針刺“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理對(duì)大鼠缺血再灌注心肌的保護(hù)作用及機(jī)制研究*

陳 松， 韓永麗， 吳 松△， 王 華， 梁鳳霞， 黃 偉，2， 陳 茜

1湖北中醫(yī)藥大學(xué)針灸骨傷學(xué)院/針灸治未病湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心，武漢 430061 2湖北省中醫(yī)院針灸科，武漢 430061

針刺“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理對(duì)大鼠缺血再灌注心肌的保護(hù)作用及機(jī)制研究*

陳 松1， 韓永麗1， 吳 松1△， 王 華1， 梁鳳霞1， 黃 偉1，2， 陳 茜1

1湖北中醫(yī)藥大學(xué)針灸骨傷學(xué)院/針灸治未病湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心，武漢 4300612湖北省中醫(yī)院針灸科，武漢 430061

目的探討電針“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理是否通過(guò)p38 MAPK信號(hào)通路來(lái)影響心肌缺血再灌注損傷。方法選用3月齡Wistar雄性大鼠40只，體重(220±23) g，編號(hào)后按隨機(jī)數(shù)字表分入對(duì)照組(僅穿線(xiàn)，不結(jié)扎)、模型組、電針預(yù)處理組、電針預(yù)處理+SB230580組，每組10只。通過(guò)阻斷左冠狀動(dòng)脈前降支缺血30 min，再灌注120 min，檢測(cè)心肌缺血再灌注損傷后各項(xiàng)心功能指標(biāo)(舒張末期壓力、左室收縮期平均壓、短軸縮短率和射血分?jǐn)?shù))，檢測(cè)心肌組織中活性氧(ROS)含量，超氧化物歧化酶SOD活性，丙二醛(MDA)含量及ATP含量，透射電鏡下觀(guān)察心肌超微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果與對(duì)照組比較，模型組各項(xiàng)心功能指標(biāo)中舒張末期壓力升高，左室收縮期平均壓、短軸縮短率和射血分?jǐn)?shù)均降低(均P<0.05)，梗死面積和梗死程度均升高(均P<0.01)，心肌肌纖維溶解、斷裂，間質(zhì)增大，心肌細(xì)胞腫脹明顯，SOD活性及ATP含量明顯下降，ROS及MDA含量明顯上升(均P<0.05)，電針預(yù)處理可明顯減輕這種變化，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，SB230580抑制劑可減弱電針“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理的這種作用(均P<0.05)。結(jié)論電針“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理能顯著改善心肌缺血再灌注損傷后心功能及心肌細(xì)胞活性，降低心肌梗死面積，減輕線(xiàn)粒體的腫脹程度，保護(hù)線(xiàn)粒體的完整性。這種保護(hù)作用可能與改善心肌細(xì)胞的呼吸功能有關(guān)。

電針； 預(yù)處理； 缺血再灌注損傷； 線(xiàn)粒體； p38 MAPK通路

與冠狀動(dòng)脈持續(xù)閉塞相比，心肌缺血后的及時(shí)再灌注能夠縮小心肌梗死范圍并改善左室收縮功能，而再灌注本身又能導(dǎo)致缺血期間并不存在的損傷并使已有損傷加重。這一過(guò)程包含大量交互式機(jī)制的級(jí)聯(lián)反應(yīng)持續(xù)進(jìn)展，最終導(dǎo)致心肌細(xì)胞功能代謝紊亂及細(xì)胞凋亡[1-2]。這種現(xiàn)象即是心肌缺血再灌注損傷(myocardial ischemia-reperfusion injury，MIRI)。MIRI的發(fā)生機(jī)制非常復(fù)雜，常伴隨重度的無(wú)菌性炎癥反應(yīng)，并通過(guò)多重信號(hào)通路，誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子和炎癥趨化因子的產(chǎn)生與聚集。p38 MAPK信號(hào)通路作為MAPK家族的重要成員，通過(guò)對(duì)胞內(nèi)信號(hào)的傳遞參與細(xì)胞對(duì)外界環(huán)境改變的調(diào)節(jié)性反應(yīng)，并且還可以與其他信號(hào)通路相互作用，是細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞的交匯點(diǎn)[3]。前期研究表明，電針“內(nèi)關(guān)”對(duì)缺血心肌細(xì)胞電活動(dòng)有明顯的保護(hù)作用，其中既有中樞神經(jīng)核團(tuán)的參與，也與神經(jīng)內(nèi)分泌因子調(diào)節(jié)下游MAPK信號(hào)通路有關(guān)[4-8]。但是針刺“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理降低MIRI損傷，是否有p38 MAPK信號(hào)通路的參與，目前鮮見(jiàn)報(bào)道。本文旨在探討針刺“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理對(duì)MIRI的影響及其可能機(jī)制，為尋找更好的預(yù)處理方法提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

主要實(shí)驗(yàn)儀器：BL-Newcentury 410生物信號(hào)及壓力測(cè)試系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司)，ALC-V系列動(dòng)物呼吸機(jī)(上海奧爾科特生物科技公司)，aquaplus2系列艾科浦超純水制成機(jī)(美國(guó)艾科浦國(guó)際有限公司)，WH-2型微型漩渦混勻器(上海滬西分析儀器廠(chǎng))，Clark氧電極(英國(guó)Hansateach公司中國(guó)總部)，ST-360型酶標(biāo)儀(上海旦鼎國(guó)際貿(mào)易有限公司)，601型超級(jí)恒溫水浴(江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠(chǎng))，TGL-10B系列臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng))，HANS-200型電針治療儀(南京濟(jì)生醫(yī)療科技有限公司)。主要試劑：PBS緩沖液、ROS測(cè)定試劑盒購(gòu)自碧云天生物技術(shù)研究所，超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒、丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒和三磷酸腺苷(ATP)含量測(cè)試盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，p38 MAPK信號(hào)通路特異性阻斷劑SB203580購(gòu)自美國(guó)Selleck生物科技有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)雄性Wistar大鼠40只，3月齡，體重(220±23) g，由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK(鄂)2015-0018，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：42000600008926。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在湖北中醫(yī)藥大學(xué)科研中心進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施使用證編號(hào)：No.00133292。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及處理方法 采用隨機(jī)數(shù)字表法，將40只大鼠隨機(jī)分為4組：對(duì)照組(S組)、模型組(M組)、電針預(yù)處理組(EA組)和電針預(yù)處理+SB230580組(EA+SB組)。對(duì)照組：常規(guī)飼養(yǎng)，不做任何處理；缺血再灌注(模型)組：捆綁1次/d，20 min/次，第8天開(kāi)胸后缺血20 min，再灌注40 min；電針預(yù)處理組和電針預(yù)處理+SB230580組：捆綁1次/d，同時(shí)進(jìn)行電針刺操作，20 min/次，共7 d，SB230580采用頸背部皮下注射，0.3 mg/kg·d，共7 d，第8天開(kāi)胸后缺血20 min，再灌注40 min。

1.3 心肌缺血再灌注模型的建立

方法參見(jiàn)文獻(xiàn)[9-10]。采用體內(nèi)心肌缺血再灌注損傷模型，用3%戊巴比妥鈉50 mg/kg腹腔內(nèi)注射進(jìn)行麻醉，起效后將大鼠置于鼠臺(tái)上固定，心電圖監(jiān)測(cè)。將大鼠頸部濕潤(rùn)剃毛消毒后橫行切開(kāi)皮膚約1 cm，分層暴露氣管，于正中第3、4氣管軟骨環(huán)作倒“T”型切口，置入特制氣管導(dǎo)管，接呼吸機(jī)[呼吸頻率50次/min，呼吸功能比1∶1.5，壓力20 cmH2O(1 cmH2O=98 Pa)]。分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，將PE-50聚乙烯管插入頸外靜脈和頸動(dòng)脈，用于心功能監(jiān)測(cè)。左側(cè)胸前濕潤(rùn)剃毛消毒后于胸骨第3、4肋間橫切口切開(kāi)皮膚，用止血鉗鈍性分離各肌層及胸膜并撐開(kāi)，剪開(kāi)心包膜，暴露心臟，在心大靜脈附件的左心耳下2～3 mm處用2×6帶線(xiàn)圓針6-0號(hào)醫(yī)用錦綸單絲線(xiàn)繞過(guò)前降支冠狀動(dòng)脈，肺動(dòng)脈圓錐旁溝出針，心電圖監(jiān)測(cè)顯示正常時(shí)，于絲線(xiàn)上方墊一PE管，打活結(jié)造成缺血模型，并采用推管法行左冠狀動(dòng)脈缺血再灌注術(shù)。以左室前壁向外膨脹及心電ST段抬高為缺血標(biāo)志；再灌注時(shí)左室前壁缺血區(qū)紫色消失，抬高的ST段下降1/2以上，局部可見(jiàn)反應(yīng)性充血，有炎性水腫和滲出，即缺血再灌注模型復(fù)制成功。

1.4 電針預(yù)處理方法

參照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物穴位圖譜》[11]選取大鼠腧穴。內(nèi)關(guān)位于大鼠前肢內(nèi)側(cè)、離腕關(guān)節(jié)約3 mm左右的尺橈骨縫間，雙側(cè)取穴。用0.30 mm×15 mm華佗牌毫針直刺，針刺深度約5 mm，接HANS-200型電針治療儀，選用連續(xù)波，頻率2 Hz，強(qiáng)度1 mA，通電治療20 min。

1.5 指標(biāo)檢測(cè)

1.5.1 心肌標(biāo)本梗死面積和梗死重量的測(cè)定 剖取大鼠全心，冰生理鹽水洗凈，濾紙吸干，液氮固定，浸入新鮮配制的NB-T磷酸緩沖液中染色。染色完全后取出，正常組織(缺血危險(xiǎn)區(qū))染色呈藍(lán)色，梗死組織(即梗死區(qū))不染色，呈白色。用數(shù)碼相機(jī)記錄心肌標(biāo)本，采用HMIAS-2000高清晰度彩色醫(yī)學(xué)圖文分析系統(tǒng)分析，分別計(jì)算梗死面積占心肌切片總面積的百分比和梗死區(qū)占全心重量的百分比。

1.5.2 心功能的測(cè)定 造模成功后將已經(jīng)插入頸動(dòng)脈的PE-50聚乙烯管末端與生物信號(hào)及壓力測(cè)試系統(tǒng)相連，進(jìn)入左心室，收集左心室的心功能指標(biāo)：左室舒張末期壓力(left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP)、左室收縮期平均壓(left ventricular systolic mean presure，LVSP)、短軸縮短率(fractional shortening，F(xiàn)S)和射血分?jǐn)?shù)(ejection fraction，EF)。

1.5.3 心肌組織內(nèi)ROS含量、SOD活性、MDA含量及ATP含量測(cè)定 在冰槽內(nèi)切取心臟，并稱(chēng)取100 mg心肌組織放入離心管。制備成10%的勻漿液。將離心管放置于高溫沸水浴箱中，10 min后取出搖勻，轉(zhuǎn)速為3 500 g的離心機(jī)中離心10 min，抽取上清液檢測(cè)。之后嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟操作，采用黃嘌呤氧化法檢測(cè)心肌SOD活性，硫代巴比妥酸法檢測(cè)心肌MDA含量，高效液相色譜法檢測(cè)心肌組織中ATP的含量。

1.5.4 心肌組織超微結(jié)構(gòu)觀(guān)察 取大鼠心臟，濾紙吸干血跡，用4%多聚甲醛固定，再刀片切取心室部位，用2.5%戊二醛固定3 h、磷酸緩沖液漂洗，切片經(jīng)脫水、包埋、固化、超薄切片，然后以3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色，在透射電鏡下觀(guān)察心肌細(xì)胞腫脹及損傷程度。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)錄入IBM-SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述，采用K-S或S-W檢驗(yàn)以驗(yàn)證數(shù)據(jù)的正態(tài)性，采取Levene檢驗(yàn)以驗(yàn)證數(shù)據(jù)的方差齊性。組間均數(shù)差異采用單因素方差分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠心肌梗死情況比較

結(jié)果見(jiàn)表1。與S組相比較，M組的梗死面積和梗死程度均升高(均P<0.01)；EA組和EA+SB組的心肌損傷程度均較M組有顯著性差異(均P<0.01)，且EA組的各項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)于EA+SB組(均P<0.05)。

與M組比較，△△P<0.01；與EA組比較，*P<0.05

2.2 各組大鼠心功能比較

結(jié)果見(jiàn)表2。與S組相比較，M組、EA組和EA+SB組的LVEDP升高，LVSP、FS、EF均降低(均P<0.05)。同時(shí)，EA組、EA+SB組與M組之間各項(xiàng)指標(biāo)的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

2.3 大鼠心肌組織ROS含量、SOD活性、MDA含量及ATP含量

如表3所示，與S組比較，M組、EA組及EA+SB組大鼠心肌細(xì)胞SOD活性及ATP含量明顯下降，ROS及MDA含量明顯上升(均P<0.05);EA組及EA+SB組ROS、MDA、ATP含量及SOD活性，與M組比較，均有顯著性差異(均P<0.05)，其中EA組各項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)于EA+SB組(均P<0.05)。

表2 各組大鼠心功能指標(biāo)Table 2 The indexes of rat cardiac function in each group(±s)

與S組比較，#P<0.01；與M組比較，△P<0.05

2.4 透射電鏡觀(guān)察各組大鼠心肌細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)

如圖1所示，S組正常心肌纖維排列規(guī)則，細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞核及線(xiàn)粒體形態(tài)和數(shù)量正常，線(xiàn)粒體嵴清晰，心肌間未見(jiàn)異常(圖1A)。M組(圖1B)心肌肌纖維出現(xiàn)溶解斷裂甚至壞死，間質(zhì)增大，腫脹明顯；部分線(xiàn)粒體固縮變小，部分線(xiàn)粒體腫脹或外膜破損；線(xiàn)粒體嵴不規(guī)則、斷裂成絮狀、缺失。EA組(圖1C)及EA+SB組(圖1D)心肌肌纖維間隙輕度增寬，壞死灶減輕，心肌細(xì)胞輕微腫脹，細(xì)胞核及線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)基本完整，小部分線(xiàn)粒體仍存在空泡樣病變。

表3 大鼠心肌組織ROS含量、SOD活性、MDA含量及ATP含量Table 3 The ROS content，SOD activity，MDA content and ATP content in myocardial tissues in each group(±s)

與S組比較，#P<0.01；與M組比較，△P<0.05；與EA組比較，*P<0.05

A：S組；B：M組；C：EA組；D：EA+SB組圖1 各組大鼠心肌細(xì)胞電鏡照片(×10 000)Fig.1 Electronic microscopy of rat myocardiocytes in each group(×10 000)

3 討論

預(yù)處理，即“未病先防”，屬于中醫(yī)學(xué)里“治未病”的理論范疇?！爸挝床　笔侵嗅t(yī)學(xué)的重要組成部分，并且有著悠久的文化內(nèi)涵。如《道德經(jīng)·七十一章》中說(shuō)：“其安易持，其未兆易謀，其脆易泮，其微易散，為之于未有，治之于未亂”?！端貑?wèn)·刺熱論》中也說(shuō)：“病雖未發(fā)，見(jiàn)赤色者刺之，名曰治未病。”。我國(guó)現(xiàn)行衛(wèi)生醫(yī)療服務(wù)體系主要包括由各級(jí)醫(yī)院構(gòu)成的治病體系和疾病預(yù)防控制中心構(gòu)成的防病體系兩部分組成，但是防病體系多重視傳染病的預(yù)防和公共衛(wèi)生的治理，對(duì)常見(jiàn)慢性病及病前亞健康狀態(tài)關(guān)注度不夠。在中醫(yī)防治一體的基本法則和健康理念下，針刺作為一項(xiàng)基本的中醫(yī)治療技術(shù)，在疾病的預(yù)防和康復(fù)領(lǐng)域，正受到越來(lái)越多的重視[12-14]。并且這種預(yù)處理的思想，將可與基因檢測(cè)手段相融合，做到有針對(duì)性地精準(zhǔn)預(yù)防及治療[15]。本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，針刺預(yù)處理確實(shí)能夠改善MIRI的心功能各項(xiàng)指標(biāo)，降低心肌梗死程度，并且從信號(hào)通路水平證實(shí)了“未病先防”的合理性。

我們?cè)谇捌谘芯恐衃4-5]，已經(jīng)證實(shí)針刺“內(nèi)關(guān)”穴可以通過(guò)p38 MAPK信號(hào)通路，抑制心肌細(xì)胞中TNF-α和IL-1β的表達(dá)，來(lái)保護(hù)心肌肥厚。并且針刺預(yù)處理可以有效保護(hù)缺血心肌，啟動(dòng)機(jī)體內(nèi)源性的自我保護(hù)機(jī)制，抵抗隨后可能發(fā)生的疾病損害。如針刺“內(nèi)關(guān)”穴預(yù)處理能降低心肌缺血再灌注損傷大鼠心電圖的STⅡ值，減少血漿中降鈣素基因相關(guān)肽、血清缺血修飾白蛋白含量，提高心肌細(xì)胞中縫隙蛋白Cx43的表達(dá)水平，參與缺血心肌的保護(hù)[16-18]。

活性氧(ROS)，在缺血再灌注時(shí)的破壞機(jī)制中發(fā)揮重要作用。在呼吸爆發(fā)狀態(tài)下，激活的中性粒細(xì)胞生成大量ROS，與ROS自身形成的“ROS觸發(fā)ROS”的大規(guī)模爆發(fā)。脂質(zhì)過(guò)氧化導(dǎo)致細(xì)胞膜損傷及鈣超載，通透性增加，誘導(dǎo)細(xì)胞毒性的發(fā)生，導(dǎo)致自由基清除酶(SOD)的數(shù)量和活性降低，MDA、LDH等酶大量漏出，損害心肌細(xì)胞[19]。本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，針刺預(yù)處理確實(shí)可以改善MIRI心肌細(xì)胞的活性和供能，抑制ROS的活性和MDA的生成。同時(shí)，ROS作為信號(hào)分子，可以介導(dǎo)如蛋白激酶C、MAPKs等信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，甚至直接激活p38 MAPK信號(hào)通路[20]。p38 MAPK采用高度保守的三級(jí)酶促級(jí)聯(lián)反應(yīng)來(lái)進(jìn)行信號(hào)傳遞，該通路可被多種應(yīng)激刺激(如熱休克、高滲、缺血再灌注等)激活。作為經(jīng)典的炎癥通路，進(jìn)一步加重MIRI損傷，并且磷酸化p38 MAPK能夠進(jìn)一步活化下游底物，通過(guò)核因子介導(dǎo)，啟動(dòng)炎癥細(xì)胞釋放腫瘤壞死因子和白介素等致炎因子，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[21-22]。本研究也證實(shí)了針刺“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理對(duì)心肌的保護(hù)作用可能跟調(diào)控心肌細(xì)胞呼吸功能有關(guān)，說(shuō)明電針“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理對(duì)MIRI心肌損傷的保護(hù)作用應(yīng)該是多種途徑共同作用的結(jié)果。

電鏡下觀(guān)察到，M組的心肌肌纖維出現(xiàn)溶解斷裂甚至壞死，間隙增大，細(xì)胞及線(xiàn)粒體腫脹明顯。部分線(xiàn)粒體固縮變小，部分線(xiàn)粒體腫脹、或外膜破損。線(xiàn)粒體嵴不規(guī)則、斷裂成絮狀、缺失。EA組和EA+SB組均可以減輕MIRI心肌損傷，有效保護(hù)線(xiàn)粒體的完整性。

綜上所述，我們通過(guò)建立MIRI模型證實(shí)，電針“內(nèi)關(guān)”預(yù)處理至少可以通過(guò)調(diào)控心肌細(xì)胞呼吸功能有效保護(hù)MIRI心肌損傷，也證實(shí)了電針對(duì)心肌的保護(hù)作用應(yīng)該是多層次，多靶點(diǎn)。但其是否通過(guò)p38 MAPK信號(hào)通路進(jìn)行調(diào)控，以及如何調(diào)控下游轉(zhuǎn)錄因子及與哪些功能性基因相關(guān)，還需體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。

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ElectroacupuncturePreconditioningat“Neiguan”P(pán)reventsMyocardialIschemia-reperfusionInjuryinRatsbyActivatingp38-MAPKPathway

Chen Song，Han Yongli，Wu Song△et al

CollegeofAcupuncture-MoxibustionandOrthpaedics，HubeiUniversityofChineseMedicine；HubeiCollaborativeInnovationCenterofAcupunctureandMoxibustionforDiseasePrevention，Wuhan430061，China

ObjectiveTo investigate the protective mechanism of electroacupuncture preconditioning at “Neiguan” in preventing myocardial ischemia-reperfusion injury(MIRI)in rats.MethodsForty male Wistar rats，3 months old，weighting about (220±23) g，were randomly divided into four groups：sham operation group(sham group)，MIRI model group(model group)，electroacupuncture preconditioning group(EA group)and electroacupuncture preconditioning+SB203580 group(EA+SB group)，with 10 rats in each group.The MIRI model was achieved by the ligation of the left anterior descending artery to cause ischemia for 30 min and then deligation for 120-min reperfusion.Before the model establishment，rats in the EA group and EA+SB group

electric acupuncture for 20 min(1 mA，continuous wave).After MIRI，the cardiac function indexes including left ventricular end-diastolic pressure(LVEDP)，left ventricular systolic mean pressure(LVSP)，fractional shortening(FS)and ejection fraction(EF)were evaluated.Myocardial tissues were later obtained，the contents of ROS，SOD，MDA and ATP were detected and the ultrastructures were observed.ResultsRats in the model group had increased infarction size when compared with those in the sham group.Their LVSP，F(xiàn)S and EF were much lower，and LVEDP much higher than those in the sham group(P<0.05).There were dissolved and necrotic muscle fibers，increased myocardial interstitial gap and edema in the model group.The contents of ROS and MDA were increased，and those of ATP and SOD activity decreased in the model group as compared with those in the sham group(P<0.05).These indexes were greatly improved in rats experiencing electroacupuncture preconditioning，whereas the effects were suppressed after addition of SB230580(P<0.05).ConclusionElectroacupuncture preconditioning at“Neiguan” significantly improves the cardiac function，increases the cell activity，decreases the infarction area，mitigates the mitochondrial swelling and protects the integrity of the mitochondria，which may be associated with the improvement of the respiratory function of myocardiocytes.

electroacupuncture； preconditioning； myocardial ischemia-reperfusion injury； mitochondrion； p38 MAPK signaling pathway

*國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(No.81403460)

陳 松，男，1986年生，講師，E-mail：362573836@qq.com

△通訊作者，Corresponding author，E-mail：119065124@qq.com

R245.9

10.3870/j.issn.1672-0741.2017.05.006

(2016-08-15 收稿)