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      當歸補血湯與四物湯對血虛模型小鼠補血作用比較研究

      2017-12-06 07:53:44金情政
      浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志 2017年11期
      關(guān)鍵詞:血虛四物湯補氣

      金情政 湯 瑋

      ·論 著·

      當歸補血湯與四物湯對血虛模型小鼠補血作用比較研究

      金情政 湯 瑋

      目的 觀察當歸補血湯與四物湯對血虛模型小鼠補血作用以及兩個方劑的差異性。方法ICR小鼠40只,隨機分成正常組、模型組、當歸補血湯組和四物湯組,每組10只,除正常組外,另三組復制失血性血虛小鼠模型,當歸補血湯組和四物湯組同時分別灌胃當歸補血湯和四物湯,連續(xù)給藥7天,觀察小鼠體征特點,測定各組小鼠給藥前及造模給藥后血紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細胞壓積(HCT)、血小板計數(shù)(PLT)和白細胞(WBC)的值以及第7天出血凝血時間變化。結(jié)果 給藥7天,當歸補血湯組小鼠食欲、行為和毛色等體征特點改善直至完全恢復,四物湯組小鼠體征特點改善不明顯。與正常組比較,模型組小鼠各指標均降低[RBC:(6.65±0.87)×1012/L比(9.90±0.95)×1012/L(P<0.01),HGB:(108.6±11.69)g/L 比(134.4±13.55)g/L(P<0.01),HCT:(44.37±4.72)%比(52.01±4.98)%(P<0.01),PLT:(983±7.81)×109/L 比(1218±10.27)×109/L(P<0.01),WBC:(6.20±0.22)×109/L 比(7.80±0.05)×109/L(P<0.01)];與模型組比較,當歸補血湯組與四物湯組小鼠各指標均升高[當歸補血湯組:RBC(9.31±0.89)×1012/L,HGB:(136.1±11.88)g/L,HCT(53.10±5.24)%,PLT(1005±10.43)×109/L,WBC(8.26±0.31)×109/L,P<0.05,P<0.01;四物湯組:RBC[(9.68±0.99)×1012/L,HGB(132.4±14.62)g/L,HCT(53.18±5.89)%,PLT[(1097±6.97)×109/L,WBC(7.63±0.05)×109/L,P<0.05,P<0.01]。結(jié)論 當歸補血湯和四物湯均有較好的補血作用,但兩方對模型小鼠的血虛體征特點影響不同。

      小鼠;血虛模型;當歸補血湯;四物湯;補血作用

      急性出血是臨床常見癥狀,患者急性大量出血很可能導致血虛等并發(fā)癥,血虛證是中醫(yī)常見證,補氣生血系列藥物是臨床治療血虛證的重要工具。當歸補血湯出自李東垣《內(nèi)外傷辨惑論》[1],用于治血虛發(fā)熱證,以及各種貧血、過敏性紫癜等屬血虛氣弱者;四物湯出自唐藺道人《仙授理傷續(xù)斷秘方》[2],是中醫(yī)臨床補血調(diào)經(jīng)的常用經(jīng)典方劑。研究[3-5]報道當歸補血湯與四物湯均有補血作用。本實驗基于四物湯復方多成分、整體調(diào)節(jié)作用的特性,當歸補血湯多環(huán)節(jié)改善動物造血功能,建立失血性血虛動物模型,通過比較兩種方劑在急性補血方面的作用,從微觀和宏觀的角度上比較這兩個方劑對急性出血的不同影響,以期為臨床合理用藥提供依據(jù)。

      1 實驗材料

      1.1 實驗動物 ICR小鼠40只,雌雄各半,體質(zhì)量18~22g,由浙江省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供,合格證:SCXK(浙)2014-0001號。

      1.2 實驗藥物及試劑 當歸補血湯組分藥材購自衢州南孔中藥有限公司,黃芪30g,當歸6g,按傳統(tǒng)方法煎制而成;四物湯組分藥材購自衢州南孔中藥有限公司,熟地12g,當歸、白芍各9g,川芎6g,按傳統(tǒng)方法煎制而成;每毫升含1g生藥。生理鹽水;凝血酶(華蘭生物制藥廠,批號16020025)。

      1.3 實驗儀器 LH-780型全自動血細胞分析儀(美國Beckman公司);電子秤(上海民橋精密科學儀器有限公司)。

      2 實驗方法

      2.1 分組及給藥 小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,40只小鼠隨機分成正常組、模型組、當歸補血湯組和四物湯組,每組10只。造模前各組小鼠眼眶采血,測定正常血象值。除正常組,另三組小鼠眼眶后靜脈叢放血0.5mL,造成急性失血性血虛模型[6]。從造模當天起,各給藥組灌胃給予相應(yīng)藥物,當歸補血湯組和四物湯組均分別灌胃相應(yīng)藥物0.4mL。正常組和模型組給予等量生理鹽水,連續(xù)給藥7天。

      2.2 觀察指標 每日分別記錄每組小鼠的體征特點;測定造模后第 1、3、7 天血液中紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細胞壓積(HCT)、血小板計數(shù)(PLT)和白細胞(WBC)的值(采血后制成抗凝全血樣本置血細胞分析儀測定);測定造模后第7天的凝血時間(小鼠剪尾玻管法測定)。

      2.3 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,實驗數(shù)據(jù)均以(±s) 表示,多組間計量資料采用單因素方差分析,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

      3 實驗結(jié)果

      3.1 各組小鼠體征變化 造模后,模型組小鼠食欲下降、行動緩慢、團縮嗜睡、毛蓬豎而少光澤,尾蒼白而涼。四物湯組小鼠也表現(xiàn)為少食、懶動、嗜睡癥狀;當歸補血湯組小鼠從第4天開始,上述癥狀有所改善,從第6天開始,食欲恢復正常,行為狀態(tài)恢復,毛色恢復正常,與正常小鼠差別不明顯。

      3.2 各組小鼠血RBC比較 給藥前各組小鼠血RBC無明顯差異。給藥后第3天,與模型組比較,當歸補血湯組、四物湯組小鼠血RBC均顯著升高(P<0.01),見表 1。

      3.3 各組小鼠血HGB比較 給藥前,各組小鼠血HGB無明顯差異;給藥后第3天,與模型組比較,當歸補血組、四物湯組小鼠血HGB均顯著升高(P<0.01);給藥后第7天,與模型組比較,當歸補血湯組、四物湯組小鼠血 HGB 顯著升高(P<0.05,P<0.01),見表2。

      3.4 各組小鼠血HCT比較 給藥前,各組小鼠血HCT無明顯差異;在給藥后第7天,與模型組比較,當歸補血湯組、四物湯組小鼠血HCT顯著升高(P<0.05),見表 3。

      表1 各組小鼠血液RBC比較(1012/L,±s)

      表1 各組小鼠血液RBC比較(1012/L,±s)

      注:與正常組比較,△P<0.01;與模型組比較,**P<0.01;RBC:紅細胞

      組別正常組模型組當歸補血湯組四物湯組只數(shù)10 10 10 10劑量--1.0g/mL 1.0g/mL給藥前9.80±0.65 9.70±0.54 9.74±0.58 9.76±0.55第1d 9.71±0.75 4.71±0.65 4.73±0.48 4.80±0.62第3d 9.93±0.85 5.96±0.91△8.01±0.86**8.41±0.53**第7d 9.90±0.95 6.65±0.87△9.31±0.89**9.68±0.99**

      表2 各組小鼠血液HGB比較(g/L,±s)

      表2 各組小鼠血液HGB比較(g/L,±s)

      注:與正常組比較,△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01;HGB:血紅蛋白

      組別正常組模型組當歸補血湯組四物湯組只數(shù)10 10 10 10劑量--1.0g/mL 1.0g/mL給藥前135.8±12.75 130.7±11.36 140.2±13.17 131.7±11.84第1d 136.4±13.34 61.71±4.23 63.03±5.96 63.90±5.39第3d 132.8±12.78 66.43±5.29△89.52±7.86**98.54±10.14**第7d 134.4±13.55 108.6±11.69△136.1±11.88**132.4±14.62*

      表3 各組小鼠血液HCT比較(%,±s)

      表3 各組小鼠血液HCT比較(%,±s)

      注:與正常組比較,△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05;HCT:紅細胞壓積

      組別正常組模型組當歸補血湯組四物湯組只數(shù)10 10 10 10劑量--1.0g/mL 1.0g/mL給藥前50.32±4.87 51.61±5.07 49.04±4.33 50.64±5.55第1d 50.89±5.36 35.10±4.02 35.39±2.76 36.32±3.22第3d 51.67±5.49 39.84±3.85△43.52±3.91 44.37±4.64第7d 52.01±4.98 44.37±4.72△53.10±5.24*53.18±5.89*

      表4 各組小鼠血液PLT比較(109/L,±s)

      表4 各組小鼠血液PLT比較(109/L,±s)

      注:與正常組比較,△P<0.01;與模型組比較,**P<0.01;與當歸補血湯組比較,▲P<0.01;PLT:血小板計數(shù)

      組別正常組模型組當歸補血湯組四物湯組只數(shù)10 10 10 10劑量--1.0g/mL 1.0g/mL給藥前1200.0±6.05 1185.4±5.43 1192.1±4.94 1188.6±6.13第1d 1210.1±6.84 532.6±5.21 574.5±5.84 579.3±6.33第3d 1205.5±7.89 634.9±8.10△750.9±8.34**939.0±10.15**▲第7d 1218.4±10.27 983.4±7.81△△1005.2±10.43**1097.1±6.97**▲

      表5 各組小鼠血液WBC比較(109/L,±s)

      表5 各組小鼠血液WBC比較(109/L,±s)

      注:與正常組比較,△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01;與當歸補血湯組比較,▲P<0.01;WBC:白細胞

      組別正常組模型組當歸補血湯組四物湯組只數(shù)10 10 10 10劑量--1.0g/mL 1.0g/mL給藥前7.52±0.09 7.38±0.12 7.36±0.14 7.48±0.13第1d 7.41±0.16 4.82±0.07 4.92±0.13 5.00±0.14第3d 7.38±0.14 5.20±0.11△5.66±0.31*6.59±0.14**▲第7d 7.80±0.05 6.20±0.22△8.26±0.31**7.63±0.05**▲

      3.5 各組小鼠血PLT比較 給藥前各組小鼠血PLT無明顯差異;在給藥后第3、7天,與模型組比較,當歸補血湯組、四物湯組小鼠血PLT均顯著升高(P<0.01),見表 4。

      3.6 各組小鼠血WBC比較 給藥前各組小鼠血液中WBC無明顯差異;給藥后第3天,與模型組比較,當歸補血湯組、四物湯組小鼠血WBC均顯著升高(P<0.05,P<0.01);在給藥后第 7 天,與模型組比較,當歸補血湯組、四物湯組小鼠血WBC均顯著升高(P<0.01),見表 5。

      3.7 各組小鼠凝血時間比較 給藥第7天,與模型組比較,當歸補血湯組小鼠血凝血時間顯著降低(P<0.01);與當歸補血湯組比較,四物湯組小鼠止血凝血時間顯著升高(P<0.01),見表 6。

      4 討論

      血是構(gòu)成人體和維持人體生命活動最基本的物質(zhì)之一,血液有運載作用,最主要是運載氣,當血液大量流失后,與之相關(guān)的氣也會受損,氣與血是兩者不可或缺的,只有氣血兩足,人才能精力充沛、神志清晰、思維敏捷、情志活動正常。本實驗中小鼠大量出血,出現(xiàn)懶動、食欲減少、嗜睡的現(xiàn)象都說明了血虛會造成氣虛。

      表6 各組小鼠凝血時間比較(min,±s)

      表6 各組小鼠凝血時間比較(min,±s)

      注:與模型組比較,**P<0.01;與當歸補血湯組比較,▲P<0.01

      組別模型組當歸補血湯組四物湯組只數(shù)10 10 10劑量-1.0g/mL 1.0g/mL凝血時間5.8±0.4 3.5±0.7**6.8±0.9▲

      本實驗研究表明,造模給藥3天后,與血虛模型組小鼠比較,當歸補血湯組和四物湯組小鼠血液中的RBC、HGB、PLT和WBC各項指標均有顯著性上升;但從小鼠的體征變化看,當歸補血湯組小鼠比四物湯組小鼠略為活躍,食量也較好。造模給藥7天后,與模型小鼠比較,當歸補血湯1.0g/mL劑量組和四物湯1.0g/mL劑量組小鼠血液中的RBC、HGB、HCT、PLT和WBC各項指標均有顯著性變化;但從小鼠的體征變化來看,當歸補血湯組小鼠行為活躍,食量增加,毛色有光澤,而四物湯組小鼠行為還是略微遲緩,少食,嗜睡。在給藥第3天,與當歸補血湯組比較,四物湯組小鼠血液中的PLT和WBC水平均有顯著性上升(P<0.01);在第7天,與當歸補血湯組比較,四物湯組小鼠血液中的PLT水平有顯著性上升(P<0.01),WBC 水平有顯著性下降(P<0.01),但與模型組比較,當歸補血湯組和四物湯組小鼠血液中WBC水平均有顯著性上升。說明四物湯組小鼠血液各項指標很快上升,但是有少食、懶動、嗜睡的現(xiàn)象,提示四物湯只是在短時間促進造血功能,使指標上升,起到治標的作用,這與四物湯中的阿魏酸、當歸多糖、地黃多糖等可明顯提高血清中集落刺激因子等造血因子,刺激造血干細胞增殖、分化[7],促進造血組織造血功能的恢復,重在補血活血[4]有關(guān)。當歸補血湯組小鼠,給藥3天后懶動、少食、嗜睡癥狀有所改善,給藥6天后上述氣虛癥狀基本消失,恢復正常,而且血液中各項指標恢復,提示該方重在補氣,氣盛而能生血,當歸補血湯重用黃芪(5份)大補脾肺之氣,以資氣血生化之源,為君藥,配伍當歸(1份)補血和營,為臣藥。陳耀輝等[8]研究提示該方能加快血虛動物骨髓有核細胞DNA的合成,增加骨髓有核細胞數(shù)量,刺激骨髓造血祖細胞集落的形成,加快血細胞的分化與成熟,促進血虛小鼠外周血細胞數(shù)量恢復正常,達到補氣生血的功效,能更好的從根本上解決缺血問題。

      凝血實驗結(jié)果表明當小鼠體內(nèi)血液急劇減少后,會造成血液中各項指標降低,出現(xiàn)氣血不足的現(xiàn)象,給予四物湯和當歸補血湯一段時間,與模型組比較,四物湯組與當歸補血湯組小鼠血液中的PLT均顯著升高,四物湯組較當歸補血湯組升得更高些。但考慮到中藥復方發(fā)揮療效是多成分、多靶點共同作用的結(jié)果,鄭傳柱等[9]文獻研究顯示,四物湯具有改善血液流變性、延長凝血時間、抑制血小板聚集等活血作用,從而使凝血時間延長,對于急性出血患者很難固本。給予當歸補血湯一段時間,血液中各項指標上升,而凝血時間縮短,對于急性出血的患者有很好的療效?!镀⑽刚摗分姓f:“血不自生,須得生陽氣之藥,血自旺矣。”《溫病條辯》中說:“血虛者,補其氣而血自生?!币虼?,血虛者補血時,應(yīng)加入補氣之品,以助生化,或者重補氣以生血;如因大失血而致血虛者,尤以補氣以顧脫,使氣旺則血生[10]。中醫(yī)說急則治標,緩則治本,有形之血生于無形之氣,當歸補血湯中重用黃芪既是治標也是治本。

      本研究結(jié)果表明,四物湯與當歸補血湯均具有補血的功效。單從功效看,四物湯重在補血活血,當歸補血湯重在補氣生血。根據(jù)中醫(yī)“有形之血不能速生,無形之氣所當急固”的理論,在急性缺血的情況下,中醫(yī)理論指導重在補氣,達到氣生血,從根本上解決缺血問題,所以當歸補血湯對急性失血的補血效果會更好,凝血時間亦會更短。

      [1]金·李杲.內(nèi)外傷辨惑論[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2011:27.

      [2]唐·藺道人.仙授理傷續(xù)斷秘方[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2006:7.

      [3]金若敏,寧煉,陳長勛,等.血虛模型動物制備及當歸補血湯的作用研究[J].中成藥,2001,23(4):268-271.

      [4]唐昆,吳希.四物湯的現(xiàn)代藥理作用和臨床應(yīng)用[J].中國中醫(yī)急癥,2006,15(12):1397-1399.

      [5]賈梅,鄭傳柱,張麗,等.膠艾湯與四物湯對血虛模型大鼠補血功效的比較研究[J].中草藥,2015,46(11):1640-1644.

      [6]黃麗萍,吳素芬,周俊,等.當歸補血湯對三種血虛模型小鼠作用比較[J].中藥藥理與臨床,2011,27(5):5-8.

      [7]劉艷,李毅.淺論血虛證從“心生血”論治[J].遼寧中醫(yī)雜志,2010,37(2):262.

      [8]陳耀輝,黃麗萍,吳素芬,等.當歸補血湯與人參當歸方、靈芝阿膠方的補氣生血作用比較[J].中藥藥理與臨床,2015,31(1):22-25.

      [9]鄭傳柱,賈梅,張麗,等.膠艾湯與四物湯對血瘀模型大鼠活血功效的比較研究[J].中草藥,2014,45(18):2652-2657.

      [10]鄭中甲.方劑學[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2005:163.

      Comparison of Blood Tonic Effect of Angelicae Sinensis Decoction and Siwu Decoction in Blood Deficiency Model Mice

      JIN Qingzheng,TANG Wei
      Zhejiang Quhua Hospital,Quzhou(324004),China

      Objective To study the effect of Angelicae Sinensis Decoction and Siwu Decoction on blood deficiency model mice and the difference of two prescriptions.Methods Forty ICR mice were randomized into blank,model,Angelicae Sinensis Decoction,and Siwu Decoction groups,with 10 mice in each group.Hemorrhagic blood deficiency models were established in other 3 groups except for blank group.The treatment groups were fed with the corresponding drugs for consecutive 7 days.Physical signs were daily observed;the value of red blood cell(RBC),hemoglobin(HGB),hematocrit(HCT),platelet(PLT),white blood cell(WBC)were measured before and on day 1,3 and 7 after treatment;the blood coagulation time was determined on day 7.Results On day 7 after treatment,the appetite,the behavior,and the appearance of mice in Angelicae Sinensis Decoction group was greatly improved to the normal level,but such improvement was not noted in Siwu Decoction group.Compared with blank group,the RBC,HGB,HCT,PLT,and WBC levels of mice in model group were significantly lower respectively[RBC:(6.65±0.87)×1012/L vs(9.90±0.95)×1012/L;HGB:(108.6±11.69)g/L vs(134.4±13.55)g/L;HCT:(44.37±4.72)%vs(52.01±4.98)%;PLT:(983±7.81)×109L vs(1218±10.27)×109/L;WBC:(6.20±0.22)×109L vs(7.80±0.05)×109/L;all P<0.01],but the reduction was reversed in both Angelicae Sinensis Decoction[RBC:(9.31±0.89)×1012/L;HGB:(136.1±11.88)g/L;HCT:(53.10±5.24)%;PLT:(1005±10.43)×109L;WBC:(8.26±0.31)×109L]and Siwu Decoction groups[RBC:(9.68±0.99)×1012/L;HGB:(132.4±14.62)g/L;HCT:(53.18±5.89)%;PLT:(1097±6.97)×109L;WBC:(7.63±0.05)×109L],with P<0.05 or P<0.01.Conclusion Angelicae Sinensis Decoction and Siwu Decoction have goodblood enriching effect,but the two kinds of prescriptions have different effects on the characteristics of blood deficiency signs in model mice.

      mice;blood deficiency model;angelicae sinensis decoction;siwu decoction;blood enriching effect

      浙江衢化醫(yī)院藥劑科(衢州 324004)

      金情政,E-mail:jinqingzheng111@126.com

      (收稿:2017-04-12 修回:2017-06-21)

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