年的重樓4種皂苷積累量不足，有可能是皂苷積累時間不足，但也可能是受到生長過程中澆水、施肥、光照等多種因素的影響。因此，從藥用品質的角度講，五至六年生是獲得華重樓藥用品質最佳的采收時間。而生長時間過長，皂苷總含量反而有所下降，可能是生長時間太長，基部營養(yǎng)為保證頂端生長而大量消耗，導致整體含量下降所致。

3 結論與討論

該試驗結果表明，4種重樓皂苷總含量在8—9月（果熟期）達到高峰，10月開始下降，翌年4—9月呈升高趨勢（前期慢，中期快，后期迅速）；華重樓皂苷總量最高生長年限是第5～6年，不足5年的重樓4種皂苷積累量不足，7年以后含量總體呈下降趨勢。因此，兼顧產量和重樓皂苷含量，華重樓的最佳采收期為8—9月，在寶興縣及類似生態(tài)區(qū)，種苗栽植后5～6年是獲得華重樓藥用品質最佳的采收時間。

寶興縣華重樓的生長發(fā)育一般分為營養(yǎng)生長期（4月）、授粉期（5—6月）、果熟期（7—9月）、衰老期（9—10月）等4個物候期。不同生長發(fā)育期的華重樓其4種重樓皂苷的積累處于一個動態(tài)的過程中，隨時間的變化而變化，含量差異較大。采收期是影響中藥材產量和質量的重要環(huán)節(jié)之一，確定最佳采收期需要從藥材的產量和質量2個方面進行綜合考慮，華重樓的最佳采收期兼顧產量和含量因素，認為應以8—9月（果熟期—衰老期）為宜，這與實際生產中傳統(tǒng)采收期基本一致。

重樓皂苷的積累是一個動態(tài)過程，在一定年限內，皂苷含量呈遞增積累；但超過一定年限后，皂苷含量呈遞減變化，可能是生長時間過長，尾端木質化加快或者藥效成分流失引起。同時華重樓生長年限過長，發(fā)現(xiàn)尾端有腐爛或者被蟲子啃食的現(xiàn)象，促進藥效向頂端轉移，這些都可能導致藥效下降。華重樓皂苷總量最高生長年限是第5～6年，不足5年的重樓4種皂苷積累量不足，可能是皂苷積累時間不足，也可能是受生長過程中澆水、施肥、光照等多種因素的影響[5-6]。

4 參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中國藥典，I部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：243.

[2] 李化，黃璐琦，楊濱.論植物物候學指導中藥材采收期的研究[J].中國藥學雜志，2008，43（19）：1441.

[3] 張燁，呂霜霜，周濃，等.不同生長年限滇重樓中4種重樓皂苷的含量比較[J].中國藥房，2011，22（43）：4081-4083.

[4] 黃蕓，崔立劍，劉偉娜，等.HPLC-ELSD法分析重樓商品藥材中甾體皂苷的含量[J].中國中藥雜志，2006，31（15）：1230.

[5] 張玨，王躍華，楊華，等.華重樓研究現(xiàn)狀[J].時珍國醫(yī)國藥，2013，24（1）：196-198.

[6] 尹顯梅，張開元，蔣桂華，等.華重樓皂苷類成分的動態(tài)分布規(guī)律對藥材質量的影響[J].中草藥，2017，48（6）：1199-1204.