西藏謝通門(mén)縣山羊球蟲(chóng)感染情況調(diào)查

常艷凱 ， 毋亞運(yùn) ， 鄭雙健 ， 王 璐 ， 李東方 ， 李家奎 ， 張龍現(xiàn) ， 張慧正 ， 張素梅

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院 ， 河南 鄭州 450002 ； 2. 西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 ， 西藏 林芝 860000 ; 3.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 ， 湖北 武漢 430070 ； 4.河南省汝陽(yáng)縣衛(wèi)生監(jiān)督所付店分所 ， 河南 汝陽(yáng) 471200)

西藏謝通門(mén)縣山羊球蟲(chóng)感染情況調(diào)查

常艷凱1， 毋亞運(yùn)1， 鄭雙健1， 王 璐1， 李東方1， 李家奎2，3， 張龍現(xiàn)1， 張慧正4， 張素梅1

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院 ， 河南 鄭州 450002 ； 2. 西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 ， 西藏 林芝 860000 ; 3.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 ， 湖北 武漢 430070 ； 4.河南省汝陽(yáng)縣衛(wèi)生監(jiān)督所付店分所 ， 河南 汝陽(yáng) 471200)

為了解西藏謝通門(mén)縣山羊球蟲(chóng)的感染情況，采用飽和蔗糖溶液漂浮法,對(duì)該地區(qū)采集的260份山羊新鮮糞便樣品進(jìn)行了顯微鏡檢查，并對(duì)球蟲(chóng)種類(lèi)進(jìn)行了形態(tài)學(xué)鑒定。結(jié)果：該地區(qū)山羊球蟲(chóng)總感染率為81.15%(211/260)，共感染12種山羊艾美耳球蟲(chóng)(Eimeria)，其中艾麗艾美耳球蟲(chóng)(E.alijevi)和蒼白艾美耳球蟲(chóng)(E.pallida)的感染率分別為52.7%(137/260)和50.8%(132/260)，為優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種。山羊感染球蟲(chóng)多呈混合感染，混合感染率為61.7%(129/209)，并首次在西藏地區(qū)發(fā)現(xiàn)了斑點(diǎn)、柯察、蒼白艾美耳球蟲(chóng)。依據(jù)本次調(diào)查山羊球蟲(chóng)的結(jié)果和艾美耳球蟲(chóng)孢子化卵囊特征，制訂了山羊球蟲(chóng)檢索表。結(jié)論：西藏謝通門(mén)縣山羊球蟲(chóng)的感染情況較為嚴(yán)重，建議積極做好防控措施，減少球蟲(chóng)感染。

球蟲(chóng)感染 ； 種類(lèi) ； 西藏 ； 山羊

西藏地區(qū)作為中國(guó)五大牧場(chǎng)之一，動(dòng)物種類(lèi)繁多，一直以來(lái)畜牧業(yè)在其生產(chǎn)總值中占有較大比重。2015年西藏家畜存欄量有2 188萬(wàn)頭，其中山羊有533萬(wàn)頭，占西藏家畜總量的24.3%(國(guó)家統(tǒng)計(jì)中心http://t.cn/RI9Zg1z)。西藏地區(qū)山羊的養(yǎng)殖主要以個(gè)體放牧飼養(yǎng)為主，交通不便和管理粗放導(dǎo)致了山羊球蟲(chóng)病治療的滯后。羊球蟲(chóng)病引起的腹瀉和亞臨床感染(消瘦、發(fā)育停滯)嚴(yán)重影響了養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。國(guó)內(nèi)外關(guān)于山羊球蟲(chóng)感染情況調(diào)查較多，但西藏地區(qū)作為傳統(tǒng)牧區(qū)，且又處于高海拔地區(qū)，關(guān)于山羊球蟲(chóng)的報(bào)道相對(duì)較少。日喀則地區(qū)位于青藏高原西南部，山羊存欄量居西藏全區(qū)之首，謝通門(mén)縣是日喀則地區(qū)主要的羊生產(chǎn)區(qū)之一[1]。為了弄清高海拔地區(qū)山羊球蟲(chóng)感染情況，為本病的防控提供科學(xué)的依據(jù)，本研究對(duì)平均海拔 4 100 m 以上的日喀則地區(qū)謝通門(mén)縣牧區(qū)山羊球蟲(chóng)感染情況進(jìn)行了調(diào)查，以期為高原地區(qū)山羊寄生蟲(chóng)病的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集 本調(diào)查于2016年6-7月在西藏謝通門(mén)縣(位于日喀則地區(qū)中北部，東經(jīng)87°4′至89°1′，北緯29°18′至30°26′，平均海拔4 100 m以上)4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)7個(gè)不同放牧地點(diǎn)隨機(jī)采集了260份山羊糞便，每份樣品20～30 g。每份加2.5%重鉻酸鉀，置于4 ℃冰箱中保存。

1.2 檢查方法 應(yīng)用飽和蔗糖漂浮法對(duì)球蟲(chóng)樣本進(jìn)行陽(yáng)性篩選。參考Becker[2]的方法進(jìn)行球蟲(chóng)的收集與培養(yǎng)。

1.3 蟲(chóng)種鑒定 為確定球蟲(chóng)的種類(lèi)，將孢子化球蟲(chóng)卵囊置于顯微鏡(OLYMPUS BX53)下進(jìn)行鑒定。根據(jù)卵囊大小、形狀、卵囊結(jié)構(gòu)、內(nèi)殘?bào)w的有無(wú)和孢子囊形狀進(jìn)行形態(tài)學(xué)定種[3-4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 球蟲(chóng)感染情況 260份糞便樣品中，檢測(cè)到211份球蟲(chóng)陽(yáng)性樣品，感染率為81.2%(211/260)。因部分樣品球蟲(chóng)感染量小，未進(jìn)行球蟲(chóng)孢子化培養(yǎng)，對(duì)211份球蟲(chóng)陽(yáng)性樣品中的209份球蟲(chóng)進(jìn)行了形態(tài)學(xué)鑒定，共鑒定出12種山羊艾美耳球蟲(chóng)。感染率分別為：艾麗艾美耳球蟲(chóng)(E.alijevi)52.7%(137/260)，蒼白艾美耳球蟲(chóng)(E.pallida)50.8%(132/260)，克氏艾美耳球蟲(chóng)(E.christenseni)10.8%(28/260)，柯察艾美耳球蟲(chóng)(E.kocharli)9.6%(25/260)，家山羊艾美耳球蟲(chóng)(E.hirci)8.8%(23/260)，阿普艾美耳球蟲(chóng)(E.apsheronica)7.3%(19/260)，阿氏艾美耳球蟲(chóng)(E.arloingi)5%(13/260)，山羊艾美耳球蟲(chóng)(E.caprina)4.2%(11/260)，約奇艾美耳球蟲(chóng)(E.jolchijevi)2.7%(7/260)，斑點(diǎn)艾美耳球蟲(chóng)(E.punctata)2.7%(7/260)，妮氏艾美耳球蟲(chóng)(E.ninakohlyakimovae)1.5%(4/260)，羊艾美耳球蟲(chóng)(E.caprovina)0.4%(1/260)。

本次調(diào)查顯示，山羊球蟲(chóng)的混合感染率為61.7%(129/209)。陽(yáng)性樣本中，最多有7種球蟲(chóng)的混合感染，平均感染1.9種球蟲(chóng)?；旌细腥?、3、4、5、7種球蟲(chóng)的所占的比率分別為38.3%、15.8%、6.7%、0.5%、0.5%。

2.2 山羊球蟲(chóng)種類(lèi)及孢子化卵囊形態(tài)特征 本次調(diào)查檢測(cè)到的山羊球蟲(chóng)種類(lèi)及孢子化卵囊形態(tài)特征描述如下(圖1)：(1)約奇艾美耳球蟲(chóng)(E.jolchijevi)：卵囊大小31.4(27.7～41.6)μm×22.3(18.4～28.6)μm，呈壺形或罐狀，有極帽且極帽稍平，近極帽端較寬，有卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊橢圓形，大小14.3(11.7～16.9)μm×7.7(6.1～10.4)μm，有斯氏體，有孢子囊殘?bào)w；(2)家山羊艾美耳球蟲(chóng)(E.hirci)：卵囊大小26.1(19.2～30.2)μm×19.1(15.4～20.8)μm，寬橢圓形，或近似球形，卵囊壁光滑，有極帽，有卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊寬橢圓形，大小11.2(9.0～13.1)μm×7.7(6.2～9.3)μm，有斯氏體，有孢子囊殘?bào)w；(3)阿氏艾美耳球蟲(chóng)(E.arloingi)：卵囊大小30.5(25.6～38.7)μm× 21.3(17.9～26.0)μm，橢圓形，兩邊相對(duì)平直，卵囊壁光滑，有極帽，有卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊長(zhǎng)橢圓形，大小14.8(13.0～17.9)μm×7.5(5.6～8.2)μm，無(wú)斯氏體，有孢子囊殘?bào)w；(4)克氏艾美耳球蟲(chóng)(E.christenseni)：卵囊大小40.9(36.4～46.1)μm×26.1(24.3～28.6)μm,卵圓形，卵囊壁光滑，有極帽，有卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊寬橢圓形，大小15.3(13.5～17.4)μm×9.7(8.2～10.9)μm，斯氏體不明顯，有孢子囊殘?bào)w；(5)阿普艾美耳球蟲(chóng)(E.apsheronica)：卵囊大小33.4(22.9～38.4)μm× 24.8(22.5～28.2)μm，尖卵圓形，卵囊外壁較厚，無(wú)極帽，有卵膜孔，且卵膜孔內(nèi)陷成一個(gè)小孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊卵圓形，大小14.5(12.8～17.9)μm×8.4(7.7～10.2)μm，斯氏體不明顯，有孢子囊殘?bào)w；(6)羊艾美耳球蟲(chóng)(E.caprovina)：卵囊大小32.8(26.1～41.1)μm×26.4(20.5～38.8)μm，短橢圓形或近似球形，卵囊壁光滑，無(wú)極帽，有卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊長(zhǎng)橢圓形，大小15.3(12.8～17.7)μm×8.2(7.2～10.4)μm,有斯氏體，有孢子囊殘?bào)w；(7)斑點(diǎn)艾美耳球蟲(chóng)(E.punctata)：卵囊大小30.2(25.6～35.8)μm×22.3(17.9～25.6)μm，卵囊呈橢圓形、近似球形或卵圓形，卵囊壁粗糙，呈波浪狀，有極帽，有卵膜孔，有卵囊殘?bào)w，孢子囊呈梨形，大小12.1(10.2～15.4)μm×6.9(5.1～8.2)μm，有斯氏體，有卵囊殘?bào)w；(8)山羊艾美耳球蟲(chóng)(E.caprina)：卵囊大小37.0(28.1～42.9)μm×25.3(20.5～28.6)μm，橢圓形，卵囊壁光滑，無(wú)極帽，有卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊長(zhǎng)橢圓形，大小15.8(11.7～18.2)μm×9.0(6.4～10.4)μm，有斯氏體，有孢子囊殘?bào)w；(9)柯察艾美耳球蟲(chóng)(E.kocharli)：卵囊大小51.5(43.5～57.4)μm×38.5(30.2～44.2)μm，橢圓形或卵圓形，卵囊表面有顆粒狀浮起，有橫紋，有極帽，有卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊長(zhǎng)橢圓形，大小20.3(17.4～27.3)μm×10.7(9.0～13.0)μm，有斯氏體，有孢子囊殘?bào)w；(10)妮氏艾美耳球蟲(chóng)(E.ninakohlyakimovae)：卵囊大小24.9(20.5～29.4)μm×19.7(15.4～25.6)μm，卵圓形，卵囊壁光滑，無(wú)極帽，有卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊橢圓形，大小12.9(10.2～15.4)μm×7.6(6.4～9.1)μm，有斯氏體，有卵囊殘?bào)w；(11)艾麗艾美耳球蟲(chóng)(E.alijevi)：卵囊大小17.8(15.4～21.1)μm× 15.7(12.8～19.5)μm，球形或近似球形，卵囊壁光滑，無(wú)極帽，無(wú)卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊卵圓形，大小9.5(7.7～11.7)μm×5.3(4.2～6.5)μm，斯氏體不明顯，有孢子囊殘?bào)w；(12)蒼白艾美耳球蟲(chóng)(E.pallida)：卵囊大小18.2(14.3～22.5)μm×13.2(12.2～15.4)μm，長(zhǎng)橢圓形，卵囊壁光滑，無(wú)極帽，無(wú)卵膜孔，無(wú)卵囊殘?bào)w，孢子囊長(zhǎng)橢圓形，大小7.5(5.0～9.1)μm×4.8(3.1～6.4)μm，無(wú)斯氏體，無(wú)孢子囊殘?bào)w。

圖1 山羊孢子化艾美耳球蟲(chóng)卵囊圖A：約奇艾美耳球蟲(chóng) B：家山羊艾美耳球蟲(chóng) C：阿氏艾美耳球蟲(chóng) D：克氏艾美耳球蟲(chóng) E：阿普艾美耳球蟲(chóng) F：羊艾美耳球蟲(chóng) G：斑點(diǎn)艾美耳球蟲(chóng) H：山羊艾美耳球蟲(chóng) I：柯察艾美耳球蟲(chóng) J：妮氏艾美耳球蟲(chóng) K：艾麗艾美耳球蟲(chóng) L：蒼白艾美耳球蟲(chóng)

2.3 鑒別山羊球蟲(chóng)檢索表 山羊球蟲(chóng)種類(lèi)較多，結(jié)構(gòu)上較為相似，但不同種類(lèi)形態(tài)上有差異，依據(jù)國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)[3-4]和本次檢測(cè)到的球蟲(chóng)種類(lèi)，制訂了山羊艾美耳球蟲(chóng)檢索表(表1)，為其他學(xué)者在鑒定種類(lèi)時(shí)提供參考。

3 討論

本次對(duì)謝通門(mén)縣區(qū)域山羊球蟲(chóng)感染情況調(diào)查，結(jié)果顯示球蟲(chóng)的感染率較為普遍(81.2%，211/260)。和夏晨陽(yáng)[5]7月份對(duì)青藏高原尼木縣放牧山羊的調(diào)查(86.7%，1 040/1 200)、韓瓊瓊[6]在云南、貴州等高山地區(qū)對(duì)肉用山羊球蟲(chóng)的調(diào)查(88.0%，243/276)的結(jié)果相一致，朱丹[7]在河南(95.6%，807/844)和Penzhorn[8]在美國(guó)(97.2%，599/616)的結(jié)果都高于本調(diào)查，這可能因?yàn)楦呱降貐^(qū)較平原溫度低，氣候不適于卵囊的生長(zhǎng)發(fā)育。但是遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于閻曉菲[9]在新疆(71.4%，893/1 251)和Cai[10]對(duì)寧夏地區(qū)放牧山羊(86.7%，26/30)的報(bào)道，可能與空氣的濕度對(duì)卵囊的感染傳播有影響。

自Marotel第一次描述山羊的球蟲(chóng)，到如今被描述的山羊球蟲(chóng)多達(dá)20種，但其中一些種類(lèi)被重復(fù)描述，且部分種類(lèi)是在綿羊體內(nèi)發(fā)現(xiàn)而當(dāng)作山羊感染的種類(lèi)[3]。一些科學(xué)家在山羊和綿羊間進(jìn)行了球蟲(chóng)的交叉感染[11-12]，以期證明山羊和綿羊可以同時(shí)感染相同種類(lèi)的球蟲(chóng)，但都未得到預(yù)期結(jié)果。綜合國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為感染山羊球蟲(chóng)有13種[3-4,9]。

本次在謝通門(mén)縣地區(qū)共發(fā)現(xiàn)12種山羊艾美耳球蟲(chóng)，其中斑點(diǎn)、柯察、蒼白艾美耳球蟲(chóng)在西藏地區(qū)首次報(bào)道，國(guó)內(nèi)其他地區(qū)也有檢測(cè)記錄[5-6,10]。據(jù)Andrews[13]統(tǒng)計(jì)，現(xiàn)有的艾美耳球蟲(chóng)中，阿氏、克氏、家山羊、山羊、妮氏、艾麗艾美耳球蟲(chóng)是在山羊體內(nèi)發(fā)現(xiàn)最多的蟲(chóng)種。本次調(diào)查中艾麗和蒼白艾美耳球蟲(chóng)為本試驗(yàn)中的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種，李夢(mèng)婕[14]對(duì)堯山白山羊的調(diào)查阿氏、克氏、艾麗艾美耳球蟲(chóng)為優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種，涂宜強(qiáng)[15]報(bào)道的陜西大耳山羊優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種為阿氏、雅氏及艾氏艾美耳球蟲(chóng)。夏晨陽(yáng)[5]在西藏對(duì)放牧山羊球蟲(chóng)的調(diào)查艾麗、阿氏、山羊、雅氏、約奇、羊艾美耳球蟲(chóng)為優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種。不同地區(qū)的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種不同，可能與地區(qū)的差異、生活環(huán)境因素和山羊品種有關(guān)，有待進(jìn)一步的研究。

表1山羊艾美耳球蟲(chóng)檢索表

檢索特征檢索特征或檢索結(jié)果1無(wú)極帽(妮氏、山羊、艾麗、羊、阿普、蒼白)2 有極帽(約奇、家山羊、阿氏、克氏、斑點(diǎn)、柯察)52卵膜孔不明顯，或無(wú)，卵囊球形到橢圓形，小型體積(艾麗、蒼白)3 有卵膜孔卵膜孔不凹陷(山羊、羊、妮氏)4 有卵膜孔且卵膜孔呈小凹陷阿普3卵囊呈球形或近似球形艾麗 卵囊呈橢圓形蒼白4卵囊卵圓形，中小型體積(20～29．4)μm×(15．4～25．6)μm妮氏 卵囊橢圓形，孢子囊長(zhǎng)橢圓形，大型體積山羊 卵囊短橢圓形或近似球形，大型體積羊5卵囊壁光滑6 卵囊壁粗糙76卵囊橢圓形，兩側(cè)相對(duì)平直阿氏 卵囊呈罐狀約奇 卵囊寬橢圓形或近似球形，孢子囊寬橢圓形，中小型體積(19．2～30．2)μm×(15．4～20．8)μm家山羊 卵囊卵圓形，孢子囊寬卵圓形，大型體積(36．4～46．1)μm×(24．3～28．6)μm克氏7卵囊壁呈波浪花紋狀，有卵囊殘?bào)w，中型體積(25．6～35．8)μm×(17．9～25．6)μm斑點(diǎn) 卵囊表面有粒狀浮起，有橫紋，無(wú)卵囊殘?bào)w，大型體積(43．5～57．4)μm×(30．2～44．2)μm柯察

本次調(diào)查球蟲(chóng)在山羊體內(nèi)主要呈現(xiàn)混合感染(61.7%，129/209)，混合感染2～7種蟲(chóng)種，和國(guó)內(nèi)外其他學(xué)者調(diào)查基本一致，但是在目前的研究中涉及的混合感染的蟲(chóng)種的平均數(shù)量小于Skirnisson[16]所報(bào)道的每個(gè)樣品平均感染7.4種。球蟲(chóng)的混合感染也被認(rèn)為是引起山羊球蟲(chóng)病的一個(gè)重要因素。山羊感染球蟲(chóng)病時(shí)會(huì)出現(xiàn)腹瀉，甚至死亡。有研究表明，球蟲(chóng)病引起的腹瀉可能是引起羊死亡的第二大病因[17]。并且球蟲(chóng)病會(huì)伴發(fā)感染蠕蟲(chóng)病、 肺炎、 疥癬等疾病，如果不及時(shí)治療，會(huì)導(dǎo)致山羊的死亡率增加。

綜上所述，西藏謝通門(mén)縣地區(qū)山羊球蟲(chóng)的感染率和混合感染率均較高，且感染蟲(chóng)種較多。本次調(diào)查在高原地區(qū)首次發(fā)現(xiàn)了斑點(diǎn)、柯察、蒼白艾美耳球蟲(chóng)，更為重要的是山羊球蟲(chóng)檢索表的制定為今后其他學(xué)者進(jìn)行羊球蟲(chóng)病的防控提供了重要參考。

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InvestigationofCoccidialInfectionandSpeciesinGoatsinXaitongmoin,Tibet

CHANG Yan-kai1, WU Ya-yun1, ZHENG Shuang-jian1, WANG Lu1, LI Dong-fang1, LI Jia-kui2,3, ZHANG Long-xian1, ZHANG Hui-zheng4, ZHANG Su-mei1

(1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;2.College of Animal Science, Tibetan Agricultural and Animal Husbandry College, Linzhi 860000,China;3. College of Veterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;4. Fudian Branch Institute of Ruyang Animal Health Inspection Institute, Ruyang 471200, China)

In order to understand the infection situation of goat coccidiosis in Xaitongmoin County of Tibet, 260 goats fecal samples were examined by the sheather floatation method and theEimeriaspecies were identified based on morphological features and size of the sporulated oocysts. Results showed that the prevalence ofEimeriain goats was 81.15% (211/260), and theEimeriaalijeviandEimeriapallidawere the dominant species in 12 identified species in this study, with 52.7% (137/260) and 50.8% (132/260) infection rates and concurrent infection rate 61.7% (129/209)simultaneously.E.punctate,E.kocharli, andE.pallidawere first discovered in Tibet. A retrieval table ofEimeriaspp. in goats was established to identify the species according to the characteristics of sporulated oocysts under microscopy. From above all, effective measures should be taken to control the coccidial infection in Tibet.

Coccidial infection ; Species ; Tibet ; Goats

ZHANG Su-mei

S858.27

A

0529-6005(2017)09-0009-04

2017-02-27

國(guó)家現(xiàn)代肉羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)資金項(xiàng)目(NYCYTX-39)；國(guó)家現(xiàn)代肉牛牦牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)資金項(xiàng)目(CARS-38)

常艷凱(1992-)，男，碩士生，研究方向?yàn)槿双F共患寄生蟲(chóng)病學(xué)，E-mail:changyankai369@163.com

張素梅，E-mail：zhsumei2815@163.com