老年急性ST段抬高型心肌梗死RyR2及UCP2蛋白治療前后水平變化研究

王娟麗，張利，高曉梅

急性心肌梗死是目前引起死亡的常見心血管疾病，且隨著人口老齡化的日趨加重，其發(fā)病率和死亡率逐年升高[1,2]。急性ST段抬高型心肌梗死患者是冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。┍O(jiān)護(hù)病房的常見病種，對急性ST段抬高型心肌梗死患者的診治水平是冠心病病房水平的重要參考[3,4]。老年急性ST段抬高型心肌梗死患者的早期診斷對改善患者預(yù)后、提高療效具有重要的價值[5,6]。蘭尼堿受體2（RyR2）是細(xì)胞內(nèi)鈣離心調(diào)控的重要蛋白，與心肌功能密切相關(guān)。解偶聯(lián)蛋白2（UCP2）

是線粒體膜上的陽離子載體蛋白，可引起質(zhì)子泄露導(dǎo)致線粒體膜電位降低。目前尚無關(guān)于RyR2及UCP2蛋白水平與老年急性ST段抬高型心肌梗死相關(guān)性的研究。本研究分析老年急性ST段抬高型心肌梗死RyR2及UCP2蛋白在治療前后水平變化，以期為臨床診斷及治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象 納入陜西省周至縣人民醫(yī)院于2011年1月～2016年12月間診治的老年急性心肌梗死患者120例，其中非ST段抬高型心肌梗死患者56例（NSTEMI組），年齡（63.3±10.2）歲；ST段抬高型心肌梗死患者64例（STEMI組），年齡（63.6±10.8）歲；同期健康體檢者60例作為對照組年齡（63.5±10.8）歲。本研究中急性非ST段抬高型和ST段抬高型心肌梗死患者診斷標(biāo)準(zhǔn)參照Thygesen等的報道的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重肝腎功能異常患者；嚴(yán)重代謝系統(tǒng)異?；颊?；認(rèn)知功能嚴(yán)重障礙患者。本研究患者均知情并簽署知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 觀察指標(biāo)及檢測方法 分析老年非ST段抬高型和ST段抬高型急性心肌梗死患者血清中RyR2、心肌肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶2a（SERCA2a）、UCP2及沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）的表達(dá)水平，并分析經(jīng)抗栓治療后上述蛋白的表達(dá)變化。上述蛋白檢測均采用酶聯(lián)免疫吸附測定法進(jìn)行。RyR2蛋白檢測試劑盒購自Abcam公司；SERCA2a蛋白檢測試劑盒購自R&D公司；UCP2蛋白檢測試劑盒購自O(shè)mega公司；SIRT1蛋白檢測試劑盒購自Abcam公司。以β－actin為內(nèi)參。所有操作過程均按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 溶栓及抗凝治療方案 STEMI患者給予瑞替普酶（rPA）治療，緩慢靜脈推注含有18 mg的rPA的生理鹽水，給藥30 min后再次給予相同劑量的rPA，rPA給藥后給予患者5000 U低分子量肝素鈣，1/12 h，連續(xù)7 d。NSTEMI患者僅給予患者5000 U低分子量肝素鈣，1/12 h，連續(xù)7 d。在治療過程中依據(jù)相關(guān)指南給予患者調(diào)脂、抗血小板、降血壓和抗心力衰竭治療。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件完成，計量資料用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組均數(shù)的比較采用單因素方差分析，組間均數(shù)比較采用q檢驗，計數(shù)資料的比較采用卡方分析。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組基線資料對比 對照組及老年急性心肌梗死亞組患者在平均年齡、性別構(gòu)成方面無統(tǒng)計學(xué)差異性（P＞0.05），表1。

2.2 老年急性ST段抬高型心肌梗死患者RyR2、SERCA2a蛋白水平變化 研究發(fā)現(xiàn)老年急性心肌梗死患者RyR2及SERCA2a蛋白水平明顯低于對照組（P＜0.05），且ST段抬高型心肌梗死患者的上述蛋白表達(dá)水平明顯低于非ST段抬高型心肌梗死患者（P＜0.05），表2。

2.3 老年急性ST段抬高型心肌梗死患者UCP2、SIRT1蛋白水平變化 老年急性心肌梗死患者UCP2及SIRT1蛋白水平明顯低于對照組（P＜0.05），且ST段抬高型患者的上述蛋白表達(dá)水平明顯低于非ST段抬高型患者（P＜0.05），表3。

2.4 抗栓治療后患者RyR2蛋白水平變化 ST段抬高型心肌梗死患者經(jīng)抗栓治療后RyR2及SERCA2a蛋白的表達(dá)明顯升高，且明顯高于治療前（P＜0.05），但上述蛋白水平仍明顯低于對照組（P＜0.05），表4。

2.5 抗栓抗凝后患者UCP2蛋白水平變化 研究發(fā)現(xiàn)ST段抬高型心肌梗死患者經(jīng)抗栓治療后CUP2及SIRT1蛋白的表達(dá)明顯升高，且明顯高于治療前（P＜0.05），但上述蛋白水平仍明顯低于對照組（P＜0.05），表5。

表1 三組患者年齡及性別構(gòu)成比較

表2 老年急性ST段抬高型心肌梗死患者RyR2蛋白水平變化分析

表3 老年急性ST段抬高型心肌梗死患者UCP2蛋白水平變化分析

表4 抗栓治療后患者RyR2蛋白水平變化分析

表5 抗栓治療后患者UCP2蛋白水平變化分析

3 討論

老年急性心肌梗死已成為危機老年患者健康和生存的重要殺手，給患者、家庭和社會帶來沉重的負(fù)擔(dān)。而臨床上對其早期的診斷和治療對提高治療效果、改善患者的預(yù)后具有重要的價值。鈣通道異常是心肌病發(fā)病的重要原因，也是藥物干預(yù)治療的重要靶點。本研究在分析RyR2及UCP2蛋白對老年急性ST段抬高型心肌梗死的診斷價值及藥物治療作用時發(fā)現(xiàn)老年急性心肌梗死患者RyR2、SERCA2a、UCP2及SIRT1蛋白水平明顯低于對照組，且ST段抬高型心肌梗死患者上述蛋白表達(dá)水平明顯低于非ST段抬高型心肌梗死患者；ST段抬高型心肌梗死患者經(jīng)溶栓、抗栓治療后上述蛋白的表達(dá)明顯升高，且明顯高于治療前，但上述蛋白水平仍明顯低于對照組。因此，RyR2及UCP2蛋白對老年急性ST段抬高型心肌梗死的臨床診斷有重要價值。

鈣通道異常及鈣調(diào)控蛋白表達(dá)的異常是多種心肌病發(fā)病的重要原因[8]。在對去甲烏藥堿與6-姜酚配伍對心衰大鼠強心機制研究時發(fā)現(xiàn)去甲烏藥堿與6-姜酚配伍能夠增強心衰大鼠心肌收縮力，其機制為增加心臟SEACA2a蛋白表達(dá)，改善收縮和舒張功能[9]。在RyR2蛋白水平表達(dá)變化與冠心病心氣虛證發(fā)病的相關(guān)性研究中也證實RyR2蛋白水平表達(dá)變化與冠心病心氣虛證存在相關(guān)性，RyR2蛋白表達(dá)變化可以在一定程度上揭示冠心病心氣虛證發(fā)病的微觀機制[10]。在分析心肌細(xì)胞RyR2和L型鈣通道的基因變異與室性心律失常和心源性猝死相關(guān)性的研究中也證實RyR2上的基因變異rs376687l A是室性心律失常和心源性猝死的遺傳學(xué)預(yù)測因子，而rs790896A等位基因是慢性心力衰竭患者的保護(hù)因子，可降低室性心律失常和心源性猝死的風(fēng)險[11]。以往研究也發(fā)現(xiàn)苓桂養(yǎng)心湯治療肥厚性心肌病（DCM）大鼠的作用機制可能與通過調(diào)節(jié)DCM大鼠心肌肌漿網(wǎng)鈣調(diào)控相關(guān)蛋白的基因及蛋白表達(dá)，改善心肌細(xì)胞鈣轉(zhuǎn)運及心臟舒縮功能有關(guān)[12]，且心力衰竭大鼠心肌SERCA2a mRNA的表達(dá)下調(diào)，miR-25-3p和miR-25-5p的表達(dá)上調(diào)[13]。吳錦波等[14]也發(fā)現(xiàn)比索洛爾可以下調(diào)心肌miR-25-3p表達(dá)水平、提高SERCA2a和PLB表達(dá)水平，增強SERCA2a活性發(fā)揮作用。本研究也發(fā)現(xiàn)老年急性心肌梗死患者RyR2、SERCA2a蛋白水平明顯低于對照組，且ST段抬高型患者的上述蛋白表達(dá)水平明顯低于非ST段抬高型患者；ST段抬高型心肌梗死患者經(jīng)抗栓治療后上述蛋白的表達(dá)明顯升高，且明顯高于治療前，但上述蛋白水平仍明顯低于對照組。因此，RyR2及SERCA2a蛋白對老年急性ST段抬高型心肌梗死的臨床診斷有重要價值。以往的研究證實UCP2及SIRT1蛋白表達(dá)異常是多種心肌病發(fā)病的病理基礎(chǔ)[15,16]。在分析參芪益心方對心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞線粒體解耦聯(lián)蛋白2干預(yù)作用的研究中證實參芪益心方可提高心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞ATP和PCr含量、下調(diào)UCP2的表達(dá)[17]。在分析β3受體阻斷劑對心力衰竭大鼠心肌解偶聯(lián)蛋白2和能量代謝變化影響的研究中也發(fā)現(xiàn)心力衰竭時心肌UCP2表達(dá)增加，PCr減少、PCr/ATP降低，心臟功能惡化；β3-AR阻斷劑通過抑制UCP2的表達(dá)，改善心肌能量代謝和心臟功能[18]。既往研究證實DCM時心肌UCP2表達(dá)明顯增加，導(dǎo)致心肌能量代謝障礙，惡化心臟功能[19]。本研究也發(fā)現(xiàn)老年急性心肌梗死患者UCP2及SIRT1蛋白水平明顯低于對照組，且ST段抬高型心肌梗死患者的上述蛋白表達(dá)水平明顯低于非ST段抬高型心肌梗死患者；ST段抬高型心肌梗死患者經(jīng)抗栓治療后上述蛋白的表達(dá)明顯升高，且明顯高于治療前，但上述蛋白水平仍明顯低于對照組，提示上述蛋白可作為老年急性ST段抬高型心肌梗死的臨床診斷指標(biāo)。

因此，RyR2及UCP2蛋白對老年急性ST段抬高型心肌梗死的臨床診斷有重要價值。

[1] 孫蓉,杜妮. 急性ST段抬高型心肌梗死靜脈尿激酶溶栓治療并發(fā)出血事件的相關(guān)因素[J]. 臨床醫(yī)學(xué)研究與實踐,2016,1(22):4-6.

[2] 尹洪濤,陶貴周,屈寶澤,等. 急性ST段抬高型心肌梗死直接PCI術(shù)后無復(fù)流的相關(guān)因素分析[J]. 醫(yī)學(xué)與哲學(xué)(B),2016,37(10):34-6.

[3] 魏占云,李耘,王紫晨,等. 老年急性ST段抬高型心肌梗死后新發(fā)房顫患者危險因素及紅細(xì)胞分布寬度測定的意義[J]. 疑難病雜志,2016,15(09):904-7.

[4] 劉建偉. 急性ST段抬高型心肌梗死冠脈介入治療時機對患者左心功能的影響[J]. 河南醫(yī)學(xué)研究,2016,25(8):1484-5.

[5] 袁晉青,宋瑩. 《2015年中國急性ST段抬高型心肌梗死診斷及治療指南》——更新要點解讀[J]. 中國循環(huán)雜志,2016,31(4):318-20.

[6] 劉志郎,邵亞麗. 急診介入與擇期介入治療急性ST段抬高型心肌梗死的臨床及預(yù)后效果比較[J]. 河北醫(yī)學(xué),2016,22(1):153-5.

[7] Thygesen K,Alpert JS,Jaffe AS,et al. Third Universal definition of myocardial infarction. Circulation, 2012,126:2020-35.

[8] 吳錦波,葉小漢,冼紹祥,等. 中藥心康方對心力衰竭大鼠心肌miR-25-3p表達(dá)水平和SERCA2a活性的影響[J]. 中國病理生理雜志,2016,32(10):1770-4.

[9] 石曉路,武乾,崔海峰,等. 去甲烏藥堿與6-姜酚配伍對心衰大鼠強心機制研究[J]. 中華中醫(yī)藥雜志,2016,31(2):420-3.

[10] 孔春明,馬月香. RyR2蛋白水平表達(dá)變化與冠心病心氣虛證發(fā)病的相關(guān)性研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥,2016,27(1):234-6.

[11] 黎鎮(zhèn)賜,羅義,劉震,等. 心肌細(xì)胞RyR2和L型鈣通道的基因變異與室性心律失常和心源性猝死的相關(guān)性[J]. 廣州醫(yī)藥,2015,46(4):6-9.

[12] 沈麗娟,戴飛,陸曙,等. 苓桂養(yǎng)心湯對擴張型心肌病大鼠心肌保護(hù)作用及肌漿網(wǎng)鈣調(diào)控蛋白的影響[J]. 中國實驗方劑學(xué)雜志,2017,23(18):145-51.

[13] 吳錦波,葉小漢,冼紹祥,等. 心力衰竭大鼠心肌SERCA2a和miR-25-3p/5p表達(dá)的改變及瀉肺利水方藥的干預(yù)作用[J]. 中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2017,33(2):146-50.

[14] 吳錦波,葉小漢,冼紹祥,等. 比索洛爾提高心力衰竭大鼠心肌SERCA2a活性[J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床,2017,37(3):386-90.

[15] 孫曉慧,王燕,牟艷玲. 2型糖尿病大鼠心肌PI3K/Akt/mTOR信號通路的改變及Sirt1的調(diào)控機制研究[J]. 中國藥理學(xué)通報,2017,33(6):793-8.

[16] 施鵬,陶輝,張家貴,等. 靶向沉默SIRT1對乳鼠心肌成纖維細(xì)胞增殖的影響[J]. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2017,52(4):471-5.

[17] 鄒國良,李佳卓,代曉明,等. 參芪益心方對心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞線粒體解耦聯(lián)蛋白2的干預(yù)作用[J]. 山東中醫(yī)雜志,2017,36(3):231-3.

[18] 高艷輝,高海波,狄寧寧,等. β3受體阻斷劑對心力衰竭大鼠心肌解偶聯(lián)蛋白2和能量代謝變化的影響[J]. 中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2013,29(4):376-9.

[19] 高艷輝,陳延軍,劉廣忠,等. 酒精性心肌病大鼠心肌解偶聯(lián)蛋白2表達(dá)及能量代謝變化[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2013,13(19):3637-40.