HPV基因分型對ASCUS細(xì)胞臨床應(yīng)用的價值

，

(1.湘雅常德醫(yī)院檢驗科，湖南 常德 415000；2.湘雅常德醫(yī)院婦產(chǎn)科)

·臨床醫(yī)學(xué)·

HPV基因分型對ASCUS細(xì)胞臨床應(yīng)用的價值

程俊1，雷張濤2

(1.湘雅常德醫(yī)院檢驗科，湖南 常德 415000；2.湘雅常德醫(yī)院婦產(chǎn)科)

目的了解未明確意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASCUS)患者人乳頭瘤病毒(HPV)亞型感染的分布情況，為臨床ASCUS患者診治提供相關(guān)理論依據(jù)。方法經(jīng)宮頸細(xì)胞學(xué)檢查確診為ASCUS患者328例，流式細(xì)胞儀檢測HPV型別，陰道鏡下進(jìn)行病理活檢。結(jié)果ASCUS患者主要分布在30～50歲年齡段，其中HPV陽性263例，陽性率80.18%，HPV陽性患者宮頸病理結(jié)果為宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)-Ⅰ、CIN-Ⅱ、CIN-Ⅲ的檢出率高于HPV陰性。此外，ASCUS患者中感染單-HPV高危型前四位和感染率分別是HPV 16(15.85%)，52(10.67%)，18(8.84%)，58(7.93%)，多重HPV高危型感染率為7.93%。結(jié)論對于細(xì)胞學(xué)檢查篩查為ASCUS的患者，可聯(lián)合HPV分型和陰道鏡下活檢，提高診斷的準(zhǔn)確性。

非典型鱗狀上皮細(xì)胞； 人乳頭瘤病毒； 病理活檢； 高危型

宮頸癌是常見婦科疾病，其發(fā)生是一個長時間的癌變過程，因此，早期篩查顯得尤為重要。隨著宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)(TCT)的廣泛開展,宮頸脫落細(xì)胞學(xué)檢查已成為輔助宮頸癌早期發(fā)現(xiàn)、早期預(yù)防的重要手段?，F(xiàn)行宮頸細(xì)胞學(xué)診斷依據(jù)是TBS系統(tǒng)(The Bethesda System)，TBS中有類定義為不典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASCUS)的特殊細(xì)胞，在顯微鏡下觀察形態(tài)為非典型鱗狀細(xì)胞，形態(tài)學(xué)和數(shù)量上也不足以直接判斷細(xì)胞的好壞，此類報告給臨床醫(yī)生和患者造成了誤解和困擾，需要進(jìn)一步診斷或隨訪。目前，已有大量的研究證實高危型人乳頭瘤病毒( high-risk human papillomavirus，HR-HPV)長時間的持續(xù)感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN) 以及宮頸癌發(fā)生的主要危險因素。因此，ASCUS與HPV感染兩者之間的相關(guān)性，值得我們思考。本研究通過對328例 ASCUS 患者進(jìn)行HPV基因分型和病理切片結(jié)果的分析，期待為ASCUS患者的臨床處理提供一定的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2016年1月至2016年12月在我院婦科門診進(jìn)行宮頸癌篩查，TCT結(jié)果為ASCUS患者共328例，年齡分布在19～77歲之間。

1.2標(biāo)本采集剔除就診前48h內(nèi)有性生活、使用陰道灌洗、經(jīng)期帶血及局部上藥的患者，采用專用宮頸刷和細(xì)胞保存液收集宮頸脫落細(xì)胞， TCT判讀為ASCUS的患者，進(jìn)行HPV分型檢測和陰道鏡下活檢，組織送本院病理科。

1.3方法

1.3.1 宮頸細(xì)胞學(xué)檢測 嚴(yán)格按照TBS細(xì)胞學(xué)系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)，由兩位細(xì)胞病理醫(yī)生，TCT判定結(jié)果為ASCUS。

1.3.2 HPV檢測 按照上海透景公司產(chǎn)品說明書操作，采用流式熒光雜交技術(shù)，對27種HPV亞型進(jìn)行檢測，結(jié)果包括17種HPV高危亞型( high-risk type,HR-HPV，16、18、31、33、35、45、52、66、39、58、26、51、56、59、68、82、53 )，10種HPV低危亞型 ( low-risk type,LR-HPV，6、11、40、42、44、61、83、55、43、81)，可檢出2種及2種以上的亞型引起的混合感染。

1.3.3 病理活檢 陰道鏡下，對可疑病灶處進(jìn)行活檢，無異常處多點活檢，送檢本院病理科，查詢結(jié)果有如下類型：慢性宮頸炎癥反應(yīng)，低度鱗狀上皮內(nèi)病變(CIN-Ⅰ) 和高度鱗狀上皮內(nèi)病變(CIN-Ⅱ和 CIN-Ⅲ )，鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma,SCC )。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析相關(guān)數(shù)據(jù)使用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析，組間比較采用卡方(χ2)檢驗，以P<0.05為兩組間差異具有顯著性。

2 結(jié) 果

2.1 ASCUS患者年齡組成與病理結(jié)果分析從

各個年齡段的數(shù)據(jù)可以得知，在40～49歲年齡段，慢性宮頸炎、CINⅠ、CIN Ⅱ-Ⅲ感染率最高，分別占24.39%、6.71%、7.93%，SCC在60～69歲年齡段感染率最高，占到1.83%，結(jié)果見表1。

表1 ASCUS患者年齡組成與病理結(jié)果關(guān)系(例)

2.2 ASCUS患者HPV感染情況與病理結(jié)果分析328例ASCUS患者中，HPV陽性人數(shù)是263例，陽性率為80.18%， 其中病理結(jié)果為SCC的患者HPV檢出率為100%，結(jié)果見表2。

表2ASCUS患者HPV感染情況與病理結(jié)果關(guān)系(例)

慢性宮頸炎CINⅠCINⅡ-ⅢSCC總計HPV陽性162355412263HPV陰性40178065合計202526212328

病理結(jié)果CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ與HPV感染之間關(guān)系用卡方檢驗，得χ2值=6.469，P<0.01

2.3 HPV亞型感染與病理結(jié)果分析單一型HR-HPV感染型別和感染率分別是16(15.85%)，52(10.67%)，18(8.84%)，58(7.93%)，39(3.66%)，33(5.49%)，68(2.44%)，53(1.83%)，還檢出5種單一的LR-HPV，型別和感染率分別是6(0.61%),11(1.83%),44(1.22%),61(1.83%),55(1.22%)，此外，混合性HPV感染率為(16.77%)，結(jié)果見表3.

表3 ASCUS患者HPV亞型感染與病理結(jié)果關(guān)系(例)

3 討 論

TCT是早期宮頸癌篩查常用的檢測方法之一，在TBS分級系統(tǒng)中，ASCUS細(xì)胞出現(xiàn)具有一定的特殊性，不是一個單一的生物學(xué)實體，與很多因素有關(guān)，包括與HPV感染無關(guān)的改變、提示有潛在CIN的改變、以及極少數(shù)的癌。因此，對于ASCUS患者的處理，臨床上存在著不同的爭議。李娟，等[1]報道，ASCUS患者病理活檢后，50%以上為良性病變，這給病人造成了不必要經(jīng)濟(jì)損失和心理負(fù)擔(dān)。因此，提高篩查的準(zhǔn)確性顯得尤為重要。

HPV感染是誘導(dǎo)宮頸癌發(fā)生的重要因素，大部分女性都存在一過性感染，只有極少一部分發(fā)展成為癌前病變或癌[2-5]，通過對HPV病毒的檢測,可提高宮頸癌及癌前病變的檢出率。本研究結(jié)果顯示，在ASCUS患者年齡組成與病理結(jié)果的表中,30～39歲和40～49歲年齡段的婦女慢性宮頸炎、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ的結(jié)果較多，這與國內(nèi)的報道相符合[6]，而60～69歲的婦女SCC的結(jié)果最多，可能是上述兩個時間段的婦女性生活較為活躍，懷孕次數(shù)、吸煙等原因易導(dǎo)致相關(guān)宮頸疾病的改變[7-8]，而部分60～69歲的婦女則可能由于長時間的感染HPV病毒，沒有針對性的治療或由于自身的免疫功能逐漸降低，病毒得不到清除等諸多因素，發(fā)展成了SCC。從表2中可以得知，在病理診斷為CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ和SCC患者中，HPV陽性檢出率為80.16%，HPV陰性的檢測率僅有19.84%，兩組資料比較，HPV陽性的病理結(jié)果顯著高于HPV陰性的病理結(jié)果，兩者有顯著性差異(P<0.05)，這與報道相符合[9]。提示ASCUS患者同時進(jìn)行HPV檢測，可以提高異常病理結(jié)果的檢出率，值得引起臨床醫(yī)生關(guān)注。

本研究中出現(xiàn)的HPV高危型有16，52，18，58，39，33，68，53，低危型有6,11,44,61,55，以及高危型和低危型或者多種高危型引起的混合感染。有文獻(xiàn)報道[10]，HPV52和HPV58是亞洲國家所特有的基因型，在世界其他地方較少出現(xiàn)，具有地域特異性。本研究中，HPV高危型16，52，18，58,感染率分別是15.85%，10.37%，8.84%，7.93%,其持續(xù)性感染，更易致宮頸高級別病變，需進(jìn)一步陰道鏡檢查并搔刮組織送病理活檢，這也與國內(nèi)報道相符合[11-12]。

綜上所述，HPV分型的檢測對于ASCUS患者臨床處理的預(yù)判斷提供了一定的參考價值，特別是HPV16,18,52,58亞型和多重HR-HPV陽性的患者，應(yīng)該引起重視，積極在陰道鏡下活檢，減少臨床漏診的風(fēng)險。但是，由于本研究收集標(biāo)本并非大樣本數(shù)據(jù)，還需要進(jìn)一步的探討和研究。

[1] 李娟，穆玉蘭，HPV感染與宮頸病變關(guān)系[J].中國臨床醫(yī)生，2013,41(12):862-864.

[2] 金瑞英，周堅紅.宮頸細(xì)胞學(xué)陰性患者高危型HPV含量與CIN2及更高級別病變的相關(guān)性[J].腫瘤學(xué)雜志，2015,21(3):233-236.

[3] Banister CE,Messersmith AR,Cai B,et al.Disparity in high risk HPV persistence between African American and European American Women of College Age [J].J Infect Dis,2014,15(7):394-401.

[4] 傅云峰，謝幸.生殖道人乳頭瘤病毒感染規(guī)范診治[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2014，30(9):684-686.

[5] Diamament S.Liquid based cytology and HPV DNA testing in a Greek population compared to colposcopy and histology [J].Clin Exp Obstet Gynecol,2013,40 (1):131-136.

[6] 柴昕，孫麗芳.宮頸不典型鱗狀細(xì)胞105例臨床分析[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2010,11(4)：271-273.

[7] 朱靜，朱瑾，武振宇，等.被動吸煙與浸潤性宮頸癌發(fā)病的研究—2010年復(fù)旦婦產(chǎn)科醫(yī)院宮頸癌發(fā)病相關(guān)風(fēng)險因素的Logistic回歸分析[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2012,6(11):449-453.

[8] 周權(quán)，黃民主，黃霜，等.中國已婚婦女宮頸癌發(fā)病影響因素Meta分析[J].中國癌癥雜志，2011,2(21):125-129.

[9] 趙健，周金年，楊英捷，等.人乳頭狀瘤病毒分型檢測在宮頸細(xì)胞學(xué)診斷為ASCUS分層處理中的意義[J].中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志，2008,22(4)：299.

[10] 趙穎，林敏，潘美晨，等.HPV分型及高危八型定量檢測在宮頸病變中的意義[J].分子診斷與治療雜志，2013,5(2)：102-106

[11] 姬川琳，甘霖，彭霖希，等.高危型HPV分型檢測在宮頸疾病診治中的應(yīng)用價值[J].中國計劃生育和婦產(chǎn)科，2015,7(6)：29-32.

[12] 蔡振華，方偉禎，肖木洲，等.HPV分型及其高危亞型與宮頸病變的關(guān)系[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志，2016,28(9):1097-1099.

ClinicalvalueofhumanpapillomavirusgenotypeinASCUS

CHENG Jun,LEI Zhangtao

(ClinicalLaboratory,XiangyaChangdeHospital,Changde,Hunan415000,China)

ObjectiveTo learn the prevalence of infection by different subtypes of human papillomavirus (HPV) patients diagnosed as atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS),and provide theory evidence of treatment and diagnosis for ASCUS patients.Methods328 patients were diagnosed as ASCUS by cytologic test,flow cytometry was used to detect HPV genotypes,and pathologic biopsy was examined under the colposcope.ResultsASCUS patients were mainly distributed at the age of 30 to 50,263 cases were positive HPV,the rate was 80.18%,moreover,the detection rate of positive HPV were much higher than the negative ones in cervical intraepithelial neoplasia (CIN).In addition,the top of HR-HPV genotypes and infection rates were HPV 16(15.85%),52(10.67%),18(8.84%),58(7.93%)respectively,the multiple HR-HPV infection rate was 7.93%.ConclusionFor ASCUS patients diagnosed with cytologic test should combine the result of HPV genotypes and colposcopy biopsy to promote clinical diagnostic accuracy.

atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS); human papillomavirus (HPV); pathologic biopsy; high risk

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2017.04.015

2017-01-12；

2017-03-05

R737.33

A

秦旭平)