中醫(yī)藥對肺癌p53基因表達(dá)影響的研究進(jìn)展

吳旭萍 張海橋 林勝友

原發(fā)性肺癌是我國最常見的惡性腫瘤之一。據(jù)最新數(shù)據(jù)統(tǒng)計，我國新發(fā)肺癌病例70.5萬，死亡病例為56.9萬，死亡率占我國惡性腫瘤死亡率的第一位[1]。p53與肺癌的生物學(xué)行為存在相關(guān)性[2]。p53作為一種抑癌基因，是癌癥中最常見的突變基因之一[3]，人類惡性腫瘤患者中超過50%的人存在p53基因的突變。目前中醫(yī)對調(diào)節(jié)肺癌p53基因表達(dá)的研究日益增多。部分研究表明，中醫(yī)藥能夠在一定程度上抑制突變型p53基因的表達(dá)，增強(qiáng)野生型p53基因的表達(dá)。本文就其相關(guān)性作一探討。

1 p53基因及p53蛋白概述

p53基因位于17號染色體短臂1區(qū)31帶，由11個外顯子和10個內(nèi)含子組成，其cDNA全長2074bp，轉(zhuǎn)錄2.5kb mRNA，其編碼的蛋白質(zhì)通常稱為p53蛋白[4]。p53基因分為野生型和突變型，野生型p53為正常的p53基因。野生型p53基因可調(diào)節(jié)大量靶基因的表達(dá)，進(jìn)而影響細(xì)胞周期分布、分化、凋亡、靜息、DNA損傷、轉(zhuǎn)移的抑制和血管生成及其他功能[5]。野生型p53基因通過缺失突變、點突變、移碼突變、基因重排等變?yōu)橥蛔冃蚿53基因。p53基因的突變或缺失是致癌的原因之一。研究[6]表明，若人類17號染色體的短臂缺失，結(jié)腸、肺、肝或其他臟器可發(fā)生腫瘤。突變型p53基因由于失去了與細(xì)胞核內(nèi)的特異性DNA結(jié)合能力，而且不能與p53結(jié)合蛋白結(jié)合或僅微弱地結(jié)合，同時使野生型p53的正?；钚允艿揭种?，從而產(chǎn)生細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，因此，p53基因發(fā)生突變后，還可能獲得某些癌基因的功能。當(dāng)p53基因錯義突變或終止突變后，有可能合成無功能的多肽鏈或多肽片段，結(jié)果對腫瘤細(xì)胞的基因不再發(fā)揮調(diào)控作用。

2 P53與肺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后

p53與肺癌的生物學(xué)行為存在相關(guān)性[2]，能夠通過調(diào)節(jié)其下游的靶基因，在肺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后中發(fā)揮作用。突變型p53參與腫瘤從良性到有侵襲性的過程。內(nèi)源性高表達(dá)突變型p53基因的小鼠與低表達(dá)p53的小鼠有明顯差異，高表達(dá)突變型p53小鼠的腫瘤譜向癌癥及轉(zhuǎn)移性腫瘤偏移[7-8]。多年來，許多體外和小鼠模型已經(jīng)證實了突變型p53通過增強(qiáng)通過諸如TGFβ，EGFR和MET等受體[9]的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來增強(qiáng)腫瘤侵襲和運(yùn)動的能力。近幾年對miRNA的研究更證實p53參與調(diào)節(jié)一系列miRNA（如miR-34家族、miR-200家族，miR-148b等）的表達(dá)[10]，對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展產(chǎn)生影響。傅寅佳等[11]通過對生物信息學(xué)開放數(shù)據(jù)庫的分析，并經(jīng)實驗證實，p53通過對miR-148b的啟動子的調(diào)控來調(diào)節(jié)miR-148b的表達(dá)，抑制肺腺癌細(xì)胞的增殖。在促進(jìn)肺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移方面，p53被證實可通過調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)ENTPD5酶將UDP水解成UMP，促進(jìn)蛋白的N-糖基化來誘導(dǎo)肺癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移[12]，也可通過調(diào)節(jié)Sival基因，增強(qiáng)stathmin蛋白和微管蛋白直接的相互作用，并減弱stathmin與CaMKⅡ的聯(lián)系，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移[13]。

因肺癌的預(yù)后與肺癌的分化程度，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，TMN分期，肺外侵襲情況等多種因素有關(guān)，而p53對以上各因素均可產(chǎn)生影響，故p53可作為肺癌預(yù)后評估的一個重要因素。α-1抗胰蛋白酶（A1AT）基因被認(rèn)為是突變型p53的關(guān)鍵效應(yīng)物，能夠驅(qū)動肺癌的侵襲。最新研究[14]發(fā)現(xiàn)，突變型p53通過調(diào)控其家族成員p63轉(zhuǎn)錄上調(diào)了A1AT表達(dá)，而A1AT抗體能減弱突變型p53驅(qū)動的轉(zhuǎn)移和侵襲,高A1AT表達(dá)與更高的腫瘤分期，升高的p53表達(dá)和肺腺癌患者的總生存期縮短相關(guān)。長鏈非編碼RNA（Linc-RNA）也是近年來研究的熱點之一。Linc-RNA被認(rèn)為不僅與腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)，并且與腫瘤的轉(zhuǎn)移相關(guān)。Wu等[15]證實，Linc-RNA可通過增強(qiáng)p53活性調(diào)節(jié)新內(nèi)膜的形成，血管平滑肌增殖及凋亡。Linc-RNA同時也可調(diào)節(jié)p53依賴的凋亡，高水平的Linc-RNA與較差的非小細(xì)胞肺癌預(yù)后相關(guān)[16]。Angelica等[17]實驗研究證實，在非小細(xì)胞肺癌中，較高的miR-34a/高p53表達(dá)比低 miR-34a/低 p53表達(dá)的有更高的存活率。

3 p53與肺癌治療

放療通過射線直接作用于DNA，引起DNA分子斷裂、交聯(lián)或間接使人體組織間液發(fā)生電離，產(chǎn)生自由基，從而引起DNA損傷，此過程中p53起了很重要的作用。DNA受損后，一部分細(xì)胞表面感受器蛋白刺激共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張突變基因（ataxia telangiectasia-mutated gene，ATM）/共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張Rad3相關(guān)蛋白（ATM and Rad3 related，ATR），后者可將一些效應(yīng)器蛋白（CHK1/CHK2）磷酸化。這些效應(yīng)器蛋白協(xié)同ATM將靶蛋白包括p53蛋白磷酸化，增加了級聯(lián)效應(yīng)的復(fù)雜性，明確了p53在決定放療敏感性方面的重要作用[18]。同時，Cheng等[19]研究發(fā)現(xiàn)p53的放射增敏與MDM2和P21表達(dá)的增加有關(guān)，p53可通過抑制自噬和激活細(xì)胞凋亡來調(diào)節(jié)放射敏感性，p53有效地消除了電子輻射（IR）誘導(dǎo)的自噬。Kriegs等[20]證實在具有完整的p53/p21信號通路的肺癌細(xì)胞中，通過抑制EGFR使細(xì)胞永久的停留在G1期，而增加NSCLC細(xì)胞的放射敏感性。

化療藥物的特點是干擾細(xì)胞的增殖，作用于不同的細(xì)胞周期，引起細(xì)胞凋亡。上述多項研究[11，15]已證實P53對細(xì)胞增殖及凋亡具有重要影響。陳薇等[21]對1995-2011年SCI收錄期刊發(fā)表有關(guān)p53蛋白與晚期非小細(xì)胞肺癌化療療效的文獻(xiàn)匯總后進(jìn)行Meta分析和統(tǒng)計處理，結(jié)果顯示，p53蛋白陰性患者可能比p53陽性者對鉑類化療更加敏感。

p53基因還是決定熱敏感的一個重要因素[22]，在42℃時，A549細(xì)胞中p53蛋白表達(dá)明顯增加，從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。?；搓柕萚23]研究顯示，術(shù)前熱療聯(lián)合化療，或僅灌注化療均可下調(diào)中晚期肺癌中p53蛋白陽性表達(dá)率。

隨著近年來研究的逐步深入，與p53相關(guān)的靶向治療取得了重大進(jìn)展?；謴?fù)p53抑癌功能已成為新的治療策略。Bykov等[24]發(fā)現(xiàn)了一種名為PRIMA-1的小分子，可以重新激活突變型p53，其衍生物PRIMA-1-met已進(jìn)入了二期臨床試驗。Sorgani等[25]最近描述了一種突變型p53靶向肽，可通過破壞特定的易聚突變型p53的聚集來起作用。

4 中醫(yī)藥對肺癌p53基因表達(dá)的研究

中藥也是治療肺癌的重要手段之一，中藥具有提高機(jī)體免疫力，促進(jìn)肺癌細(xì)胞凋亡，阻礙肺癌細(xì)胞生長及增殖，阻滯肺癌細(xì)胞的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，調(diào)節(jié)信號傳導(dǎo)通路，抑制新生血管形成，改善血液流變學(xué)等指標(biāo)的功效。目前中醫(yī)中藥對肺癌p53基因表達(dá)的研究也取得了一定的成果。

4.1 單藥及其提取物對p53的影響 中藥提取物的抗腫瘤活性成分因其高效低毒的特性，目前研究較為廣泛，其中活血化瘀類中藥提取物是研究的熱點。姜黃素是一種天然多酚類色素，為二酮類化合物，廣泛存在中藥姜黃的根莖中。近年來的研究顯示，其在抗腫瘤、抗突變、抗炎、利膽、抗氧化等方面具有良好的藥理作用。一項研究[26]報道姜黃素可激活p53信號通路，上調(diào)miR-192-5p/215促進(jìn)凋亡，影響肺癌預(yù)后。另一項實驗研究[27]表明，姜黃素作用肺癌A549細(xì)胞24h就可引起A549細(xì)胞中野生型p53蛋白表達(dá)水平的上調(diào)，并呈劑量依賴性，同時升高Bax和Caspase-3，提示姜黃素可能通過上調(diào)p53下游的Bax和Caspase-3等凋亡相關(guān)基因的表達(dá),促進(jìn)肺癌細(xì)胞凋亡。莪術(shù)揮發(fā)油提取物欖香烯對腫瘤細(xì)胞的DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成有明顯的抑制作用，能直接作用于細(xì)胞膜，使腫瘤細(xì)胞破裂，可以改變和增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的免疫原性，誘發(fā)和促進(jìn)機(jī)體對腫瘤細(xì)胞的免疫反應(yīng)。Lee等[28]發(fā)現(xiàn)β-欖香烯通過增加野生型p53蛋白的表達(dá)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞停滯在G2/M期。丹參作為活血化瘀藥的常用藥，研究顯示其可以抑制野生型p53表達(dá)，徐亞東等[29]通過建立Lewis肺癌小鼠模型，檢測丹參注射液對Lewis肺癌組織p53的表達(dá)，結(jié)果顯示，小鼠Lewis肺癌組織p53丹參注射液組陽性率明顯高于對照組。

此外，基于肺癌的中醫(yī)病機(jī)特點，止咳化痰類中藥在肺癌治療中運(yùn)用廣泛?？疃ň哂衅酱箍茸饔?，治療肺虛久咳，體外抗腫瘤效應(yīng)也被揭示。其有效成分款冬花多糖被證實在作用于肺癌A549細(xì)胞后，呈劑量依賴的特點誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡，并上調(diào)p53基因表達(dá)、下調(diào) bcl-2基因表達(dá)（P＜0.05），其抗腫瘤效應(yīng)可能與細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控有關(guān)[30]。中藥靈芝具有補(bǔ)氣安神，止咳平喘的作用，其成熟期從實體的菌蓋彈射出來的細(xì)小的孢子，即靈芝孢子粉。趙燕等[31]對Lewis肺癌瘤株小鼠的實驗研究發(fā)現(xiàn)，靈芝孢子粉組肺癌瘤體質(zhì)量顯著低于模型對照組，經(jīng)測定，靈芝孢子粉組突變型p53基因的表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)明顯少于模型對照組，因此靈芝孢子粉能夠減少突變型p53的編碼產(chǎn)物，降低細(xì)胞增殖能力，具有明顯的抑瘤作用。

上述兩大類提取物主要通過調(diào)控p53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑發(fā)揮抗腫瘤作用，另外，多種癌細(xì)胞中存在植物提取物的表觀調(diào)控靶點的認(rèn)識也逐漸被揭示，并取得一些進(jìn)展。吳瑛等[32]發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素可通過抑制甲基轉(zhuǎn)移酶使p53基因去甲基化，促進(jìn)p53蛋白的表達(dá)，進(jìn)而抑制細(xì)胞增殖。大豆異黃酮可通過降低啟動子區(qū)域甲基化水平，來增強(qiáng)染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白5以及p53的表達(dá)量，有助于抑制腫瘤細(xì)胞生長及NB微血管的形成。

4.2 中藥復(fù)方對p53的影響 中藥復(fù)方因其成分復(fù)雜，目前基礎(chǔ)研究較少，故存在一定的局限性。益氣除痰方具有健脾、消積、清利作用，已在肺癌治療取得臨床療效，細(xì)胞實驗[33]觀察到益氣除痰方含藥血清對大鼠肺腺癌A549失巢凋亡的誘導(dǎo)作用呈濃度依賴性，檢測結(jié)果表明其機(jī)制可能與PI3K/Akt信號通路有關(guān)，特別是對P-Akt表達(dá)的抑制和下游凋亡相關(guān)基因p53、bcl-2、bax的調(diào)控。肺抑瘤合劑由益氣養(yǎng)陰、化痰散瘀、清熱解毒的中藥組成，與生理鹽水組相比，其可使小鼠突變型p53基因的表達(dá)明顯降低，可能是通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡實現(xiàn)抑制瘤體增大的作用[34]。一種新方Ke formula（魚腥草、冬瓜子、膽南星等十三味中藥組成）通過調(diào)節(jié)p53誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞停滯在G1/S期，發(fā)揮抗腫瘤作用[35]。扶正抗癌方聯(lián)合吉非替尼作用于肺癌A549細(xì)胞后，相比于單純中藥組及單純吉非替尼組腫瘤增殖受到抑制（P＜0.05），凋亡率為（12.6±4.5）%，采用 Western blot檢測后發(fā)現(xiàn)PPAR-γ、p53蛋白均出現(xiàn)上調(diào)，猜測機(jī)制與p53調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)[36]。

因肺癌后期本虛的臨床表現(xiàn)，采用扶正固本，健脾益胃治則也取得一定療效。劉強(qiáng)等[37]報道，六君子湯聯(lián)合EP方案與單純EP方案對比，加入六君子湯組的突變型p53表達(dá)顯著降低，對肺癌療效較為顯著。許林利[38]采用補(bǔ)腎化瘀解毒法研究Lewis肺癌轉(zhuǎn)移小鼠的p53基因表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎化淤解毒復(fù)方能夠降低腫瘤組織中突變型p53蛋白的表達(dá)量，同時降低突變型p53基因mRNA的表達(dá)，減少腫瘤的生長轉(zhuǎn)移，并且能協(xié)同順鉑增效。針對肺癌后期的惡病質(zhì)，對Lewis肺癌小鼠使用消巖湯[39]后，小鼠進(jìn)食及體毛情況均有改善，瘤體較對照組減小，經(jīng)測定其野生型p53基因的表達(dá)顯著高于對照組。

對于肺癌患者DDP耐藥的問題，有學(xué)者在對溫下方的研究[40]中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)含藥血清處理過的A549/DDP細(xì)胞株凋亡率明顯升高，其p53表達(dá)增高、Bcl-2表達(dá)降低。目前Bcl-2被認(rèn)為是與耐藥相關(guān)的基因，而p53能直接下調(diào)Bcl-2，從而降低細(xì)胞膜表面肺耐藥相關(guān)蛋白的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)肺癌細(xì)胞的耐藥。

5 結(jié)語與展望

p53基因作為經(jīng)典的抑癌基因之一，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、治療等方面的作用已被廣泛驗證，并且在針對肺癌的治療中也已有了很大進(jìn)展，但中藥對于肺癌p53基因表達(dá)影響的研究尚少。目前的實驗研究多見于植物單藥或其提取物，對中藥復(fù)方缺乏深入的研究，中醫(yī)辨證論治及整體觀念的結(jié)合尚顯不足。且以基礎(chǔ)實驗研究為主，少見臨床研究。中藥對p53的作用機(jī)制也尚待探索。故今后的研究可向辨證施治的中藥復(fù)方及作用機(jī)制，臨床研究轉(zhuǎn)變，闡明中藥復(fù)方對肺癌分子層面的影響機(jī)制，對開發(fā)和研制抗肺癌新藥具有指導(dǎo)作用。

參考文獻(xiàn)

［1］陳萬青，鄭榮壽，張思維，等.2012年中國惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析［J］.中國腫瘤，2016，25（1）：1-8.

［2］高福平，魏謹(jǐn).P53與肺癌關(guān)系的研究進(jìn)展［J］.臨床肺科雜志，2012，17（1）：127-128.

［3］ Pfeifer GP，Holmquist GP.Mutagenesis in the P53 gene［J］.Biochimica et Biophysica Acta（BBA）-Reviews on Cancer，1997，1333（1）：M1-M8.

［4］ Day A，Verma CS，Lane DP.Modulation of p53 degradation as a therapeutic approach［J］.Cancer，2008，98（1）：4-8.

［5］ Laptenko O，Prives C.Transcriptional regulation by p53：one protein，many possibilities［J］.Cell Death Differ，2006，13（6）：951-961.

［6］王承紅.p53基因在腫瘤放療中的研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2010，16（2）：205-207．

［7］ Lang GA，Iwakuma T，Suh YA，et al.Gain of function of a p53 hot spot mutation in a mouse model of Li-Fraumeni syndrome［J］.Cell，2004，119（6）：861-872.

［8］Hanel W，Marchenko N，Xu S，et al.Two hot spot mutant p53 mouse models display differential gain of function in tumorigenesis［J］.Cell Death&Differentiation，2013，20（7）：898-909.

［9］ Muller PAJ，Vousden KH.Mutant p53 in cancer：new functions and therapeutic opportunities［J］.Cancer cell，2014，25（3）：304-317.

［10］ Hermeking H.MicroRNAs in the p53 network：microman－agement of tumour suppression［J］.Nature Reviews Cancer，2012，12（9）：613－626.

［11］傅寅佳，楊熹，來森艷，等.p53通過調(diào)控miR-148b抑制肺癌細(xì)胞 PC-9 的增殖［J］.實用醫(yī)學(xué)雜志，2015，31（12）：1908-1911.

［12］ Vogiatzi F，Brandt DT，Schneikert J，et al.Mutant p53 promotes tumor progression and metastasis by the endoplasmic reticulum UDPase ENTPD5［J］.Proceedings of the National Academy of Sciences，2016，113（52）：E8433-E8442.

［13］Li N，Jiang P，Du W，et al.Siva1 suppresses epithelial-mesenchymal transition and metastasis of tumor cells by inhibiting stathmin and stabilizing microtubules［J］.Proceedings of the National Academy of Sciences，2011，108（31）：12851-12856.

［14］ Shakya R，Tarulli GA，Sheng L，et al.Mutant p53 upregulates alpha-1 antitrypsin expression and promotes invasion in lung cancer［J］.Oncogene，2017，36（31）：4469-4480.

［15］Wu G，Cai J，Han Y，et al.LincRNA-p21 Regulates Neointima Formation，Vascular Smooth Muscle Cell Proliferation，Apoptosis，and Atherosclerosis by Enhancing p53 Activity clinical perspective［J］.Circulation，2014，130（17）：1452-1465.

［16］ Moises J，Castellano J，Ramirez J，et al.LincRNA-p21 Impacts Prognosis In Non-Small Cell Lung Cancer Adenocarcinoma Patients［J］.American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine，2016，11（12）：2173-2182.

［17］Angelica CM，Cristina I，David V，et al.PDL1 Regulation by p53 via miR-34［J］.Journal of the National Cancer Institute，2016，108（1）：djv303.

［18］宋曉燕.p53基因在腫瘤治療中的進(jìn)展［J］.世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2016，16（54）：25，66.

［19］Cheng G，Kong D，Hou X，et al.The tumor suppressor，p53，contributes to radiosensitivity of lung cancer cells by regulating autophagy and apoptosis［J］.Cancer Biotherapy and Radiopharmaceuticals，2013，28（2）：153-159.

［20］ Kriegs M，Gurtner K，Can Y，et al.Radiosensitization of NSCLC cells by EGFR inhibition is the result of an enhanced p53-dependent G1 arrest［J］.Radiotherapy and Oncology，2015，115（1）：120-127.

［21］陳薇，王飛江，劉菊英.p53與晚期非小細(xì)胞肺癌化療療效的 Meta 分析［J］.江蘇醫(yī)藥.2013，39（23）：2918-2919.

［22］蔣東，李芳，葛錦峰，等.熱療對人肺癌細(xì)胞凋亡的影響［J］.江蘇醫(yī)藥.2012，38（15）：1737-1739.

［23］祝淮陽，熊瑜.術(shù)前熱療聯(lián)合灌注化療對肺癌細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因的影響［J］.實用老年醫(yī)學(xué).2012，25（5）：394-397.

［24］ Bykov VJN，Zhang Q，Zhang M，et al.Targeting of mutant p53 and the cellular redox balance by APR-246 as a strategy for efficient cancer therapy［J］.Frontiers in oncology，2016，6（7471）：21.

［25］ Soragni A，Janzen DM，Johnson LM，et al.A designed inhibitor of p53 aggregation rescues p53 tumor suppression in ovarian carcinomas［J］.Cancer cell，2016，29（1）：90-103.

［26］Ye M，Zhang J，Zhang J，et al.Curcumin promotes apoptosis by activating the p53-miR-192-5p/215-XIAP pathway in non-small cell lung cancer［J］.Cancer letters，2015，357（1）：196-205.

［27］蔣金，曹友德，磨娜，等.姜黃素誘導(dǎo)肺癌A549細(xì)胞凋亡［J］.激光雜志.2012，33（4）：58-60.

［28］Lee RX，Li QQ，Reed E.β-elemene effectively suppresses the growth and survival of both platinum-sensitive andresistant ovarian tumor cells［J］.Anticancer research，2012，32（8）：3103-3113.

［29］徐亞東，劉俊英，徐亞光，等.丹參注射液對小鼠Lewis肺癌 P53、P16 表達(dá)的影響［J］.中國實用醫(yī)藥，2013，8（16）：260-261.

［30］羅強(qiáng)，李迎春，任鴻，等.款冬花多糖對肺腺癌A549細(xì)胞生長及凋亡的影響［J］.河北北方學(xué)院學(xué)報（自然科學(xué)版），2013，29（4）：63-66.

［31］趙燕，席孝賢.靈芝孢子粉對肺癌小鼠突變型P53蛋白表達(dá)的影響及抑瘤作用［J］.陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，34（4）：79-80.

［32］吳瑛，劉芳，郭文淵，等.雷公藤內(nèi)酯醇下調(diào)P53基因甲基化抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖［J］．中國腫瘤生物治療雜志，2011，18（3）：270-274．

［33］李曉清，安琳，鐘家芳.益氣除痰方對大鼠肺癌A549細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制［J］.中國老年學(xué)雜志，2015，35（9）：2365-2367.

［34］鄭翠娥，孔雅，閆璐玓，等.肺抑瘤合劑對小鼠Lewis肺癌p16、p53、cyclinD1 表達(dá)影響的實驗研究［J］.中國中醫(yī)藥科技，2008，15（2）：116.

［35］ Xiong F，Jiang M，Huang Z，et al.A novel herbal formula induces cell cycle arrest and apoptosis in association with suppressing the PI3K/AKT pathway in human lung cancer A549 cells［J］.Integrative cancer therapies，2014，13（2）：152-160.

［36］楊小兵，陳曉，吳萬垠，等.扶正抗癌方聯(lián)合吉非替尼對肺癌A549細(xì)胞的影響及機(jī)制［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志.2016，36（11）：1340-1344.

［37］劉強(qiáng)，李茵茵，崔巍，等.六君子湯聯(lián)合EP化療方案治療晚期非小細(xì)胞肺癌37例［J］.中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育.2017，15（5）：98-99.

［38］許林利.補(bǔ)腎化瘀解毒復(fù)方對Lewis肺癌轉(zhuǎn)移作用及p53、nm23 基因表達(dá)影響的研究［D］.暨南大學(xué)，2009.

［39］張?zhí)N超，賈英杰，楊佩穎，等.消巖湯對肺癌惡病質(zhì)小鼠腫瘤生長的影響［J］.中醫(yī)雜志，2013，54（6）：509-511.

［40］季旭明，歐陽兵，吳智春，等.溫下方含藥血清誘導(dǎo)A549/DDP細(xì)胞凋亡及對 Bcl-2，Bax，p53蛋白表達(dá)的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2011，17（12）：123-126.