• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    飼喂高精料日糧對(duì)奶牛泌乳及相關(guān)調(diào)節(jié)因子的影響

    2017-10-11 08:23:28謝正露李金鳳張德明王錦祥
    關(guān)鍵詞:精料泌乳瘤胃

    謝正露,李金鳳,張德明,王錦祥,桑 雷

    (1.福建農(nóng)林大學(xué)金山學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)系,福建福州 350002; 2.福建農(nóng)林大學(xué)金山學(xué)院沙縣祥云實(shí)踐教學(xué)基地,福建沙縣 365501; 3.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,福建福州 350002)

    飼喂高精料日糧對(duì)奶牛泌乳及相關(guān)調(diào)節(jié)因子的影響

    謝正露1,2*,李金鳳2,張德明2,王錦祥3,桑 雷3

    (1.福建農(nóng)林大學(xué)金山學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)系,福建福州 350002; 2.福建農(nóng)林大學(xué)金山學(xué)院沙縣祥云實(shí)踐教學(xué)基地,福建沙縣 365501; 3.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,福建福州 350002)

    為了解高精料日糧對(duì)泌乳奶牛乳產(chǎn)量的影響,選擇12只健康經(jīng)產(chǎn)奶牛,分別飼喂精粗比為40∶60(對(duì)照組)和60∶40(高精料組)的日糧,試驗(yàn)期12周,每周監(jiān)測(cè)乳產(chǎn)量。試驗(yàn)期間每周采集血液樣品用于測(cè)定外周血生長(zhǎng)激素(GH)和胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)含量;試驗(yàn)結(jié)束,采集瘤胃液置-70℃保存待測(cè),肝臟和乳腺組織于液氮速凍后置-70℃保存待測(cè)。結(jié)果表明,高精料日糧的飼喂顯著降低了瘤胃pH(P<0.05);奶牛外周血GH含量和IGF-1含量從第7周開(kāi)始顯著降低(P<0.05);肝臟組織中生長(zhǎng)激素受體(GHR)、蛋白質(zhì)酪氨酸激酶2(JAK2)、信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子5A(STAT5A)及信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子5B(STAT5B)mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)(P<0.05);乳腺組織中, 胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)(P<0.05)。結(jié)果提示,長(zhǎng)期飼喂高精料日糧會(huì)降低血液中GH和IGF-1含量,抑制GH-IGF-1軸的基因表達(dá)及關(guān)聯(lián)的JAK2-STAT5信號(hào)途徑的相關(guān)基因表達(dá),從而減少了乳產(chǎn)量。

    高精料日糧;GH/IGF-1軸;基因表達(dá);乳產(chǎn)量;奶牛

    奶牛泌乳功能是奶牛養(yǎng)殖的重要經(jīng)濟(jì)性狀,其中乳產(chǎn)量和乳品質(zhì)直接影響了奶牛養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。乳蛋白、乳脂肪和乳糖含量作為乳品質(zhì)評(píng)價(jià)的內(nèi)涵指標(biāo)受到體內(nèi)激素、生長(zhǎng)因子及多種基因所調(diào)控。研究發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)激素(growth hormone,GH)是體內(nèi)重要的內(nèi)分泌激素,調(diào)節(jié)機(jī)體脂解作用促進(jìn)骨生成、糖異生、乳腺發(fā)育及維持泌乳等[1-2]。研究表明,奶牛體內(nèi)GH與胰島素樣生長(zhǎng)因子(insulin-like growth factors-1,IGF-1)形成GH-IGF-1軸可有效調(diào)節(jié)泌乳反應(yīng),通過(guò)外源性提高GH含量可增加產(chǎn)乳,其腦垂體激素的濃度與奶牛泌乳量成正比關(guān)系,并且調(diào)節(jié)整個(gè)機(jī)體的物質(zhì)代謝[1-2]。

    外源性GH可以與牛的乳腺導(dǎo)管上皮的GH受體(growth hormone recepor,GHR)結(jié)合刺激牛乳腺上皮細(xì)胞大量增殖[3]。在反芻動(dòng)物中GH 可以直接影響乳腺的功能,注射GH可使反芻動(dòng)物產(chǎn)奶量顯著提高[4-5]。Etherton T D等[6]指出直接注射GH可以提高動(dòng)物的產(chǎn)奶量。應(yīng)用外源bGH補(bǔ)給奶牛,發(fā)現(xiàn)在泌乳早期GH水平升高和胰島素水平下降,同時(shí)抑制脂肪組織合成脂肪,加強(qiáng)脂肪組織的脂解作用[5]。GH對(duì)泌乳的調(diào)控機(jī)制一般認(rèn)為是通過(guò) IGF-1內(nèi)分泌和旁分泌的介導(dǎo)作用,尤為重要的是GH可通過(guò)刺激肝臟產(chǎn)生IGF-1間接促進(jìn)個(gè)體線性生長(zhǎng)的效能[7-8]。并且,IGF-1通過(guò)調(diào)節(jié)體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)分配來(lái)激活體內(nèi)脂肪的分解,使更多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入乳腺組織,從而增加泌乳[9]。本試驗(yàn)以泌乳期奶牛為研究對(duì)象,用不同精粗比日糧進(jìn)行飼喂,通過(guò)監(jiān)測(cè)乳產(chǎn)量,檢測(cè)循環(huán)血液中GH和IGF-1的含量,肝臟和乳腺組織中相關(guān)基因表達(dá)水平的變化,探索在高精料日糧的飼喂條件下GH-IGF-1軸調(diào)控乳產(chǎn)量的機(jī)制。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 試驗(yàn)用動(dòng)物 選取泌乳奶牛12頭(產(chǎn)犢后2周),體重為518.46 kg±17.65 kg、臨床檢查健康,飼養(yǎng)于福建農(nóng)林大學(xué)金山學(xué)院沙縣祥云實(shí)踐教學(xué)基地。

    1.1.2 主要試劑 SYBR Green 熒光酶,瑞士Roach公司產(chǎn)品;M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶、RNA抑制劑,美國(guó)Promega公司產(chǎn)品;隨機(jī)引物、dNTP等,福州未來(lái)百珞生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品;胰島素樣生長(zhǎng)因子1酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒,上海朗頓生物科技有限公司產(chǎn)品;生長(zhǎng)激素放射免疫測(cè)定試劑盒,購(gòu)自北京北方生物技術(shù)研究所;其余試劑為分析純。

    1.1.3 主要儀器 WYJ2100型可見(jiàn)分光光度計(jì)尤尼柯;RT-6000型酶標(biāo)分析儀,深圳雷杜公司產(chǎn)品;SN-695型智能放免γ測(cè)量?jī)x,上海日環(huán)儀器一廠生產(chǎn);MIKRO-22R型高速冷凍離心機(jī)、熒光定量PCR 儀,Bio-Rad公司產(chǎn)品;組織勻漿器,瑞士Kinematica AG公司產(chǎn)品;核酸濃度測(cè)定儀,EB公司產(chǎn)品。

    1.2 方法

    1.2.1 動(dòng)物分組與飼養(yǎng)管理 選取泌乳奶牛12頭,隨機(jī)分為2組,分別飼喂精粗比為40∶60(正常對(duì)照組,NC)和60∶40(高精料處理組,HT)的日糧(由蘆葦草、玉米青貯、啤酒糟和精料組成),自由飲水,每日飼喂時(shí)間為早上06:00、中午13:00和晚21:00。試驗(yàn)期12周,飼料營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

    表1 日糧配方

    注:* 1 kg預(yù)混料中含維生素A 250 000 IU;維生素D 60 000 IU;維生素E 1 025 mg;煙酸 396 mg;鐵 696 mg;銅612.5 mg;鋅2 908.5 mg;錳623.28 mg;碘37mg;鈷8.5 mg;硒21 mg;鈣179.2 g;磷68 g;氯9.44%;鈉9.02%。

    Note:* Provided per kg of premix Vitamin A 250 000 IU;Vitamin D 60 000 IU;Vitamin E 1 025 mg;Niacin 396 mg;Fe 696 mg;Cu 612.5 mg;Zn 2 908.5 mg;Mn 623.28 mg;I 37 mg;Co 8.5 mg;Se 21 mg;Ca 179.2 g;P 68 g;Cl 9.44%;Na 9.02%.

    1.2.2 樣品采集和處理 試驗(yàn)期間,每周通過(guò)頸靜脈采集外周血液。將取得的新鮮血液注入肝素鈉真空抗凝管中,以3 000 r/min室溫離心15 min,取上清置-20℃待用。

    試驗(yàn)期間,奶牛安裝瘤胃瘺管。試驗(yàn)結(jié)束期牛采食完全后打開(kāi)瘤胃瘺管蓋,將瘤胃內(nèi)容物通過(guò)多層紗布包裹、擠壓、過(guò)濾得到瘤胃液,共持續(xù)12 h。測(cè)定pH后,樣品置-20℃保存。

    試驗(yàn)結(jié)束,通過(guò)活體穿刺分別采集肝臟和乳腺組織樣品,用預(yù)冷的生理鹽水清洗4次,迅速液氮凍存,置-80℃保存。

    1.2.3 乳產(chǎn)量測(cè)定 試驗(yàn)期間,活塞單捅擠奶機(jī)擠奶(4:00~5:00和18:00~19:00)。擠奶前用消毒水清洗乳頭和乳區(qū),清水洗凈。將前3把奶棄去后安裝活塞單捅擠奶機(jī),擠完后稱重,記錄乳產(chǎn)量。

    1.2.4 血液GH和IGF-1含量的測(cè)定 通過(guò)GH放射免疫分析試劑盒測(cè)定血漿中GH的含量,測(cè)定方法按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。測(cè)定范圍、靈敏度和計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)按照文獻(xiàn)[10]描述,SN-695型智能放免γ測(cè)量?jī)x檢測(cè)并獲得數(shù)據(jù)。

    通過(guò)IGF-1-ELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定外周血漿IGF-1的含量,測(cè)定方法按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。以空白孔調(diào)零,450 nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔OD值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程,再將樣品OD值對(duì)應(yīng)回歸方程計(jì)算樣品濃度。

    1.2.5 肝臟和乳腺組織GH-IGF-1軸及相關(guān)信號(hào)通路中基因的表達(dá)水平檢測(cè)

    1.2.5.1 總RNA提取和cDNA合成 取80 mg左右的組織樣本,用微量電動(dòng)組織勻漿器徹底勻漿后采用Trizol抽提法提取總RNA。核酸測(cè)定儀測(cè)定總RNA的濃度,再根據(jù)樣品OD 260 nm/OD 280 nm比值檢測(cè)總RNA的純度,當(dāng)OD 260 nm/OD 280 nm比值在1.8~2.0之間表示所提取的RNA純度好,可以進(jìn)行下一步試驗(yàn)。

    cDNA合成按照以下步驟進(jìn)行:取2 μL 總RNA樣品混合2 μL dNTP和2 μL Oligo(dT) 于Eppendorf管中,用DEPC水調(diào)整到10 μL,輕輕混勻。將上述混合物置于PCR儀中,72℃反應(yīng)5 min,然后置于冰上冷卻。最后,在上述混合物中加入0.2 μL RNAse inhibibor、0.5 μL M-MLV和2 μL 5×buffer,用DEPC水水調(diào)整到20 μL,混勻后置于PCR儀中,37℃ 1 h、95℃ 5 min,冰上冷卻,并將合成的cDNA置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2.5.2 Real-time PCR檢測(cè)分析 用real-time PCR方法檢測(cè)肝臟和乳腺組織中GH-IGF-1軸及相關(guān)信號(hào)通路的基因表達(dá),包括IGF-1受體(IGF-1R)、GH受體(GHR)、蛋白質(zhì)酪氨酸激酶2(JAK2)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子1、3、5A和5B(STAT1、STAT3、STAT5A和STAT5B)、激素敏感酯酶(HSL)、脂蛋白酯酶(LPL),基因序列從GenBank中查閱,根據(jù)引物設(shè)計(jì)原則,利用Primer 5軟件設(shè)計(jì),引物序列及相關(guān)參數(shù)見(jiàn)表2,引物由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限責(zé)任公司合成。

    表2 引物序列及參數(shù)

    本試驗(yàn)采用熒光定量PCR SYBR Green染料法對(duì)相關(guān)基因的mRNA表達(dá)進(jìn)行定量分析,反應(yīng)在MyiQ2 real-time PCR儀上進(jìn)行,熒光酶是SYBR Green real-time PCR Master Mix,20 μL定量反應(yīng)體系,其中SYBR Green熒光酶10 μL,R-primer 和F-primer 10 pmol/μL 2 μL、cDNA 2 μL、DEPC水6 μL。主反應(yīng)條件為: 95℃ 30 min;95℃ 10 s,58℃ 30 s,72℃ 30 s,40個(gè)循環(huán)。循環(huán)結(jié)束后,2-ΔΔCt法計(jì)算出每個(gè)樣本目標(biāo)基因的表達(dá)。計(jì)算目的基因的相對(duì)量公式如下:

    ΔΔCt=(CtTarget-Ctβ-actin)x-(CtTarget-Ctβ-actin)Control

    其中ΔΔCt表示選擇β-actin為內(nèi)參,以正常對(duì)照組的目標(biāo)基因和內(nèi)標(biāo)基因Ct差值的平均值作為參照,x表示任意一個(gè)樣本。

    1.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS16.0軟件中Independent T-test模型進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。結(jié)果以Mean±SEM表示,P<0.05表示差異顯著。

    2 結(jié)果

    2.1 高精料日糧飼喂對(duì)瘤胃pH和乳產(chǎn)量的影響

    由圖1顯示,兩組奶牛瘤胃pH低于5.6的持續(xù)時(shí)間超過(guò)3 h,有亞急性瘤胃酸中毒狀態(tài)存在。

    由圖2顯示,與對(duì)照組比較,高精料組奶牛乳產(chǎn)量在前3周差異不顯著(P>0.05)。第4周起,高精料組奶牛乳產(chǎn)量開(kāi)始呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。第7周至試驗(yàn)結(jié)束,高精料組奶牛的乳產(chǎn)量顯著低于對(duì)照組乳產(chǎn)量(P<0.05)。

    圖1 高精料飼喂對(duì)奶牛瘤胃pH的影響

    與對(duì)照相比,*表示差異顯著(P<0.05),**表示差異極顯著(P<0.01)

    Compared with control group,*P<0.05,**P<0.01

    圖2高精料日糧對(duì)乳產(chǎn)量的影響

    Fig.2 Effect of high concentration diet treatment on the milk yield

    2.2 高精料日糧飼喂對(duì)外周血中GH和IGF-1含量的影響

    通過(guò)放射免疫技術(shù)和ELISA技術(shù)檢測(cè)外周血血漿中GH和IGF-1含量。結(jié)果如圖3顯示,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)開(kāi)始前3周高精料組奶牛外周血中GH和IGF-1含量差異不顯著(P>0.05)。第4周開(kāi)始,高精料組奶牛外周血中GH和IGF-1含量與對(duì)照組相比顯示一個(gè)下降的趨勢(shì),且在第7周至第12周顯著下降(P<0.05)。

    2.3 高精料日糧飼喂對(duì)肝臟和乳腺組織中GH/IGF-1軸及相關(guān)信號(hào)通路基因表達(dá)的影響

    通過(guò)qPCR檢測(cè)肝臟組織中GHR、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5A和STAT5B mRNA表達(dá)水平,結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,高精料組奶牛肝臟組織中GHR、JAK2、STAT5A、STAT5B、HSL和LPL mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)(P<0.05或P<0.01,圖4A和4B)。

    A.生長(zhǎng)激素的含量;B.胰島素樣生長(zhǎng)因子1的含量;與對(duì)照相比,*表示差異顯著(P<0.05),**表示差異極顯著(P<0.01)

    A.GH concentration; B.IGF-1 concentration; Compared with the control group,*P<0.05,**P<0.01

    圖3兩組間外周血血漿中GH和IGF-1含量比較

    Fig.3 Comparison of the contents of GH and IGF-1 in peripheral plasma between two groups

    A.奶牛肝臟組織中GHR、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5A和STAT5B mRNA表達(dá)水平;B.奶牛肝臟組織中HSL和LPL mRNA表達(dá)水平;C.奶牛乳腺組織中IGF-1R mRNA表達(dá)水平。與對(duì)照相比,*表示差異顯著(P<0.05),**表示差異極顯著(P<0.01)

    A.The mRNA levels of GHR,JAK2,STAT1,STAT3 and STAT5 genes in liver of dairy cows; B.The mRNA levels of HSL and LPL genes in liver of dairy cows; C.The mRNA level of IGF-1R gene in mammary gland of dairy cows.Compared with the control group,*P<0.05,**P<0.01

    圖4奶牛肝臟和乳腺中相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平

    Fig.4 The mRNA levels of associated genes in liver and mammary gland of dairy cows

    通過(guò)real-time PCR檢測(cè)乳腺組織中IGF-1R mRNA表達(dá)水平,結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,高精料組奶牛乳腺組織中IGF-1R mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)(P<0.05,圖4C)。

    3 討論

    反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)代謝是從瘤胃發(fā)酵開(kāi)始的,改變瘤胃pH環(huán)境會(huì)影響瘤胃內(nèi)發(fā)酵和營(yíng)養(yǎng)成分的代謝。有研究表明,增加日糧高精料水平,瘤胃液pH會(huì)被降低[11]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,高精料組奶牛瘤胃液pH顯著降低,且低于5.8持續(xù)時(shí)間大于3 h左右,提示奶??赡芴幱趤喖毙粤鑫杆嶂卸緺顟B(tài),不利于微生物生長(zhǎng),抑制瘤胃微生物的發(fā)酵水平,且會(huì)影響很多細(xì)胞因子的變化,同時(shí)改變了機(jī)體的代謝。

    GH是參與反芻動(dòng)物泌乳維持和合成代謝的重要激素,大量的研究表明其具有催乳效應(yīng),生產(chǎn)中也通過(guò)外源添加GH含量來(lái)增加乳產(chǎn)量[6]。其中,血液中內(nèi)源性GH含量的提高還會(huì)直接影響乳汁形成,從而影響乳產(chǎn)量和乳品質(zhì)[12]。本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組奶牛相比,高精料組奶牛外周血血漿中GH含量出現(xiàn)下降,且乳產(chǎn)量也同步出現(xiàn)下降,表明在高精料日糧的飼喂條件下,奶牛體內(nèi)合成和分泌的GH含量下降,在內(nèi)源性GH含量降低,降低脂肪分解的效率減少能量供應(yīng),可能抑制了乳汁形成過(guò)程,奶牛乳產(chǎn)量隨之降低。

    許多研究證實(shí),體內(nèi)GH與IGF-1的變化對(duì)機(jī)體組織的分化、增殖及物質(zhì)代謝有重要的影響[12-14]。GH在肝臟組織中與GHR結(jié)合,通過(guò)轉(zhuǎn)磷酸化作用激活鄰近的JAK2分子,激活的JAK2接著磷酸化STATs使其激活,激活的STATs轉(zhuǎn)移到胞核中,當(dāng)它與靶基因啟動(dòng)子GAS位點(diǎn)結(jié)合時(shí)將調(diào)控靶基因IGF-1表達(dá)[15]。在本試驗(yàn)中,通過(guò)對(duì)肝臟組織中GHR、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5A和STAT5B mRNA表達(dá)水平檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)與正常對(duì)照組奶牛相比,高精料組奶牛肝臟組織中GHR、JAK2、STAT5A和STAT5B mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào),與外周血血漿中GH和IGF-1結(jié)果吻合。

    先前的研究指出,動(dòng)物受到外源GH刺激時(shí),將促進(jìn)肝細(xì)胞IGF-1的合成,使外周循環(huán)血液中IGF-1的含量顯著增加,血液中GH和IGF-1含量增加可顯著提高乳產(chǎn)量,同時(shí)IGF-1能促進(jìn)乳腺導(dǎo)管的發(fā)育[16-17]。在本試驗(yàn)中,高精料日糧飼喂顯著降低外周血血漿中IGF-1含量。與正常對(duì)照組奶牛相比,高精料組奶牛乳腺組織中IGF-1R mRNA表達(dá)顯著下調(diào),與外周血血漿中IGF-1含量變化一致。結(jié)果提示IGF-1含量降低,減少IGF-1與IGF-1R結(jié)合,促進(jìn)乳腺發(fā)育的功能被限制,并且促進(jìn)泌乳的效應(yīng)降低,導(dǎo)致乳產(chǎn)量下降。該結(jié)果反向證明了與前人研究中指出的提高循環(huán)血液中IGF-1的含量,可提高血流量,增加泌乳的結(jié)果相一致[1]。

    綜上所述,在高精料日糧飼喂的條件下,導(dǎo)致亞急性瘤胃酸中毒的發(fā)生,致使奶牛體內(nèi)內(nèi)源性GH含量降低,GH在肝臟組織中與GHR結(jié)合,通過(guò)JAK2-STAT5信號(hào)通路調(diào)節(jié)肝臟中IGF-1生成量,使得循環(huán)血中IGF-1含量下降,乳腺組織IGF-1與IGF-1R結(jié)合發(fā)揮促進(jìn)泌乳作用減弱,下調(diào)了GH-IGF-1軸基因和JAK2-STAT5通路相關(guān)基因的表達(dá),導(dǎo)致乳產(chǎn)量下降。

    [1] Akers R M.Major advances associated with hormone and growth factor regulation of mammary growth and lactation in dairy cows[J].J Dairy Sci,2006,89(4): 1222-1234.

    [2] Berryman D E,Christiansen J S,Johannsson G,et al.Role of the GH/IGF-1 axis in lifespan and healthspan: lessons from animal models[J].Growth Hormone & IGF Res,2008,18(6): 455-471.

    [3] Kleinberg D L,Wood T L,Furth P A,et al.Growth hormone and insulin-like growth factor-I in the transition from normal mammary development to preneoplastic mammary lesions[J].Endocrine Rev,2009,30(1):51-74.

    [4] Harvey S,Martinez-Moreno C G,Luna M,et al.Autocrine/paracrine roles of extrapituitary growth hormone and prolactin in health and disease: An overview[J].Gen Compar Endocrinol,2015,220: 103-111.

    [5] Boutinaud M,Rousseau C,Keisler D,et al.Growth hormone and milking frequency act differently on goat mammary gland in late lactation[J].J Dairy Sci,2003,86(2): 509-520.

    [6] Etherton T D,Bauman D E.Biology of somatotropin in growth and lactation of domestic animals[J].Physiol Rev,1998,78(3): 745-761.

    [7] 趙艷坤,邵 偉,王立文,等.IGF-Ⅰ及其受體對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳性能的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2017(3):58-62.

    [8] 曾書(shū)秦,刁其玉,王建芬,等.不同能量水平飼糧對(duì)7~10月齡荷斯坦育成牛生長(zhǎng)性能和血清指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(2):606-615.

    [9] Cannata D,Lann D,Wu Y,et al.Elevated circulating IGF-I promotes mammary gland development and proliferation[J].Endocrinology,2010,151(12): 5751-5761.

    [10] Xie Z L,Ye P S,Zhang S K,et al.Endogenous LPS alters liver GH/IGF system gene expression and plasma lipoprotein lipase in goats[J].Physiol Rev,2015,64(5): 721-729.

    [11] Xie Z L,Jiang X Y,Ye P S,et al.Relationship between liver and low rumen pH in goat[J].Gen Mol Res,2015,14(1):209-221.

    [12] Delgadin TH,Pérez Sirkin D I,Di Yorio M P,et al.GH,IGF-I and GH receptors mRNA expression in response to growth impairment following a food deprivation period in individually housed cichlid fishCichlasomadimerus[J].Fish Physiol Biochem,2015,41(1): 51-60.

    [13] Breves J P,Tipsmark C K,Stough B A,et al.Nutritional status and growth hormone regulate insulin-like growth factor binding protein (igfbp) transcripts inMozambiquetilapia[J].Gen Compar Endocrinol,2014,207: 66-73.

    [14] 范巖巖,劉倩倩,張廷榮,等.轉(zhuǎn)pGH-IGF-1基因?qū)ωi生長(zhǎng)和繁殖性能的影響[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2016,52 (9):15-18.

    [15] Baik M,Yu J H,Hennighausen L.Growth hormone-STAT5 regulation of growth,hepatocellular carcinoma,and liver metabolism[J].Annals New York Acad Sci,2011,1229: 29-37.

    [16] Han Y C,Sun Y G,Li Q.Growth hormone polymorphisms and growth traits in Chinese Tibetan sheepOvisaries[J].Genet Mol Res,2016,15(3): 1551-1557.

    [17] 沈留紅,巫曉峰,肖勁邦,等.回乳期奶牛血清GH、INS、HC、TGF-β1和IGF-1含量變化[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2017,29( 4):548-554.

    Abstract:In order to investigate the effect of feeding high concentrate diets on milk production,12 healthy multiparous dairy cows in mid-lactation were randomly divided in to two groups.One receiving a diet with normal control (concentrate: forage=40∶60) as the NC group,and another receiving a high concentrate diet treatment (concentrate: forage=60∶40) as the HT group.The experiment lasted for 12 weeks and milk production was monitoring every week.At the end of experiment,the rumen liquids were sampled and stored at -70℃,also liver and mammary tissue were sampled and stored at -70℃ by liquid nitrogen flash freezer for later gene expression analysis.During the experiment,the plasma samples were collected every week for determining the GH and IGF-1 concentrations.The results showed that the ruminal pH,milk yield,the plasma GH and IGF-1 concentrations of HT group were significantly decreased (P<0.05) after 7 weeks,compared with the NC group.The gene expressions of growth hormone receptor (GHR),protein-tyrosine kinase 2 (JAK2),signal transducer and activator of transcription 5A (STAT5A) and signal transducer and activator of transcription 5B (STAT5B) in liver,insulin-like growth factor 1 receptor (IGF-1R) in mammary gland,respectively,showed significant down regulation in the HT group compared with the NC group (P<0.05).These results suggest that prolonged feeding of a high concentrate diet could reduces the plasma GH and IGF-1 concentrations,down regulate the mRNA expression levels of GH-IGF-1 axis genes and associated with JAK2-STAT5 pathway genes,resulting in a decline in the milk yield.

    Keywords:high concentrate diet; GH-IGF-1 axis; gene expression; milk yield; dairy cow

    EffectsofHighConcentrateDietonLactationandRelevantRegulatoryFactorsinDairyCows

    XIE Zheng-lu1,2,LI Jin-feng2,ZHANG De-ming2,WANG Jin-xiang3,SANG Lei3

    (1.AgricultureandBiotechnologyDepartment,JinshanCollege,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou,Fujian, 350002,China;2.ShaCountyXiangyunPracticeTeachingBase,JinshanCollege,FujianAgricultureandForestryUniversity,ShaCounty,Shaxian,Fujian,365501,China;3.InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine,FAAS,Fuzhou,Fujian,350002,China)

    S852.21

    A

    1007-5038(2017)08-0057-06

    2017-01-17

    福建農(nóng)林大學(xué)金山學(xué)院科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(Z150701)

    謝正露(1986- ),男,福建建甌人,講師,博士,主要從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)生理生化與代謝障礙研究。*

    猜你喜歡
    精料泌乳瘤胃
    中西醫(yī)結(jié)合治療牛瘤胃酸中毒
    冬季肉牛咋喂精料
    瘤胃調(diào)控劑對(duì)瘤胃發(fā)酵的影響
    母豬泌乳量不足的危害及提高措施
    不來(lái)月經(jīng)加上泌乳,說(shuō)不定是腦子長(zhǎng)瘤了
    冬季綿羊咋補(bǔ)飼
    冬季綿羊咋補(bǔ)飼
    不來(lái)月經(jīng)加上泌乳,說(shuō)不定是腦子長(zhǎng)瘤了
    不同泌乳階段駝乳理化指標(biāo)和體細(xì)胞數(shù)的測(cè)定分析
    羊瘤胃臌氣的發(fā)生及防治
    久久久久九九精品影院| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久热精品热| 国产一级毛片七仙女欲春2| 免费观看在线日韩| 波野结衣二区三区在线| 久久久久国产网址| h日本视频在线播放| 国产熟女欧美一区二区| 1000部很黄的大片| 亚洲乱码一区二区免费版| 精品一区二区免费观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 久久99热6这里只有精品| 欧美97在线视频| 在线a可以看的网站| 3wmmmm亚洲av在线观看| 免费搜索国产男女视频| 亚洲久久久久久中文字幕| 久久精品国产亚洲av涩爱| 久久久午夜欧美精品| 国产成人福利小说| 国内精品宾馆在线| 久久这里有精品视频免费| 一区二区三区高清视频在线| 男女边吃奶边做爰视频| 国产中年淑女户外野战色| 99热精品在线国产| 亚洲av中文av极速乱| 国产精品三级大全| 久久精品国产亚洲网站| 免费看光身美女| av播播在线观看一区| 亚洲精品国产成人久久av| 久99久视频精品免费| 精品国内亚洲2022精品成人| 身体一侧抽搐| 综合色av麻豆| 韩国av在线不卡| 麻豆一二三区av精品| 一区二区三区高清视频在线| 床上黄色一级片| av女优亚洲男人天堂| 亚洲av成人精品一区久久| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 久久精品国产亚洲av天美| 久久鲁丝午夜福利片| 久久99蜜桃精品久久| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲欧美一区二区三区国产| 尾随美女入室| 色噜噜av男人的天堂激情| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲国产精品久久男人天堂| 九草在线视频观看| 美女国产视频在线观看| 丰满少妇做爰视频| 老女人水多毛片| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲国产欧美人成| 欧美丝袜亚洲另类| 欧美+日韩+精品| 中文欧美无线码| 国产精品女同一区二区软件| 午夜精品国产一区二区电影 | 秋霞在线观看毛片| 国产成人午夜福利电影在线观看| 午夜福利在线在线| 69av精品久久久久久| 亚洲av电影不卡..在线观看| 高清午夜精品一区二区三区| 亚州av有码| 日本欧美国产在线视频| 18+在线观看网站| av在线观看视频网站免费| 舔av片在线| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲性久久影院| 国产精品无大码| 日日干狠狠操夜夜爽| 精品久久久久久成人av| 精品一区二区三区人妻视频| 色哟哟·www| 51国产日韩欧美| 日韩在线高清观看一区二区三区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 天天躁日日操中文字幕| 天堂影院成人在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| 国产亚洲最大av| 人妻系列 视频| 国产午夜精品论理片| 深夜a级毛片| 狠狠狠狠99中文字幕| 成人亚洲精品av一区二区| 国语自产精品视频在线第100页| 久久99热这里只有精品18| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 真实男女啪啪啪动态图| 午夜福利在线在线| 一区二区三区四区激情视频| 直男gayav资源| 九九在线视频观看精品| 国国产精品蜜臀av免费| 如何舔出高潮| 看十八女毛片水多多多| 日韩欧美三级三区| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 内射极品少妇av片p| 男人舔女人下体高潮全视频| 日韩高清综合在线| 精品国内亚洲2022精品成人| 日本午夜av视频| 欧美成人a在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 伊人久久精品亚洲午夜| 久久99热这里只有精品18| 国内精品宾馆在线| 一个人看视频在线观看www免费| 色噜噜av男人的天堂激情| 男女视频在线观看网站免费| 午夜爱爱视频在线播放| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 成人亚洲精品av一区二区| 国产又爽黄色视频| 考比视频在线观看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲美女黄色视频免费看| www.色视频.com| 有码 亚洲区| 伦理电影免费视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 免费看av在线观看网站| 国产av精品麻豆| 高清av免费在线| 秋霞在线观看毛片| 成人免费观看视频高清| 97在线视频观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产免费现黄频在线看| 丰满乱子伦码专区| 久久ye,这里只有精品| 少妇熟女欧美另类| 999精品在线视频| 丰满乱子伦码专区| 免费观看无遮挡的男女| 嫩草影院入口| 狂野欧美激情性bbbbbb| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美日本中文国产一区发布| 一级,二级,三级黄色视频| 久久这里只有精品19| 极品人妻少妇av视频| 一级毛片电影观看| 大片免费播放器 马上看| 一级黄片播放器| 午夜影院在线不卡| 欧美激情极品国产一区二区三区 | xxxhd国产人妻xxx| 国产 精品1| 国产精品久久久av美女十八| 国产一区二区激情短视频 | 中文字幕人妻熟女乱码| 美女国产高潮福利片在线看| 国产在线视频一区二区| xxx大片免费视频| 性色av一级| 最近中文字幕2019免费版| 精品久久国产蜜桃| 国产在线一区二区三区精| 国产亚洲精品久久久com| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国精品久久久久久国模美| 一个人免费看片子| 婷婷色综合大香蕉| 午夜激情av网站| 日本黄色日本黄色录像| 国国产精品蜜臀av免费| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲一区二区三区欧美精品| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产 一区精品| 一本久久精品| 看免费成人av毛片| 免费av中文字幕在线| 婷婷成人精品国产| 波野结衣二区三区在线| 久久久精品94久久精品| 日韩一区二区三区影片| 久久女婷五月综合色啪小说| 啦啦啦在线观看免费高清www| 大片免费播放器 马上看| 秋霞伦理黄片| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲av日韩在线播放| 国产成人av激情在线播放| 丁香六月天网| 日韩伦理黄色片| 丝袜脚勾引网站| 成年人免费黄色播放视频| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产精品久久久久久精品古装| 日本-黄色视频高清免费观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲少妇的诱惑av| 观看av在线不卡| 丰满少妇做爰视频| 午夜福利,免费看| 亚洲成国产人片在线观看| 久久久精品区二区三区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久久国产欧美日韩av| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产成人精品一,二区| 18禁国产床啪视频网站| 90打野战视频偷拍视频| 久久久亚洲精品成人影院| 成人国产麻豆网| 国产精品欧美亚洲77777| 午夜老司机福利剧场| 午夜精品国产一区二区电影| 尾随美女入室| 婷婷色麻豆天堂久久| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲国产最新在线播放| 丝瓜视频免费看黄片| av有码第一页| av免费观看日本| 青青草视频在线视频观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 国产麻豆69| 午夜福利视频精品| 18+在线观看网站| 一级毛片 在线播放| 热re99久久精品国产66热6| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久久久久久久精品精品| 久久狼人影院| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 97在线视频观看| 最近的中文字幕免费完整| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产69精品久久久久777片| 免费观看在线日韩| 午夜老司机福利剧场| 99国产精品免费福利视频| 高清av免费在线| 国产在线一区二区三区精| 国产精品无大码| 亚洲国产色片| 亚洲欧美精品自产自拍| 最后的刺客免费高清国语| 99re6热这里在线精品视频| 国产亚洲欧美精品永久| 午夜福利视频在线观看免费| 99香蕉大伊视频| 九色亚洲精品在线播放| 边亲边吃奶的免费视频| 大香蕉97超碰在线| 国产高清不卡午夜福利| av卡一久久| 久久亚洲国产成人精品v| 国产男人的电影天堂91| 高清毛片免费看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲中文av在线| 成人影院久久| 精品一区二区三卡| 七月丁香在线播放| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 不卡视频在线观看欧美| 国产毛片在线视频| 热99久久久久精品小说推荐| 满18在线观看网站| 97在线视频观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 考比视频在线观看| av免费观看日本| 一本大道久久a久久精品| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 久久精品久久精品一区二区三区| 一个人免费看片子| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲内射少妇av| 少妇人妻精品综合一区二区| 免费看光身美女| 桃花免费在线播放| 人妻少妇偷人精品九色| 日本黄色日本黄色录像| 成人国语在线视频| 丝袜脚勾引网站| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲av.av天堂| 久久久久精品性色| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲欧洲国产日韩| 高清欧美精品videossex| 赤兔流量卡办理| 观看av在线不卡| 日韩免费高清中文字幕av| 男女无遮挡免费网站观看| av播播在线观看一区| 国产免费视频播放在线视频| 国产一区有黄有色的免费视频| 最新的欧美精品一区二区| av卡一久久| 亚洲精品一二三| √禁漫天堂资源中文www| 国产xxxxx性猛交| 亚洲国产av影院在线观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产精品一国产av| 成年人午夜在线观看视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产精品偷伦视频观看了| 高清不卡的av网站| 日韩电影二区| 哪个播放器可以免费观看大片| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久免费观看电影| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 男的添女的下面高潮视频| 欧美精品av麻豆av| 免费黄网站久久成人精品| 日本黄大片高清| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 日本免费在线观看一区| 国产精品三级大全| 欧美日韩亚洲高清精品| 永久网站在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品亚洲成a人片在线观看| 男女边摸边吃奶| 99九九在线精品视频| 精品一品国产午夜福利视频| 国产成人精品婷婷| 日韩欧美一区视频在线观看| 九色成人免费人妻av| 欧美97在线视频| 亚洲综合色网址| tube8黄色片| 日日撸夜夜添| 天天影视国产精品| 国产精品三级大全| 秋霞伦理黄片| 在线观看国产h片| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产视频首页在线观看| 伦精品一区二区三区| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| av天堂久久9| 18+在线观看网站| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 考比视频在线观看| 亚洲情色 制服丝袜| 国产不卡av网站在线观看| 国产高清国产精品国产三级| 中国美白少妇内射xxxbb| 在线观看国产h片| 亚洲国产精品999| 在线观看美女被高潮喷水网站| 欧美+日韩+精品| 精品少妇久久久久久888优播| 国产在线视频一区二区| 热re99久久国产66热| 波野结衣二区三区在线| 国产精品久久久久成人av| 全区人妻精品视频| 亚洲国产色片| 欧美xxⅹ黑人| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 欧美国产精品一级二级三级| 午夜激情av网站| 少妇被粗大的猛进出69影院 | av免费观看日本| 大香蕉97超碰在线| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产毛片在线视频| 色吧在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 永久网站在线| 国产精品女同一区二区软件| 一级爰片在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 国产精品一区www在线观看| 久久久久国产网址| 国产亚洲最大av| 国产一区有黄有色的免费视频| 午夜日本视频在线| 中文字幕av电影在线播放| 精品国产一区二区三区四区第35| 少妇人妻 视频| 日韩一区二区三区影片| 日本-黄色视频高清免费观看| 免费观看性生交大片5| 国产不卡av网站在线观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 久久久久久久国产电影| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日韩欧美精品免费久久| 国产成人一区二区在线| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲精品国产av蜜桃| 中文天堂在线官网| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲精品456在线播放app| 22中文网久久字幕| 日韩欧美精品免费久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲欧洲日产国产| 内地一区二区视频在线| 91国产中文字幕| av女优亚洲男人天堂| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产成人av激情在线播放| 成年动漫av网址| 成人国产av品久久久| 少妇人妻精品综合一区二区| 久久女婷五月综合色啪小说| 制服人妻中文乱码| 日本欧美视频一区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 欧美成人午夜精品| 寂寞人妻少妇视频99o| 黄色毛片三级朝国网站| 熟女av电影| 一级片'在线观看视频| 男女午夜视频在线观看 | 性色av一级| 日韩人妻精品一区2区三区| 亚洲综合精品二区| www.av在线官网国产| 多毛熟女@视频| 国产一区有黄有色的免费视频| av福利片在线| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲av国产av综合av卡| 曰老女人黄片| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 另类精品久久| 国产成人午夜福利电影在线观看| 桃花免费在线播放| 亚洲精品国产av蜜桃| 两性夫妻黄色片 | 中文字幕制服av| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 午夜老司机福利剧场| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久午夜综合久久蜜桃| 精品一区二区三卡| 少妇的丰满在线观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 中文字幕人妻熟女乱码| 激情视频va一区二区三区| 欧美精品一区二区大全| 免费人成在线观看视频色| 91久久精品国产一区二区三区| 看免费成人av毛片| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产精品人妻久久久久久| 免费观看无遮挡的男女| 国产免费福利视频在线观看| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲av.av天堂| 成人综合一区亚洲| 9色porny在线观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产色婷婷99| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 欧美日韩综合久久久久久| 九色亚洲精品在线播放| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲第一av免费看| 黄片播放在线免费| 熟女电影av网| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 亚洲美女视频黄频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 全区人妻精品视频| 99热这里只有是精品在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品一区二区三卡| 久久精品久久精品一区二区三区| 日本黄大片高清| 啦啦啦啦在线视频资源| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 一级,二级,三级黄色视频| 18禁观看日本| 大片电影免费在线观看免费| 成年人免费黄色播放视频| 国产伦理片在线播放av一区| 精品少妇内射三级| 1024视频免费在线观看| 国产爽快片一区二区三区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 老熟女久久久| 欧美精品高潮呻吟av久久| 婷婷色综合大香蕉| 飞空精品影院首页| 国产 一区精品| 飞空精品影院首页| 精品国产一区二区久久| 精品亚洲成国产av| 啦啦啦在线观看免费高清www| 人妻 亚洲 视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 日韩欧美一区视频在线观看| av天堂久久9| 亚洲性久久影院| 日日摸夜夜添夜夜爱| 免费av不卡在线播放| 91精品伊人久久大香线蕉| 人体艺术视频欧美日本| 久久国内精品自在自线图片| 国产有黄有色有爽视频| 99久久精品国产国产毛片| 久久人妻熟女aⅴ| 99久国产av精品国产电影| 成人毛片a级毛片在线播放| 人妻少妇偷人精品九色| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 欧美亚洲日本最大视频资源| 婷婷色综合大香蕉| 激情视频va一区二区三区| 亚洲av成人精品一二三区| 免费黄频网站在线观看国产| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产伦理片在线播放av一区| 免费观看无遮挡的男女| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 丝袜脚勾引网站| 国产极品天堂在线| 国产一级毛片在线| 日韩制服骚丝袜av| 国产成人精品一,二区| 国国产精品蜜臀av免费| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久久久久久精品精品| 人体艺术视频欧美日本| 国产老妇伦熟女老妇高清| 18在线观看网站| 18禁动态无遮挡网站| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲av.av天堂| 免费人成在线观看视频色| 国产精品一区二区在线不卡| 在线精品无人区一区二区三| 9191精品国产免费久久| 男女免费视频国产| 午夜激情av网站| 国产精品偷伦视频观看了| 三上悠亚av全集在线观看| 我的女老师完整版在线观看| 精品一品国产午夜福利视频| 国产片内射在线| 国产在线视频一区二区| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 色94色欧美一区二区| 一级毛片我不卡| 日韩av在线免费看完整版不卡| 丝袜在线中文字幕| 桃花免费在线播放| 久久久精品免费免费高清| 青春草亚洲视频在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产精品偷伦视频观看了| 丝瓜视频免费看黄片| √禁漫天堂资源中文www| 岛国毛片在线播放| 久久久久网色| 日本av免费视频播放| 免费黄频网站在线观看国产| 男女国产视频网站| 女性生殖器流出的白浆| 99久国产av精品国产电影| 18在线观看网站| 18禁动态无遮挡网站| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲,欧美精品.| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 天天操日日干夜夜撸| 国产 精品1| 91aial.com中文字幕在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 日韩成人伦理影院|