PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白參與的肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病機(jī)制研究

趙陽 王西京 張淑群 康華峰 管海濤 靳耀鋒 單昌友 刁巖

[摘要] 目的 分析PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白參與的肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病機(jī)制，為相關(guān)治療提供參考。 方法 選取2015年6月～2016年6月西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院（以下簡稱“我院”）收治的60例肉芽腫性小葉乳腺炎患者作為觀察組，選取我院同期健康體檢者30名作為對照組，分析患者PI3K/AKT/mTOR通路蛋白及免疫球蛋白水平變化。 結(jié)果 與對照組比較，觀察組PI3K、AKT、mTOR及白細(xì)胞介素-2（IL-2）、IL-6、IL-10水平明顯升高，IgA、IgM及IgG水平明顯降低，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論 PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白與非肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病過程密切相關(guān)。

[關(guān)鍵詞] PI3K/AKT/mTOR信號通路；免疫球蛋白；白細(xì)胞介素；肉芽腫性小葉乳腺炎

[中圖分類號] R655.8 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號] 1673-7210（2018）10（c）-0008-03

[Abstract] Objective To analyze the pathogenesis of granulomatous lobular mastitis involved in PI3K/AKT/mTOR pathway and immunoglobulin， and provide reference for related treatment. Methods Sixty patients with granulomatous lobular mastitis diagnosed and treated from June 2015 to June 2016 in the Second Affiliated Hospital of Xi′an Jiaotong University （“our hospital” for short） were selected as the observation group. Thirty healthy subjects in our hospital were selected as the control group. The patient′s PI3K/AKT/mTOR pathway protein and immunoglobulin levels were analyzed. Results Compared with the control group， the levels of PI3K， AKT， mTOR and interleukin-2 （IL-2）， IL-6， IL-10 were significantly increased in the observation group， and the levels of immunoglobulin IgA， IgM and IgG were significantly decreased， the differences were statistically significant （P < 0.05）. Conclusion PI3K/AKT/mTOR pathway proteins and immunoglobulin have a close relationship with the pathogenesis of granulomatous lobular mastitis.

[Key words] PI3K/AKT/mTOR pathway； Immunoglobulin； Interleukin； Granulomatous lobular mastitis

非哺乳期乳腺炎是一組發(fā)生在女性非哺乳期的病原學(xué)證據(jù)不明的非特異性炎癥，其病理類型多樣，臨床上最常見的為肉芽腫性小葉乳腺炎和導(dǎo)管周圍乳腺炎[1-2]。肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病率呈逐步增高趨勢，臨床上此病易被誤診為乳腺增生，與乳腺癌亦難以區(qū)分。肉芽腫性小葉乳腺炎治療方法多樣，療效區(qū)別較大，且容易反復(fù)發(fā)作，也有不少患者因就診較晚或治療不當(dāng)而導(dǎo)致病變范圍擴(kuò)大，以至于切除乳房，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，對廣大女性的身心健康造成巨大影響[3-4]。PI3K/AKT/mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與了多種乳腺疾病的病理過程[5]，但尚未見到其與肉芽腫性小葉乳腺炎相關(guān)性的報(bào)道。本研究分析了PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白參與的肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病機(jī)制，以期為相關(guān)治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年6月～2016年6月西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院（以下簡稱“我院”）診治的肉芽腫性小葉乳腺炎患者60例作為觀察組，年齡21～49歲，平均（30.6±6.4）歲。選取我院同期健康體檢者30名作為對照組，年齡17～48歲，平均（28.8±7.9）歲。兩組研究對象年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t = 0.546，P > 0.05）。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

觀察組納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床高度懷疑且術(shù)前病理證實(shí)是肉芽腫性小葉乳腺炎；②未合并先天性心臟病、嚴(yán)重顱內(nèi)損傷、乳腺癌、糖尿病、嚴(yán)重肝腎功能不全等疾??；③已簽署知情同意書且符合醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)基本要求。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①各項(xiàng)體檢健康者；②未合并先天性心臟病、嚴(yán)重顱內(nèi)損傷、嚴(yán)重肝腎功能不全等疾病；③已簽署知情同意書且符合醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)基本要求。

1.3 治療方法

根據(jù)最新共識(shí)意見及我院腫瘤科經(jīng)驗(yàn)，患者予以左氧氟沙星0.6 g/d，共1周，并口服醋酸潑尼松30 mg/d，見效后繼續(xù)按此劑量口服2周，每2周減量5 mg，如病情好轉(zhuǎn)或痊愈，征求患者意見行手術(shù)治療或繼續(xù)治療至少6周。如治療1周后效果不佳，加用甲氨蝶呤10 mg/周。

1.4 主要試劑

全波長酶標(biāo)儀（RT6100型，深圳雷杜生命科學(xué)有限公司），PI3K檢測試劑盒（上海廣瑞生物科治療前技有限公司），AKT檢測試劑盒（R&D;公司），mTOR檢測試劑盒（Sigma Aldrich公司），白細(xì)胞介素2（IL-2）檢測試劑盒（武漢博士德生物工程有限公司），IL-6檢測試劑盒（BD公司）；IL-10檢測試劑盒（eBioscience公司），IgA、IgG檢測試劑盒（Mabtech公司），IgM檢測試劑盒（Abcam公司）。

1.5 觀察指標(biāo)檢測方法

抽取所有研究對象治療前的空腹靜脈血，1500 r/min離心10 min，分離上層血清，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測各組研究對象血清中PI3K/AKT/mTOR通路蛋白PI3K、AKT、mTOR、IL-2、IL-6、IL-10水平，并分析其變化。所有檢測均按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組PI3K、AKT和mTOR水平變化分析

與對照組比較，觀察組PI3K、AKT和mTOR水平明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩組免疫球蛋白水平變化分析

與對照組比較，觀察組IgA、IgM及IgG水平明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

2.3 兩組炎癥因子水平變化分析

與對照組比較，觀察組IL-2、IL-6及IL-10水平明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表3。

3 討論

3.1 肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病情況及本研究結(jié)果

肉芽腫性小葉乳腺炎的發(fā)病率逐年增高，城市和農(nóng)村發(fā)病率均明顯升高。多數(shù)患者及醫(yī)療機(jī)構(gòu)對此病缺乏正確認(rèn)識(shí)，致使發(fā)生漏診、誤診及病變范圍擴(kuò)大，或治療后復(fù)發(fā)，從而導(dǎo)致治療時(shí)間延長，甚至需行乳房切除術(shù)，這對患者的身心健康及生活質(zhì)量帶來災(zāi)難性的影響。因此，分析肉芽腫性小葉乳腺炎的發(fā)病機(jī)制對臨床診斷和治療具有重要的參考價(jià)值。本研究分析了PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白參與的肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病機(jī)制，發(fā)現(xiàn)觀察組PI3K、AKT、mTOR、IL-2、IL-6、IL-10水平明顯升高，而IgA、IgM、IgG水平明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。提示PI3K/AKT/mTOR通路蛋白及免疫球蛋白與肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病過程密切相關(guān)。

3.2 PI3K/AKT/mTOR通路異常及其與乳腺疾病發(fā)病的相關(guān)性

PI3K/AKT/mTOR通路異常與乳腺的多種病理過程密切相關(guān)[6-7]。PTEN調(diào)控的該信號通路與乳腺癌細(xì)胞的凋亡過程密切相關(guān)[8]。PI3K/AKT/mTOR信號通路調(diào)控了突變難治性晚期乳腺癌的病理學(xué)過程[5]。本研究發(fā)現(xiàn)觀察組PI3K、AKT、mTOR水平明顯升高，提示PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白與非哺乳期乳腺炎發(fā)病過程密切相關(guān)。

3.3 乳腺疾病的發(fā)病與免疫球蛋白水平異常的相關(guān)性分析

免疫球蛋白是機(jī)體免疫功能的主要參與者和調(diào)控者，其水平異常與乳腺炎的發(fā)病有關(guān)[9]。非哺乳期乳腺炎患者血液中免疫球蛋白及補(bǔ)體水平異常，患者外周血自身抗體ANA、AHA陽性率高，揭示非哺乳期乳腺炎是一種免疫功能紊亂的自身免疫性疾病[10]，且非哺乳期乳腺炎患者外周血T淋巴細(xì)胞、免疫球蛋白及補(bǔ)體水平與正常人有顯著差異[11]。非哺乳期乳腺炎患者的免疫功能紊亂，其紊亂程度與發(fā)病年齡、生育狀況及乳房炎性結(jié)塊面積有關(guān)系[12]。本研究也發(fā)現(xiàn)，觀察組IgA、IgM、IgG水平明顯降低，提示免疫球蛋白與肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病過程密切相關(guān)。

3.4 白細(xì)胞介素水平異常與乳腺疾病的關(guān)系分析

白細(xì)胞介素調(diào)控的炎性反應(yīng)也是乳腺疾病發(fā)生的重要因素，其水平異常與乳腺炎的病理過程有關(guān)[13-14]。除癖消溢散治療漿細(xì)胞性乳腺炎的療效確切，其作用與降低乳腺組織和血清IL-6、TNF-α水平，減輕急性炎性反應(yīng)有關(guān)[15]。IL-2、IL-4在漿細(xì)胞性乳腺炎過程中發(fā)揮重要作用，漿細(xì)胞性乳腺炎組織中免疫平衡可能向Th1方向偏移[16]。祛腐生肌方內(nèi)服外敷腫塊型漿細(xì)胞性乳腺炎效果良好，能有效改善癥狀，調(diào)節(jié)白細(xì)胞介素水平[17]。漿細(xì)胞性乳腺炎組織中的IL-1β、TNF-α高表達(dá)，兩者對漿細(xì)胞性乳腺炎的發(fā)展發(fā)揮了協(xié)同作用，且乳腺炎血清IL-18水平較正常顯著升高，乳腺炎越嚴(yán)重則血清IL-18水平越高，血清IL-18水平可能為乳腺炎的診斷和預(yù)測提供依據(jù)[13，18]。本研究中觀察組IL-2、IL-6、IL-10水平明顯升高，提示白細(xì)胞介素與肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病過程密切相關(guān)，與上述研究一致。

3.5 研究結(jié)論及下一步的研究工作

本研究發(fā)現(xiàn)PI3K/AKT/mTOR通路的激活、白細(xì)胞介素水平的升高和免疫球蛋白水平的降低均參與了肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病過程，推測可能是PI3K/AKT/mTOR通路的激活導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生明顯的炎性反應(yīng)，即表征為白細(xì)胞介素水平的明顯升高，而同時(shí)PI3K/AKT/mTOR通路的激活和炎性反應(yīng)的發(fā)生共同引起了機(jī)體免疫機(jī)能的降低，即IgA、IgM、IgG水平明顯降低。進(jìn)一步從細(xì)胞水平上對該假設(shè)進(jìn)行驗(yàn)證，以期為臨床肉芽腫性小葉乳腺炎的診斷及治療提供更多的參考依據(jù)。

綜上所述，PI3K/AKT/mTOR通路蛋白及免疫球蛋白與肉芽腫性小葉乳腺炎發(fā)病過程密切相關(guān)。

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（收稿日期：2018-08-07 本文編輯：任 念）