雪菊總黃酮對(duì)小鼠體重及記憶再現(xiàn)障礙的影響

秦 樂(lè) 陳新梅 邢佰穎 岳志敏

(山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，山東 濟(jì)南 250355)

雪菊，菊科植物兩色金雞菊，具有清熱解毒、活血化疲、和胃健脾之功效。現(xiàn)代藥理研究表明，雪菊具有降血糖、降血壓、降血脂、抗氧化、去除體內(nèi)垃圾等多種功效[1]。其主要含有黃酮類物質(zhì)、人體必需礦物質(zhì)元素、氨基酸及蛋白質(zhì)類，也含有豐富的芳香族化合物，有機(jī)酸、多糖等[2]。其中，雪菊總黃酮含量高，具有顯著的抗病毒、抗氧化能力[3]，且從植物中提取得到的天然黃酮類化合物可有效對(duì)抗記憶力衰退[4]，為探討雪菊總黃酮對(duì)新陳代謝以及記憶力的影響，本實(shí)驗(yàn)采用稱量法和小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)法研究其對(duì)體重、小鼠記憶再現(xiàn)及行為能力的影響程度，對(duì)人們的日常飲食與體重控制有一定指導(dǎo)意義，可為雪菊總黃酮在此方面的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材 料

1.1 動(dòng)物

SPF級(jí)雄性昆明種小鼠，體重28～32g。由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司質(zhì)檢中心實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供。動(dòng)物合格證編SCXK(魯)20160007。

1.2 儀器

XZC-5A 型小鼠跳臺(tái)儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站提供)；恒溫不銹鋼水浴鍋(上海樹(shù)立儀器儀表有限公司)；JM-A3002電子天平(諸暨市超澤衡器設(shè)備有限公司)。

1.3 試藥

雪菊(新疆潤(rùn)元本草有限公司，批號(hào)：20160910)；95%乙醇(天津市富宇精細(xì)化工有限公司，分析純，批號(hào): 20150725);氯化鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，分析純，批號(hào)：20160902)。

2 方法與結(jié)果

2.1 雪菊總黃酮的提取

精密稱取研碎后過(guò)60目網(wǎng)篩的雪菊粉末4.00 g，按料液比1∶10加入40 mL純水，于90 ℃下熱浸20 min后過(guò)濾。如此重復(fù)2次，合并2次浸出液得到11.14 mg/mL高劑量雪菊總黃酮[5]。后稀釋2次，各稀釋1倍，得5.57 mg/mL中劑量和2.78 mg/mL低劑量雪菊總黃酮。

2.2 動(dòng)物分組及給藥

健康昆侖種小鼠40只，隨機(jī)分為4組，即空白組，低、中、高劑量雪菊總黃酮組，每組10只。除空白組外，其余各組分別灌胃(0.1 mL/10 g)給予低、中、高劑量雪菊總黃酮，空白組灌胃給予等量生理鹽水，每天2次，連續(xù)給藥30天。

2.3 小鼠體重的測(cè)定

各組小鼠自由取食及飲用水，分別在灌胃前，灌胃后10、20、30 d稱重記錄體重。并觀察每組小鼠排泄情況及健康狀況。

由表1可知，灌胃前，各組小鼠體重?zé)o差異，且4組小鼠在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中體重均增加，且不同劑量雪菊總黃酮組的小鼠體重增長(zhǎng)較空白組均有不同程度的減緩，劑量越大，體重增長(zhǎng)越慢。與空白組相比，灌胃后20 d中、高濃度雪菊總黃酮組小鼠的體重統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著；灌胃后30 d高劑量組體重統(tǒng)計(jì)學(xué)差異極為顯著，表明高濃度雪菊總黃酮能明顯控制小鼠體重增長(zhǎng)。

表1 不同濃度雪菊總黃酮給藥天數(shù)對(duì)小鼠體重的影響Table 1 Effects for days of different concentration total flavonoids from coreopsis tinctoria on weight of mice

注：與空白組比較，***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。

2.4 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)

第30 d給藥1 h后，跳臺(tái)訓(xùn)練5 min(36 V，1 mA，Alternating Current交流電)。訓(xùn)練后24 h，試驗(yàn)前30 min，空白組灌胃40%乙醇10 mL·kg-1，低、中、高劑量雪菊總黃酮組等量灌胃末次給藥，進(jìn)行重復(fù)跳臺(tái)測(cè)試，記錄小鼠5 min內(nèi)受到電擊的總次數(shù)，定義為跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)。

表2 不同濃度雪菊總黃酮對(duì)40%乙醇致記憶再現(xiàn)障礙小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)錯(cuò)誤次數(shù)Table 2 effects of different concentration total flavonoids from coreopsis tinctoriaon memory emersion disorders caused by 40% ethanol of mice

注：與空白組比較，***P<0.001。

由表2可知，與空白組相比，不同劑量雪菊總黃酮組的小鼠跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)均減少，濃度越大，跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)越少，且中、高劑量組有極顯著差異，表明中、高劑量雪菊總黃酮能顯著降低乙醇引起的記憶再現(xiàn)障礙模型小鼠跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)，提高其記憶再現(xiàn)能力。

3 結(jié)果與討論

通過(guò)測(cè)量小鼠在灌胃前，灌胃后10、20、30 d的體重，發(fā)現(xiàn)不同濃度的雪菊總黃酮對(duì)小鼠體重增長(zhǎng)有不同程度的減緩作用，且濃度越高，體重增長(zhǎng)減緩程度越大。灌胃20 d后，中、高劑量雪菊總黃酮組與空白組的體重相比有顯著差異；灌胃30 d后高劑量組與空白組小鼠體重差異極為顯著，表明高濃度雪菊總黃酮可明顯控制小鼠體重增長(zhǎng)。雪菊總黃酮中的兒茶素[6]能顯著抑制脂肪細(xì)胞的增殖、分化，有抑制細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)積累的功效，同時(shí)通過(guò)刺激機(jī)體熱生成、降低機(jī)體對(duì)食物營(yíng)養(yǎng)成分的吸收等作用而減少機(jī)體的能量攝入和存儲(chǔ)[7]，從而減緩小鼠的體重增長(zhǎng)。且觀察各組小鼠排泄情況可發(fā)現(xiàn)，高劑量雪菊總黃酮組小鼠的排泄量較空白組明顯增多，說(shuō)明雪菊能加快腸道蠕動(dòng)，排除小鼠體內(nèi)垃圾，清理毒素，其原因可能與雪菊總黃酮的抗氧化能力與促進(jìn)新陳代謝[8]有關(guān)。綜上，推測(cè)雪菊總黃酮具有一定的促消化、排毒，減少脂肪堆積的功效，臨床上可用于潤(rùn)腸通便，排毒養(yǎng)顏以及減肥等日常保健。

小鼠跳臺(tái)行為實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)不同濃度雪菊總黃酮對(duì)40%乙醇所致小鼠記憶再現(xiàn)障礙的結(jié)果表明，與空白組相比不同濃度的雪菊總黃酮對(duì)小鼠記憶再現(xiàn)障礙有改善作用，且中、高劑量組能顯著減少跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)，表明中、高濃度雪菊總黃酮對(duì)具有中樞抑制作用的低濃度乙醇造成的記憶再現(xiàn)缺損有顯著的對(duì)抗作用，提示雪菊總黃酮可能改善了乙醇引起的細(xì)胞毒性反應(yīng)，修復(fù)了細(xì)胞因乙醇攝入導(dǎo)致的磷脂和脂肪酸代謝紊亂及氧化代謝產(chǎn)物的增加造成的損傷[9]。其機(jī)制可能與總黃酮清除自由基，抗脂質(zhì)過(guò)氧化等作用有關(guān)[10]。雪菊總黃酮在小鼠學(xué)習(xí)記憶方面的積極作用在臨床上對(duì)老年癡呆等病癥的防治具有潛在優(yōu)勢(shì)和良好的應(yīng)用前景[11]。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，雪菊總黃酮具有抑制小鼠體重增重和提高小鼠記憶再現(xiàn)能力的功效?？蔀檫M(jìn)一步探討雪菊總黃酮對(duì)動(dòng)物體重及智力發(fā)育的影響，開(kāi)發(fā)利用以雪菊總黃酮為原材料的功能性藥品和食品提供借鑒參考。

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