轉(zhuǎn)移因子研究現(xiàn)狀

李曉梅

（山東省菏澤市鄆城縣畜牧獸醫(yī)局，山東 荷澤 274700）

轉(zhuǎn)移因子(Transfer Factor，TF)由 Lawrence 于結(jié)核菌素陽性供者的活淋巴細(xì)胞中首次發(fā)現(xiàn)[1]。隨后研究又發(fā)現(xiàn)TF為從淋巴細(xì)胞中提取的一類低分子肽與核苷酸復(fù)合物，屬于多肽類物質(zhì)，含多種氨基酸，分子質(zhì)量小、無熱原、無抗原性、不引起過敏反應(yīng)、不產(chǎn)生抗抗體、無明顯毒副作用和無種屬差異，是一種新型而又安全的免疫增強(qiáng)劑[2]，具有傳遞免疫信息、激發(fā)免疫細(xì)胞活性、調(diào)節(jié)免疫功能、增強(qiáng)機(jī)體特異性和非特異性細(xì)胞免疫功能的作用。除此之外，TF還具有轉(zhuǎn)移和擴(kuò)大細(xì)胞免疫力的功能。目前，轉(zhuǎn)移因子已經(jīng)被廣泛的應(yīng)用于人類疾病的預(yù)防治療和某些畜禽疾病的防治。

1 轉(zhuǎn)移因子的種類

目前TF的種類較多，主要可以分為非特異性轉(zhuǎn)移因子和特異性轉(zhuǎn)移因子兩大類。非特異性轉(zhuǎn)移因子指用動(dòng)物白細(xì)胞提取的具有多種免疫活性的轉(zhuǎn)移因子，這類轉(zhuǎn)移因子主要調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，提高疫苗的免疫效果或機(jī)體抵抗力。特異性轉(zhuǎn)移因子采用某種特定病原感染動(dòng)物后再提取含該抗原特異活性的轉(zhuǎn)移因子。前者應(yīng)用廣泛，后者針對(duì)特定疾病，相對(duì)局限。

根據(jù)其來源和作用對(duì)象，特異性活性的TF可分為抗腫瘤類特異性TF、抗病生毒性特異TF、細(xì)菌性特異TF、寄生蟲特異TF等微生物類TF和其他特異性TF；其次，TF的來源較為廣泛。

另外，重組轉(zhuǎn)移因子 （recombinant Transfer Factor，rTF）近年來被廣泛研究。rTF是利用基因工程技術(shù)將編碼具有免疫增強(qiáng)活性的轉(zhuǎn)移因子基因，進(jìn)行克隆和體外表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)純化制備而成，試驗(yàn)表明其具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫活性的作用[3]。

2 轉(zhuǎn)移因子的理化性質(zhì)

轉(zhuǎn)移因子是存在于人和動(dòng)物免疫淋巴細(xì)胞內(nèi)的具有生物活性的非均一性可透析的小分子物質(zhì)。動(dòng)物TF的化學(xué)本質(zhì)為一種多肽與寡核苷酸連接在一起且不含蛋白質(zhì)的雜合分子，分子質(zhì)量一般不大于15ku。不同動(dòng)物TF的理化特性、組成成分、肽分子大小及氨基酸種類差別不大，然而含量卻差異顯著，而不同的制備方法也可導(dǎo)致TF的差異。TF不易被胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、RNA和DNA酶等多種酶類分解。由于TF分子質(zhì)量小，不具備抗原性，因此使用后會(huì)不會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，也不會(huì)被抗體消滅，可以反復(fù)使用、結(jié)合和激活淋巴細(xì)胞。TF對(duì)熱不穩(wěn)定，高溫下會(huì)失去部分活性，低溫可長時(shí)間保存。有研究表明在23℃、37℃處理3個(gè)月后的TF對(duì)淋巴細(xì)胞的增殖影響與4℃儲(chǔ)存下的TF相比并無明顯區(qū)別[4]。因此TF無抗原性、無熱原性、無毒副作用。

3 轉(zhuǎn)移因子在家禽中的應(yīng)用

3.1 雞TF免疫活性的研究 TF在家禽的多種疾病防治中都有研究應(yīng)用，在應(yīng)對(duì)新城疫、傳染性法氏囊炎及禽流感等的效果顯著。丁明文等用新城疫（NDV）疫苗高免豬脾臟制備 TF，結(jié)果表明NDV疫苗高免豬脾臟與正常豬脾臟TF理化性質(zhì)基本一致，但高免豬脾TF產(chǎn)率高于正常豬脾，為NDV特異性TF的研制開辟了新來源[5]。李學(xué)良等通過試驗(yàn)對(duì)自然感染雞傷寒、雞傳染性法氏囊病(IBD)的各種不同年齡的雞依照各自體重大小注射TF 3～6ml，結(jié)果治愈率分別達(dá)91.69%和100%[6]。李富桂等用TF分別給人工感染發(fā)病的雞傳染性法氏囊病和雞神經(jīng)型馬立克病(MD)自然發(fā)病雞進(jìn)行治療，治療結(jié)果顯示雞TF具有較好的效果，尤其在重復(fù)感染時(shí)表現(xiàn)出巨大的優(yōu)勢(shì)，因而對(duì)IBD污染嚴(yán)重的雞場具有極好的使用價(jià)值。黃建文等通過試驗(yàn)證明，不管是用雞還是豬脾TF治療感染禽流感的雛雞時(shí)，都能明顯改善臨床癥狀，減少死亡，縮短病程，表明雞、豬TF同樣可以用于禽流感的早期治療[7]。近年來也有研究發(fā)現(xiàn)烏骨雞TF可顯著提高ND-HI和AI-HI作用，同時(shí)，可以徹底消除IBD疫苗造成的免疫抑制[8]。

此外研究還發(fā)現(xiàn)雞TF還可提高雞的生產(chǎn)性能。佘德勇研究發(fā)現(xiàn)，雞脾轉(zhuǎn)移因子可以顯著提高雞小腸絨毛高度，增加雞小腸V/C比值，誘導(dǎo)腸道干細(xì)胞增殖分化發(fā)育，增加杯狀細(xì)胞密度，改善腸道粘膜機(jī)械屏障功能；改變腸道細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)分布，促進(jìn)腸道抗炎因子IL-10及IL-13的表達(dá)，降低促炎因子IL-1和TNF-α水平，改善腸道粘膜免疫屏障功能，進(jìn)而提高雞群抗病能力和生長性能[9]。

3.2 免疫佐劑的研究 作為一種新型的免疫制劑，TF在臨床上對(duì)活疫苗和油乳劑滅活苗的協(xié)同作用得到充分驗(yàn)證，并且發(fā)現(xiàn)TF能提高機(jī)體細(xì)胞免疫水平，促進(jìn)抗體的產(chǎn)生，并延長抗體高峰期，使之維持更長的時(shí)間。任培森等研究發(fā)現(xiàn)將禽流感DNA疫苗與轉(zhuǎn)移因子聯(lián)合免疫可顯著提高免疫雞抗體水平及免疫器官指數(shù)[10]。孫秀玉等研究也發(fā)現(xiàn)，在對(duì)肉雞免疫時(shí)配伍口服轉(zhuǎn)移因子，可以促進(jìn)肉雞的生長發(fā)育，并在一定程度上提高新城疫疫苗的抗體滴度，對(duì)外周血淋巴細(xì)胞百分率和免疫器官指數(shù)沒有產(chǎn)生明顯影響[11]。

4 轉(zhuǎn)移因子免疫增強(qiáng)劑的功能及作用機(jī)理

4.1 傳遞特異細(xì)胞免疫信息，促進(jìn)細(xì)胞免疫 TF可以促進(jìn)中性粒細(xì)胞游走，促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)抗原的呈遞，刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生淋巴細(xì)胞激活因子，能使動(dòng)物體內(nèi)CD3+、CD4+細(xì)胞數(shù)量得以提高，CD4+/CD8+的比值也得到提升，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生干擾素，同時(shí)也可修復(fù)淋巴細(xì)胞膜受體的免疫活性。TF也可調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞mRNA的合成，特異TF可抑制癌細(xì)胞DNA合成，顯示出TF的免疫調(diào)節(jié)作用；張方信等應(yīng)用特異TF免疫治療腫瘤病人后發(fā)現(xiàn)各細(xì)胞因子活性顯著增強(qiáng)，白細(xì)胞（WBC）明顯增加，且IL-1、IL-2活性及WBC增加明顯高于化療者，表明TF作為細(xì)胞調(diào)節(jié)劑可有效調(diào)節(jié)腫瘤患者的細(xì)胞因子水平[12]。

4.2 促進(jìn)體液免疫，增加抗體滴度 轉(zhuǎn)移因子對(duì)體液免疫的影響主要是通過T淋巴細(xì)胞輔助、實(shí)現(xiàn)、調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫機(jī)能。高迎春等研究表明雞脾轉(zhuǎn)移因子（IF）可促進(jìn)減蛋綜合征滅活疫苗的免疫效果[13]。TF作為免疫增強(qiáng)劑還可以使得造血系統(tǒng)在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生活化淋巴細(xì)胞，促進(jìn)T輔助細(xì)胞產(chǎn)生并釋放更多的淋巴因子，從而提升T細(xì)胞的生長和分裂的功能，進(jìn)而發(fā)揮抗放射、抗免疫抑制作用。

4.3 增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫應(yīng)答的作用 非特異性活性的檢測(cè)不需要有特異抗原的刺激。TF的非特異性活性表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面[14]：①增強(qiáng)或抑制淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化。體內(nèi)試驗(yàn)表明TF對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化增強(qiáng)或抑制作用的強(qiáng)度具有處理?xiàng)l件依賴性，在體外 TF對(duì)刀豆素 A(concanavalin A，ConA)的刺激呈抑制作用，對(duì)PWM（美洲商陸素）刺激呈增強(qiáng)作用，而對(duì)PHA（植物血凝素）刺激無明顯作用，在粗制TF中既存在增強(qiáng)免疫反應(yīng)的物質(zhì)，又存在抑制免疫反應(yīng)的物質(zhì)；②趨化活性。TF對(duì)中性粒細(xì)胞和脾細(xì)胞具有很強(qiáng)的增殖活性，對(duì)巨噬細(xì)胞也具有弱的趨化活性，同時(shí)也可以刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生淋巴細(xì)胞激活因子；③增加單核細(xì)胞cGMP濃度，但對(duì)cGMP水平無明顯影響；④增強(qiáng)K細(xì)胞、NK細(xì)胞和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)的殺傷活性；⑤促進(jìn)胸腺細(xì)胞的分化；⑥誘導(dǎo)靶細(xì)胞分泌大量干擾素-γ和白細(xì)胞介素-2等細(xì)胞因子；⑦增強(qiáng)B淋巴細(xì)胞活性，使抗體滴度升高；⑧提高M(jìn)UC2（血清粘蛋白）基因的表達(dá)水平、下調(diào)各個(gè)腸段TLR2及TLR4 mRNA水平和提高抗氧化功能。

5 轉(zhuǎn)移因子的應(yīng)用前景

轉(zhuǎn)移因子作為一種新型的免疫激發(fā)劑近年來已引起了人們的廣泛關(guān)注。它在控制傳染病及免疫缺陷疾病的預(yù)防方面起到了非常重要的作用。此外，隨著人們對(duì)食品的生物安全意識(shí)提高，提倡食用綠色食品，因而對(duì)限制抗生素和抗病毒化學(xué)藥物的使用等越來越重視。TF安全迅速、效果顯著、無藥物殘留、無明顯毒副作用、無抗原性，符合作為新型免疫制劑綠色動(dòng)物性食品生產(chǎn)的要求，因此積極開展動(dòng)物TF的系統(tǒng)性研究及開發(fā)，廣泛應(yīng)用于畜禽疫病控制，將會(huì)為養(yǎng)殖界帶來巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

但是TF的制備會(huì)受到一定的限制，因?yàn)門F廣泛存在于動(dòng)物的白細(xì)胞中，其制備原料通常是富含白細(xì)胞的脾、淋巴結(jié)等器官和組織及外周血液T細(xì)胞。而雞脾臟為加工過程中的廢棄物，可用來制作TF，因此制備家禽TF的原材料來源相當(dāng)廣泛，具有很大的優(yōu)勢(shì)。此外家禽TF的使用可以明顯促進(jìn)其生長發(fā)育，提高出欄體重，并在一定程度上提高疫苗免疫后的抗體滴度。綜合以上幾種優(yōu)勢(shì)，TF在家禽行業(yè)的使用具有很高的價(jià)值。

然而，盡管多為學(xué)者普遍認(rèn)為TF安全、無毒、無抗原等特點(diǎn)，但是TF的實(shí)際臨床應(yīng)用并不是特別廣泛，主要是因?yàn)椋孩俜翘禺愋訲F的化學(xué)活性受供體的免疫功能影響較大，導(dǎo)致臨床效果浮動(dòng)較大；②缺乏適宜的動(dòng)物模型和理想的活性測(cè)定方法；③臨床應(yīng)用缺乏必需的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)；④試驗(yàn)環(huán)境存在差異。因此，建立科學(xué)的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，探索高效TF活性檢測(cè)方法是使TF得以進(jìn)一步推廣應(yīng)用的關(guān)鍵所在。