飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚生長性能和體成分的影響

葉 樂，胡 靜，趙 旺，王 雨，吳開暢

( 1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院 南海水產(chǎn)研究所，熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心，海南 三亞 572018；2.農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室，廣東 廣州 510300 )

飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚生長性能和體成分的影響

葉 樂1,2，胡 靜1,2，趙 旺1,2，王 雨1,2，吳開暢1,2

( 1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院 南海水產(chǎn)研究所，熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心，海南 三亞 572018；2.農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室，廣東 廣州 510300 )

為確定眼斑雙鋸魚幼魚人工配合飼料中合適蛋白水平，試驗研究了飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚生長、飼料轉(zhuǎn)化率和體成分的影響。養(yǎng)殖試驗在循環(huán)水系統(tǒng)中進行，初始體質(zhì)量為(0.085±0.002) g的幼魚隨機分配到6個處理組(每組3個平行，每個平行40尾)，分別投喂蛋白水平38.11%、40.91%、44.16%、47.21%、50.02%和53.16% 的人工飼料，試驗持續(xù)56 d。不同蛋白水平飼料對眼斑雙鋸魚幼魚質(zhì)量增加率、特定生長率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率以及全魚的體成分等均有顯著影響。飼料蛋白水平為38.11%～50.02%時，隨著飼料蛋白水平的增加，眼斑雙鋸魚幼魚的質(zhì)量增加率和特定生長率呈增加的趨勢，飼料蛋白水平為53.16%時略有下降。經(jīng)回歸分析，當(dāng)飼料蛋白水平為51.8%時，質(zhì)量增加率最大；蛋白水平為51.1%時，特定生長率最大。飼料系數(shù)也隨著飼料蛋白水平增加而呈現(xiàn)先降后升的趨勢，飼料系數(shù)谷值出現(xiàn)在蛋白水平為47.21% 試驗組，而蛋白質(zhì)效率則相反。經(jīng)回歸分析，當(dāng)飼料蛋白水平為47.5%時，飼料系數(shù)最??；飼料蛋白水平為47.8%時，蛋白質(zhì)效率最大。全魚粗蛋白隨飼料蛋白水平升高呈增加趨勢，但到一定水平后維持該水平不再增加，而粗脂肪則隨飼料蛋白水平升高呈先降后升的趨勢。綜合生長、飼料轉(zhuǎn)化率和體成分等指標，本試驗條件下眼斑雙鋸魚幼魚適宜的飼料蛋白水平為47.5%～51.8%。

眼斑雙鋸魚；幼魚；蛋白水平；生長；體成分

眼斑雙鋸魚(Amphiprionocellaris)屬雀鯛科，?？~亞科，雙鋸魚屬。?？~亞科的魚類統(tǒng)稱為小丑魚或?？~，其共同的特點是能與?？ダ采?，是代表性的珊瑚礁觀賞魚類，常年銷量穩(wěn)居海水觀賞魚首位。隨著海水觀賞魚產(chǎn)業(yè)的興起，小丑魚工廠化培育越來越為人們所重視。有關(guān)小丑魚繁殖生物學(xué)方面的研究也成為熱點，涉及親魚培育、胚胎和仔魚發(fā)育等[1-4]，盡管如此，仔幼魚營養(yǎng)需求方面的研究還比較匱乏，僅見仔魚餌料品種選擇和利用研究[5-8]。在小丑魚培育過程中，飼料成本無疑占據(jù)了較大的成本份額。目前，幼魚在完成變態(tài)后，主要使用新鮮魚蝦肉和市售海水觀賞魚成品魚飼料投喂。使用新鮮魚蝦糜不僅價格高而且易污染水質(zhì)，而市售海水觀賞魚成品魚飼料價格昂貴，也不一定能滿足幼魚的生長需要和適口性，不適宜在產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用，因此，研制經(jīng)濟適用的幼魚人工配合飼料對小丑魚繁殖產(chǎn)業(yè)化具有重要的意義。

飼料中不恰當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)配比不僅影響魚類生長，還會導(dǎo)致魚類行為和生理異常，降低對不良環(huán)境和疾病的抵抗能力[9]。蛋白質(zhì)需求量研究在水產(chǎn)動物營養(yǎng)學(xué)研究中是最基本的一個環(huán)節(jié)。若飼料中蛋白質(zhì)含量不足，將導(dǎo)致魚類生長速度和飼料轉(zhuǎn)化率降低[10-12]；反之，飼料中蛋白質(zhì)含量過高，過多的蛋白質(zhì)將分解僅作為能量使用，增加飼料成本，同時會加重魚體代謝負擔(dān)，并使魚體排放更多的氨氮，導(dǎo)致水體質(zhì)量下降[13-14]。此外，不合適的營養(yǎng)還會導(dǎo)致魚類行為和生理異常，降低對不良環(huán)境和疾病的抵抗能力[9]。目前，海水魚蛋白質(zhì)營養(yǎng)需求的研究基本都是針對經(jīng)濟食用魚類，如波紋短須石首魚 (Umbrinacirrosa)[15]、漠斑牙鲆 (Paralichthyslethostigma)[16]、銀鯧(Pampusargenteus)[17]、半滑舌鰨 (Cynoglossussemilaevis)[18]、大菱鲆(Scophthalmusmaximus)[19]、圓斑星鰈 (Veraspervariegatus)[20]等，而對觀賞性海水魚類研究較少，特別是對小丑魚蛋白質(zhì)營養(yǎng)需求方面的研究尚未見報道，僅見葉樂等[21]進行由鮮蝦肉、魷魚肉和面粉等為主要原料的配合飼料初步研究，但未確定各營養(yǎng)要素的需求量，且鮮肉作為主要原材料比較昂貴。本試驗采用蛋白質(zhì)梯度法，通過研究飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚生長性能和飼料利用率的影響，以獲得生長指標和飼料利用率最大時配合飼料中最佳蛋白水平，為小丑魚人工養(yǎng)殖的配合飼料研制開發(fā)提供基礎(chǔ)資料和理論依據(jù)，促進小丑魚人工養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計和試驗飼料

以魚粉和豆粕為主要飼料蛋白源，以卵磷脂、魚油和豆油為主要脂肪源，用玉米淀粉平衡能量，設(shè)計6個蛋白水平飼料，蛋白含量分別為38.11%，40.91%，44.16%，47.21%，50.02%，53.16%。各組飼料脂肪水平保持一致。將原料粉碎過0.2 mm篩后用鼓型混合機混合，以小型顆粒機冷制粒(粒徑1.0 mm)，晾曬至水分約為10.00%。制成的飼料置于冰箱中-20 ℃保存待用。飼料原料和營養(yǎng)組成見表1。

1.2 試驗魚和養(yǎng)殖管理

試驗魚為自繁殖同批次幼魚，初始體質(zhì)量(0.085±0.002) g。選取體質(zhì)健康、規(guī)格一致的個體進行試驗。共6個處理組，每個處理組設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)40尾魚，共720尾。用基礎(chǔ)飼料進行7 d馴養(yǎng)，待試驗魚正常攝食后開始試驗。

表1 試驗飼料原料和營養(yǎng)成分 %

注：(1) 復(fù)合維生素：維生素A，900000 IU/g；維生素D，250000 IU/g；維生素K3，60 IU/g；維生素E，50 IU/g；維生素B1，320 mg/g；維生素B2，1090 mg/g； 維生素B5，2000 mg/g； 維生素B6，500 mg/g；維生素B12，116 mg/g；維生素C，5000 mg/g；煙酸，40 mg/g；葉酸，5 mg/g；泛酸鈣，20 mg/g；肌醇，150 mg/g；生物素，0.2 mg/g. (2) 無機鹽混合物(g/100 g): 硫酸鎂，3.0；氯化鉀，0.7；碘化鉀，0.015；硫酸鋅，0.14；硫酸錳，0.03；氯化銅，0.05；氯化鈷，0.005；硫酸亞鐵，0.15；磷酸二氫鉀，45.0；氯化鈣，28.0. 飼料能量蛋白質(zhì)以23.64 MJ/kg、脂肪以39.54 MJ/kg、糖以17.15 MJ/kg計算.

1.3 樣品采集與分析

試驗結(jié)束后稱量每個水族箱試驗魚(饑餓24 h)總體質(zhì)量。每個平行隨機取10尾魚用于測定體長、體質(zhì)量和內(nèi)臟質(zhì)量，其余全魚樣品用于測定體成分。

水分測定用105 ℃烘箱干燥恒定質(zhì)量法；粗蛋白測定為凱氏定氮法(總氮×6.25)；粗脂肪測定用索氏乙醚抽提法；灰分測定用馬福爐灼燒法(550 ℃)；糖測定用3,5-二硝基水楊酸法[22-23]。

1.4 統(tǒng)計分析方法

成活率/%=Nt/N0×100%

質(zhì)量增加率/%=(mt-m0)/m0×100%

特定生長率/%·d-1=(lnmt-lnm0)/t×100%

日攝食率/%=m1/[(m0+mt+md)×t/2]×100%

飼料系數(shù)=m1/(mt-m0)

蛋白質(zhì)效率=(mt-m0)/m2

肝體指數(shù)/%=m3/mt×100%

臟體指數(shù)/%=m4/mt×100%

式中，Nt為試驗結(jié)束存活魚數(shù)量(尾)；N0為試驗開始魚數(shù)量(尾)；mt為試驗結(jié)束體質(zhì)量(g)；m0為試驗開始體質(zhì)量(g)；md為試驗死亡魚體質(zhì)量(g)；Lt為試驗結(jié)束體長(cm)；m1為攝入飼料量(干質(zhì)量)(g)；m2為蛋白質(zhì)攝入量(g)，t為試驗時間(d)；m3為肝質(zhì)量(g)；m4為內(nèi)臟質(zhì)量(g)。

試驗結(jié)果用 SPSS 19.0進行單因素方差分析，組間差異運用Duncan′s多重比較分析，P<0.05為差異顯著。以質(zhì)量增加率、特定生長率、飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率為指標進行二次曲線回歸分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚生長和飼料利用的影響

在養(yǎng)殖試驗期間，眼斑雙鋸魚幼魚未患病，攝食和生長正常，均具有較高的成活率，各試驗組間成活率差異不顯著(P>0.05)，飼料蛋白水平對其生長的影響見表2。由表2可知，隨著飼料蛋白水平由38.11%增至50.02%，眼斑雙鋸魚幼魚質(zhì)量增加率和特定生長率均逐漸增加，而飼料蛋白水平53.16%時，眼斑雙鋸魚幼魚質(zhì)量增加率和特定生長率均呈下降趨勢。隨著飼料蛋白水平增加，蛋白質(zhì)效率呈先升后降的趨勢，峰值出現(xiàn)在蛋白水平47.21%處理組，而飼料系數(shù)隨蛋白水平增加呈先降后升的趨勢，谷值出現(xiàn)在蛋白水平47.21%處理組。日攝食率在飼料蛋白水平38.11%時達最低，其余試驗組間無顯著差異(P>0.05)。對質(zhì)量增加率與蛋白質(zhì)進行回歸分析，得出二次方程y=-0.8666x2+89.63x-1856.9(r2=0.7367)，求出當(dāng)x=51.8時，質(zhì)量增加率最大(圖1)。對特定生長率與蛋白質(zhì)進行回歸分析，得出二次方程y=-0.0029x2+0.2965x-4.4102 (r2=0.802)，求出當(dāng)x=51.1時，特定生長率最大(圖2)。對飼料系數(shù)與蛋白質(zhì)進行回歸分析，得出二次方程y=0.0142x2-1.349x+34.6(r2=0.6792)，求出當(dāng)x=47.5時，飼料系數(shù)最小(圖3)。對蛋白質(zhì)效率與蛋白質(zhì)進行回歸分析，得出二次方程y=-0.0043x2+0.4113x-8.6411(r2= 0.5991)，求出當(dāng)x=47.8時，蛋白質(zhì)效率最高(圖4)。

2.2 飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚體成分的影響

飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚體成分影響見表3。飼料蛋白質(zhì)水平對幼魚、全魚水分和灰分無顯著影響(P>0.05)；全魚粗蛋白隨飼料蛋白水平升高呈現(xiàn)先升后平穩(wěn)的趨勢；全魚粗脂肪隨飼料蛋白水平升高呈現(xiàn)先降后升的趨勢。飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚肥滿度、臟體指數(shù)、肝體指數(shù)無顯著影響(P>0.05)(表4)。

表2 飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚生長性能的影響(平均值±標準差)

注：同行數(shù)據(jù)后上標不同英文字母表示差異顯著(P<0.05)，下同.

圖1 飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚質(zhì)量增加率的影響

圖2 飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚特定生長率的影響

圖3飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚飼料系數(shù)的影響

圖4飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚蛋白質(zhì)效率的影響

表3 飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚體成分影響(平均值±標準差) %

3 討 論

3.1 飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚生長和飼料利用的影響

試驗結(jié)果顯示，隨著飼料蛋白水平由38.11%增至50.02%，眼斑雙鋸魚幼魚質(zhì)量增加率和特定生長率均逐漸增加，表明一定范圍內(nèi)飼料蛋白水平的增加可以促進幼魚的生長，這與大部分魚類試驗結(jié)果一致，如波紋短須石首魚[15]、漠斑牙鲆[16]、銀鯧[17]、半滑舌鰨[18]、大菱鲆[19]和圓斑星鰈[20]等。試驗結(jié)果還顯示，隨著飼料蛋白水平繼續(xù)增至53.16%時，眼斑雙鋸魚幼魚質(zhì)量增加率和特定生長率反而下降，雖然未達到顯著差異，也表現(xiàn)出過高的飼料蛋白水平對幼魚生長有副作用的趨勢，飼料蛋白水平與幼魚生長回歸曲線符合二次曲線模型，造成這一結(jié)果可能的原因是，蛋白質(zhì)攝入過量造成體內(nèi)自由氨基酸累積過量，導(dǎo)致蛋白質(zhì)中毒或者氮排泄代謝耗能大于多攝取的蛋白能量而造成生長率不升反降[24]。過高的飼料蛋白水平抑制生長現(xiàn)象在一些海水經(jīng)濟魚類中也有發(fā)現(xiàn)，如波斯鱘(Acipenserpersicus)投喂蛋白水平50%的飼料時生長顯著低于投喂蛋白水平為40%的飼料[25]，棕點石斑魚(Epinephelusfuscoguttatus) 與鞍帶石斑魚(E.lanceolatus) 雜交種特定生長率隨飼料蛋白水平增加而增加，但當(dāng)飼料蛋白水平達55%時特定生長率又降低[26]；而與一些魚類如花鱸(Lateolabraxjaponicus)[27]、星斑川鰈 (Platichthysstellatus)[28]和卵形鯧鲹(Trachinotusovatus)幼魚[29]等不同，這些魚類在高蛋白水平下仍維持較高生長水平而不下降，其飼料蛋白水平與幼魚生長符合折線模型。根據(jù)生長指標質(zhì)量增加率和特定生長率的分析結(jié)果，眼斑雙鋸魚幼魚適宜蛋白水平為51.1%～51.8%。

試驗結(jié)果還表明，投喂低蛋白水平(38.11%)飼料時，眼斑雙鋸魚攝食率顯著高于其他蛋白水平試驗組, 說明幼魚在飼料蛋白水平低的時候通過增加攝食量以滿足蛋白質(zhì)的需要。這與星斑川鰈[28]和烏蘇擬鲿(Pseudobagrusussuriensis)[30]研究結(jié)果類似。同樣，波紋短須石首魚飼料高蛋白水平組(53%和59%)日攝食率顯著低于低蛋白水平組(35%)，飼料利用效率隨飼料蛋白水平增加而提升[15]；圓斑星鰈飼料系數(shù)隨蛋白水平增加而降低[20]。不同的是本試驗隨著飼料蛋白水平的增加, 飼料系數(shù)先降后升，而蛋白質(zhì)效率先升后降，即飼料利用效率和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率在蛋白水平47.21%試驗組達最高后隨蛋白水平繼續(xù)增加而下降。與銀鯧類似，低蛋白水平(35%)飼料系數(shù)顯著低于高蛋白水平組，蛋白水平過高(55%)，蛋白質(zhì)效率下降[17]。表明一定程度提高飼料蛋白水平可以提升飼料利用效率和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率，但過高的蛋白水平反而導(dǎo)致飼料利用效率和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率下降，盡管此時生長速度可能仍持續(xù)加快。根據(jù)飼料利用效率和蛋白轉(zhuǎn)化效率指標，回歸得出眼斑雙鋸魚幼魚適宜蛋白水平為47.5%～47.8%，比生長指標得出的適宜蛋白水平低，說明綜合考量生長和飼料利用效率指標確定最適飼料蛋白水平會更為客觀。綜合生長和飼料利用指標，眼斑雙鋸魚幼魚適宜飼料蛋白水平為47.5%～51.8%，與目前所知其他肉食性海水魚類蛋白質(zhì)需要量基本一致(通常為45%～55%)，如卵形鯧鲹適宜的飼料蛋白質(zhì)需要量為45.75%[29]，波紋短須石首魚飼料最適蛋白水平為51.4%[15]，漠斑牙鲆[16]脂肪水平10%時最適蛋白水平50%，銀鯧最適蛋白水平為 49%[17]，圓斑星鰈脂肪水平8%時最適蛋白水平50%[20]，半滑舌鰨最適蛋白水平為55%[18]，大菱鲆最適蛋白水平為55%，此時生長最快，飼料利用效率和能量利用效率最高[19]。

3.2 飼料蛋白水平對眼斑雙鋸魚幼魚體成分的影響

許多研究認為，隨飼料蛋白水平增加，體成分中粗蛋白質(zhì)量分數(shù)一般呈增加趨勢，而粗脂肪質(zhì)量分數(shù)呈下降趨勢[20, 25, 31]。但是也有研究表明，隨飼料蛋白水平增加而增加，波紋短須石首魚體成分亦無顯著差異[15]；還有研究表明，南亞野鯪(Labeorohita)體成分中粗蛋白和粗脂肪質(zhì)量分數(shù)均隨飼料蛋白水平增加而增加[32]?？梢?，體成分變化可能存在種類和個體差異，也可能存在養(yǎng)殖環(huán)境和試驗條件與方法等差異的影響。本試驗結(jié)果與以上結(jié)果有所不同，隨飼料蛋白水平增加，體成分中粗蛋白質(zhì)量分數(shù)呈增加趨勢，但到一定水平后維持該水平不再增加，而粗脂肪質(zhì)量分數(shù)呈先降后升的趨勢?？赡艿脑蚴请S著攝入蛋白增加，有更多蛋白質(zhì)可用于魚體的組織修復(fù)和新的組織形成[33]，此時表現(xiàn)出粗蛋白質(zhì)量分數(shù)增加，但攝入過量蛋白質(zhì)超出機體組織需要時，多余蛋白質(zhì)不再用于組織構(gòu)建而可能轉(zhuǎn)化為脂肪在體內(nèi)儲存，此時表現(xiàn)出粗蛋白質(zhì)量分數(shù)穩(wěn)定而粗脂肪質(zhì)量分數(shù)增加。作為魚體營養(yǎng)狀態(tài)指標的肥滿度、肝體指數(shù)和臟體指數(shù)，飼料蛋白水平對其影響不顯著，與烏蘇擬鲿研究結(jié)果一致[30]，波斯鱘肝體指數(shù)在各蛋白水平試驗組間亦無顯著差異[25]，而圓斑星鰈肝體指數(shù)和臟體指數(shù)隨著飼料蛋白水平的增加呈現(xiàn)下降的趨勢，而肥滿度無顯著差異[20]。

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EffectsofDietaryProteinLevelsonGrowthPerformanceandBodyCompositioninJuvenileFalseClownFish,Amphiprionocellaris

YE Le1,2，HU Jing1,2，ZHAO Wang1,2，WANG Yu1,2，WU Kaichang1,2

( 1.Tropical Fisheries Research and Development Center, South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Sanya 572018, China; 2.Key Laboratory of South China Sea Fishery Resource Exploitation & Utilization, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510300, China )

An 8-week feeding trial was conducted to investigate the effects of different protein levels in diet on growth performance, body composition of juvenile false clown fishAmphiprionocellaris. The fish with initial body weight(0.085±0.002) g were randomly divided into six treatments with triplicate groups, and fed diets containing 38.11%, 40.91%, 44.16%, 47.21%, 50.02% or 53.16% protein in a circulating sea water system. The weight gain (WG) and specific growth rate (SGR) increased with protein level from 38.11% to 50.02% and decreased in the fish fed the diet containing 53.16% protein level. Regression analysis indicated that the maximal WG was found at 51.8% protein level and the maximal SGR was found at 51.1% protein level. Moreover, with the increase in protein level, feed conversion ratio (FCR) showed a trend of decline after rising first. The minimal FCR appeared at 47.21% protein level, and the trend of protein efficiency ratio (PER) was just the opposite. Regression analysis revealed that the minimum FCR was found at 47.5% protein level and the maximal PER was found at 47.8% protein level. Whole-body protein content increased as dietary protein level increasing，without increased at a certain high level. Whole-body crude fat decreased first and then increased with the increasing dietary protein level. Considering indicators such as growth, feed efficiency and body composition, the suitable dietary protein level of the juvenile false clown fish should be 47.5% to 51.8% under this experimental condition.

Amphiprionocellaris; juvenile; dietary protein level; growth performance; body composition

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.01.001

S965.8

A

1003-1111(2017)01-0001-07

2015-12-02；

2016-03-11.

海南省重點科技計劃項目(ZDXM20130051)；海南省應(yīng)用技術(shù)研發(fā)與示范推廣專項(ZDXM2014131)；三亞市科技成果轉(zhuǎn)化項目(2013CZ11)；國家(省)重點科技項目三亞市配套資金資助項目(2010PT06，2014PT01).

葉樂(1974—)，男，副研究員，博士；研究方向：海水養(yǎng)殖和生理生態(tài)學(xué).E-mail: yele2008@163.com. 通訊作者：吳開暢(1959—)，男，研究員；研究方向：水產(chǎn)養(yǎng)殖.E-mail: wukaichang@163.com.