ABO、RHD血型抗原手工微柱凝膠免疫檢驗法的分析

韓 秋

（遼寧省遼陽市結(jié)核病醫(yī)院檢驗科，遼寧 遼陽 111005）

輸血是臨床非常重要的一類治療技術(shù)，為了保證輸血安全性，必須在輸血前做好血型分析檢驗，以此確定輸血應(yīng)該選擇的血型[1]。微柱凝膠檢測是一種輸血檢驗的新型方法，世界衛(wèi)生組織將這一方法視作分析血型的首選方法。我國當前應(yīng)用較多的為手工微柱凝膠免疫檢驗法，本研究具體以試管法為對照，分析ABO、RHD血型抗原檢測中手工微柱凝膠免疫檢驗法的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 基礎(chǔ)資料：從2016年9月至2017年10月我院接受健康體檢的人群中抽取100名作為本次研究對象，包括56名男，44名女，年齡平均為（40.28±20.36）歲。研究對象入選標準：體檢結(jié)果顯示無異常；年齡超過18歲且低于65歲；不存在惡性血液疾病；以往沒有接受過輸血治療；參與研究前一個月沒有服用過可能對檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響的藥物；以往沒有暴露在危險環(huán)境中過；非妊娠期、哺乳期。

1.2 方法。檢驗儀器及試劑：Ortho BIOVue System溯專用離心機；單克隆A、B標準血清；ABO、RhD血型抗原微柱凝膠免鑒定卡；抗D單克隆抗血清。

清晨對全部受檢者均抽取2份靜脈血液作為檢驗樣本，1份通過試管法進行ABO、RhD血型抗原檢驗，另一份通過手工微柱凝膠免疫檢驗法進行ABO、RhD血型抗原檢驗。其中試管法按照臨床檢驗相關(guān)操作規(guī)程嚴格執(zhí)行，操作結(jié)束后，經(jīng)1-2名資歷高的檢驗人員檢測血清，對檢驗結(jié)果進行詳細記錄。

手工微柱凝膠免疫檢驗時在抗A、抗B、抗D的微柱凝膠管中加入50 μL 0.5%的紅細胞懸液，接著在每分鐘1000轉(zhuǎn)的速度下進行持續(xù)5分鐘的離心處理，最后對結(jié)果進行觀察記錄。

1.3 評價標準。試管法：RhD陽性：凝集結(jié)果顯示出被檢紅細胞上存在 D抗原；RhD陰性：沒有發(fā)生凝集。ABO陽性：IgM類特異性血型抗體與紅細胞膜上特異性抗原結(jié)合出現(xiàn)凝集反應(yīng)；陰性：沒有發(fā)生聚集。

手工微柱凝膠免疫檢驗法：陽性：紅細胞發(fā)生凝集，在離心后留在微柱表面；陰性：紅細胞下沉在微柱底部。

1.4 統(tǒng)計方法：SPSS22.0對獲取數(shù)據(jù)開展分析，[n（%）]表示文檢驗陽性率及陰性率，χ2檢驗，P＜0.05表明有統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié) 果

手工微柱凝膠免疫檢驗法檢驗100名受檢對象后顯示ABO陽性的有60名，陽性率60%；RhD陽性的有100名，陽性率100%。試管法檢驗100名受檢對象后顯示ABO陽性的有60名，陽性率60%；RhD陽性的有100名，陽性率100%。從結(jié)果可知試管法和手工微柱凝膠免疫檢驗法對于ABO、RHD血型抗原檢驗的結(jié)果一致，符合率為100%，兩種方法檢驗結(jié)果間不存在統(tǒng)計學(xué)差異，P＞0.05。

3 討 論

在臨床輸血治療前，必須確保受血者和輸血者血型相配，才可以保證血液輸入后不會出現(xiàn)凝集反應(yīng)。另外在產(chǎn)前檢查中血型檢驗也非常重要，假設(shè)夫妻Rh或ABO血型不合，都可能導(dǎo)致新生兒、胎兒出現(xiàn)溶血反應(yīng)，最終會導(dǎo)致多種不良妊娠結(jié)局[2]。

以往多通過試管法鑒定血型，這一方法操作簡單，對檢驗儀器沒有較高要求，在血型的初次鑒定中應(yīng)用較多。不過在試驗操作時，必須對試管進行徹底清洗，否則可能出現(xiàn)假凝集情況。一般需要先添加血清，然后再添加紅細胞懸液，這樣才能檢查血清有沒有漏加[3]。試管法檢驗時對離心的速度以及時間存在較高要求，且進行結(jié)果觀察時必須保證背景光線足夠，才可以對凝集程度進行準確觀察。不過在實踐操作過程中，出現(xiàn)不標準試劑、試劑污染或者試劑失效的可能性較大，部分時候檢驗人員由于不細心導(dǎo)致樣本加錯，離心處理不恰當，都會影響檢驗結(jié)果。手工微柱凝膠免疫檢驗法中將微柱凝膠卡的填充物選擇為凝膠，結(jié)合應(yīng)用多種技術(shù)，檢驗時抗原抗體反應(yīng)出現(xiàn)后，紅細胞會有凝集變化，繼續(xù)實施離心處理后，不能經(jīng)過凝膠間隙，所以會滯留于凝膠上層和分散的凝膠中，以此能夠?qū)崿F(xiàn)陰陽性的鑒別[4]。本研究手工微柱凝膠免疫檢驗法檢驗ABO陽性率60%，RhD陽性率100%；試管法檢驗結(jié)果分別為60%、100%，P＞0.05。

綜上所述，ABO、RHD血型抗原利用手工微柱凝膠免疫檢驗法檢驗?zāi)軌颢@得和試管法一樣的準確性，同時能夠提升操作簡便性以及結(jié)果準確性，值得推廣。