咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗體聯(lián)合檢測對鼻咽癌篩查價(jià)值

劉春霞，林煒，周小娟，葉桂林，周茂華，吳偉，劉聯(lián)斌

（贛州市腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 贛州 341000）

鼻咽癌是指發(fā)生于鼻咽腔頂部和側(cè)壁的惡性腫瘤，發(fā)病率為耳鼻咽喉惡性腫瘤之首。鼻咽癌主要發(fā)生于我國南方五省，即廣東、廣西、湖南、福建和江西，占當(dāng)?shù)仡^頸部惡性腫瘤的首位[1]。東南亞國家也是高發(fā)區(qū)。EB病毒是Epstein和Barr于1964年首次成功地將Burkitt非洲兒童淋巴瘤細(xì)胞通過體外懸浮培養(yǎng)而建株，并在建株細(xì)胞涂片中用電鏡觀察到皰疹病毒顆粒，認(rèn)為該病毒是多種惡性腫瘤（如鼻咽癌）的病因之一，它主要感染人類口咽部的上皮細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞[2]。人體感染EBV后能誘生抗EBNA抗體，抗EA抗體，抗VCA抗體及抗NA抗體[3]。因此，我們對鼻咽癌和健康體檢者采取咽拭子EBV-DNA和血清EB病毒抗體（VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA）的聯(lián)合檢測，通過對兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行的靈敏度和特異性的分析和統(tǒng)計(jì)。本研究旨在探討咽拭子EBV-DNA和血清EB病毒抗體聯(lián)合檢測對鼻咽癌篩查價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2015年6月～2017年2月間在贛州市腫瘤醫(yī)院獲得病理明確診斷的鼻咽癌患者85例為觀察組；同期健康體檢者60例為對照組。觀察組中，包括有男48例，女37例，年齡20～83歲，平均（45.8±11.3）歲。對照組中，包括男34例，女26例，年齡21～80歲，平均（44.7±12.1）歲。兩組受試者年齡、性別等各項(xiàng)指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組中，鼻咽癌患者按照TNM分期，Ⅰ期、Ⅱ期視為早期，Ⅲ期、Ⅳ期視為晚期。所有患者均符合臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，自愿接受臨床檢查，并簽署了知情同意書。

1.2 研究方法 對觀察組、對照組分別展開咽拭子EBVDNA和EB病毒抗體（VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA）聯(lián)合檢測?？贵w檢測：采集鼻咽癌患者治療前靜脈血5 ml，經(jīng)化學(xué)發(fā)光法對VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA抗體進(jìn)行檢測，所有檢測均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，陽性標(biāo)準(zhǔn)：VCA-IgA＞4 AU/nl、EAIgA＞3 U/nl、NA-IgGrA＞2 AU/nl；咽拭子EBV-DNA檢測：經(jīng)咽拭子刷采集受試者咽扁桃體上的分泌物，約3～5圈，而后送檢，經(jīng)熒光定量PCR法進(jìn)行檢測。陽性標(biāo)準(zhǔn)：EBV-DNA＞100 IU/ml記為陽性，低于檢測下限記為陰性。

2 結(jié)果

2.1 EBV四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷陽性率 EBV-DNA、VCAIgA、NA-IgG、EA-IgA單獨(dú)檢測的診斷陽性率分別為80.00%、96.47%、98.82%、57.65%，四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對鼻咽癌的診斷率為98.82%（P＜0.05），見表1。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本研究數(shù)據(jù)均用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)量資料采用“”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計(jì)數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 EBV四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.2 不同臨床分期鼻咽癌患者EBV檢測指標(biāo)陽性率比較不同臨床分期患者的EBV檢測指標(biāo)陽性率不同，Ⅰ期者聯(lián)合檢測陽性率為75%，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期者聯(lián)合檢測陽性率均為100%，可見晚期患者陽性率高于早期患者（P＜0.05），并且四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對晚期患者的診斷陽性率達(dá)到100%，見表2。

表2 85例不同臨床分期鼻咽癌患者EBV檢測指標(biāo)陽性率比較

3 討論

研究顯示，EBV感染與鼻咽癌發(fā)生之間，存在明顯的相關(guān)性[5]。EBV相關(guān)抗體在鼻咽癌診斷中，可產(chǎn)生一定的輔助作用，為目前臨床常用的鼻咽癌血清學(xué)診斷指標(biāo)。除此外，在鼻咽癌患者血漿中，存在EBV-DNA高表達(dá)情況，并且有研究指出，EBV-DNA表達(dá)水平與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、分期、治療效果、預(yù)后、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等存在明顯聯(lián)系[6]。

在患者由于一些鼻咽癌相關(guān)癥狀、表現(xiàn)第一次就診時(shí)，對其展開EB病毒血清學(xué)檢測，多可對鼻咽癌確診檢查的進(jìn)行與否進(jìn)行指導(dǎo)。EB病毒抗體血清學(xué)檢測，對于指導(dǎo)臨床后續(xù)工作具有重要意義[7-9]。因鼻咽癌的臨床癥狀具有非特異性，僅小部分患者在發(fā)病后需要進(jìn)行進(jìn)一步確診。因此，血清學(xué)檢查的主要目的對鼻咽癌的可能予以排除。因此，對檢查結(jié)果的靈敏度、準(zhǔn)確度提出較高要求。研究證實(shí)，EBV DNA能夠?qū)δ[瘤消長情況進(jìn)行靈敏反映，在鼻咽癌的診斷、治療、效果評價(jià)以及預(yù)后中，均具有指導(dǎo)意義[10]。曾有學(xué)者指出，EBV DNA檢測，對于EBV原發(fā)性感染早期診斷的臨床價(jià)值十分顯著[11]。目前，國內(nèi)眾多學(xué)者已經(jīng)開始對EBV-DNA血清學(xué)檢測引起重視，但是關(guān)于咽拭子EBV-DNA檢測的研究還不是十分深入。

曾有研究顯示，EBV感染的臨床表現(xiàn)與年齡存在明顯相關(guān)性，在獲得確診的EBV感染患者中，EBV-DNA陽性患兒年齡集中在2～5歲之間，EBV-VCA-IgM陽性者年齡多集中咋5～12歲之間，由此證實(shí)，EBV感染在整個(gè)兒童時(shí)期均會發(fā)生，5歲以上兒童會表現(xiàn)出典型傳染性單核細(xì)胞增多癥，年幼患兒以非典型EBV感染的表現(xiàn)為主。國外有學(xué)者指出，8個(gè)月以下患兒，因受到母體抗體的保護(hù)，因此8個(gè)月內(nèi)EBV感染的幾率較小，并且對8個(gè)月以后的感染存在一定的抑制效果。

近幾年EBV-DNA檢測收到醫(yī)學(xué)界的推崇，PCR法的應(yīng)用越來越廣泛。本研究針對咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗體聯(lián)合檢測對鼻咽癌篩查價(jià)值進(jìn)行評價(jià)，探討其對鼻咽癌的篩查價(jià)值。研究發(fā)現(xiàn)，四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對鼻咽癌的診斷陽性率為98.82%，顯著高于各指標(biāo)單獨(dú)檢測的診斷率。不同臨床分期患者的EBV檢測指標(biāo)陽性率不同，晚期患者陽性率高于早期患者。這一結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)[12-14]報(bào)道結(jié)果相似，由此證實(shí)，咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗體聯(lián)合檢測對鼻咽癌篩查價(jià)值顯著高于各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測，可顯著提高鼻咽癌診斷靈敏度，具有較高的篩查價(jià)值，值得推廣應(yīng)用。

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[2] 殷勝松,鄢文,王昂.XRCC2基因多態(tài)性與鼻咽癌患者放射性口腔黏膜炎反應(yīng)程度的相關(guān)性研究[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2016,16(6):806.

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