同工酶和SSR分子標(biāo)記技術(shù)在親緣關(guān)系鑒定中的應(yīng)用

石祥鵬

摘要：作物種質(zhì)資源親緣關(guān)系的確定可以為種質(zhì)資源的有效利用和優(yōu)良品種的選育提供理論依據(jù)，本文綜述了同工酶和SSR分子標(biāo)記技術(shù)在親緣關(guān)系鑒定中的應(yīng)用，并對(duì)上述兩種技術(shù)在育種中的應(yīng)用進(jìn)行了展望。

關(guān)鍵詞：親緣關(guān)系;同工酶;SSR標(biāo)記

0 前言

微衛(wèi)星（microsatellite）又稱簡單序列重復(fù)（simplesequence repeats，SSR），是指在真核生物整個(gè)基因組中存在序列較短且重復(fù)出現(xiàn)的核苷酸序列。SSR的多態(tài)性主要由于兩端序列的重復(fù)序列數(shù)目或重復(fù)程度不同導(dǎo)致的，且是相對(duì)保守的單拷貝序列，因此可根據(jù)側(cè)翼序列設(shè)計(jì)引物。

遺傳應(yīng)用上，同工酶原理在于其功能相同但結(jié)構(gòu)不同，由于結(jié)構(gòu)中氨基酸序列或組成有差異致使同工酶在電泳時(shí)遷移率存在差異。分離方法主要有電泳法、層析法、酶學(xué)法和免疫學(xué)法等，其中以電泳法應(yīng)用最為廣泛。同工酶在不同的生理狀態(tài)、發(fā)育時(shí)期、不同品種中的活性、數(shù)目都變化較大，其電泳圖譜在一定條件下較為穩(wěn)定，具有種屬專一性。

文中筆者就SSR分子標(biāo)記和同工酶在種質(zhì)資源的遺傳多樣性正確評(píng)價(jià)和合理利用進(jìn)行概述。

1 SSR分子標(biāo)記

SSR分子標(biāo)記具有較高的多態(tài)性、共顯性，在基因組上分布均勻、隨機(jī)，對(duì)DNA樣本質(zhì)量要求不高，遺傳信息量大等特征，因而在遺傳多樣性分析方面得到廣泛應(yīng)用。

艾先濤等利用SSR標(biāo)記對(duì)新疆自育陸地棉品種進(jìn)行遺傳多樣性分析，得出品種間具有相對(duì)較高的遺傳相似性，總體上遺傳多樣性不豐富，表明新疆自育陸地棉品種間親緣關(guān)系較近。陸敏佳等利用SSR引物對(duì)41個(gè)藜麥種質(zhì)的多態(tài)性及其親緣關(guān)系進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，共檢測出139個(gè)等位基因條帶，平均為8.7;16對(duì)引物的多態(tài)信息含量（PIC）變幅為0.208～0.432，平均為0.366，表明來源于不同地區(qū)的遺傳距離較遠(yuǎn)，遺傳基礎(chǔ)較廣泛。

2 同工酶

同工酶分析技術(shù)是通過電泳和組織化學(xué)方法進(jìn)行特異性染色而把酶蛋白分子分離，并將其位置和活性直接在染色區(qū)帶以酶譜的形式標(biāo)記出來。DNA上結(jié)構(gòu)基因的遺傳信息決定了同工酶多肽鏈結(jié)構(gòu)中的氨基酸排列順序，借助于酶譜分析的方法識(shí)別控制譜帶表達(dá)的基因，從而從本質(zhì)上揭示材料間的遺傳差異性。

劉承源等利用同工酶對(duì)月季種質(zhì)資源的親緣關(guān)系及雜種真實(shí)性進(jìn)行分析，在相對(duì)遷移率為0.264-0.858的位點(diǎn)處共獲得7條酶帶，其中共有酶帶3條，特征酶帶4條，表明月季種質(zhì)間遺傳多樣性豐富的同時(shí)，又存在一致性。李永祥等對(duì)3種性別野牛草幼葉和幼穗的3種同工酶（過氧化物酶、超氧化物歧化酶、多酚氧化酶）進(jìn)行酶譜分析，結(jié)果表明葉片的過氧化酶、多酚氧化酶可以用來對(duì)野牛草進(jìn)行早期性別鑒定。

3 展望

同工酶和SSR分子標(biāo)記技術(shù)在育種中主要用于種質(zhì)資源間遺傳多樣性分析、聚類劃分群體等方面，經(jīng)過長時(shí)間的摸索、探究，已經(jīng)形成較為成熟的技術(shù)體系;單核苷酸多態(tài)性（SNP）技術(shù)的出現(xiàn)表明未來檢測手段應(yīng)朝著更加精確、細(xì)致的方向發(fā)展。

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