新疆維吾爾族人群幽門螺旋桿菌毒力CagA和VacA表達與胃癌的相關性

阿依努爾·阿合曼，美麗克扎提·安扎爾，李扎·居馬

(1.新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科，新疆 烏魯木齊 830001；2.烏魯木齊市新市區(qū)三公社區(qū)服務中心，新疆 烏魯木齊 830000)

新疆維吾爾族人群幽門螺旋桿菌毒力CagA和VacA表達與胃癌的相關性

阿依努爾·阿合曼1，美麗克扎提·安扎爾1，李扎·居馬2

(1.新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科，新疆 烏魯木齊 830001；2.烏魯木齊市新市區(qū)三公社區(qū)服務中心，新疆 烏魯木齊 830000)

目的 探討新疆維吾爾族人群幽門螺旋桿菌(H.pylori，Hp)毒力CagA和VacA表達與胃癌的相關性。方法 采用病例-對照研究方法選取2014年1月至2016年11月新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院病理學確診的新疆維吾爾族人群胃癌患者98例為病例組，同期確診為非腫瘤性胃病的維吾爾族患者298例為對照組。采用免疫印跡法檢測兩組患者血清Hp抗體水平及其毒力CagA和VacA表達情況。同時比較兩組患者的年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、吸煙史、飲酒史、腫瘤家史等。將有統(tǒng)計學意義的因素及Hp CagA和VacA表達進一步帶入Logistic回歸方程，篩選維吾爾族人群胃癌的高危因素，并探討Hp毒力CagA和VacA表達與胃癌相關性。結果 病例組患者Hp血清學陽性率為76.5%，對照組陽性率為72.1%，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；對照組患者中十二指腸潰瘍組、胃潰瘍組和淺表性胃炎組的Hp血清學陽性率分別為82.7%，85.1%和58.3%，淺表性胃炎組明顯低于胃潰瘍組和十二指腸潰瘍組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；病例組患者的CagA+、VacA+及CagA+與VacA+全陽性率分別為81.3%、84.0%和81.3%，明顯高于對照組的62.8%、61.9%和61.9%，且差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；單因素分析顯示，病例組與對照組在吸煙史、飲酒史、腫瘤家族史、常食用腌制食物和CagA+VacA+全陽性表達方面比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；Logistic回歸分析顯示，腫瘤家族史(OR=3.21，95%CI：1.69～5.22，P＜0.05)和CagA+VacA+全陽性表達(OR=2.12，95%CI：1.23～4.21,P＜0.05)為胃癌的獨立危險因素。結論 新疆維吾爾族胃癌患者Hp感染率較高，CagA+VacA+全陽性表達可能是胃癌的獨立危險因素。

新疆；維吾爾族；幽門螺旋桿菌；毒力；胃癌；危險因素

胃癌是消化系統(tǒng)常見惡性腫瘤，在許多發(fā)展中國家，胃癌是導致死亡的主要原因[1]。我國惡性腫瘤死亡率居全死因的第二位，其中胃癌占份額較大，在農(nóng)村胃癌死亡率居腫瘤死亡率的第一位[2]，我國新疆屬胃癌高發(fā)地區(qū)，多數(shù)患者出現(xiàn)癥狀就診時腫瘤往往已中晚期，手術和化療效果欠佳，如何預防胃癌的發(fā)生是控制胃癌死亡率的關健，尤其對其癌前疾病更需采取經(jīng)濟有效的干預措施，阻止其向腫瘤發(fā)展。已有研究顯示胃癌的發(fā)生是幽門螺桿菌(H.pylori，Hp)、宿主因素和環(huán)境因素共同作用的結果[3]。人群中Hp感染率為50%左右，而只有少數(shù)Hp感染者發(fā)展為消化性潰瘍甚至胃癌。造成這種情況的差異有兩個原因，一是Hp毒力的大小，二是人體的防御能力，而Hp毒力基因VacA和CagA起著重要作用。同時有研究認為特定菌型感染與胃癌存在相關性，且不同菌型感染在地區(qū)分布上存在一定的特點[4]。本研究旨在探討新疆維吾爾族人Hp毒力CagA和VacA表達與胃癌相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用病例-對照研究方法選取2014年1月至2016年11月在我院經(jīng)病理學確診的新疆維吾爾族人群胃癌患者98例為病例組，同期確診的維吾爾族非腫瘤性胃病患者298例為對照組。納入標準：(1)年齡≥18周歲；(2)病理學或胃鏡檢查明確診斷為胃癌或胃部其他疾病(十二指腸潰瘍、胃潰瘍或胃炎)；(3)患者或家屬簽署知情同意書。排除標準：(1)胃癌或胃部疾病診斷不明確者；(2)合并免疫系統(tǒng)疾病者；(3)HIV抗體陽性者；(4)懷孕期婦女。

1.2 方法

1.2.1 檢查方法 患者清晨空腹抽取外周靜脈血6 mL，低速離心(500 r/min)5 min分離血清并放置于-4℃冰箱中保存待檢。采用免疫印跡試劑盒進行Hp抗體檢測。由同一實驗室人員采用統(tǒng)一批次試劑盒對標本進行檢測，檢測步驟按試劑盒具體操作說明進行。結果判定128 ku及116 ku為CagA陽性；95 ku、91 ku和87ku為VacA陽性。

1.2.2 患者基線資料收集 根據(jù)事先制定的納入與排除標準由兩名研究者獨立對患者進行評估，評價患者是否應該納入，對于存在分歧的病例，兩名研究者討論后協(xié)商解決。記錄的患者臨床資料包括診斷(胃癌或者為非胃癌)；年齡、既往病史(糖尿病、高血壓、腫瘤家族史)生活史(吸煙、飲酒等)。兩名研究者對上述提取的臨床資料進行交叉核對后錄入數(shù)據(jù)庫。

1.2.3 研究質(zhì)控 (1)選擇性偏倚控制：為減少或避免患者入選過程中產(chǎn)生的納入偏倚，我們對兩名課題組成員進行納入與排除標準及記錄信息的培訓，用事先準備好的20分標準病例對兩名課題組成員進行訓練。(2)測量偏倚控制：應用統(tǒng)一的量表進行數(shù)據(jù)錄入，對不同病例間不同的診斷或評分標準進行換算；(3)混雜偏倚控制：首先應用單因素χ2檢驗篩選出可能與胃癌發(fā)生有關的因素，再將可疑因素帶入Logistic回歸方程，篩選胃癌獨立危險因素，對混雜因素加以去除。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用STATA10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析?；颊吣挲g等連續(xù)分布資料以均數(shù)±標準差(x-±s)表示，組間比較采用兩樣本均數(shù)t檢驗；計數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗。胃癌相關的危險因素采用多元Logistic回歸分析，以比值比OR為危險因素評價指標，OR值＞1為高危因素，OR值＜1為保護因素，篩選出相互獨立的胃癌相關危險因素并計算權重，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 Hp陽性率比較 病例組患者Hp血清學陽性率為76.5%(75/98)，對照組陽性率為72.1%(215/298)，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。對照組中十二指腸潰瘍組、胃潰瘍組和淺表性胃炎組的Hp血清學陽性率分別為82.7%(76/97)，85.1%(69/81)和58.3%(70/120)，淺表性胃炎組明顯低于胃潰瘍組和十二指腸潰瘍組，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

2.2 Hp毒力CagA和VacA比較 病例組患者CagA+、VacA+及CagA+與VacA+全陽性率分別為81.3%、84.0%和81.3%，明顯高于對照組的62.8%、61.9%和61.9%，且差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；而對照組中的十二指腸潰瘍組、胃潰瘍組和淺表性胃炎組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 各組患者CagA+、VacA+陽性表達率比較[例(%)]

2.3 胃癌可能相關因素 單因素分析顯示，病例組與對照組在吸煙史、飲酒史、腫瘤家族史、常食用腌制食物和CagA+VacA+全陽性表達方面比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表2。

2.4 Logistic回歸分析 將吸煙史、飲酒史、腫瘤家族史、常食用腌制食物和CagA+VacA+全陽性表達數(shù)帶入Logistic回歸方程，結果顯示腫瘤家族史(OR=3.21，95%CI：1.69-5.22，P＜0.05)和CagA+VacA+全陽性表達(OR=2.12，95%CI：1.23-4.21，P＜0.05)為胃癌的獨立危險因素，見圖1。

表2 兩組患者的一般情況比較[例(%)]

圖1 胃癌獨立危險因素森林圖

3 討論

新疆為一多民族聚集地區(qū)，各少數(shù)民族均有其不同的遺傳特點，生活方式及飲食特性。在少數(shù)民族中維吾爾族占較大比例，共有834.56萬人。新疆地區(qū)維吾爾族及漢族的胃癌與國內(nèi)外研究比較，有其自身的特點[5-6]：(1)維吾爾族胃癌的平均發(fā)病年齡及高發(fā)年齡組較漢族提前。(2)維吾爾族胃癌的發(fā)生部位以胃竇最多，胃底賁門次之，而漢族則為胃竇最多，胃體次。(3)維吾爾族胃癌的性別比例，男性顯著高于女性。男性惡性腫瘤以胃癌占第一位，占惡性腫瘤總數(shù)的19.24%。也是新疆地區(qū)腫瘤防治的重點。(4)新疆地區(qū)，哈薩克族人群胃癌死亡率最高[2]。

目前研究認為胃癌的發(fā)生是幽門螺桿菌(Hp)、宿主因素和環(huán)境因素共同作用的結果[7]。人群中Hp感染率為50%左右，而只有少數(shù)Hp感染者發(fā)展為消化性潰瘍甚至胃癌。感染Hp后是否發(fā)展為胃潰瘍甚至胃癌不僅與宿主自身免疫有關，同時也與Hp毒力水平有關。Hp為革蘭染色陰性菌，S形或弧形彎曲Hp桿菌具有粘附功能且能夠分泌毒性物質(zhì)，容易引發(fā)宿主胃黏膜病變包括胃黏膜萎縮、不典型增生、腸上皮化生，最后發(fā)生癌變。

相關的流行病學數(shù)據(jù)顯示，Hp感染率在地域和種族中間存在較大差異，且與該地區(qū)或國家的經(jīng)濟水平有關[8]。一般發(fā)達國家或發(fā)達地區(qū)Hp感染率較低，而欠發(fā)達國家或地區(qū)Hp感染率則相對較高。新疆是我國最邊遠的少數(shù)民族省區(qū)，經(jīng)濟水平相對東部沿海地區(qū)明顯落后，且生活飲食方式也存在較大差異。新疆少數(shù)民族人群胃癌等消化系統(tǒng)疾病發(fā)病率較高。但關于新疆少數(shù)民族群Hp毒力CagA和VacA表達與胃癌相關性研究報道較少。Hp毒力基因VacA和CagA起著重要作用[9-10]，按是否表達CagA和VacA將Hp分為兩型：Ⅰ型為產(chǎn)毒素菌株(CagA和VacA均表達，或有任一表達)，致病力強，易引起其胃部疾?。虎蛐蜑椴划a(chǎn)生細胞毒素的(CagA和VacA均不表達)，其毒性較弱，感染后一般無臨床癥狀。

本研究采用免疫印跡法，檢測胃胃癌患者與對照人群的血清中的各種Hp[11]抗體，包括CagA和VacA抗體與對照組的差異，探討Hp毒素與胃癌的關系，為胃癌的防治提供理論依據(jù)。研究結果顯示病例組患者Hp血清學陽性率顯著高于對照組，且病例組CagA+、VacA+、CagA+VacA+全陽性率顯著高于對照組，提示HP感染及其CagA+、VacA+抗體陽性在胃癌的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。Logistic回歸分析顯示腫瘤家族史(OR=3.21，95%CI：1.69～5.22，P＜0.05)和CagA+VacA+全陽性表達(OR=2.12，95%CI:1.23～4.21，P＜0.05)為胃癌的獨立危險因素。本研究認為新疆維吾爾族胃癌患者Hp感染率較高，CagA+VacA+陽性表達可能為胃癌的獨立危險因素。因此，新疆維吾爾族Hp感染患者尤其是CagA+、VacA+抗體陽性者為胃癌的高危人群，對此類人群應進行Hp根除治療，降低其向胃癌發(fā)展的風險，做到早防早治。

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Correlation of the expression of Helicobacter pylori CagA and VacA with gastric cancer risk in Xinjiang Uygur

population.Ayinuer·aheman1,Meilikezati·Anzaer1,Lizha·juma2.1.Department of Gastroenterology,People's Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region,Urumqi 830001,Xinjiang,CHINA;2.New Urban District Three Community Service Center of Urumqi,Urumqi 830000,Xinjiang,CHINA

Objective To explore the correlation of the expression of Helicobacter pylori CagA and VacA with gastric cancer risk in Xinjiang Uygur population.Methods This is a case-control study which recruited 98 cases of gastric cancer(the disease group)and 298 cases of non-cancer gastric diseases(the control group)from Jan.2014 to Nov.2016 in People's Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region.The serum CagA and VacA antibody in H.pylori(Hp)were tested by Western blotting.The clinical characteristics such as age,gender,BMI,smoking history,alcohol history carcinoma history of the two groups were recorded and compared.Logistic regression was used to select the independent risk factors for gastric cancer.And further evaluate the association of the expression of CagA and VacA with gastric cancer risk.Results The serum Hp positive rate were 76.5%in disease group versus 72.1%in the control group(P＞0.05).However,the serum Hp positive rate of the duodenal ulcer group,gastric ulcer group and superficial gastritis group in the desease group were 82.7%,85.1%,58.3%,respectively,and the superficial gastritis group was significant lower than that of the duodenal ulcer and gastric ulcer group(P＜0.05).The positive rate of CagA+,VacA+and both CagA+and VacA+were 81.3%,84.0%,81.3%,respectively in the disease group versus 62.8%,61.9%,61.9%in the control group(P＜0.05).Single factor analysis indicated that there were significant differences between the two groups in smoking history,alcohol history,often eating pickled food,tumor history and the positive expression of CagA+and VacA+(P＜0.05).Logistic regression analysis showed tumor history(OR=3.21,95%CI:1.69-5.22,P＜0.05)and the both positive expression of CagA+and VacA+(OR=2.12,95%CI:1.23-4.21,P＜0.05)were independent risk factors for gastric cancer in Xinjiang Uygur population.Conclusion Hp infection rate is higher in patients with gastric cancer in in Xinjiang Uygur population,and the positive expression of CagA+and VacA+may be an independent risk factor of gastric cancer.

Xinjiang;Uygur population;Helicobacter pylori(Hp);Virulence;Gastric cancer;Risk factors

R735.2

A

1003—6350（2017）19—3106—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.19.004

新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市科學技術計劃項目(編號：Y141310022)

阿依努爾·阿合曼。E-mail：ayneahm@163.com

2016-12-20)