• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    止得咳顆粒質量標準的研究

    2018-01-17 11:00黃敏黃國東韋瑀龍謝廣源陸丹萍吳變美
    中國醫(yī)藥導報 2018年30期
    關鍵詞:黃芩苷薄層色譜射干

    黃敏 黃國東 韋瑀龍 謝廣源 陸丹萍 吳變美

    [摘要] 目的 建立止得咳顆粒的質量標準研究方法。 方法 采用薄層色譜法(TLC)對白前、射干進行定性鑒別;采用高效液相色譜法(HPLC)C18色譜柱測定黃芩苷和次野鳶尾黃素的含量:流動相為甲醇-0.2%磷酸溶液(49∶51);流速為1 mL/min;檢測波長為266 nm。 結果 TLC斑點清晰,陰性無干擾。HPLC定量測定中,黃芩苷和次野鳶尾黃素分別在947.1~7577.0 ng(r = 0.9998)、18.03~180.30 ng(r = 0.9999)范圍內線性關系良好,平均加樣回收率分別為100.6%(RSD = 0.4%)、93.1%(RSD = 0.6%)。 結論 該方法簡便、可行、靈敏、準確,可作為止得咳顆粒的質量控制方法。

    [關鍵詞] 止得咳顆粒;黃芩苷;次野鳶尾黃素;白前;射干;薄層色譜;高效液相色譜

    [中圖分類號] R927.11 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210(2018)10(c)-0106-05

    [Abstract] Objective To establish a study method for the quality standard of Zhideke Granules. Methods Thin layer chromatography (TLC) was used for the qualitative identification of Cynanchum glaucescens and Belamcanda chinensis. High performance liquid chromatography (HPLC) was used to determine baicalin and irisflorentin by C18 chromatographic column, the mobile phase was methanol-0.2% phosphoric acid solution (49∶51), the flow rate was 1 mL/min, the detection wavelength was set at 266 nm. Results The TLC spots were clear and free from negative interference. In HPLC quantitative determination, baicalin and irisflorentin showed good linear relationships within the ranges of 947.1-7577.2 ng (r = 0.9998) and 18.032-180.32 ng (r = 0.9999), whose average recovery were 100.6% (RSD = 0.4%) and 93.1% (RSD = 0.6%), respectively. Conclusion The method is simple, feasible, sensitive and accurate, which can be used as the quality control method of Zhideke Granules.

    [Key words] Zhideke Granules; Baicalin; Irisflorentin; Cynanchum glaucescens; Belamcanda chinecsis; Thin layer chromatography; High performance liquid chromatography

    止得咳顆粒由桔梗[1]、白前[2]、枇杷葉[3]、射干[4]、柴胡[5]、黃芩[6]等10味中藥經科學配伍而成,具有清熱解毒、止咳化痰的功效,臨床上用于感冒發(fā)熱、頭痛、噴嚏、急慢性氣管炎、肺炎咳嗽、喉炎。本品為廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院醫(yī)療機構制劑,其質量控制方法簡單,無鑒別、含測等專屬性強的檢測項目,為了能更好地控制產品質量[7],本研究參考2015版《中國藥典》各味藥材質量檢測標準[8]、廣東省中藥材標準第一冊[9]及廣西壯族自治區(qū)壯藥質量標準第二卷[10],基于樣品提取和色譜條件的優(yōu)化,選取白前和射干作為定性鑒別成分,另選取黃芩活性成分黃芩苷、射干活性成分次野鳶尾黃素作為含量測定指標性成分,建立準確性好、專屬性強的質量檢驗方法,用于該品種制劑的質量控制。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器

    Agilent 1260型高效液相色譜儀、十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱(Agilent Extend C18 250 mm×4.6 mm,5 μm;YMC-pack ODS-A 250 mm×4.6 mm,5 μm;Spolar C18 250 mm×4.6 mm,5 μm);AB265-S十萬分之一電子天平(梅特勒-托利多);SQ8200HBT超聲波清洗器(上海冠特超聲儀器有限公司);AXLC1820超純水機(重慶阿修羅科技發(fā)展有限公司);薄層板(青島海洋化工廠);紫外分析儀(北京賓達英創(chuàng)科技有限公司)。

    1.2 樣品與試劑

    樣品:止得咳顆粒(廣西匯科藥物研究有限責任公司,批號:170701、170702、170703);缺黃芩、射干的雙陰性樣品(廣西匯科藥物研究有限責任公司);對照藥材:白前(批號:121442-200501)、射干(批號:120994-201206);對照品:射干苷(批號:11632-200602)、黃芩苷(批號:110715-201612)、次野鳶尾黃素(批號:111557-200602),對照品與對照藥材均來自中國食品藥品檢定研究院。試劑:甲醇(色譜純),水(超純水),其他試劑均為分析純。

    2 方法與結果

    2.1 薄層色譜定性鑒別

    2.1.1 白前藥材的鑒別

    2.1.1.1 白前對照藥材溶液 取白前對照藥材1 g,加水50 mL,加熱回流1 h,放冷,用棉花濾過,取濾液,用氨試液飽和的正丁醇振搖提取2次,每次30 mL,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水50 mL洗滌,棄去水洗液,正丁醇層蒸干,殘渣加乙醇1 mL使溶解,制成白前對照藥材溶液。

    2.1.1.2 供試品溶液 取本品15 g,研細,加水50 mL使溶解,用氨試液飽和的正丁醇溶液振搖提取2次,每次50 mL,自“2.1.1.1”項下合并正丁醇提取液起,同法制成供試品溶液。

    2.1.1.3 鑒別方法 吸取供試品溶液和白前對照藥材溶液各10~15 μL,分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上,以環(huán)己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(4∶8∶0.05)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365 nm)下檢視,結果見圖1(封四)。由圖1可知,供試品在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點,且斑點清晰,分離度與比移值均良好。

    2.1.2 射干藥材的鑒別

    2.1.2.1 射干苷對照品溶液與射干對照藥材溶液 取射干對照藥材1 g,加水30 mL,超聲提取30 min,濾過,用乙酸乙酯提取2次,每次30 mL,合并乙酸乙酯液,蒸干,殘渣加甲醇1 mL使溶解,制成射干對照藥材溶液。再取射干苷對照品,加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作為射干苷對照品溶液。

    2.1.2.2 供試品溶液 取本品8 g,研細,加水30 mL使溶解,自“2.1.2.1”項下合并乙酸乙酯液起,同法配制作為供試品溶液。

    2.1.2.3 鑒別方法 吸取供試品溶液和射干對照藥材溶液、射干苷對照品溶液各2~5 μL,分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠GF254薄層板上,以三氯甲烷-丁酮-甲醇-冰醋酸(3∶1∶1∶0.1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(254 nm)下檢視,結果見圖2。由圖2可知,供試品在與對照品和對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點,且斑點清晰,分離度與比移值均良好。

    2.2 HPLC定量測定

    2.2.1 色譜條件

    色譜柱:Agilent Extend C18 250 mm×4.6 mm,5 μm;流動相:甲醇-0.2%磷酸溶液(49∶51);流速:1 mL/min;檢測波長:266 nm;柱溫:30℃;進樣量:10 μL。

    2.2.2 溶液的制備

    2.2.2.1 供試品溶液 取止得咳顆粒樣品研磨,取粉末約2 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入75%乙醇25 mL,稱定重量,密塞,超聲處理(功率250 W,頻率50 kHz)30 min,放冷,再稱定重量,用75%乙醇補足減失的重量,搖勻。

    2.2.2.2 雙陰性樣品溶液 取缺黃芩與射干的雙陰性樣品,與“2.2.2.1”同法配制。

    2.2.2.3 對照品儲備液與對照品溶液 ①黃芩苷對照品儲備液與對照品溶液:取黃芩苷對照品50.38 mg,置25 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容稀釋至刻度,搖勻,作為黃芩苷對照品儲備液;精密量取2 mL,加甲醇定容至10 mL作為黃芩苷對照品溶液。②次野鳶尾黃素對照品儲備液與對照品溶液:取次野鳶尾黃素對照品11.27 mg,置50 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容稀釋至刻度,搖勻,作為次野鳶尾黃素對照品儲備液;精密量取5 mL,加甲醇定容至100 mL,作為次野鳶尾黃素對照品溶液。

    2.2.3 專屬性試驗

    分別吸取對照品溶液、樣品溶液(批號:170703)及雙陰性樣品溶液各10 μL,依法測定。結果見圖3。結果顯示陰性樣品在主峰出峰位置無吸收峰,提示陰性樣品無干擾,方法專屬性良好。

    2.2.4 線性關系考察

    分別精密量取黃芩苷對照品儲備液,逐步稀釋成濃度為0.094 71、0.1894、0.3789、0.5683、0.7577 mg/mL的線性系列溶液。精密量取次野鳶尾黃素對照品儲備液,逐步稀釋成濃度為1.803、3.606、4.508、7.213、9.016、18.03 μg/mL的線性系列溶液。按“2.2.1”項下色譜條件進行測定,記錄圖譜。以進樣量C(x,ng)為橫坐標,峰面積(y)為縱坐標進行線性擬合,得回歸方程。黃芩苷:y = 1.9750x + 75.5497,r = 0.9998。次野鳶尾黃素:y = 4.2999x - 2.2947,r = 0.9999。結果顯示黃芩苷和次野鳶尾黃素分別在進樣量為947.1~7577.0 ng和18.03~180.30 ng范圍內線性關系良好。

    2.2.5 重復性試驗

    取止得咳顆粒樣品,按照“2.2.2.1”平行制備6份供試品溶液,按“2.2.1”項下色譜條件測定,記錄圖譜,計算黃芩苷、次野鳶尾黃素的含量及相對標準偏差。結果6份供試品溶液黃芩苷平均含量為4.260 mg/g,RSD為0.6%;次野鳶尾黃素平均含量為84.73 μg/g,RSD為1.4%,表明方法重復性良好。

    2.2.6 精密度試驗

    取黃芩苷對照品溶液、次野鳶尾黃素對照品溶液按“2.2.1”項下色譜條件連續(xù)進樣5次,記錄圖譜。結果兩組分峰面積RSD分別為0.1%和0.3%,表明該儀器精密度良好。

    2.2.7 穩(wěn)定性試驗

    取“2.2.5”項下重復性樣1溶液分別于室溫下放置0、4、8、16、24 h時按照“2.2.1”項下色譜條件進行測定,記錄色譜圖。結果顯示樣品黃芩苷、次野鳶尾黃素峰面積RSD分別為0.6%和2.0%,表明供試品溶液在24 h內穩(wěn)定性良好。

    2.2.8 加樣回收率試驗

    取已知含量的止得咳顆粒樣品約1 g,平行稱取6份,黃芩苷對照品儲備液(0.9321 mg/mL)5 mL、次野鳶尾黃素對照品儲備液(0.036 06 mg/mL)2.5 mL,依法測定,記錄圖譜并計算加樣回收率,結果見表1~2。

    2.2.9 耐用性試驗

    取供試品溶液,分別改變“2.2.1”項下色譜柱品牌(Agilent Extend C18 250 mm×4.6 mm,5 μm;YMC-pack ODS-A 250 mm×4.6 mm,5 μm;Spolar C18 250 mm×4.6 mm,5 μm)、流速(0.8、1.0、1.2 mL/min)、柱溫(25℃、30℃、35℃)、波長(261、266、271 nm)、流動相比例甲醇-0.2%磷酸溶液(46∶54、49∶51、54∶46),依法測定。結果顯示在改變色譜柱品牌、流速、柱溫、波長及流動相比例時,樣品測定結果相對標準偏差分別為黃芩苷:0.20%、0.20%、0.78%、0.54%、0.61%;次野鳶尾黃素:0.41%、0.51%、0.65%、0.42%、0.35%。各試驗條件下主峰分離效果良好,黃芩苷主峰理論塔板數均>2000,提示方法耐用性良好。

    2.2.10 樣品測定

    分別取3個批號的樣品照本方法進行分析測定,結果見表3。

    3 討論

    3.1 薄層色譜定性鑒別

    3.1.1 白前藥材的鑒別

    由于《中國藥典》無白前藥材的鑒別方法,同時考慮到本品藥材較多,干擾大。在選擇提取方法的時候考慮用不同濃度的堿液溶解,并用乙酸乙酯多次提取,但最終結果均不如本研究中的提取方法斑點清晰。筆者同時對白前鑒別方法的展開劑也進行了研究:①三氯甲烷-甲醇-水(2∶1∶1.5)下層液[11];②三氯甲烷-甲醇-水(3.5∶1∶1.5)下層液;③甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(5∶6∶3∶1)[12];結果顯示斑點均不夠圓整,比移值太高,而本研究中收載的展開劑效果好,比移值適中,斑點清晰,重現性好。

    3.1.2 射干藥材的鑒別

    除本研究中選擇的提取方法,筆者亦選取藥典中射干藥材的鑒別方法研究,但斑點不明顯,同時也比較以下展開系統:①三氯甲烷-丁酮-甲醇(10∶5∶1)[13];②三氯甲烷-甲醇-冰醋酸(20∶3∶0.5)[14];結果顯示①斑點不夠圓整,②特征斑點不明顯,而本研究中收載的展開劑效果好,比移值適中,斑點清晰,重現性好。

    3.2 HPLC定量測定研究

    3.2.1 定量測定成分的選擇

    筆者參考產品中10味藥材的質量標準,在對白前和射干藥材進行定性鑒別的基礎研究上,對比研究枇杷葉、桔梗、柴胡、黃芩、射干等藥材的含量測定的方法,由于處方中中藥成分較多,組分復雜,各組分峰之間難分離,同時考慮各藥材在成品中的功效,選取黃芩中黃芩苷[15]與射干中次野鳶尾黃素[16-17]作為本品質量研究的主成分。

    3.2.2 測定波長的選擇

    《中國藥典》中“黃芩”與“射干”的“含量測定”項下波長分別為280 nm及266 nm。本方法同時測定黃芩苷和次野鳶尾黃素2種成分,但樣品中黃芩苷響應大,而次野鳶尾黃素響應較低,故選擇266 nm作為本方法的檢測波長。

    3.2.3 樣品提取方法的選擇

    分別以70%乙醇、乙醇、甲醇、70%甲醇為溶劑采用超聲提取和回流提取的方法對試驗的結果對比研究。結果顯示本方法70%乙醇作為溶劑得到的含量較高,峰型較好,而超聲30 min提取效果與加熱回流1 h結果無明顯差別,但超聲提取省時、操作簡便。而在對超聲時間進行考察時,結果顯示超聲20 min與40 min的結果與30 min無明顯差異,故本法選取超聲30 min作為樣品提取的條件。

    3.2.4 流動相比例的選擇

    結合《中國藥典》2015版一部中黃芩、射干含量測定的方法及相關文獻資料調整流動相比例[18],考慮到梯度洗脫時,系統精密度與重復性較等度洗脫差,且梯度洗脫程序平衡時間較長,故本法選擇等度洗脫,同時對不同比例的甲醇-0.2%磷酸溶液進行調整,建立了能同時測定黃芩苷和次野鳶尾黃素的定量分析方法,經過一系列方法學項目驗證試驗[19-20],表明本方法簡便、分離效果好、準確、重復性好。

    綜上所述,本文建立的質量控制方法專屬性強、準確性高、重現性好,能較好地控制產品質量,但配方中桔梗、枇杷葉等藥味還有待建立專屬性強的控制方法,進一步完善止得咳顆粒的質量標準。

    [參考文獻]

    [1] 溫雯,馬躍海,朱竟赫,等.射干傳統功效考證及其實驗藥理學驗證[J].世界科學技術:中醫(yī)藥現代化,2017,19(5):846-850.

    [2] 梁愛華,薛寶云.芫花葉白前的鎮(zhèn)咳、祛痰及平喘作用[J].中國中藥雜志,1995,20(3):176-178

    [3] 孫曉卉,張量.柴胡藥理作用的研究進展[J].中國醫(yī)藥導報,2017,14(10):52-55.

    [4] 王永潔,陳清雙.桔梗的研究進展[J].中國保健營養(yǎng),2016,26(1):71.

    [5] 柯仲成,朱志平,徐志遠,等.枇杷葉的研究進展[J].內蒙古醫(yī)科大學學報,2016,38(1):84-87.

    [6] 張曉娟,呂勃川.黃芩研究新進展[J].中醫(yī)藥學報,2017, 45(1):96-99.

    [7] 袁久榮,袁浩.中藥質量控制與方法學研究[J].中國藥學雜志,2001,36(8):566-569.

    [8] 國家藥典委員會.中國藥典[M].一部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:97,109,204-205,232-233,277,280-281,285,301,377.

    [9] 廣東省食品藥品監(jiān)督管理局.廣東省中藥材標準第一冊[M].廣州:廣東科技出版社,2004:122-123.

    [10] 廣西壯族自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局.廣西壯族自治區(qū)壯藥質量標準第二卷[M].南寧:廣西科學技術出版社,2011:162.

    [11] 周宏兵,盧綺雯,曾常青,等.止咳枇杷沖劑中三種中藥的薄層色譜鑒別[J].廣東藥學院學報,2002,18(3):172-173.

    [12] 宋玉成,張伯崇,宋平順,等.白前及其混淆品老瓜頭的理化鑒別[J].中藥材,1996,19(5):236-237.

    [13] 王盛,陳莉,馮藝戎,等.熱毒清口服液質量控制方法的改進[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2017,24(3):75-77.

    [14] 田成旺,郭建華,張科,等.射黃含片的質量標準研究[J].中成藥,2013,35(2):302-306.

    [15] 盧文穎.黃芩苷藥理作用研究進展[J].科學技術創(chuàng)新,2017(22):66-67.

    [16] 呂艷妮,付佳,孔利云,等.細胞膜色譜在線HPLC-IT-TOF MS聯用系統篩選分析射干中次野鳶尾黃素的抗EGFR活性作用[J].質譜學報,2017,38(4):425-432.

    [17] 鄒桂欣,尤獻民,王光函,等.野鳶尾中異黃酮與其抗炎作用的相關性分析[J].中華中醫(yī)藥學刊,2016,34(10):2406-2408.

    [18] 唐躍年,金樑,張健,等.RP-HPLC法測定射干合劑中黃酮類多指標成分的含量[J].中國藥房,2010,21(39):3714-3716.

    [19] 國家藥典委員會.中國藥典[M].四部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:374-376.

    [20] 文藝,李海文,劉鳳斌,等.中藥藥性量化研究的方法學進展[J].中華中醫(yī)藥雜志,2017,32(3):1181-1183.

    (收稿日期:2018-04-08 本文編輯:張瑜杰)

    猜你喜歡
    黃芩苷薄層色譜射干
    創(chuàng)新藥物二乙基射干苷元的雜質研究
    清咽良藥說射干
    超高效液相色譜法同時測定川射干中7個異黃酮成分的含量
    藏藥甘露酥油丸質量標準研究
    正交試驗法篩選白虎定喘口服液提取工藝研究
    瑤藥紫九牛的薄層色譜研究
    HPLC—DAD法同時測定清肺寧嗽丸中4種成分的含量
    HPLC測定安宮牛黃丸中黃芩苷和黃芩素的含量
    HPLC和TLC法對藍色簽字筆墨水分類鑒定研究
    HPLC法測定芩霍雙清飲中黃芩苷的含量
    欧美激情极品国产一区二区三区 | 亚洲av成人精品一二三区| 国产精品人妻久久久影院| 免费大片18禁| 国产片特级美女逼逼视频| av在线app专区| 少妇高潮的动态图| 免费观看在线日韩| 看十八女毛片水多多多| 超色免费av| 日韩大片免费观看网站| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲欧洲国产日韩| 91在线精品国自产拍蜜月| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产在线一区二区三区精| 岛国毛片在线播放| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 制服人妻中文乱码| 黄色视频在线播放观看不卡| 午夜影院在线不卡| 男的添女的下面高潮视频| 亚州av有码| 日韩欧美精品免费久久| 日本91视频免费播放| 亚洲中文av在线| 免费人妻精品一区二区三区视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 在线免费观看不下载黄p国产| 久热这里只有精品99| 日本-黄色视频高清免费观看| 一级毛片 在线播放| 国产成人a∨麻豆精品| 丝袜在线中文字幕| 久久女婷五月综合色啪小说| 亚洲精品乱久久久久久| 曰老女人黄片| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲av国产av综合av卡| 久久久久久久精品精品| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产精品人妻久久久久久| 日韩av在线免费看完整版不卡| √禁漫天堂资源中文www| 国产成人aa在线观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 只有这里有精品99| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲综合色网址| 国产精品熟女久久久久浪| 一个人免费看片子| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 午夜免费鲁丝| 国产老妇伦熟女老妇高清| 十八禁高潮呻吟视频| 男女无遮挡免费网站观看| 制服丝袜香蕉在线| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 久久精品久久精品一区二区三区| 国产乱人偷精品视频| 久久久久久久久久人人人人人人| 黑人高潮一二区| 99久国产av精品国产电影| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲av二区三区四区| 国产一区二区在线观看av| 毛片一级片免费看久久久久| 97在线人人人人妻| 亚洲精品aⅴ在线观看| 少妇的逼好多水| 丝袜脚勾引网站| 亚洲第一av免费看| 亚洲中文av在线| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产一区二区在线观看日韩| 少妇人妻久久综合中文| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 精品午夜福利在线看| 丰满迷人的少妇在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产乱来视频区| 乱人伦中国视频| 日韩电影二区| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲成人av在线免费| 大话2 男鬼变身卡| 久久人人爽人人爽人人片va| 啦啦啦在线观看免费高清www| 视频中文字幕在线观看| 久久精品国产a三级三级三级| 色网站视频免费| 十分钟在线观看高清视频www| 婷婷色综合www| 男女无遮挡免费网站观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产成人av激情在线播放 | 日韩一本色道免费dvd| 中国三级夫妇交换| 精品久久国产蜜桃| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 日韩欧美精品免费久久| 嘟嘟电影网在线观看| 秋霞伦理黄片| 国产熟女欧美一区二区| 免费高清在线观看视频在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 久久久国产欧美日韩av| 欧美精品高潮呻吟av久久| 一级爰片在线观看| kizo精华| 免费观看av网站的网址| 精品久久久久久久久亚洲| 精品久久国产蜜桃| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产精品久久久久久精品古装| 久久狼人影院| 色94色欧美一区二区| 黄片无遮挡物在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产免费视频播放在线视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 午夜老司机福利剧场| 中文字幕亚洲精品专区| 国产男女超爽视频在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 91精品国产九色| 久久国产精品大桥未久av| 五月玫瑰六月丁香| 在线观看www视频免费| 国产欧美亚洲国产| 有码 亚洲区| 欧美3d第一页| 男女免费视频国产| av国产精品久久久久影院| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产黄频视频在线观看| 免费观看的影片在线观看| av视频免费观看在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 久久韩国三级中文字幕| 99久久精品一区二区三区| 欧美日韩在线观看h| 精品少妇内射三级| 国产精品国产av在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲国产最新在线播放| 久久久精品免费免费高清| 欧美精品一区二区免费开放| 99久久精品国产国产毛片| 国产精品国产av在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 高清欧美精品videossex| 日韩在线高清观看一区二区三区| av免费在线看不卡| 欧美亚洲日本最大视频资源| 91久久精品电影网| 男男h啪啪无遮挡| 日本欧美视频一区| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 欧美精品亚洲一区二区| 黑丝袜美女国产一区| 免费av中文字幕在线| 18禁动态无遮挡网站| 制服丝袜香蕉在线| 91精品国产国语对白视频| 午夜影院在线不卡| 又大又黄又爽视频免费| 欧美日韩av久久| 看免费成人av毛片| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲四区av| 亚洲第一av免费看| 五月伊人婷婷丁香| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产免费福利视频在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 我的女老师完整版在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日韩伦理黄色片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 日韩三级伦理在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 成人综合一区亚洲| 全区人妻精品视频| 精品国产一区二区久久| 久久99热这里只频精品6学生| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 新久久久久国产一级毛片| 国产成人一区二区在线| 亚洲精品一二三| 国产免费现黄频在线看| 亚洲天堂av无毛| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产一区二区在线观看av| 色吧在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| av电影中文网址| 久久精品久久久久久久性| 久久久国产欧美日韩av| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产老妇伦熟女老妇高清| 99久久人妻综合| 色网站视频免费| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 成人综合一区亚洲| 久久久久久久久久久久大奶| 国产精品欧美亚洲77777| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲精品一二三| 街头女战士在线观看网站| 18禁在线播放成人免费| 三上悠亚av全集在线观看| 亚洲成色77777| 一级毛片 在线播放| 老司机亚洲免费影院| 亚洲三级黄色毛片| 这个男人来自地球电影免费观看 | 99久久精品国产国产毛片| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 永久免费av网站大全| 男女高潮啪啪啪动态图| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲成人av在线免费| 一本色道久久久久久精品综合| 免费观看无遮挡的男女| 只有这里有精品99| 大码成人一级视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 一本色道久久久久久精品综合| 高清欧美精品videossex| 日韩视频在线欧美| 日本黄大片高清| 有码 亚洲区| 国产日韩欧美视频二区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 日韩中字成人| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美97在线视频| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 特大巨黑吊av在线直播| 免费观看在线日韩| 免费av中文字幕在线| 婷婷成人精品国产| 国产av国产精品国产| 久久狼人影院| 在线观看三级黄色| tube8黄色片| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲精品456在线播放app| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产精品熟女久久久久浪| 色94色欧美一区二区| 一级a做视频免费观看| 91成人精品电影| 看非洲黑人一级黄片| 久久精品国产亚洲网站| 日本黄大片高清| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 高清视频免费观看一区二区| 国产精品一区二区在线不卡| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 午夜激情久久久久久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | av一本久久久久| 国产高清三级在线| 美女国产视频在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 大香蕉久久成人网| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 满18在线观看网站| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产免费现黄频在线看| 校园人妻丝袜中文字幕| 99re6热这里在线精品视频| 激情五月婷婷亚洲| 日韩一区二区视频免费看| 成人国产av品久久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲精品中文字幕在线视频| 欧美日韩在线观看h| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲欧美精品自产自拍| 美女cb高潮喷水在线观看| 久久久国产精品麻豆| 在线观看美女被高潮喷水网站| 午夜视频国产福利| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 如何舔出高潮| 日本与韩国留学比较| 亚洲人与动物交配视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 热99国产精品久久久久久7| 成人亚洲精品一区在线观看| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲av二区三区四区| 一区二区三区四区激情视频| 国产欧美亚洲国产| 91精品国产国语对白视频| 免费看光身美女| 亚洲情色 制服丝袜| 久热这里只有精品99| 亚洲综合色网址| tube8黄色片| 亚洲av男天堂| tube8黄色片| 女人精品久久久久毛片| 国产高清三级在线| 精品久久蜜臀av无| 日韩视频在线欧美| 亚洲欧洲日产国产| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 免费高清在线观看视频在线观看| 中国国产av一级| 久久久久久久久久久丰满| 国产极品天堂在线| 国产综合精华液| 精品一区二区免费观看| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲精品一区蜜桃| 国产精品 国内视频| 免费观看无遮挡的男女| 在线免费观看不下载黄p国产| 免费看不卡的av| 极品人妻少妇av视频| 少妇熟女欧美另类| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲精品乱久久久久久| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久女婷五月综合色啪小说| 伦理电影免费视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产永久视频网站| 大片免费播放器 马上看| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲综合色惰| 丰满饥渴人妻一区二区三| 制服丝袜香蕉在线| 91精品国产国语对白视频| 两个人免费观看高清视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 曰老女人黄片| 看十八女毛片水多多多| 激情五月婷婷亚洲| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 男人操女人黄网站| 五月天丁香电影| 黑丝袜美女国产一区| 99九九在线精品视频| 国产成人精品在线电影| 一本久久精品| 满18在线观看网站| 少妇 在线观看| 午夜日本视频在线| 成人二区视频| 亚洲欧洲国产日韩| 在线观看人妻少妇| 高清av免费在线| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲天堂av无毛| 国产精品久久久久成人av| 久久av网站| 亚洲国产欧美在线一区| 如何舔出高潮| 成人毛片60女人毛片免费| 91在线精品国自产拍蜜月| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 一区二区三区精品91| 国产亚洲精品久久久com| 九草在线视频观看| 男女国产视频网站| 久久久a久久爽久久v久久| 日本色播在线视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产av码专区亚洲av| 久久精品久久精品一区二区三区| 成年女人在线观看亚洲视频| 亚洲av成人精品一二三区| 韩国高清视频一区二区三区| 制服丝袜香蕉在线| 毛片一级片免费看久久久久| 国产成人一区二区在线| 有码 亚洲区| 国产高清三级在线| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 嘟嘟电影网在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 18禁在线播放成人免费| 精品久久久久久久久av| 蜜桃国产av成人99| freevideosex欧美| 五月天丁香电影| 国产精品.久久久| 青春草亚洲视频在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 观看av在线不卡| av电影中文网址| 不卡视频在线观看欧美| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| av线在线观看网站| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 9色porny在线观看| 成年女人在线观看亚洲视频| 七月丁香在线播放| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 久久免费观看电影| 国产精品熟女久久久久浪| 黑丝袜美女国产一区| 久久综合国产亚洲精品| 成人午夜精彩视频在线观看| 日本wwww免费看| 99热全是精品| 男女啪啪激烈高潮av片| 九色亚洲精品在线播放| 熟女电影av网| 午夜福利视频精品| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲第一av免费看| 一级毛片 在线播放| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 一级毛片我不卡| 一个人看视频在线观看www免费| 大片电影免费在线观看免费| 丝瓜视频免费看黄片| 欧美日韩在线观看h| 韩国av在线不卡| 亚洲av日韩在线播放| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲精品美女久久av网站| 伦理电影免费视频| 一级毛片aaaaaa免费看小| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 高清毛片免费看| 看非洲黑人一级黄片| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 视频在线观看一区二区三区| 我要看黄色一级片免费的| 成人亚洲欧美一区二区av| 久久国产亚洲av麻豆专区| 成年人免费黄色播放视频| 18禁在线播放成人免费| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲av欧美aⅴ国产| 免费观看的影片在线观看| a级毛片在线看网站| 999精品在线视频| 精品久久久久久电影网| 日韩欧美一区视频在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 99精国产麻豆久久婷婷| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 欧美日韩在线观看h| 久久久久久久久久久丰满| 一边亲一边摸免费视频| 国产成人freesex在线| 一区二区三区乱码不卡18| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产亚洲一区二区精品| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 午夜影院在线不卡| 免费大片18禁| 高清午夜精品一区二区三区| 99热6这里只有精品| 久久精品国产自在天天线| 免费黄频网站在线观看国产| 免费av中文字幕在线| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 成人无遮挡网站| 两个人的视频大全免费| 欧美亚洲日本最大视频资源| 成人国语在线视频| 免费看不卡的av| 国产成人免费无遮挡视频| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 亚洲av成人精品一二三区| 国产免费又黄又爽又色| 久久影院123| 久久女婷五月综合色啪小说| 黄色视频在线播放观看不卡| 日韩中字成人| 中文字幕久久专区| 国产成人av激情在线播放 | 久久97久久精品| av.在线天堂| 三级国产精品片| 日韩中字成人| 久久久久久人妻| 国产成人免费观看mmmm| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 少妇人妻久久综合中文| 久久久久久人妻| 日韩精品有码人妻一区| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 最新的欧美精品一区二区| 亚洲精品第二区| 婷婷色麻豆天堂久久| 少妇熟女欧美另类| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 三级国产精品片| 在线观看免费日韩欧美大片 | 精品人妻熟女毛片av久久网站| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 免费观看性生交大片5| 久久精品国产亚洲av涩爱| 日日摸夜夜添夜夜爱| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲,一卡二卡三卡| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 我要看黄色一级片免费的| 天堂中文最新版在线下载| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 99久久中文字幕三级久久日本| 久久久欧美国产精品| 成人无遮挡网站| 大香蕉久久成人网| 午夜影院在线不卡| 国产高清有码在线观看视频| 人成视频在线观看免费观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 欧美另类一区| 欧美最新免费一区二区三区| 三级国产精品片| 一本色道久久久久久精品综合| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲精品日本国产第一区| 日韩中字成人| 国产av一区二区精品久久| 国产免费一区二区三区四区乱码| 只有这里有精品99| 亚洲第一av免费看| 国产成人免费无遮挡视频| 男女啪啪激烈高潮av片| 新久久久久国产一级毛片| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 全区人妻精品视频| 国产精品久久久久久久久免| 男女边吃奶边做爰视频| 色94色欧美一区二区| 一边摸一边做爽爽视频免费| 各种免费的搞黄视频| 欧美日本中文国产一区发布| 国产成人aa在线观看| 少妇人妻久久综合中文| 色5月婷婷丁香| 国产精品嫩草影院av在线观看| 免费观看a级毛片全部| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 精品少妇内射三级| 一区二区三区精品91| 免费少妇av软件| 久久国产亚洲av麻豆专区| 午夜日本视频在线| 久久久a久久爽久久v久久| av国产精品久久久久影院| a级毛片在线看网站| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产综合精华液| 欧美精品一区二区大全| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 九色成人免费人妻av| 亚洲人成77777在线视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产精品免费大片| 久久久久久久久久人人人人人人| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 久久久久久久久久人人人人人人| 超碰97精品在线观看| 国产精品三级大全| 最近中文字幕2019免费版| 在线观看www视频免费| 亚洲内射少妇av| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 婷婷成人精品国产| 欧美少妇被猛烈插入视频| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 18禁动态无遮挡网站| 中文字幕最新亚洲高清| 大话2 男鬼变身卡| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 综合色丁香网| 一级,二级,三级黄色视频| 丝袜喷水一区| 久久韩国三级中文字幕| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 夜夜骑夜夜射夜夜干| 欧美日韩在线观看h| 夜夜爽夜夜爽视频| 久久99热这里只频精品6学生| 国产成人精品无人区| 亚洲美女搞黄在线观看| 激情五月婷婷亚洲|