薩?？巳庋虿煌路莩瑪?shù)排卵效果比較

曾滔，韓煜茹，祁先江，申桂賓，王二耀，張子敬，于翔，霍飛，董紅*

（1.新疆哈密市畜牧工作站，新疆哈密839000；2.新疆巴里坤縣畜牧工作站，新疆巴里坤縣839200；3.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所養(yǎng)牛室，河南鄭州450002；4.新疆畜牧科學(xué)院畜牧研究所，新疆烏魯木齊830000）

薩?？巳庋虿煌路莩瑪?shù)排卵效果比較

曾滔1，韓煜茹1，祁先江2，申桂賓2，王二耀3，張子敬3，于翔3，霍飛4，董紅4*

（1.新疆哈密市畜牧工作站，新疆哈密839000；2.新疆巴里坤縣畜牧工作站，新疆巴里坤縣839200；3.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所養(yǎng)牛室，河南鄭州450002；4.新疆畜牧科學(xué)院畜牧研究所，新疆烏魯木齊830000）

為了提高新疆哈密地區(qū)薩福克純種肉羊的利用率，比較不同月份胚胎移植生產(chǎn)的效果，分別于4月和12月在哈密地區(qū)巴里坤縣建坤牧業(yè)種羊場各選擇43只薩?？朔N羊進(jìn)行超數(shù)排卵胚胎采集試驗，結(jié)果表明：從平均回收胚胎數(shù)、平均可用胚胎數(shù)、可用胚率三個指標(biāo)考量，薩?？朔N羊12月超排效果（10枚、8.6枚、87%）顯著優(yōu)于4月（7枚、5枚、71.43%）。

不同月份；薩?？搜颍怀瑪?shù)排卵；平均回收胚胎數(shù)；平均可用胚胎數(shù)

超數(shù)排卵作為一項胚胎生物工程技術(shù)，是優(yōu)良種畜實現(xiàn)快速擴(kuò)繁的途徑之一，通過超數(shù)排卵獲得大量發(fā)育整齊、優(yōu)質(zhì)的受精卵是進(jìn)行批量鮮胚移植和胚胎冷凍的前提[1]。自2015年新疆哈密地區(qū)從澳大利亞引進(jìn)純種薩福克肉羊以來，本區(qū)胚胎移植工作已經(jīng)進(jìn)入了應(yīng)用化階段，但在實踐中發(fā)現(xiàn)超數(shù)排卵效果不穩(wěn)定。為了觀察不同月份對超排效果的影響，本次試驗主要通過春季（4月）和秋冬季（12月）對同一批薩?？朔N羊進(jìn)行超數(shù)排卵胚胎采集試驗，以便更好的應(yīng)用于胚胎移植生產(chǎn)。

1 材料與方法

1.1 供體母羊的選擇

供體母羊來源于巴里坤縣建坤牧業(yè)種羊場，選擇43只生長發(fā)育正常、膘情良好、體質(zhì)健壯，無生殖系統(tǒng)疾病的3～4歲薩?？搜?。

1.2 藥品和試劑

FSH（寧波三生藥業(yè)生產(chǎn)）、CIDR（澳大利亞）、氯前列腺素（寧波三生藥業(yè)）、靜松靈、鹽酸普魯卡因、腎上腺素、PBS緩沖液（自制配制）、胚胎保存液（自己配制）、75%酒精、苯扎溴銨消毒液、礦物油、0.9%生理鹽水、2%碘酊。

1.3 儀器設(shè)備

體視顯微鏡、恒溫加熱臺、恒溫水浴鍋、烘箱、高壓滅菌鍋、酒精燈、手術(shù)車、創(chuàng)布、毛剪、手術(shù)刀、止血鉗、腸鉗等。

1.4 超數(shù)排卵和配種處理

備選的供體羊在超數(shù)排卵處理前觀察有兩個發(fā)情周期，對供體羊進(jìn)行外陰部消毒清洗，把CIDR放入消毒好的PVC投放管內(nèi)，將PVC投放管緩緩放入供體羊的陰道內(nèi)，然后用消毒好的玻璃棒把管內(nèi)的CIDR輕輕推入供體羊的陰道里。到埋入CIDR后的第11 d采用肌肉注射FSH，注射總劑量為350IU，分3 d逐漸遞減注射量，每日早晚各一次，劑量一樣，間隔10～12 h。到埋植CIDR的第13 d上午取出CIDR，同時每只注射PG0.1～0.15 mg。然后第2 d開始試情，同時對發(fā)情的供體羊采用自然交配配種，8～10 h后復(fù)配一次，直到發(fā)情結(jié)束。

1.5 胚胎收集和鑒定

胚胎的采集操作在供體羊發(fā)情配種后的第6 d利用手術(shù)法采集，此期胚齡應(yīng)該主要為桑葚胚和囊胚，并詳細(xì)記錄黃體、采集的胚胎數(shù)量。胚胎質(zhì)量評定時按通用標(biāo)準(zhǔn)，考慮胚胎的形態(tài)、密度、色澤、卵裂球等。根據(jù)以上指標(biāo)內(nèi)容觀察結(jié)果可將胚胎分為A、B、C、D四個不同等級[2]：A級胚胎：胚胎發(fā)育與胚齡一致，形態(tài)完整，結(jié)構(gòu)緊湊，卵裂球輪廓清晰，細(xì)胞團(tuán)致密，色調(diào)均一。B級胚胎：胚胎發(fā)育與胚齡相符，輪廓大致清晰，透明帶稍變形，細(xì)胞團(tuán)比較致密，色調(diào)正常，變性細(xì)胞占30%以下。C級胚胎：形態(tài)輪廓尚可，細(xì)胞團(tuán)不致密，結(jié)構(gòu)松散，異常細(xì)胞比例在30%～50%之間。D級胚胎：退化、未受精卵，胚胎發(fā)育較正常胚齡晚1 d以上，卵裂球異常離散或死亡。只有C級以上的胚胎作為可用胚胎進(jìn)行移植。

2 結(jié)果與分析

2.1 統(tǒng)計分析

用SPSS18.0統(tǒng)計軟件,方差分析法計算不同處理組間的差異顯著性。

2.2 不同季節(jié)超數(shù)排卵的黃體和出胚數(shù)的效果比較

表1 不同季節(jié)超數(shù)排卵的黃體和出胚數(shù)結(jié)果

本研究結(jié)果表明，12月份超排處理的黃體數(shù)、回收的胚胎數(shù)顯著高于4月份（P＜0.05）。

2.3 不同季節(jié)超數(shù)排卵胚胎等級的效果比較

對4月份和12月份薩福克綿羊超排效果對比觀察，由表2可知,12月份A、B級胚胎高于4月份,差異極顯著（P＜0.01）；12月份C級胚胎、退化胚胎低于4月份。差異顯著（P＜0.05）。因此，12月份超排效果顯著好于4月份。

表2 不同季節(jié)超數(shù)排卵胚胎效果

2.4 不同季節(jié)超數(shù)排卵利用率的比較

本試驗共超數(shù)排卵處理43只供體，春季6只無黃體做淘汰處理，超數(shù)排卵手術(shù)37只，超排反應(yīng)率為86.05%（37/43）。秋季3只無黃體做淘汰處理，超數(shù)排卵手術(shù)40只，超排反應(yīng)率為93.02%（40/43）。秋季淘汰率明顯低于春季，供體羊?qū)Υ俾雅菁に氐膽?yīng)答更敏感。

3 討論

綿羊發(fā)情周期主要在春秋兩季,且以秋季發(fā)情旺盛,在每個發(fā)情季節(jié)有多個發(fā)情周期。在發(fā)情季節(jié),卵巢處于活動狀態(tài),呈現(xiàn)周期性卵泡發(fā)育。因此當(dāng)供體處于發(fā)情活動期的季節(jié)時，進(jìn)行超數(shù)排卵處理可以取得較好的效果[3]。袁玉國等（2011）在11月、5月分別對山羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理，發(fā)現(xiàn)5月份平均可用胚數(shù)明顯低于11月平均可移植胚數(shù)[4]。王躍卿等（2008）研究不同季節(jié)母體卵巢排卵變化規(guī)律表明，非繁殖季節(jié)與繁殖季節(jié)母羊卵巢上都有較多的生長卵泡發(fā)育，但在非繁殖季節(jié)許多生長卵泡會在排卵前閉鎖不排卵，在繁殖季節(jié)由于營養(yǎng)、光照等因素排卵率較高，受精卵質(zhì)量較好[5]。本試驗對薩?？思兎N肉羊在哈密地區(qū)春季4月份和秋冬季12月份超排效果進(jìn)行比較，結(jié)果表明，秋冬季12月份效果明顯好于春季4月份，12月份獲得黃體數(shù)、胚胎數(shù)、可用胚胎數(shù)及利用率顯著高于4月份。賈海明等[6]研究發(fā)現(xiàn)，冬季對綿羊進(jìn)行超數(shù)排卵的效果與秋季效果較接近，這與本次試驗結(jié)果相一致。但許斌等[7]研究發(fā)現(xiàn)，非繁殖季節(jié)綿羊的黃體數(shù)、采胚數(shù)與在繁殖季節(jié)超排結(jié)果無明顯差異,這可能與品種間差異、處理方案有關(guān)。易金云[8]等報道季節(jié)對綿羊超數(shù)排卵有影響，但不影響移植胚的發(fā)育效率，與本實驗4月份和12月份鮮胚移植妊娠率均達(dá)到65%結(jié)果一致。

對于全年均衡生產(chǎn)胚胎來說，春季雖然可用胚低于秋季，但是妊娠率并不低，所以考慮到全年生產(chǎn)的均衡性，依舊可以進(jìn)行春季胚胎生產(chǎn)的安排。除季節(jié)之外，超排效果還受品種、年齡、飼養(yǎng)管理、激素的種類和劑量等影響[8-10]，因此，在實際生產(chǎn)過程中要綜合考慮各個因素，以取得較好的效果。

[1] 薛仰全.動物超數(shù)排卵技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀[J].中國畜禽種業(yè).2013，9（9）:70-73.

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[3] 鄒孝順，全禮明.山羊超排效果影響因素[J].農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備，2016，（9）:195.

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[5] 楊浩哲，楊西光，王躍卿，等.提高山羊胚胎移植效果的方法探析[J].中國草食動物科學(xué)，2008,28（4）:32-34.

[6] 賈海明，李武.非繁殖季節(jié)（冬季）綿羊超數(shù)排卵試驗[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2009，（13）:57-58.

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The Effect of Moths on Superovulation of Suffolk Sheep

ZENG Tao1，HAN Yu-ru1，QI Xian-jiang2，SHEN Gui-bing2，WANG Er-yao3，ZHANG Zi-jin3，YU Xiang3，HUO Fei4，DONG Hong4*
（1.Hami Animal Husbandry Workstation，Hami 839000，China；2.Barkol County Animal Husbandry Workstation，Barkol Xinjiang 839200，China；3.Institute of Animal Husbandry and Veterinary,Henan Academy of Agricultural Science，Zhengzhou 450002，China；4.Institute of Animal Science,Xinjiang Academy of Animal Science,Urumqi 830000,China）

In order to improve the availability of Suffolk sheep at Hami region,Comparing the effect of embryo transfer production in different months,at Jiankun sheep farm in the Barkol county of Hami region,In April and December,43 Suffolk sheep were selected for the superovulation and embryo collection.The average number of recovered embryos,available embryos,and the rate of available embryo were analyzed.,The results showed that the superovulation effect（and）of the sufuk sheep in December was significantly better than that of April（recovered embryos 10 VS 7,available embryos 8.6 VS 5）（P＜0.05）.

different months；suffolk sheep；superovulation；average number of embryos recovered；the average viable embryos

S826.8

A

1003-6377（2017）06-0001-04

新疆維吾爾自治區(qū)十三五肉羊重點研發(fā)專項“肉羊提質(zhì)增效關(guān)鍵技術(shù)研究與示范”;國外專用肉羊胚胎移植推廣項目（哈地黨農(nóng)（2014）3號；新疆畜牧廳財政項目“2017新疆畜禽遺傳資源保護(hù)與利用中心建設(shè)”。

曾滔（1977-）男，本科，畜牧師，研究方向：動物營養(yǎng)與繁殖。E-mail：fanyuzhongxin@126.com

董紅（1977-），女，碩士，副研究員，研究方向：動物繁殖技術(shù)。E-mail：595796086@qq.com

2017-09-17，

2017-10-02

10.16863/j.cnki.1003-6377.2017.06.001