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      對單克隆抗體制備技術及應用研究進展的認識

      2017-11-01 13:42:18於瑞敏陳贏
      保健文匯 2017年12期
      關鍵詞:核糖體噬菌體單克隆

      ● 於瑞敏 陳贏

      對單克隆抗體制備技術及應用研究進展的認識

      ● 於瑞敏 陳贏

      單克隆抗體是現(xiàn)代生命科學研究的重要內(nèi)容,本文對單克隆抗體的類別進行了簡單分析,并且明確指出了現(xiàn)階段應用的多種單克隆抗體制備技術,同時,也對單克隆抗體制備技術的應用研究進展進行了一定的介紹,希望能夠為我國生命科學研究事業(yè)的發(fā)展提供一定的理論支持。

      單克隆抗體;制備技術;應用研究

      在分子生物學及細胞生物學發(fā)展的影響下,單克隆抗體技術逐漸被應用在多個領域。單克隆抗體就是用特定的培養(yǎng)基篩選出既能穩(wěn)定生長又能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細胞,經(jīng)過多年的研究,相關科研人員已經(jīng)意識到單克隆抗體技術對于科研發(fā)展的重要性,所以,我國加強了對單克隆抗體制備技術的重視,不斷提高單克隆抗體制備技術水平。

      1 單克隆抗體的類別

      1.1 人源化抗體

      抗體的人源化改造主要是對抗體進行表面重塑或者重新構(gòu)造,其中,表面塑造是指對鼠源抗體特殊區(qū)域表面的氨基酸進行重新塑造,這種方式具有一定的局限性,這只適合在與人抗體具有明顯差異的表面氨基酸,利用與人抗體相似的氨基酸殘基對其進行替換,從而提高抗體與抗原的特異性結(jié)合;重構(gòu)抗體,是目前應用最常見的基本方法,其中的互補決定區(qū)移植抗體是通過對鼠源抗體上的互補決定區(qū),經(jīng)過分子克隆后,克隆到人體抗體與之相對應的區(qū)域內(nèi),但這種方法仍會存在非人源基因的少量殘留,仍存在因其人體免疫排斥的可能[1]。

      1.2 嵌合單克隆抗體

      圖1 小鼠單克隆抗體制備

      自從單克隆抗體技術出現(xiàn)以來,單抗制備技術的一般流程就是從具有抗原免疫的小鼠中獲取它的脾細胞,再將其與骨髓瘤細胞進行融合處理,最后對單個細胞進行克隆,從而培養(yǎng)出既能分泌抗體又能穩(wěn)定生長的克隆細胞(如圖1)。首先,免疫細胞表面F鍛受體親和力弱,產(chǎn)生的抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用較弱,而且它與人補體成分結(jié)合能力低,對腫瘤細胞的殺傷能力較弱,并且鼠源性抗體在人血循環(huán)中的半衰期短,它發(fā)揮細胞毒作用的時間較短;其次,鼠單克隆抗體具有自身的免疫原性,這極易導致宿主發(fā)生過敏反應,這樣不僅會影響單抗的效價,而且會嚴重影響病人的身體狀況,所以,為了更好的應用于臨床治療,相關人員還需要對鼠源單克隆抗體做進一步的完善。

      2 單克隆抗體制備技術

      2.1 噬菌體抗體庫技術

      噬菌體抗體庫技術主要是促進基因表達產(chǎn)物與親和選擇相結(jié)合的一種技術,它的實施載體是被改造的噬菌體,在噬菌體外殼蛋白質(zhì)基因區(qū)域插入待選基因片段,這就使得蛋白質(zhì)或者外源多肽的表達產(chǎn)物呈現(xiàn)在噬菌體的表面,進而通過親和富集法表達有特異膚或蛋白質(zhì)的噬菌體,該技術實現(xiàn)了基因型和表型的轉(zhuǎn)換。利用這種方式,促使一個具有上億個體外方式獲得的不同抗體基因數(shù)據(jù)庫的形成,使從真實的抗原中迅速分離高度相似的同族抗體成為可能,得到的抗體可用于制備完全人源化抗體。

      2.2 核糖體展示技術

      核糖體展示技術的基本原理就是利用PCR技術對目的基因進行擴增,使其形成DNA文庫,同時,將啟動子、核糖體結(jié)合位點等加入其中,并且將它們放置在具有藕聯(lián)轉(zhuǎn)錄翻譯的無細胞翻譯系統(tǒng)中進行發(fā)育,在核糖體表面上承載目的基因的翻譯產(chǎn)物,并且形成mRNA—蛋白質(zhì)—核糖體的三元復合體,最后通過常規(guī)的免疫學檢測方法,通過固相化的靶分子直接從三元復合體中篩選出感興趣的核糖體復合體,再利用RTPLR擴增,經(jīng)過多次循環(huán)過程,最終篩選出高親和力的目標分子[2]。

      3 單克隆抗體制備技術的應用前景

      3.1 應用于疾病的檢測

      單克隆抗體可以對病原體類型進行準確識別,并且針對感染性疾病能夠進行精確判斷。同時,單克隆抗體還可以通過檢測淋巴細胞表面分子,并且能夠判斷出淋巴細胞的分化階段。其中,激素類單克隆抗體能夠測定人體內(nèi)的激素含量,并且利用該信息可以對體內(nèi)的內(nèi)分泌情況進行判斷。

      3.2 應用于疾病的臨床治療

      單克隆抗體可以針對多種疾病進行治療,其中對腫瘤臨床治療具有明顯的效果。單克隆抗體治療腫瘤的方式主要有生物導彈和純抗體兩種,現(xiàn)階段已有幾十種特異性單克隆抗體應用于臨床治療,推動了腫瘤治療技術的發(fā)展。

      3.3 均應用于疾病的預防

      人體免疫主要由自身主動免疫及特異性免疫等構(gòu)成,特異性免疫屬于被動免疫,在抗原侵入人體后,在人體內(nèi)部加入抗體,對病原體進行中和及清除,從而實現(xiàn)對疾病的預防。主動免疫是指在對病原體進行減毒化操作后,將其接種到人體內(nèi),使人體產(chǎn)生一定的免疫,促使體內(nèi)的抗體對其產(chǎn)生相應的記憶,比如,對人體接種卡介苗等。雖然這兩種免疫方式有所不同,但是,它們都可以利用單克隆抗體技術進行免疫。

      4 結(jié)束語

      本文通過對單克隆抗體的類別、單克隆抗體制備技術、單克隆抗體制備技術應用前景的研究分析,明確了單克隆抗體制備技術對于我國科學研究事業(yè)發(fā)展的重要作用。單克隆抗體制備技術的應用研究主要體現(xiàn)在用于疾病的檢測、治療及預防等方面,這充分的體現(xiàn)出了單克隆抗體制備技術不僅關乎科學事業(yè)的發(fā)展,而且還關系到人類的健康水平,所以,加強對單克隆抗體制備技術的研究具有重要的現(xiàn)實意義。

      (作者單位:基蛋生物科技股份有限公司)

      [1]郭粉粉,梁文波,張學梅.單克隆抗體制備技術及應用的研究進展[J].醫(yī)學綜述,2011,08:1129-1131.

      [2]張力文.單克隆抗體制備技術的類別與應用[J].科技風 ,2017,03:256.

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