不同干燥方法對(duì)鐵皮石斛閃式提取物多糖含量的影響

錢桂敏王 平郭 峰

（1 浙江醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校中藥學(xué)院，浙江 寧波 315100；2 浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，浙江 杭州 310032；3 浙江大學(xué)寧波理工學(xué)院，浙江 寧波 315100）

鐵皮石斛為蘭科植物鐵皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo的干燥莖，是我國名貴的中藥材[1]，中國鐵皮石斛主要分布于浙江、廣西、廣東、福建、湖南和貴州等地。浙江品種大多莖軟、味甘、具黏性，有效成分多，品質(zhì)最佳，鮮藥價(jià)格最貴，尤其是浙江以北的鐵皮石斛[2]?，F(xiàn)代研究表明，鐵皮石斛的主要有效成分為多糖，其具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗腫瘤、降血脂、降血糖、抗氧化等作用[5]。

目前鐵皮石斛的產(chǎn)品主要有三大類:一種是將鐵皮石斛剪去部分須根后，邊烘邊扭以成螺旋形的干品，即鐵皮楓斗。一般都是傳統(tǒng)手工加工，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，不利于規(guī)模化生產(chǎn)；另一種是精深加工產(chǎn)品，將鐵皮石斛莖混合人參、靈芝、維生素等加工成的復(fù)合保健品。劑型有膠囊 (丸)、口服液和浸膏。還有就是直接銷售鮮品，包括鐵皮石斛的莖、花和葉，其中主要銷售的部位是莖[4]。前兩種價(jià)格都比較高，鮮品價(jià)格雖然相對(duì)便宜，但不易儲(chǔ)存。

本實(shí)驗(yàn)先對(duì)鐵皮石斛鮮品進(jìn)行閃式提取[5]，然后通過微波干燥法、冷凍干燥法、熱風(fēng)干燥法以及傳統(tǒng)烘干法對(duì)鐵皮石斛鮮品閃式提取物進(jìn)行干燥，所得干燥品分別按照2015版藥典中鐵皮石斛多糖含量測定的方法，即苯酚-硫酸法進(jìn)行對(duì)比分析，從而為鐵皮石斛閃式提取物的干燥方法提供參考。

1 試驗(yàn)材料和儀器

1.1 藥材 鐵皮石斛購于浙江寧波，產(chǎn)地為浙江樂清，經(jīng)鑒定為蘭科 (Orchidaceae)石斛屬 (Dendrobium Sw.)植物鐵皮石斛 (Dendrobium officinale Kimura et Migo)的新鮮莖。

1.2 化學(xué)試劑 D-無水葡萄糖對(duì)照品購于中國食品藥品檢定研究院；所用試劑均為分析純。

1.3 儀器設(shè)備 閃式提取器、閃式濃縮器（均來自河南金鼎科技有限公司），德國CHRIST Alpha1-4冷凍干燥機(jī)，廂式烘干機(jī)，熱風(fēng)循環(huán)烘箱，微波干燥箱（南京奧鼎機(jī)械設(shè)備有限公司），TU-1810型紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司），低溫離心機(jī) (德國SIGMA)，多用循環(huán)水式真空泵 (鄭州市鞏縣英峪予華儀器廠)，瑞士BUCHI旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RⅡ型，CLP-1000超聲波萃取器（深圳市長樂超聲設(shè)備廠）。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 制備閃式提取物 取10 g鐵皮石斛鮮品，置于閃式提取器中，加入250 mL蒸餾水 (固液比1∶25)，在常溫下進(jìn)行提取，閃提3次，時(shí)間為90 s/次，將提取液在閃式濃縮器中濃縮至50 mL，最后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至15 mL。

2.2 干燥處理 將相同質(zhì)量的鐵皮石斛鮮品閃式提取液按不同的方法干燥，測定不同的干燥方法對(duì)其含水量以及有效成分多糖的含量變化。

2.2.1 傳統(tǒng)烘干法 取提取液10 mL，置于烘干機(jī)中80℃條件下干燥2.5 h。

2.2.2 熱風(fēng)干燥法 取提取液10 mL，置于熱風(fēng)循環(huán)烘箱，在50℃，風(fēng)量3400 m3/h的條件下，干燥7 h。

2.2.3 冷凍干燥法 取提取液10 mL，置于冰箱中－18℃預(yù)凍24 h，之后在冷凍干燥機(jī)中－68℃，0.5 MPa下干燥2.5 h。

2.2.4 微波干燥法 取提取液10 mL，置微波干燥箱中在70℃，功率15 kw，頻率2540 hz的條件下0.5 h[7]。

表1 不同干燥方法干燥后外觀形態(tài)以及含水量變化對(duì)比

2.3 多糖含量測定 先將上述干燥品分別粉碎過篩（過三號(hào)篩），備用。

按照藥典（2015版）中鐵皮石斛多糖含量測定的方法即苯酚-硫酸法[1]進(jìn)行對(duì)照品溶液的制備和標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備，在488 nm的波長處測定吸光度，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)測定得線性回歸方程：y=0.1142x+0.022（r=0.9991），葡萄糖在10～100 μg/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。

2.3.1 供試品溶液的制備 分別取上述四種干燥品粉末約0.3 g，精密稱定，參照藥典操作制備供試品溶液，加水200 mL，加熱回流2 h，放冷，轉(zhuǎn)移至250 mL量瓶中，用少量水分次洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加水至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2 mL，置15 mL離心管中，精密加入無水乙醇10 mL，搖勻，冷藏1 h，取出，離心 (轉(zhuǎn)速為每分鐘4000轉(zhuǎn))20 min，棄去上清液 (必要時(shí)濾過)，沉淀加80%乙醇洗滌2次，每次8 mL，離心，棄去上清液，沉淀加熱水溶解，轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，放冷，加水至刻度，搖勻，即得供試品溶液[1]。

2.3.2 測定法 精密量取供試品溶液1 mL，置10 mL具塞試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自“精密加入5%苯酚溶液1 mL”起，依法測定吸光度，根據(jù)線性回歸方程計(jì)算供試品溶液中無水葡萄糖的含量。見表2。

表2 不同干燥方法干燥后多糖含量測定結(jié)果

3 討論

一般來說，鮮藥干燥時(shí)間越短，其有效成分保留含量越高。從試驗(yàn)中可以看出微波干燥時(shí)間最短，而熱風(fēng)干燥時(shí)間最長。其中微波干燥法在這4種干燥方法中所得多糖含量最高的干燥方法，并省時(shí)、顏色改變不大。傳統(tǒng)烘干法操作簡單，適合小批量鐵皮石斛干燥，但在實(shí)際生產(chǎn)中操作過程較費(fèi)時(shí)、費(fèi)人工，且單位水分蒸發(fā)費(fèi)用也較高。冷凍干燥技術(shù)雖可較大程度地保存鐵皮石斛提取物的性狀，但是干燥時(shí)間過長，設(shè)備價(jià)格昂貴，生產(chǎn)成本高，使其適用范圍受到局限。熱風(fēng)干燥法在本次實(shí)驗(yàn)中所得多糖的含量也較高，結(jié)合其設(shè)備簡單并比較常見，但顏色改變較大且費(fèi)時(shí)。

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[S].2015年版（一部）.北京：中國醫(yī)藥科技出版社出版社，2015:282-283.

[2]徐程，詹忠根，廖蘇梅.8種不同地域鐵皮石斛農(nóng)藝性狀及多糖和纖維素分析[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，35(5):576-579，585.

[3]聶少平，蔡海蘭.鐵皮石斛活性成分及其功能研究進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2012，33（23）：356-361.

[4]吳韻琴，斯金平.鐵皮石斛產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及可持續(xù)發(fā)展的探討[J].中華中藥雜志，2010，35(15):2033-2037.

[5]劉延澤，袁珂，冀春茹.中草藥化學(xué)成分提取新方法:植物組織破碎提取法[J].河南科學(xué)，1993，4(11):265-268.

[6]蔡興，王美娜，梁權(quán)輝，等.響應(yīng)面法優(yōu)化鐵皮石斛葉閃式提取工藝[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2016，12（7）：48-52.

[7]郝近大，季俊虬.鮮藥的研究與應(yīng)用[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2003：7-66.