黃洪云, 杜 寧, 張 璇
(唐山學院, 河北 唐山063000)
適宜的靜電場短時間處理大豆、水稻作物種子后,提高了種子的活化能,萌發(fā)過程中的吸水強度、呼吸強度、電導率及ATP含量都有所提高;蛋白質(zhì)發(fā)生分散凝聚,種子內(nèi)脫氫酶、淀粉酶和酸性磷酸酶的活性提高,而過氧化物酶的活性則下降。靜電處理改善了種子萌發(fā)過程的生理生化反應水平,促進了種子的新陳代謝,提高了種子活力。
供試種子為黑農(nóng)38號大豆種子、遼優(yōu)一號水稻種子,由匯豐種業(yè)提供。
1.2.1 大豆種子呼吸強度的測定
大豆種子用電暈電場處理[1],供試種子每組100粒,大小盡量一致,3次重復,將處理后的種子與對照種子在培養(yǎng)皿中發(fā)芽,用S 2000型紅外線CO2分析儀逐日測各組呼吸強度。
1.2.2 大豆種子電導率的測定
將種子在100kV/m的靜電場處理30min,與對照組進行對比實驗,電導率的測定按徐本美等[2]的方法,每組100粒種子,質(zhì)量相等,3次重復,用無離子水浸種4,6,8h后用DDSJ-318型電導儀測浸出液電導率。
1.2.3 水稻種子ATP含量的測定
種子在33~267kV/m的靜電場中處理10min,進行對比試驗,每份50粒種子,質(zhì)量一致,3次重復,30℃萌發(fā)24h,用螢光素酶法[3]測其發(fā)光強度,再用標準曲線換算成ATP含量。
1.2.4 水稻種子脫氫酶活性的測定
試材同前,種子在50~250kV/m的電暈電場中處理5min,與對照組進行對比實驗,每組50粒,質(zhì)量一致,重復3次。萌發(fā)24h后用TTC定量法[4]測TTCH的生成量。
1.2.5 水稻種子酸性磷酸酶活性的測定
試材同前,種子處理40min,進行對比試驗,每份試樣0.13g種子,3次重復,在30℃下萌發(fā)24h,用對硝基酚膦酸二鈉法[5]測酸性磷酸酶活性。
實驗結(jié)果表明,浸種時間的增加處理組和對照組種子的呼吸強度都增大,2組相比,相同浸種時間處理組的呼吸強度總是高于對照組,且處理組呼吸強度的增加幅度大于對照組,隨浸種時間的延長,2組的增幅差距也逐漸縮小。
圖1 高壓靜電場對種子呼吸強度的影響
由圖2可知,處理組和對照組的浸出液電導率都隨浸種時間的增加而增大,且相同的浸種時間處理組的電導率要高于對照組。影響電導率的因素較復雜,除溫度外主要是膜的完整性和新陳代謝水平。浸種前種子的膜結(jié)構(gòu)是不完整的,在種子吸脹過程中膜逐步修復,其修復完整性是影響電導率的因素,徐本美等提出發(fā)芽率接近而整齊的種子,活力高者電導率也高,此時種子的代謝水平可能是影響電導率的主要因素[2]。本實驗結(jié)果與此相符。
圖2 高壓靜電場對種子電導率的影響
由圖3可知,處理場強低于100kV/m時ATP含量增加不顯著,處理場強在100~200kV/m之間時,增加較顯著,且在200kV/m時,ATP含量增值率達到最大值,為260%,在處理場強高于200kV/m時,增值幅度又顯著減小,在240kV/m時,ATP含量增值率已經(jīng)下降到130%,此數(shù)值低于120kV/m時的140%,以后隨著電場強度的增加,ATP含量增值率迅速減小到0。
圖3 高壓靜電場對種子ATP含量的影響
由圖4可知,隨電場強度的增加,脫氫酶活性呈現(xiàn)先增大后減小的變化趨勢,且在200kV/m的電場強度下脫氫酶活性達到最大值1.36。場強度小于200 kV/m時,脫氫酶活性迅速增大到最大值;場強度大于200kV/m時,脫氫酶活性迅速減小到1.06,略大于對照的1.0。迅速脫氫是生物氧化的主要方式,脫氫反應是在脫氫酶的催化下完成的,脫氫酶活性的提高是加速生物氧化和提高新陳代謝水平的必要條件。
圖4 高壓靜電場對種子脫氫酶活性的影響
由圖5可知,隨電場強度的增大,酸性磷酸酶活性呈先增大后減小再增大再減小的非單調(diào)性變化曲線,且各個電場強度下酸性磷酸酶活性總是大于對照組,在場強度為40kV/m時,2組的活性都達到最大值,場強度為200kV/m時,酸性磷酸酶活性又再次達到小高峰,此場強度下對照組和處理組的酸性磷酸酶活性分別為3.4×10-6mol/(g·min)和4.8×10-6mol/(g·min)。場強度大于200kV/m時2組活性迅速減小,在320kV/m時2組均達最小值。
圖5 高壓靜電場對種子酸性磷酸酶活性的影響
綜上所述,高壓靜電場處理種子能有效改善種子呼吸強度、電導率、ATP含量、脫氫酶活性、酸性磷酸酶活性,且不同電場強度對以上各生理生化指標的影響不同,在各場強度下各個指標的數(shù)值呈現(xiàn)非單調(diào)性變化規(guī)律,但在200kV/m時各個指標均呈現(xiàn)較好的刺激效應。以上所用的大部分試驗方法是已被廣泛推薦的種子活力測定方法,實驗結(jié)果表明,靜電處理可提高種子萌發(fā)過程的新陳代謝水平,改善種子萌發(fā)過程的生理生化反應,提高種子活力。
[1]閻立,白希堯,李曉玲,等.靜電處理提高黃瓜番茄青椒種子活力的研究[J].園藝學報,1998,15(2):115-118.
[2]徐本美,顧增輝,任祝三.測定種子電導率方法的探討[J].種子,1983,2(1):18-23.
[3]顧增輝.用蟲熒光素酶測定油料種子的ATP含量[J].植物生理學通訊,1983(5):55-60.
[4]徐本美,顧增輝,鄭光華.測定種子活力方法的探討(Ⅰ)——TTC定量法[J].種子,1982,1(4):12-14.
[5]嚴國光,王福均.農(nóng)業(yè)儀器分析法[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1982:370-545.
[6]閻立,白希堯,李曉玲,等.靜電處理提高大豆種子活力的研究[J].中國油料,1987(4):26-29.