鹽水交叉配血法判定紅細(xì)胞血型的實(shí)驗(yàn)觀察

王晟宇

【摘 要】目的 通過鹽水交叉配血實(shí)驗(yàn)判定紅細(xì)胞血型，認(rèn)識(shí)紅細(xì)胞血型的不同分型及其特點(diǎn)。方法 隨機(jī)選擇南通市中心血站參加無償獻(xiàn)血的健康獻(xiàn)血者六人，采集外周靜脈血標(biāo)本，各自分離出血清和血球，利用紅細(xì)胞上的抗原與血清中的抗體的特異性反應(yīng)，運(yùn)用交叉配血的方法分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果 六支標(biāo)本因血型不同，而發(fā)生凝集和不凝集的現(xiàn)象。相同血型的血清血球結(jié)合不發(fā)生凝集；不同血型的血清和血球結(jié)合時(shí)會(huì)發(fā)生凝集或不凝集；O型血球和任何血型血清都不凝集；AB型血清和任何血型血球都不凝集。 結(jié)論 鹽水交叉配血法實(shí)驗(yàn)?zāi)芘袛喑鯫型和AB型血，A型和B型血不能準(zhǔn)確區(qū)分。紅細(xì)胞血型的鑒定最好使用標(biāo)準(zhǔn)血清和標(biāo)準(zhǔn)血球進(jìn)行正反定型試驗(yàn)。

【關(guān)鍵詞】鹽水；交叉配血；紅細(xì)胞；血型

人類的血型系統(tǒng)是根據(jù)人的紅細(xì)胞表面同族抗原的差別而進(jìn)行的一種分類。由于人類紅細(xì)胞所含凝集原的不同，而將血液分成若干型，故稱血型。人類血型有很多種型，而每一種血型系統(tǒng)都是由遺傳因子決定的，并具有免疫學(xué)特性。最多而常見的血型系統(tǒng)為ABO血型，分為A、B、O、AB四型；其次為Rh血型系統(tǒng)，主要分為Rh陽性和Rh陰性；再次為MN及MNSs血型系統(tǒng)。據(jù)目前國內(nèi)外臨床檢測，發(fā)現(xiàn)人類血型有30余種之多。

不同血型人的紅細(xì)胞與另一人的血清混合時(shí)，紅細(xì)胞則粘聚在一起，發(fā)生凝集反應(yīng)，致紅細(xì)胞受損害發(fā)生溶血。臨床上將受血者的紅細(xì)胞與血清分別同供者的血清與紅細(xì)胞混合，觀察有無凝集現(xiàn)象稱為交叉配血。根據(jù)這一現(xiàn)象，我們可以應(yīng)用于判定不同的紅細(xì)胞血型實(shí)驗(yàn)。

1.材料與方法

1.1標(biāo)本的選擇。隨機(jī)選擇南通市中心血站參加無償獻(xiàn)血的健康獻(xiàn)血者六人，采集外周靜脈血3ml，分別注入干燥潔凈的試管，編號(hào)1，2，3，4，5，6。

1.2儀器及試劑。實(shí)驗(yàn)室用800電動(dòng)離心機(jī)、血型檢定卡、0.9%生理鹽水、空白試管、手持式加樣槍、一次性注射器、一次性加樣吸頭、碘伏、棉簽等。

1.3方法。將抽取的6支標(biāo)本室溫靜置1小時(shí)，低速（2000轉(zhuǎn)/分）離心10分鐘，分離出血清和血球，將6支標(biāo)本分離出的血球以生理鹽水洗滌并稀釋，在分出的6支血球試管中加入1ml生理鹽水，混勻，離心，移除上清液，重復(fù)此過程2次，得到6支標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)血球。取6支空白試管，每管加入生理鹽水1ml，分別吸取6支血球標(biāo)本50ul加于6支生理鹽水試管中，混勻，配成5%的紅細(xì)胞生理鹽水懸液待用。血型檢定卡上橫排和豎排都標(biāo)注序號(hào)1-6號(hào)，首先在血型檢定卡上第一行六個(gè)凹槽中分別加1號(hào)標(biāo)本血清0.2ml，依次在6個(gè)凹槽中加入1-6號(hào)標(biāo)本的紅細(xì)胞生理鹽水懸液，混勻，觀察凝集現(xiàn)象。在第二行的六個(gè)凹槽中分別加入2號(hào)標(biāo)本血清0.2ml，依次加入1-6號(hào)標(biāo)本的紅細(xì)胞生理鹽水懸液，混勻，觀察現(xiàn)象。依此類推，直到全部做完6號(hào)標(biāo)本結(jié)束。

2.結(jié)果

出現(xiàn)凝集用“+”表示，未出現(xiàn)凝集的“-”表示，結(jié)果見下表。

3.討論

六支標(biāo)本因血型不同，而發(fā)生凝集和不凝集的現(xiàn)象。O型血球因其紅細(xì)胞表面不含有A或B凝集原，O型血球和任何血型血清都不發(fā)生凝集；AB型血清中因不含有抗A或抗B抗體，AB型血清和任何血型血球都不凝集。結(jié)合上表可以看出，3號(hào)和4號(hào)血球與6例血清都不發(fā)生凝集，可以說明3和4號(hào)標(biāo)本紅細(xì)胞上不含有A或B凝集原，即可推斷3號(hào)和4號(hào)標(biāo)本管為O型血；6號(hào)血清管和6例血球均未出現(xiàn)凝集，說明6號(hào)血清中不含有抗A或者抗B抗體，那么6號(hào)管為AB型血；相同血型的血清血球結(jié)合未發(fā)生凝集，表中1號(hào)和2號(hào)反應(yīng)完全相同，1號(hào)、2號(hào)血型相同，5號(hào)的凝集反應(yīng)和1號(hào)、2號(hào)相反，說明5號(hào)血型和1號(hào)、2號(hào)必定不同，若1、2號(hào)為A型，5號(hào)則為B型，若1、2號(hào)為B型，5號(hào)則為A型。根據(jù)這個(gè)實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，不同血型的血清和血球結(jié)合時(shí)會(huì)發(fā)生凝集或不凝集；凝集反應(yīng)取決于紅細(xì)胞表面的凝集原及血清中的抗體。實(shí)驗(yàn)中O型和AB型可根據(jù)凝集反應(yīng)表結(jié)果而判斷出，但A型和B型在未知抗原抗體的情況下無法準(zhǔn)確區(qū)分。

交叉配血法臨床用于輸血前檢查，是保證輸血安全的重要措施。在血型鑒定的基礎(chǔ)上，通過交叉配血試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)受血者和供血者之間不存在血型不合的抗原一抗體反應(yīng)，以保證受血者的輸血安全。血型鑒定和交叉配血是利用紅細(xì)胞上的抗原與血清上相應(yīng)的抗體發(fā)生特異性凝集的原理，標(biāo)本的血清效價(jià)低或者存在紅細(xì)胞抗原弱或者紅細(xì)胞亞型的情況下，試驗(yàn)結(jié)果易出現(xiàn)假陰性。另外，試管不清潔干燥、補(bǔ)體、低滲鹽水等都有可能造成溶血反應(yīng)，從而導(dǎo)致假陰性反應(yīng)，影響結(jié)果的判定。實(shí)驗(yàn)中對環(huán)境溫濕度進(jìn)行了控制，對實(shí)驗(yàn)器材都按標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行操作，未發(fā)生溶血現(xiàn)象，但未考慮弱抗原或紅細(xì)胞亞型結(jié)果假陰性的可能。觀察實(shí)驗(yàn)中的凝集出現(xiàn)時(shí)間有早有晚，凝集顆粒有多有少，考慮可能為弱抗原的影響。實(shí)驗(yàn)?zāi)軠?zhǔn)確判定出O型和AB型血，但無法區(qū)分A型和B型血。紅細(xì)胞血型的鑒定最好使用標(biāo)準(zhǔn)血清和標(biāo)準(zhǔn)血球進(jìn)行正反定型試驗(yàn)。

【參考文獻(xiàn)】

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