綠原酸的研究進(jìn)展

王玲娜， 姚佳歡， 馬超美*

（1.內(nèi)蒙古大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010021；2.呼和浩特職業(yè)學(xué)院 生物化學(xué)工程學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010058）

綠原酸（Chlorogenic acid，CGA）是由咖啡酸的1位羧基和奎尼酸的3位羥基縮合成酯的天然產(chǎn)物，是許多中藥材和蔬菜水果的有效成分，具有清除自由基、抗氧化、抗炎癥等多種生理活性，對(duì)II-型糖尿病、心血管疾病及一些與衰老相關(guān)的疾病也有預(yù)防或治療作用[1-4]。綠原酸被德國(guó)Free大學(xué)E.Eich教授認(rèn)為是有希望成為抗艾滋病病毒（HIV）的先導(dǎo)化合物，因?yàn)樗谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)有些植物的次生代謝產(chǎn)物具有抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性[5]。在挪威和英國(guó)，綠原酸以商品名“Svetol”出售，作為添加劑加入咖啡和口香糖等食品中用于減肥[6]?？傊?，綠原酸在醫(yī)藥、化工和食品等領(lǐng)域都具有光明的應(yīng)用前景。本文作者擬從理化性質(zhì)、生物活性、合成方法及體內(nèi)代謝等幾個(gè)方面對(duì)綠原酸的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)行了綜述，目的是為綠原酸的研究及資源的合理開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 綠原酸

綠原酸，又稱3-O-咖啡?？崴?（3-O-caffeoylquinic acid），相對(duì)分子質(zhì)量354.31，熔點(diǎn)208℃，半水合物為針狀結(jié)晶，[α]20D=-37（C=2.8），可溶于甲醇、乙醇，微溶于水、醚、乙酸乙酯，在氯仿、苯中溶解度較差。

1837年，Robiquet[7]第一次在咖啡豆中發(fā)現(xiàn)綠原酸，但那時(shí)并沒(méi)有“綠原酸”這個(gè)概念，直到1846年P(guān)ayen[1]在描述綠色的咖啡豆中的酚類物質(zhì)時(shí)首次提出“綠原酸”的概念。又經(jīng)過(guò)半個(gè)世紀(jì)的探索，1897年Campbell和Osbome 2位科學(xué)家在向日葵籽中共同發(fā)現(xiàn)了一種名為：heli-anthotannic acid的物質(zhì)，并指出該物質(zhì)是向日葵籽蛋白變黑的根本原因；1909年，Gorter等人確認(rèn)該化合物為綠原酸；1947年，Rudkin和Nelson初次確定了綠原酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)，即奎尼酸與咖啡酸縮合而成的一種酯[8]（結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖 1）。

圖1 綠原酸化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.1 Chemical structure of chlorogenic acid

2 綠原酸及其天然類似物的分布

咖啡豆是富含綠原酸的飲食資源之一，咖啡豆品種不同，所含綠原酸的量也大不相同。綠色咖啡豆的干物質(zhì)中，綠原酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)是6%～10%[1]。隨著研究的深入，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)綠原酸分布廣泛，從高等雙子葉植物到蕨類植物都有，其中金銀花、杜仲葉、葵花籽、咖啡豆、茵陳、藍(lán)盆花等植物中含有較多綠原酸[9-10]。在金銀花和杜仲葉這2種中藥材中，綠原酸是其主要有效成分之一，以此同時(shí)，在我國(guó)，綠原酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)還被國(guó)家藥典規(guī)定為評(píng)價(jià)金銀花和綿茵陳等重要生藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[11]。金銀花即“銀翹解毒片”、“銀黃口服液”和“雙黃連口服液”等臨床用清熱解毒藥的主要原料。

在植物中，除了含有綠原酸（chlorogenic acid，1）之外，還天然存在著許多綠原酸的類似物[12]。例如：綠原酸甲酯（methyl chlorogenate，2），綠原酸乙酯（ethyl chlorogenate，3），隱綠原酸（4-caffeoylquinic acid，4），新綠原酸（5-caffeoylquinic acid，5），異綠原酸 A （3，5-dicaffeoylquinic acid，6）， 異綠 原 酸 B（3，4-dicaffeoylquinic acid，7）， 異綠原酸 C （4，5-dicaffeoylquinic acid，8）， 萊薊素 （1，3-dicaffeoylquinic acid，9），1，5- 二 咖 啡 酰 奎 尼 酸 （1，5-dicaffeoylquinic acid，10）

表1 天然存在綠原酸的成分Table 1 Naturally occurring chlorogenic acid analogues acid

續(xù)表1

3 綠原酸的分離提取和檢測(cè)

綠原酸類物質(zhì)的提取方法包括：水提法、有機(jī)溶劑浸提法、酶解法、超臨界流體萃取法、微波輔助法、超聲波輔助法等多種方法[12]。但鑒于綠原酸分子中存在5個(gè)羥基和1個(gè)羧基，在水中溶解度達(dá)4%，在中藥加工時(shí)多采用水為溶劑，加熱煮沸提取，以便提高綠原酸的浸出率，但相應(yīng)地也增加了蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì)的溶出。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和研究的深入，李丹等[13]利用NKA-9樹(shù)脂對(duì)元寶楓中的綠原酸進(jìn)行了分離，該樹(shù)脂具有較大的吸附容量，且易被解吸附，洗脫峰集中，分離效果較好。Sun Lijun等[14]有選擇性地采用X-5和聚酰胺樹(shù)脂分離和純化綠原酸，回收率達(dá)到89.16%，這種方法的開(kāi)發(fā)將在工業(yè)和制藥業(yè)有非常廣闊的應(yīng)用前景。Saleh[15]利用超聲波輔助技術(shù)從洋薊（朝鮮薊）中提取綠原酸，綠原酸的提取率高達(dá)50%，比單獨(dú)利用甲醇提取的提取率顯著增加。田龍[16]利用超高壓液相技術(shù)提取杜仲葉中綠原酸，與傳統(tǒng)方法相比，該法大大縮短了提取時(shí)間，提高了提取率。Hao Yi等[17]通過(guò)滲透實(shí)驗(yàn)證明，發(fā)明了一種新型親水性磁性納米顆粒，這種顆粒具有選擇性吸附水性果汁中綠原酸的能力，因此可用于選擇性的分離和測(cè)定綠原酸。

綠原酸的含量測(cè)定多使用傳統(tǒng)方法[18]，如：紫外分光光度法（UV）、高效液相色譜（HPLC）；高效毛細(xì)管電泳（HPCE）等傳統(tǒng)的方法。但綠原酸的含量測(cè)定主要挑戰(zhàn)就是綠原酸同分異構(gòu)體和類似物。這些物質(zhì)結(jié)構(gòu)相似，而且常常同時(shí)存在于同一種植物或同一藥材中，特別是對(duì)中藥復(fù)方成分進(jìn)行含量測(cè)定時(shí)容易形成干擾，因此科學(xué)家不斷地進(jìn)行研究、創(chuàng)新，發(fā)明了許多測(cè)定綠原酸類物質(zhì)的新方法。Ma JN等用超高效液相-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜的多重反應(yīng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)模式對(duì)蒙藥藍(lán)盆花的綠原酸及3種二咖啡奎尼酸異構(gòu)體進(jìn)行了定量分析[19]。Ribeiro[20]研制出一種新型的碳納米分子印跡溶膠凝膠電化學(xué)傳感器，該傳感器應(yīng)用于咖啡和番茄中綠原酸的測(cè)定，回收率分別是99.3%和108.6%，在食品檢測(cè)中顯示出良好的應(yīng)用潛力。Zhang ShuiHan等[21]利用高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜法（HPLC-Q-TOF-MS/MS）技術(shù)，對(duì)灰氈毛忍冬的花蕾中的綠原酸進(jìn)行了全面分析，這種方法在檢測(cè)天然產(chǎn)物中的同分異構(gòu)體時(shí)效果很好。Tomac[22]根據(jù)綠原酸的電化學(xué)性能，尤其是分子結(jié)構(gòu)中的羥基（-OH）、碳碳雙鍵（-CH=CH）和酯基（-COOR））的電子效應(yīng)，用微分脈沖伏安法（DPV）測(cè)定其在咖啡中的含量，結(jié)果表明：這種方法對(duì)綠原酸非常敏感且具有很好的選擇性。

4 綠原酸及其類似物的化學(xué)合成

4.1 綠原酸的合成

綠原酸在人類健康中發(fā)揮著重要的作用，由于其含量低、提取分離困難，很難大量獲得，因此越來(lái)越多的人希望通過(guò)化學(xué)合成的方法得到這類化合物。然而，由于分子中有多個(gè)羥基和羧基及酯鍵的存在，使綠原酸的合成困難重重，進(jìn)展緩慢。綠原酸本身的全合成早在50年代就有報(bào)道，羥基和羧基均需要使用幾個(gè)保護(hù)基團(tuán)并需要酸和堿處理去保護(hù)，使得綠原酸的產(chǎn)率不高。1998年Rohloff[23]報(bào)道了用丙酮與2，2-二甲氧基丙烷（DMP）的混合物可將奎尼酸轉(zhuǎn)化為B和微量的AOH（見(jiàn)圖2合成路線中相應(yīng)的結(jié)構(gòu)）?；衔顰OH是1，7和4，5位被保護(hù)，只有3-位為游離羥基的奎尼酸二縮酮中間體。2001年，Michael Sefkow[24]也成功合成了綠原酸，他指出，反應(yīng)的關(guān)鍵是合成中間產(chǎn)物二縮丙酮。二縮丙酮合成主要是使用動(dòng)力學(xué)的縮化作用，先將奎尼酸用三甲基氯硅烷（Me3SiCl）轉(zhuǎn)化為五硅烷化奎尼酸，在丙酮和DMP的混合溶液中，降低溫度并相對(duì)增加催化劑TMS-OTf的量可以減少副產(chǎn)物的生成，同時(shí)大量生成3位羥基游離的二縮丙酮AOH?；衔顰OH再與乙?？Х弱Ｂ确磻?yīng)后去保護(hù)得到收率較好的綠原酸（合成路線1）。2008年，Smarrito等[25]通過(guò)奎尼酸馬龍酸酯與阿魏醛進(jìn)行Knoevenagel縮合反應(yīng)，合成了3-O-阿魏?？崴?，即3'-O-甲基化綠原酸。

圖2 綠原酸的合成路線Fig.2 Synthetic route of chlorogenic acid

4.2 綠原酸衍生物的合成

由于綠原酸的分子結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)羥基和羧基，因此可以作為原料來(lái)合成活性更強(qiáng)或有新活性的衍生物。在綠原酸的7位引入親脂性基團(tuán)后，生成有抗深部真菌作用的衍生物[26]（見(jiàn)圖3（a））。在綠原酸1，7和3，4位通過(guò)縮酮或縮醛鍵引入親脂性基團(tuán)的化合物對(duì)α-葡萄糖苷酶有很強(qiáng)抑制作用，α-葡萄糖苷酶抑制劑可以延緩胃腸道對(duì)碳水化合物的消化和吸收，降低餐后高血糖，也是用來(lái)研發(fā)抗 II-型糖尿病藥物的重要物質(zhì)[27]（見(jiàn)圖 3（b））。以奎尼酸二縮酮中間體（AOH）為起始原料，合成一系列2，3脫水的咖啡奎尼酸衍生物，其中2，3脫水的單咖啡酰奎尼酸具有良好的抗HIV病毒活性。2，3脫水的4，5二咖啡?？崴岬目笻IV病毒活性是3，5 二咖啡酰奎尼酸的 2 倍[28]（見(jiàn)圖 3（c））。 在綠原酸1位引入氨基酸側(cè)鏈形成帶有酰胺鍵的衍生物，該物質(zhì)具有抑制真菌1，3-β-D-葡聚糖合成酶的活性[29]（見(jiàn)圖 3（d））。

5 綠原酸生物活性

5.1 抗氧化活性

氧化應(yīng)激（Oxidative Stress，OS）是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí)，體內(nèi)高活性分子如活性氧自由基 （reactive oxygen species，ROS）和活性氮自由基（reactive nitrogen species，RNS）產(chǎn)生過(guò)多，導(dǎo)致氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，這種負(fù)面反應(yīng)是導(dǎo)致衰老和疾病的一個(gè)重要因素。同樣，在傷口愈合過(guò)程中，一旦氧化應(yīng)激發(fā)生，傷口的愈合也被延遲。Bagdas[30]研究發(fā)現(xiàn)，綠原酸具有非常強(qiáng)的抗氧化作用，能加速糖尿病大鼠創(chuàng)面修復(fù)，同時(shí)還不影響傷口超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶水平。氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)發(fā)生的過(guò)程中伴隨著肝功能和腎功能下降。Li Shiyong等[31]研究發(fā)現(xiàn)，綠原酸能促進(jìn)蛋白激酶B（Akt）的磷酸化，增加FOXO家族基因和抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)來(lái)抑制活性氧對(duì)骨髓干細(xì)胞的損傷。Zhou Yan[32]研究了綠原酸對(duì)線粒體的保護(hù)作用，通過(guò)綠原酸可以改善H2O2誘導(dǎo)損傷的腸道線粒體，使其呼吸鏈復(fù)合物I、IV、V的活性增加，還可以改變?nèi)趸交撬嵴T導(dǎo)的結(jié)腸炎大鼠的線粒體超微結(jié)構(gòu)和線粒體損傷的事實(shí)，因此，證明綠原酸是一種可以通過(guò)改善和治療線粒體氧化損傷的防治腸道疾病的很有前途的藥物。Ferlemi等[33]用亞硒酸鈉誘導(dǎo)大鼠白內(nèi)障形成，然后采用含有綠原酸等強(qiáng)生物活性的多酚物質(zhì)的藍(lán)莓葉提取物進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其可以通過(guò)直接或間接抑制鈣蛋白酶的活性來(lái)防止白內(nèi)障的發(fā)生。

圖3 綠原酸衍生物的合成路線Fig.3 Synthetic route of Chlorogenic acid derivatives

5.2 綠原酸的消炎和抗菌活性

炎癥反應(yīng)是由外源性或內(nèi)源性因素所引起組織損傷的一種生理反應(yīng)。腸道炎癥是一種慢性復(fù)發(fā)性疾病，可使腸道上皮細(xì)胞損傷。綠原酸可以通過(guò)調(diào)節(jié)白細(xì)胞介素-8（IL8）來(lái)抑制由TNF-α和 H2O2所引起的腸上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)[34]。Feng Yan等人[35]考察了綠原酸在體內(nèi)、體外的抗氧化作用，結(jié)果表明綠原酸對(duì)D-半乳糖（D-galactose）所誘導(dǎo)的慢性肝、腎損傷有保護(hù)作用，這種保護(hù)作用是由于其具有抗氧化和抗炎活性。Lou Lixia等[36]通過(guò)白細(xì)胞介素誘導(dǎo)成纖維樣滑膜細(xì)胞（RSC-364）的發(fā)生炎癥反應(yīng)，通過(guò)流式細(xì)胞儀和Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，綠原酸能夠抑制細(xì)胞JAK/STAT and NF-kappa B信號(hào)通路中的關(guān)鍵分子的表達(dá)水平，并抑制這些信號(hào)通路在炎癥反應(yīng)中的激活，從而抑制滑膜細(xì)胞增殖。綠原酸在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中顯示出較好的的治療潛力。

綠原酸類化合物對(duì)多種病毒有較強(qiáng)的抑制和殺滅作用[9，37]。董俊興等[38]通過(guò)病毒、細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)二咖啡?？崴峒翱Х弱？崴嵫苌飳?duì)乙型肝炎病毒及逆轉(zhuǎn)錄病毒抗原的表達(dá)、DNA的復(fù)制有良好的抑制作用，從而可以治療乙型肝炎及逆轉(zhuǎn)錄病毒的相關(guān)疾病。甲型流感病毒也嚴(yán)重威脅著人類的健康，各種亞型的病毒更是嚴(yán)重制約了藥物的開(kāi)發(fā)。Karar等[39]通過(guò)酶的抑制實(shí)驗(yàn)證明：綠原酸及其衍生物能夠抑制神經(jīng)酰胺酶的活性從而具有抗病毒活性。同時(shí)，Liu Zekun[40]利用計(jì)算機(jī)程序也計(jì)算出這些小分子與神經(jīng)氨酸酶有較強(qiáng)的結(jié)合能力，有助于進(jìn)一步設(shè)計(jì)和開(kāi)發(fā)出治療H1N1及其他抗病毒的藥物。綠原酸和3，5-二咖啡?？崴嵋诧@示出細(xì)胞水平的抗丙型肝炎病毒作用[19]。

綠原酸對(duì)植物病害也有抑制作用。玉米抗穗腐病是由禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）和單端孢菌（Trichothecium spp）等多種病原菌侵染而引起的，Atanasova-Penichon等人[41]在為期2年的實(shí)地研究中發(fā)現(xiàn)，綠原酸含量高的品種中玉米抗穗腐病的發(fā)病率較低，這可能是因?yàn)榫G原酸對(duì)單端孢菌的積累有抑制作用，以此達(dá)到抗病的效果。

5.3 綠原酸的保肝作用

內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種成分，它可誘導(dǎo)代謝異常，如血脂異常、高脂血癥。Zhou Yan等[42]通過(guò)腹腔注射內(nèi)毒素造成大鼠的脂代謝紊亂，而后每日灌胃給予綠原酸，一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)給予綠原酸的大鼠與損傷組大鼠相比內(nèi)臟脂肪細(xì)胞的面積減少，肝損傷改善。這些結(jié)果表明綠原酸通過(guò)調(diào)節(jié)脂肪酸代謝酶有效地改善大鼠肝臟脂質(zhì)紊亂，并刺激腺苷酸活化蛋白激酶的活化，調(diào)節(jié)肝脂肪酸水平。永久性膽管結(jié)扎也可致肝損傷，Wu Duohu等[43]通過(guò)肝指數(shù)、肝功能及病理學(xué)觀察，口服綠原酸治療3周明顯減弱肝腫脹和纖維化。血生化結(jié)果顯示綠原酸可降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、總膽紅素、直接膽紅素和總膽汁酸。

5.4 綠原酸的其他生物活性

杜仲是中國(guó)著名滋補(bǔ)藥材，綠原酸是杜仲中的重要化合物，它具有改善認(rèn)知能力的藥理作用。Wu Jianming等[44]第一次報(bào)道綠原酸抗抑郁的藥理作用，其過(guò)程是綠原酸穿過(guò)血-腦脊液屏障對(duì)神經(jīng)元起到保護(hù)作用，同時(shí)還促進(jìn)血清素釋放來(lái)提高體外胚胎大鼠中縫神經(jīng)元細(xì)胞Ⅰ的表達(dá)，達(dá)到抗抑郁的效果。因此，該項(xiàng)研究證明杜仲可作為治療抑郁癥的天然藥物。綠原酸能夠維持血糖濃度，Peng Bingjie等[45]利用高脂飲食引起大鼠小腸葡萄糖代謝紊亂，破壞血糖平衡。通過(guò)在高脂飲食中添加綠原酸，利用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)分析葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的胰高血糖素原mRNA在不同腸段 （十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸）的表達(dá)水平，由此得出，綠原酸可以通過(guò)調(diào)節(jié)腸道內(nèi)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和胰高血糖素原的表達(dá)，來(lái)影響葡萄糖代謝，從而控制血糖和胰島素來(lái)維持血糖平衡。綠原酸是忍冬藤的主要成分，中藥用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）。在日常生活中，酒精是最常見(jiàn)的濫用精神藥物之一，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有不良影響，最不利的結(jié)果就是海馬和新皮質(zhì)腦區(qū)的神經(jīng)元丟失，這可能與細(xì)胞凋亡和壞死的氧化應(yīng)激介導(dǎo)相關(guān)。最近的研究表明，許多植物的天然產(chǎn)物對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損傷起著重要的保護(hù)作用。有報(bào)道稱，綠原酸對(duì)氧化應(yīng)激有神經(jīng)保護(hù)作用。PC12細(xì)胞與神經(jīng)元相似，因此研究人員利用PC12細(xì)胞，研究了綠原酸對(duì)乙醇誘導(dǎo)的大鼠PC12細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果表明：綠原酸可以增加細(xì)胞的活力，促進(jìn)細(xì)胞分化，防止乙醇誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與GAP-43的表達(dá)增強(qiáng)和線粒體凋亡途徑的抑制有關(guān)[46]。

6 綠原酸的吸收與代謝

6.1 綠原酸的吸收

Azuma等[47]以248 mg/kg的綠原酸灌胃大鼠，結(jié)果只在血漿中檢測(cè)到少量咖啡酸和阿魏酸的結(jié)合物，并未檢測(cè)到原形藥物。以同樣劑量咖啡酸灌胃大鼠，結(jié)果在血漿中不僅可以檢測(cè)到原形藥物，還可以檢測(cè)到多種代謝產(chǎn)物。因此推測(cè)咖啡酸口服效果好，而綠原酸口服效果差，究其原因可能是綠原酸分子中有化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的酯鍵存在，綠原酸口服后僅有微量可被完整吸收（見(jiàn)圖4），絕大部分綠原酸在體內(nèi)會(huì)發(fā)生酯鍵斷裂，水解釋放出咖啡酸[48-51]。而酯鍵斷裂后，綠原酸的一些生理活性消失，如綠原酸有抑制肝臟葡萄糖-6-磷酸酶作用，而綠原酸的水解產(chǎn)物咖啡酸和奎尼酸則無(wú)此作用。Khan等[52]為了提高綠原酸的口服生物利用度和藥效活性，開(kāi)發(fā)了一種可口服的納米脂質(zhì)載體（NLC），評(píng)估其體外釋放。Wang Lingna等[53]合成了化學(xué)性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定的酰胺鍵代替酯鍵的綠原酸類似物，該化合物不僅抗氧化性強(qiáng)于綠原酸，同時(shí)還具有抗HCV病毒活性，代謝穩(wěn)定性也大幅增加。

圖4 綠原酸的吸收Fig.4 Absorption of chlorogenic acid

6.2 綠原酸的代謝

綠原酸的吸收主要在小腸和結(jié)腸，在微生物的作用下轉(zhuǎn)化成多種代謝產(chǎn)物。Tomas-Barberan等[54]將9個(gè)供試者的糞便樣品與綠原酸共孵育，利用四極桿串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)微生物轉(zhuǎn)化結(jié)果，結(jié)果顯示綠原酸可代謝為咖啡酸等幾個(gè)化合物。Goodwin[55]比較了大鼠腸道中的微生物對(duì)綠原酸代謝的影響，結(jié)果無(wú)菌大鼠給藥后，綠原酸以原型存在；而普通大鼠給藥后，很快能檢測(cè)到咖啡酸。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明腸道菌群是造成綠原酸水解的主要因素。

透過(guò)腸道屏障的綠原酸、咖啡酸和奎尼酸進(jìn)一步在肝臟中代謝[56]，當(dāng)研究人員把咖啡酸給予腸道中無(wú)菌的大鼠時(shí)，可在尿液中可檢測(cè)到咖啡酸和阿魏酸，因此證明，甲基化發(fā)生于肝臟。其原理是咖啡酸的羥基在兒茶酚鄰位甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下，發(fā)生甲基化，轉(zhuǎn)化為阿魏酸和異阿魏酸；肝臟中也可發(fā)生氧化還原反應(yīng)，阿魏酸的側(cè)鏈被氧化，生成香草酸；或者側(cè)鏈的不飽和鍵被還原，還原成二氫阿魏酸、二氫咖啡酸、二氫異阿魏酸；咖啡酸還可發(fā)生酯化反應(yīng)，例如：咖啡酸與硫酸結(jié)合形成3-或4-O-硫酸酯；阿魏酸與硫酸結(jié)合形成阿魏酸-4-O-硫酸酯[57]；馬尿酸與甘氨酸結(jié)合形成馬尿酸甘氨酰酯[58]。

7 結(jié)語(yǔ)與展望

在衛(wèi)生部《藥品標(biāo)準(zhǔn)》中收錄了170種中成藥，其中在清熱解毒、抗菌消炎的藥物中多以綠原酸為主要成分。綠原酸等多酚類物質(zhì)也被稱為“第七類營(yíng)養(yǎng)素”，因此被廣泛用于保健行業(yè)，添加了綠原酸的保健藥品具有清熱解毒、養(yǎng)顏潤(rùn)膚等特點(diǎn)[59]。在食品行業(yè)中，綠原酸具有增香和護(hù)色作用，在食品和果品的保鮮中應(yīng)用廣泛。綠原酸還能有效防止紫外線對(duì)人體皮膚產(chǎn)生的傷害作用，因此研究人員將綠原酸添加到化妝品中，研發(fā)出各種皮膚防曬劑和保護(hù)染發(fā)劑對(duì)頭發(fā)損傷的洗發(fā)水[60]。

我國(guó)擁有豐富的富含綠原酸的植物資源，如金銀花、杜仲、藍(lán)盆花等。目前，我國(guó)對(duì)于綠原酸開(kāi)發(fā)利用，主要依靠天然植物資源，但是對(duì)于任何一種天然化合物來(lái)講均不利于其可持續(xù)發(fā)展。因此，提高綠原酸的生物利用度，擴(kuò)展其開(kāi)發(fā)利用途徑勢(shì)在必行。目前本實(shí)驗(yàn)室針對(duì)提高綠原酸的生物利用度開(kāi)展了一系列的實(shí)驗(yàn)，目的是在保持原有生物活性的基礎(chǔ)上增加其穩(wěn)定性，為新藥開(kāi)發(fā)提供有效途徑。

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