貴州省水城某肉牛場(chǎng)支原體肺炎診治

張濤劉鏡楊莉余波,徐景峨陳堯貴吳位珩*

（1，貴州宏宇畜牧技術(shù)發(fā)展有限公司 550005；2，貴州省畜牧獸醫(yī)研究所 550005；3，貴州省六盤水市水城鐘山區(qū)生態(tài)文明建設(shè)局 553000）

隨著扶貧攻堅(jiān)的開展，貴州畜牧業(yè)得到有效發(fā)展，貴州省肉牛引進(jìn)量不斷增大，但也帶來了一系列流行病感染問題，極大的影響和威脅著我省牛養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。牛支原體 （Mycoplasma bovis） 屬軟皮綱 （Mollicutes）， 支原體目（Mycoplasmatles），是一類沒有細(xì)胞壁、介于細(xì)菌和病毒之間的最小原核微生物，主要引起牛的肺炎、關(guān)節(jié)炎、角膜結(jié)膜炎等疾病，同時(shí)也是引起牛運(yùn)輸綜合癥的主要病因之一[1]。牛支原體病的發(fā)生和流行在我國(guó)各地區(qū)均有報(bào)道，貴州省水城某肉牛場(chǎng)2017年就發(fā)生了一起牛支原體病，在項(xiàng)目組的指導(dǎo)下，該場(chǎng)牛支原體病得到了有效的防治，取得了較好的效果，現(xiàn)將具體情況匯報(bào)如下。

1 發(fā)病情況

2017年6月，貴州省水城的某肉牛場(chǎng)因從云南某地引進(jìn)的能繁育母牛發(fā)生疾病，該場(chǎng)共有牛116頭，其中發(fā)病24頭，發(fā)病嚴(yán)重的牛表現(xiàn)食欲廢絕，反芻遲緩，倒地不起，畜主根據(jù)臨床癥狀和養(yǎng)殖經(jīng)驗(yàn)，采用解磷定進(jìn)行中毒的治療，結(jié)果未見好轉(zhuǎn)，死亡6頭。故畜主報(bào)告當(dāng)?shù)厍矮F防站工作人員，并無菌采集的死亡牛組織樣本 （肺、心、肝、脾、腎、淋巴結(jié)等）到貴州省畜牧獸醫(yī)研究所求診，根據(jù)到牛場(chǎng)進(jìn)行實(shí)地病牛臨床癥狀觀察，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷，確診為牛支原體病，并指導(dǎo)該場(chǎng)進(jìn)行了牛支原體的治療與預(yù)防，使該場(chǎng)的疾病發(fā)生和流行得到有效控制。

2 臨床解剖癥狀

對(duì)發(fā)病肉牛進(jìn)行臨床癥狀觀察，病牛體溫在39～41℃，精神不振，食欲減退，呼吸急促，伴有氣喘、咳嗽，夜間咳嗽加重，流涕；感染病嚴(yán)重肉牛食欲廢絕，明顯消瘦，毛被粗亂無光澤，最后倒地不起，引起死亡。死亡牛關(guān)節(jié)腫大，眼結(jié)膜明顯發(fā)炎，并有膿液或分泌物，病死牛肺樣進(jìn)行病理解剖觀察，肺間質(zhì)增生，肺尖葉、心葉積膿，有干酪樣壞死樣。根據(jù)臨床癥狀和病理解剖觀察，初步診斷為牛支原體病。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 試劑

10%精氨酸溶液：將10g精氨酸粉劑榮樂80ml無菌水中，完全溶解后加水定容至100ml，0.22μm濾膜過濾后，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

PPLO液體培養(yǎng)基：葡萄糖2.5g，PPLO肉湯粉10.5g，酵母粉2.5g，蒸餾水445ml，116℃滅菌20min，冷卻后加馬血清 50ml， 10%精氨酸 5ml， 10×MEM 5ml， 8萬單位/ml青霉素溶液5ml，1%酚紅溶液500μl，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

PPLO固體培養(yǎng)基：葡萄糖2.5g，PPLO肉湯粉10.5g，酵母粉2.5g，蒸餾水440ml，116℃滅菌20min，冷卻后加馬血清 50ml， 10%精氨酸 5ml， 10×MEM 5ml， 8萬單位/ml青霉素溶液5ml，鋪置平板，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

3.2 病原學(xué)分離培養(yǎng)與鑒定

將采集的感病肉牛肺樣于無菌環(huán)境下接種于PPLO液體培養(yǎng)基，置于37℃，5%的CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中，恒溫培養(yǎng)3～4d，選取培養(yǎng)基由紅色變?yōu)槌吻?、透亮的淡黃色培養(yǎng)菌株，用接種針在PPLO固體平板上劃線培養(yǎng)。3～4d后于顯微鏡下觀察可見菌落呈 “煎雞蛋”特征，表面光滑，邊緣整齊。通過實(shí)驗(yàn)室診斷，結(jié)合臨床癥狀和病理解剖，可以確診為牛支原體肺炎。

4 防治

4.1 預(yù)防措施

預(yù)防和控制牛支原體病有一些操作規(guī)則，每個(gè)牧場(chǎng)應(yīng)嚴(yán)格遵循。

4.1.1 嚴(yán)格引進(jìn)新牛

要挑選皮毛富有光澤，體溫正常，精神狀態(tài)良好，食欲旺盛，活動(dòng)靈活的牛。引進(jìn)的犢牛，除具有上述條件，最好挑選體重超過150kg，犢牛斷奶至少超過60d，符合以上標(biāo)準(zhǔn)的犢牛才能夠引進(jìn)。起運(yùn)前，要嚴(yán)格控制水和草料飼喂適量，或在飼喂30min后按每千克體重給每頭犢牛注射1mg氟苯尼考注射液。在運(yùn)輸過程，避免牛畜過于擁擠，同時(shí)可飼喂適量清水。牛達(dá)到目的地后須進(jìn)行充分休息，可先飼喂適量玉米粥 （即按1kg玉米面添加4kg溫開水，再添加少量的鹽分），接著飼喂足夠的青綠飼草。對(duì)新進(jìn)來的牛進(jìn)行監(jiān)控和隔離，并且檢測(cè)其是否感染支原體。

4.1.2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

保證良好的衛(wèi)生環(huán)境非常重要，牛舍保持干燥、清潔、通風(fēng)良好，注意防寒保暖。特別是墊料的衛(wèi)生應(yīng)該非常注意，定期對(duì)肉牛場(chǎng)的設(shè)施及設(shè)備進(jìn)行清潔[2]。定期進(jìn)行消毒，圈舍可定期噴灑10～20%的石灰乳或者20～25%的草木灰進(jìn)行消毒，也可以撒布適量的干石灰粉或者草木灰?？刂骑曫B(yǎng)密度適宜，防止過于擁擠。不同來源及不同年齡的肉牛要采取分欄飼養(yǎng)。飼喂品質(zhì)優(yōu)良的飼料，補(bǔ)充適量的精料、微量元素和維生素，確保日糧含有全面、均衡的營(yíng)養(yǎng)，增強(qiáng)機(jī)體抵抗力。

4.2 治療

由于支原體沒有細(xì)胞壁，支原體對(duì)磺胺類和β-內(nèi)酰胺類藥物不敏感，賀晨飛等[3]通過牛支原體體外藥物敏感性分析篩選到臨床上對(duì)該病的治療藥物為達(dá)氟沙星、林可霉素和阿奇霉素。此外，可選擇使用牛支原體呈高敏的抗菌藥，如泰妙菌素、泰樂菌素、氟苯尼考等，同時(shí)可補(bǔ)充多種維生素，口服或肌肉注射或輸液，補(bǔ)充10%葡萄糖。由于大多數(shù)的肉牛支原體病伴有多病原混合感染現(xiàn)象出現(xiàn)，治療時(shí)可以采用四環(huán)素、慶大霉素、地塞米松合并用藥，同時(shí)補(bǔ)充10%葡萄糖和VC，用藥5～7d一個(gè)療程。

5 討論

據(jù)報(bào)道，牛支原體已在多個(gè)國(guó)家引起牛呼吸道疾病并造成了一系列的經(jīng)濟(jì)損失。我國(guó)于2008年首次從患肺炎的犢牛肺臟中分離并鑒定得到牛支原體[4]。通常檢測(cè)牛支原體主要結(jié)合形態(tài)觀察、分子生物學(xué)方法 （PCR、熒光定量PCR技術(shù)等）、血清學(xué)方法 （ELISA、IHA等）[5]。近年來，隨著畜牧業(yè)的發(fā)展，地方養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)優(yōu)質(zhì)品種肉牛的引進(jìn)，牛支原體報(bào)道也逐漸增多，由該病帶來的經(jīng)濟(jì)損失也是巨大的[7]。牛支原體是牛呼吸疾病綜合征 （Bovine respiratory disease complex,BRD）的主要病因之一，部分病牛伴有關(guān)節(jié)炎、結(jié)膜炎、生殖道炎等多種疾病[7]。任何年齡階段的牛均可感染牛支原體病，2～6月齡的犢牛最易感染。牛支原體主要通過直接接觸或經(jīng)呼吸道、生殖道、泌乳等途徑進(jìn)行傳播。運(yùn)輸應(yīng)激是牛支原體肺炎的重要誘導(dǎo)因素，可引發(fā)一系列非特異性病理反應(yīng)，造成較大的發(fā)病率和死亡率，給養(yǎng)殖戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[8]。

貴州省具有發(fā)展養(yǎng)牛業(yè)的豐富資源及養(yǎng)殖環(huán)境，牛支原體病勢(shì)必威脅養(yǎng)牛業(yè)健康快速發(fā)展，對(duì)該病的控制遵循 “早診斷，早治療”原則；在條件允許下，減少牛種引進(jìn)，堅(jiān)持“自繁自養(yǎng)原則”，避免應(yīng)激反應(yīng)或引入病原；加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，保證圈舍具有干燥、清潔和良好的通風(fēng)條件，并定期對(duì)圈舍進(jìn)行消毒和殺菌。同時(shí)，研制并開發(fā)有效的診斷試劑盒和獸用中藥來防控牛支原體病，使養(yǎng)牛業(yè)健康和穩(wěn)定的發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

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[3]賀晨飛,Riaz Mustafa,陳穎鈺,等.牛支原體體外藥物敏感性分析[J].中國(guó)奶牛,2015(16):32-35.

[4]幸九慶,李月媛,郭丹,等.國(guó)內(nèi)首次從患肺炎的犢牛肺臟中分離到牛支原體[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2008,30(9):661-664.

[5]莊金秋,梅建國(guó),劉吉山,姚春陽(yáng).牛支原體實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].中國(guó)草食動(dòng)物科學(xué),2016,36(5):58-61.

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