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    NaCl對(duì)喀斯特山區(qū)野生燕麥種子萌發(fā)的影響

    2017-10-27 12:01:29蹇黎秦小軍
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年16期
    關(guān)鍵詞:發(fā)芽勢(shì)發(fā)芽率

    蹇黎 秦小軍

    摘要:為了解喀斯特山區(qū)野生燕麥種子對(duì)鹽脅迫耐性的遺傳機(jī)制,利用不同濃度NaCl對(duì)喀斯特山區(qū)野生燕麥種子進(jìn)行萌發(fā)處理。結(jié)果表明,在不同溫度和NaCl濃度脅迫下,野生燕麥種子萌發(fā)受到明顯抑制,鹽濃度小于 150 mmol/L 時(shí),20 ℃ 培養(yǎng)的野生燕麥種子萌發(fā)受到鹽脅迫程度小于25 ℃;隨鹽濃度增加,野生燕麥種子萌發(fā)特性(發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、活力指數(shù))均有所下降;野生燕麥種子的耐鹽臨界度為50 mmol/L,極限耐鹽度為200 mmol/L。

    關(guān)鍵詞:NaCl;野生燕麥;發(fā)芽率;發(fā)芽勢(shì);活力指數(shù);喀斯特山區(qū)

    中圖分類號(hào): S512601文獻(xiàn)標(biāo)志碼:

    文章編號(hào):1002-1302(2017)16-0076-02

    收稿日期:2016-04-15

    基金項(xiàng)目:貴州省科學(xué)技術(shù)基金( 編號(hào):黔科合J字[2012]2012號(hào));畢節(jié)學(xué)院科學(xué)研究基金(編號(hào):院科合字G2012011號(hào))。

    作者簡(jiǎn)介:蹇黎(1978—),女,四川廣元人,博士,副教授,主要從事植物分子育種研究。E-mail:zggyjl@163com。

    燕麥(Avena sativa L)是一年生糧飼兼用禾本科作物,具有很高的營(yíng)養(yǎng)、藥用價(jià)值以及作為飼料帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,播種面積及產(chǎn)量?jī)H次于水稻、小麥、大麥、玉米和高粱[1-3]。生長(zhǎng)在地表干旱、土層淺薄、自然災(zāi)害頻發(fā)、石漠化程度高等生態(tài)環(huán)境惡劣的喀斯特山區(qū)的野生燕麥種質(zhì)資源,具有一套自我生長(zhǎng)繁殖的遺傳調(diào)控機(jī)制體系,蘊(yùn)藏著多種耐逆境脅迫相關(guān)的特異基因資源,是我國(guó)珍稀的野生物種資源。通過(guò)對(duì)喀斯特山區(qū)野生燕麥種質(zhì)資源抗逆相關(guān)基因的鑒定和分析,以改善關(guān)聯(lián)植物的環(huán)境適應(yīng)能力,也為燕麥新品種的選擇培育提供抗逆性強(qiáng)的優(yōu)異種質(zhì)資源。更為重要的是,可以構(gòu)建喀斯特山區(qū)野生燕麥種質(zhì)資源抗逆特異基因的鑒定和優(yōu)異蛋白質(zhì)表達(dá)的技術(shù)平臺(tái),以此為提高我國(guó)麥類相關(guān)作物的抗性效果和育種水準(zhǔn)奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

    目前,除了部分學(xué)者對(duì)野生燕麥與小黑麥、節(jié)節(jié)麥、野生二粒小麥、一粒小麥進(jìn)行了雜交育種,美國(guó)農(nóng)業(yè)部科學(xué)家從野生燕麥種質(zhì)資源中提取出抗銹?。╟rownrust)基因外,對(duì)野生燕麥種質(zhì)資源的抗旱、耐鹽、耐堿等多種抗環(huán)境脅迫基因的研究還較少[4-6]。因此,本研究擬利用不同濃度NaCl溶液對(duì)喀斯特山區(qū)野生燕麥種子進(jìn)行處理,對(duì)野生燕麥種子鹽脅迫的耐性生理作用機(jī)制進(jìn)行分析,以期為野生燕麥種質(zhì)資源的耐環(huán)境脅迫特異基因的深入研究和利用提供理論依據(jù)。

    1材料與方法

    11材料

    試驗(yàn)材料均采自貴州省16個(gè)不同的喀斯特山區(qū),采集高度為海拔700~1 900 m,每個(gè)樣本植株都具備生長(zhǎng)態(tài)勢(shì)好、抗性強(qiáng)、籽粒大而飽滿等多種優(yōu)良性狀。

    12方法

    121種子處理

    對(duì)野生燕麥種子進(jìn)行次氯酸鈣消毒后,選優(yōu)質(zhì)飽滿種子18份,每份300粒(3次重復(fù))。其中1組為對(duì)照(蒸餾水培養(yǎng))。

    122脅迫處理

    在鋪有濾紙的培養(yǎng)皿上放100粒優(yōu)質(zhì)野生燕麥種子,然后按設(shè)置的NaCl濃度梯度(0、25、50、75、100、125、150、175、200 mmol/L)分別在20、25 ℃條件下進(jìn)行培養(yǎng),第1次加入溶液量是以種子吸脹飽和為準(zhǔn)。在培養(yǎng)過(guò)程中,每天保持濾紙濕潤(rùn)。試驗(yàn)重復(fù)3次。

    123脅迫指標(biāo)測(cè)定

    芽長(zhǎng)達(dá)02 cm為萌芽標(biāo)志。

    發(fā)芽勢(shì)=7 d的發(fā)芽種子總數(shù)/種子播種總粒數(shù)×100%;

    發(fā)芽率=14 d的種子發(fā)芽粒數(shù)/種子播種總粒數(shù)×100%;

    活力指數(shù)(VI)=GI×S[S為胚根的平均長(zhǎng)度;GI= Gt/Dt(Gt為t d種子發(fā)芽數(shù),Dt為相應(yīng)種子發(fā)芽的天數(shù))];

    苗高和根長(zhǎng)測(cè)定:發(fā)芽試驗(yàn)結(jié)束后,在每個(gè)處理的3次重復(fù)中隨機(jī)抽取30株進(jìn)行測(cè)定;

    鹽害指數(shù)=(對(duì)照發(fā)芽率-鹽處理發(fā)芽率)/對(duì)照發(fā)芽率×100%;

    耐鹽極限值:種子在最適溫度條件下,發(fā)芽率為0時(shí)的NaCl濃度。

    124數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

    數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析采用Excel和SPSS 190軟件。

    2結(jié)果與分析

    21不同濃度NaCl溶液對(duì)野生燕麥種子發(fā)芽勢(shì)的影響[HT]

    不同濃度NaCl溶液處理對(duì)野生燕麥種子發(fā)芽勢(shì)影響不相同。從圖1可以看出,低濃度鹽會(huì)對(duì)種子萌發(fā)產(chǎn)生促進(jìn)作用,當(dāng)鹽濃度達(dá)到一定程度后發(fā)芽勢(shì)會(huì)隨著鹽濃度的增加而降低。20 ℃條件下,低于100 mmol/L鹽濃度處理的野生燕麥種子的發(fā)芽勢(shì)略高于對(duì)照組;當(dāng)鹽濃度達(dá)到100 mmol/L及以上時(shí),其種子的發(fā)芽勢(shì)會(huì)隨著濃度的增加而下降。即20 ℃時(shí)鹽濃度小于100 mmol/L處理種子會(huì)對(duì)種子萌發(fā)有促進(jìn)作用,鹽濃度大于等于100 mmol/L處理種子會(huì)對(duì)萌發(fā)有抑制作用;當(dāng)濃度為200 mmol/L時(shí),對(duì)種子發(fā)芽勢(shì)產(chǎn)生完全抑制。25 ℃條件下,除鹽濃度為25 mmol/L時(shí)對(duì)種子萌發(fā)產(chǎn)生促進(jìn)作用外,其余濃度均對(duì)野生燕麥種子萌發(fā)有抑制作用,當(dāng)鹽濃度為175、200 mmol/L 時(shí),其發(fā)芽勢(shì)為0,產(chǎn)生完全抑制。不同溫度條件下的發(fā)芽勢(shì)相比較而言,25 ℃條件下鹽濃度對(duì)野生燕麥種子的萌發(fā)產(chǎn)生的抑制作用明顯高于20 ℃下。

    22不同濃度NaCl溶液對(duì)野生燕麥種子發(fā)芽率的影響

    相同溫度不同鹽濃度、不同溫度相同鹽濃度條件下,喀斯特山區(qū)野生燕麥種子的發(fā)芽率均不相同。從圖2可以看出,鹽濃度和種子發(fā)芽率呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,即隨著鹽濃度的增加,種子的發(fā)芽率呈下降趨勢(shì)。不同溫度條件下,鹽濃度對(duì)野生燕麥種子的抑制也不相同,脅迫程度為25 ℃>20 ℃。在 175 mmol/L(25 ℃)、200 mmol/L(20、25 ℃)條件下,種子的發(fā)芽率受到完全抑制。在低鹽脅迫下,發(fā)芽率下降幅相對(duì)小于高鹽脅迫,即種子的發(fā)芽率在高鹽脅迫時(shí)呈快速減小趨勢(shì)。

    23不同濃度NaCl溶液對(duì)野生燕麥種子活力指數(shù)的影響[HT]

    不同溫度相同鹽濃度以及相同溫度不同濃度NaCl溶液條件下野生燕麥種子的活力指數(shù)也不相同。從圖3可以看出,野生燕麥種子在不同溫度和鹽脅迫下其活力指數(shù)均比對(duì)照低,隨著鹽濃度的增加種子的活力指數(shù)降低,當(dāng)鹽濃度達(dá)到一定量時(shí),種子萌發(fā)失去活力,指數(shù)為0。相同鹽濃度在不同溫度條件下,對(duì)種子萌發(fā)的脅迫程度也不盡相同,當(dāng)種子萌發(fā)到14 d,鹽濃度達(dá)到200 mmol/L(20、25 ℃)、175 mmol/L(25 ℃)時(shí),野生燕麥種子均未萌發(fā),其活力指數(shù)為0。由此可以看出,野生燕麥種子萌發(fā)的活力耐鹽性與溫度之間也存在密切關(guān)系,即種子在20 ℃時(shí)耐鹽性略高于25 ℃時(shí)。

    24鹽害指數(shù)的測(cè)定

    種子萌發(fā)時(shí)受鹽脅迫的程度可以通過(guò)種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽時(shí)間等指標(biāo)進(jìn)行衡定。從圖4可知,隨著鹽濃度的增加,種子萌發(fā)時(shí)受到的鹽害指數(shù)也會(huì)上升,當(dāng)鹽濃度為 200 mmol/L(20、25 ℃)、175 mmol/L(25 ℃)時(shí),種子的鹽害指數(shù)達(dá)到100%。在20 ℃條件下,當(dāng)鹽濃度達(dá)到 100 mmol/L 時(shí),其脅迫指數(shù)超過(guò)50%;而在25 ℃條件下,除鹽濃度 25 mmol/L 外, 其余處理鹽濃度下的鹽害指數(shù)均達(dá)到70%以

    上。由此可知,野生燕麥種子萌發(fā)的極限耐鹽度為 200 mmol/L、耐鹽臨界度為50 mmol/L。

    25不同濃度NaCl溶液對(duì)野生燕麥苗高和根長(zhǎng)的影響[HT]

    種子萌發(fā)14 d時(shí)測(cè)定幼苗的生長(zhǎng)情況(圖5)可知,野生燕麥的生長(zhǎng)均不同程度受到鹽害的影響。與對(duì)照相比,20 ℃、鹽濃度為25 mmol/L時(shí),苗高只有對(duì)照的一半;20 ℃條件下,除鹽濃度75、100 mmol/L之[JP3]間苗高等高(77 mm)外,其余鹽濃度下培養(yǎng)的野生燕麥種子的高度之間存在明顯的差異。

    3結(jié)論與討論

    種子的萌發(fā)是指相對(duì)靜止的種胚開始進(jìn)行一系列生理生化和形態(tài)生長(zhǎng)活動(dòng)。在這期間,種子的萌發(fā)不但會(huì)受到外界環(huán)境的影響,也會(huì)受到自身內(nèi)在因素的影響。而鹽堿脅迫是影響植物生長(zhǎng)發(fā)育、降低植物活性及產(chǎn)量品質(zhì)的主要逆境因素之一。大量的研究表明,鹽脅迫會(huì)破壞種子細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能,致使其代謝紊亂,大大降低種子萌發(fā)的活力甚至喪失萌發(fā)的能力。有關(guān)鹽脅迫的影響在高粱、小麥、火龍果等上已做了相關(guān)研究, 表明不同植物間的耐鹽脅迫程度也不盡相

    同,包括一些鹽生植物的種子耐鹽度也不例外[7-9]。在不同鹽濃度脅迫中,可以根據(jù)種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)來(lái)鑒定該種子的耐鹽程度。

    本研究中,不同溫度和鹽濃度條件下,種子的萌發(fā)受到影響的程度也不相同,且鹽濃度和種子萌發(fā)之間存在負(fù)相關(guān)性,即隨著鹽濃度的增加,鹽脅迫程度加大,抑制作用也越顯著,種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、活力指數(shù)都在不斷地下降,當(dāng)鹽濃度上升到一定量時(shí),種子的萌發(fā)特性不能得到表達(dá)并受到完全抑制。相對(duì)而言,當(dāng)鹽濃度小于150 mmol/L時(shí),20 ℃培養(yǎng)的野生燕麥種子萌發(fā)受到鹽脅迫程度略小于 25 ℃。因此,也可以證實(shí)生長(zhǎng)繁殖在鹽堿含量高的喀斯特山區(qū)的野生燕麥自身具有一套適應(yīng)逆境的遺傳調(diào)控機(jī)制。

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