人臍帶血干細(xì)胞輔助自體顆粒脂肪面部移植術(shù)臨床觀察

朱凱林

（武漢名韓醫(yī)療美容門診部 湖北 武漢 430050）

本院從2015年1月-2017年2月，收治面部凹陷需要填充脂肪患者40例，采用人臍帶血干細(xì)胞混合自體脂肪顆粒修復(fù)患者顏面部凹陷畸形，以期為臍帶血干細(xì)胞應(yīng)用于自體脂肪顆粒填充提供更多的理論依據(jù)，并對(duì)其進(jìn)行隨訪。以評(píng)價(jià)該技術(shù)的長(zhǎng)期臨床療效。

1.臨床資料

40例，均為女性，年齡25～42歲，平均年齡32歲；采用人臍帶血干細(xì)胞混合脂肪顆粒方法，美容性面部年輕化豐全面術(shù)22例、全面部皮下軟組織萎縮癥豐面治療5例、面部萎縮癥矯治13例；所有受術(shù)者在術(shù)前、術(shù)后均拍攝照片和隨訪；客觀測(cè)量驗(yàn)證顆粒脂肪注射移植術(shù)后的壽命。

2.手術(shù)方法

2.1 hUCBSC混懸液制備

足月分娩健康產(chǎn)婦（乙型肝炎病毒標(biāo)志、艾滋病、梅毒抗體等檢測(cè)陰性）臍帶血由湖北省干細(xì)胞庫(kù)提供，產(chǎn)婦及家屬均簽署知情同意書，實(shí)驗(yàn)方案經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。取新鮮臍帶血（6h內(nèi)用畢），用磷酸緩沖液（PBS）等倍稀釋后置于50ml離心管中，按1∶1比例加至人淋巴細(xì)胞分離液，4℃、2000r/min離心20min后臍帶血分5層，中間白膜層即為單個(gè)核細(xì)胞：用移液器小心吸取富含單個(gè)核細(xì)胞的懸液放人另一離心管內(nèi)，4℃、1000r/min離心15min，PBS洗滌3次；用低糖DMEM培養(yǎng)液懸浮，計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度為5×105/m1,hUCBSC混懸液制備成功。

2.2 脂肪組織制備

顆粒脂肪組織準(zhǔn)備常規(guī)吸脂后脂肪組織離心（1200g*10min）。離心后液體由上至下分為油脂層、脂肪層、沉淀層（含大量血細(xì)胞成分）。吸出油脂層，棄去。將脂肪層重新收集至50ml離心管，加人等量生理鹽水，混勻。離心（1200g，5min）。收集脂肪層中顆粒脂肪組織，備用。

2.3 干細(xì)胞一脂肪復(fù)合組織形成和移植

將臍帶血干細(xì)胞液和顆粒脂肪組織混合，混勻10min，使干細(xì)胞充分附著顆粒脂肪，形成干細(xì)胞一脂肪復(fù)合組織。移植部位以1%利多卡因浸潤(rùn)麻醉，用微量可控注射器進(jìn)行干細(xì)胞一脂肪復(fù)合組織局部注射，注射深度為皮下層，進(jìn)行多點(diǎn)均勻注射。注射后局部適度加壓包扎。

2.4 臨床療效評(píng)價(jià)

通過(guò)術(shù)前和術(shù)后照相，對(duì)比變化。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：明顯改善（原有癥狀消失或明顯減輕）、有效（原有癥狀部分消失，需重復(fù)治療）和無(wú)效（原有癥狀無(wú)變化）。皮膚檢測(cè)∶采用VISIA專業(yè)皮膚圖像分析系統(tǒng)（美國(guó)）檢測(cè)術(shù)前術(shù)后皮膚皺紋、斑點(diǎn)、毛孔、紋理的變化。在正面遮照條件下分析密度和大小，由系統(tǒng)自帶軟件轉(zhuǎn)化為定量數(shù)據(jù)。通過(guò)定量數(shù)據(jù)評(píng)價(jià)術(shù)前和術(shù)后變化?；颊咧饔^評(píng)價(jià)∶采用問(wèn)卷調(diào)查方式進(jìn)行，評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)分為滿意（自覺(jué)改善明顯，效果持久）、有效（自覺(jué)有部分改善）、不滿意（自覺(jué)無(wú)明顯改善，或改善維持時(shí)間過(guò)短）。

3.結(jié)果

干細(xì)胞一脂肪復(fù)合組織移植后，通過(guò)12個(gè)月臨床隨訪，觀察癥狀均有不同程度的改善，其中，明顯改善者20例，有效者17例。皮膚在皺紋、斑點(diǎn)、毛孔、紋理4個(gè)方面定量分析數(shù)據(jù)均降低，顯示移植后皮膚特性發(fā)生改變。37例患者對(duì)治療效果滿意或自覺(jué)有效，3例面部老化患者自覺(jué)效果不明顯，總滿意率92.5%（圖1）。無(wú)患者出現(xiàn)感染、排斥和其他不良反應(yīng)發(fā)生。

圖1 干細(xì)胞一脂肪復(fù)合組織修復(fù)右面部凹陷前后對(duì)比

4.討論

人臍帶血干細(xì)胞是臍帶以及胎盤近胎兒側(cè)血管內(nèi)的血液，包括間充質(zhì)干細(xì)胞以及造血干細(xì)胞，其是一種具有多向分化潛能以及高度自我更新能力的干細(xì)胞。臍帶血干細(xì)胞取材方便，來(lái)源廣泛，增殖分化能力強(qiáng)，免疫原性弱，移植物抗宿主病發(fā)生率低，越來(lái)越多地被應(yīng)用于臨床治療各種類型的疾病[4-6]。人臍帶血干細(xì)胞發(fā)揮作用的機(jī)制可能包括向功能細(xì)胞分化和分泌生長(zhǎng)因子兩方面。

人臍帶血干細(xì)胞可以分泌多種生長(zhǎng)因子，如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，進(jìn)而使膠原合成和血管生成增加，使皮膚質(zhì)地發(fā)生變化[7]，且人臍帶血干細(xì)胞在真皮層的微環(huán)境中，可分化為成纖維細(xì)胞，而皮膚成纖維細(xì)胞在皮膚衰老過(guò)程中亦發(fā)揮關(guān)鍵作用。成纖維細(xì)胞是細(xì)胞外基質(zhì)蛋白、糖蛋白、粘附分子和各種細(xì)胞因子的來(lái)源[8]，并直接影響角質(zhì)形成細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和肥大細(xì)胞。本研究探討人臍帶血干細(xì)胞在臨床中的應(yīng)用，將體外培養(yǎng)的人臍帶血干細(xì)胞回注到患者皺紋部位的真皮淺層，如頸紋、魚尾紋、鼻唇溝、眉間紋等，結(jié)果顯示，皺紋均得到明顯改善。可見(jiàn)，人臍帶血干細(xì)胞可進(jìn)行除皺治療，其在面部年輕化中的應(yīng)用將受到更多的關(guān)注。

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